新疆4种绵羊羊毛氨基酸含量测定

为了研究遗传及环境对羊毛生产性状的影响,利用高效液相色谱法测定了新疆地区和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊、中国美利奴羊4个绵羊品种羊毛中的17种氨基酸含量,探索不同品种绵羊间和同一品种不同品系绵羊间羊毛氨基酸含量的差异。结果表明,和田羊羊毛的氨基酸总含量显著高于多浪羊羊毛,差异显著(P<0.05);其他品种间氨基酸总量差异不显著。多浪羊羊毛中的Asp、Ser、Glu、Arg、Thr、Ala、Pro、Val、Lys、Ile、Leu、Phe等氨基酸含量均低于其他品种;卡拉库尔羊羊毛只有Cys含量高于其他品种,Ser、Gly、Thr、Pro、Tyr等氨基酸含量均低于其他品种。各品种羊毛的螺旋比值(促螺旋氨基酸含量/阻螺旋氨基酸含量),中国美利奴为0.90,卡拉库尔羊为0.79,和田羊为0.77,多浪羊为0.75。结果表明,和田羊氨基酸总含量高于其他品种,中国美利奴螺旋比值高于其他品种,卡拉库尔羊Cys含量高于其他品种。

林肯羊改良和田羊的羊毛性能及对地毯质量的影响

介绍采用林肯羊改良和田羊的羊毛性能,通过大量改良前后羊毛纤维的类型、长度、弹性、色度、细度等物理结构和纺织性能的实验数据对比分析,得出:改良后和田毛中绒毛、两型毛所占比例上升,粗毛、干死毛所占比例下降,改良后和田羊毛毛丛长度变长,是和田地毯浮毛少掉毛率低、久踩不倒优良品质的主要原因,羊毛纤维细度变粗,改良后抗压缩弹性有所下降,但对和田地毯的整体弹性影响不大,改良后羊毛亮度和白度没有显著变化,黄度有所下降。

和田羊KRT31基因遗传多态性相关分析

为探讨KRT31基因是否是影响和田羊羊毛细度的候选基因,试验以随机采集的400只和田羊个体的血样为材料,利用PCR-SSCP、DNA测序等技术研究了和田羊KRT31基因的多态性及其与羊毛细度的关联性。结果表明:和田羊KRT31基因具有多态性,存在3种基因型:EE、EF和FF,且处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),多态信息含量(PIC)为0.369 8,属于中度多态(0.5>PIC>0.25)。KRT31基因编码区片段在碱基序列52 bp(C→T)处发生突变。关联分析表明:和田羊不同基因型之间的羊毛细度差异均不显著(P>0.05)。

山区型和田羊毛囊KAP1.1基因表达载体构建及生物信息学分析

为了分析山区型和田羊毛囊角蛋白关联蛋白(Keratin associated protein,KAP1.1)基因对绵羊羊毛产量与品质的影响。以山区型和田羊皮肤毛囊为试验材料,提取总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增毛囊KAP 1.1基因,插入pMD18-T载体,构建pMD18-T-KAP 1.1克隆质粒,双酶切鉴定后构建pEGFP-N l-KAP 1.1真核表达重组质粒,做PCR、双酶切鉴定后送公司测序,并进行生物信息学分析。结果表明:成功构建了pEGFP-N l-KAP 1.1真核表达重组质粒,获得了山区型和田羊毛囊KAP 1.1基因编码序列,片段全长为519 bp,编码172个氨基酸。与GenBank中美利奴绵羊序列比对,碱基序列同源性达98.85%,氨基酸序列同源性达97.09%。说明试验成功构建了毛囊KAP 1.1真核表达载体,并获知了山区型和田羊KAP 1.1基因与蛋白序列。

和田羊KRT31和KRT85基因遗传多态性及其与羊毛性状关联性分析

试验旨在研究KRT31和KRT85基因是否是影响和田羊羊毛性状的候选基因,为今后和田羊的育种工作和改善羊毛性状提供科学依据。采集400只和田羊血样,运用PCR-SSCP和DNA测序等技术对和田羊个体的KRT31和KRT85基因进行遗传多态性分析。结果表明:和田羊KRT31和KRT85基因具有多态性,且均存在两种基因型,都处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),KRT31基因多态信息含量(PIC)为0.233,属于低度多态(PIC<0.25)。KRT85基因多态信息含量(PIC)为0.346,属于中度多态(0.25<PIC<0.5)。KRT31基因在外显子3的174bp处存在A碱基的缺失,通过分析发现,该基因A碱基的缺失,使色氨酸缺失。与羊毛长度及细度进行关联分析可知,GG基因型和GA基因型的羊毛长度差异显著(P<0.05),但是羊毛细度差异不显著(P>0.05)。KRT85基因在外显子2的204bp处存在A到G的突变,可以记作A204G。对氨基酸序列进行比较分析,该基因上A204G处的突变并未使氨基酸的编码发生改变,此位点突变为同义突变。与羊毛性状关联分析得出,AA和AB两种基因型的羊毛长度及细度差异均不显著(P>0.05)。说明和田羊KRT31基因可以作为影响和田羊羊毛性状的候选基因。

新和田羊毛品质变化分析

和田羊是一个优良的地方羊品种,其羊毛属异质半粗毛品质,为了克服和田羊产毛量低(和田羊平均产毛量为1.1kg)、体格小的缺陷,课题组在自治区科技厅"兴新办"项目支持下,引进纯种林肯半细毛羊,杂交改良和田羊。通过导入杂交、横交固定手段既保持了和田羊半粗毛品质特性,又提高了产毛量和体重。

毛纤维鳞片形态变化研究

采集2017年送检山羊绒样品,和田羊羊毛取底绒样品,细型细羊毛样品,运用光学电子显微镜研究毛纤维的鳞片形态及结构,进一步得知各类毛的鳞片排列的规律及形状,根据动物的品种毛的粗细,纤维类型不同而有明显的差别进行鉴别,分析出的毛纤维鳞片结构有助于提高鉴别能力,减少山羊绒的误判率。说明毛纤维鳞片形态变化关系到毛纤维的加工工艺性能和成品质量。

再论和田羊羊毛品质的提高与发展

本文在和田羊羊毛、导入外血的羊羊毛所进行的实验室分析和纺织产品的扩展试验曾发表过《和田羊羊毛的提高、发展》一文的基础上,针对如今和田羊羊毛中已出现的新类型,分别对检测和调查结果进行了分析对比。作者认为新和田羊类型的出现是一个飞越的发展,为此再论其品质的促进提高与发展,对其今后的发展提出一些建议:根据和田羊毛的特征和纺织工业工艺的需求。提高毛被的底绒比例应不少于50%。底绒细度保持22μm左右,毛辫长度应不超过250mm。减少干死毛,改善毛被密度,提高产量。

和田羊KAP7、KAP8基因遗传多样性及其与羊毛长度的关联性分析

以采集的600只和田羊个体的血样为材料,利用PCR-SSCP、DNA测序等技术研究分析和田羊KAP7、KAP8基因的多态性,并与羊毛长度进行关联。结果表明,和田羊KAP8基因没有发现多态性;KAP7基因具有多态性,存在3种基因型:AA、AB和BB,且处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),多态信息含量为0.2376,属于低度多态。测序结果显示,与原基因碱基序列相比,KAP7基因碱基序列在110(T→G)和268(G→A)处发生突变。关联分析表明,和田羊不同基因型之间羊毛长度差异显著。

新疆和田羊底绒、干死毛、两型毛及粗毛扫描电镜微观特征分析

为深入研究和田羊毛绒的纺织性能和毛绒生长特点,采用扫描电子显微镜对新疆和田羊的底绒、干死毛、两型毛及粗毛四类纤维进行了微观结构的观察和测量。结果表明新疆和田羊羊毛中四种纤维细度变化较大,鳞片结构复杂多变,纤维特殊结构较多。毛绒纤维鳞片类型、鳞片高度和纤维直径等信息对毛绒鉴定和个体生长研究有重要参考意义。

新疆南疆和田羊、卡拉库尔羊毛囊KAP7基因的原核表达及多克隆抗体制备

本研究旨在制备新疆南疆平原型和田羊、山区型和田羊与卡拉库尔羊3个地方品种(系)绵羊毛囊角蛋白关联蛋白7(keratin associated protein 7,KAP7)基因多克隆抗体,为探索毛囊KAP7基因对半粗毛羊羊毛产量与质量的影响奠定基础。以3个品种绵羊的皮肤毛囊为试验材料,提取总RNA,反转录得到cDNA,PCR扩增获得绵羊毛囊KAP7基因,构建pMD19-T-KAP7克隆质粒,对重组质粒进行PCR、酶切鉴定和序列分析,再构建pET-28a(+)-KAP7原核表达重组质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达,SDS-PAGE电泳检测原核表达的绵羊毛囊KAP7蛋白,经提取、纯化、回收得到目的蛋白,用其免疫家兔得到绵羊毛囊KAP7多克隆抗体血清,并用间接ELISA法检测其抗体效价。结果表明,与美利奴羊比对,平原型与山区型和田羊KAP7基因序列的同源性达99%,但平原型和田羊KAP7基因第22位碱基由G变为C,造成其KAP7蛋白第8位氨基酸由Gly变为Arg;山区型和田羊第70位碱基由A变为C,造成其24位氨基酸由Thr变为Ala;卡拉库尔羊毛囊KAP7基因与美利奴羊同源性达100%,其KAP7蛋白氨基酸序列与美利奴羊没有差异。绵羊毛囊KAP7基因原核表达重组质粒pET-28a(+)-KAP7可以在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达目的蛋白,其大小约为10ku。利用绵羊毛囊KAP7蛋白免疫家兔得到的多克隆抗体阳性血清具有免疫活性和特异性,其抗体效价达到1∶10 000。

和田羊毛囊KAP7基因的原核表达及其生物信息学分析

为了研究绵羊毛囊角蛋白基因对异质毛绵羊羊毛性状、品质的影响,将和田羊毛囊高Gly/Tyr蛋白中的角蛋白关联蛋白KAP7基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中,然后将重组质粒pET28a(+)-KAP7转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导目的蛋白的表达,并对表达的蛋白进行了SDS-PAGE检测。进行了核苷酸与氨基酸序列分析,并对4个物种的KAP7基因进行了聚类分析。结果表明:成功构建了和田羊毛囊角蛋白原核表达载体pET28a(+)-KAP7,KAP7基因大小为258 bp;并在原核细胞中表达了KAP7成熟蛋白,SDS-PAGE检测在10 ku的位置有特异性表达蛋白条带,与预期的KAP7蛋白大小一致,该基因编码85个氨基酸;将其与绵羊、驯鹿、牦牛的核苷酸序列进行比对,和田羊与GenBank中不同绵羊品种的亲缘关系都比较近,同源性分别为100%、99.6%和98.4%。与牦牛的同源性为96.8%,有14个bp的差异,与驯鹿的同源性为95.7%。

舍饲条件下南疆地方品种绵羊的被毛品质研究

为了提高羊毛品质,为羊毛生产提供理论依据,试验以平原型和田羊、山区型和田羊和卡拉库尔羊为试验动物,检验毛纤维的类型、产毛量、伸直长度、净毛率以及各类型毛纤维含量、细度、色泽等指标并通过扫描电镜观察毛纤维鳞片结构,分析以上3个品种羊毛纤维的生长规律。结果表明:根据羊毛纤维特点将其分为绒毛、粗毛和两型毛三类。在3个品种羊中,卡拉库尔羊产毛量和净毛率最高,但羊毛伸直长度最短,与平原型和田羊比较净毛率差异显著(P<0.05)。卡拉库尔羊与山区型和田羊比较粗毛含量差异极显著(P<0.01),并且和田羊品种内比较粗毛含量差异不显著(P>0.05)。山区型和田羊与卡拉库尔羊比较粗毛细度差异显著(P<0.05),和田羊品种内比较粗毛细度差异不显著(P>0.05),和田羊品种内比较两型毛细度差异显著(P<0.05)。与卡拉库尔羊比较,和田羊绒毛细度、鳞片密度、纤维直径均较小,粗毛则相反;和田羊两型毛的纤维直径大于卡拉库尔羊,两者干死毛纤维直径大小接近;和田羊的纤维鳞片较卡拉库尔羊厚。说明3种绵羊羊毛纤维鳞片结构复杂多变,平原型和田羊羊毛纤维细度和伸直长度优于山区型和田羊和卡拉库尔羊,在加工纺织品方面更具经济价值。