HPLC法测定黄蜀葵花中7种黄酮类成分的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定黄蜀葵花药材中7种黄酮类成分的含量。方法:采用Zorbax SB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.5%磷酸溶液(梯度洗脱)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),检测波长为360 nm,柱温为35℃,进样量为10μl。结果:芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3’-O-葡萄糖苷和槲皮素分别在1.2230.59μg·ml^(-1)(r=0.9999)、19.99499.79μg·ml^(-1)(r=1.0000)、10.00250.09μg·ml^(-1)(r=1.0000)、20.48511.95μg·ml^(-1)(r=1.0000)、1.6040.00μg·ml^(-1)(r=0.9999)、10.29257.15μg·ml^(-1)(r=1.0000)和1.0325.73μg·ml^(-1)(r=0.9999)范围内与峰面积呈现良好的线性关系;平均回收率分别为98.45%,99.43%,99.00%,99.02%,98.39%,98.82%和98.72%,RSD分别为0.78%,0.74%,0.87%,1.07%,1.27%,0.97%和1.31%(n=6)。结论:该方法简便、灵敏、准确、专属性强,重复性好,可用于黄蜀葵花药材中7种黄酮类成分的含量测定。

一测多评法测定黄蜀葵花中7个黄酮类成分

目的：建立以金丝桃苷为内标的一测多评法，用以评价黄蜀葵花药材质量的方法。方法：采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），0.05%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相，流速为0.40 mL·min-1，梯度洗脱（0~2 min，88%A→85%A；2~5 min，85%A→84%A；5~6 min，84%A→83%A；6~9 min，83%A→70%A；9~11 min，70%A→20%A；11~12 min，20%A→5%A；12~13 min，5%A→88%A），检测波长360 nm，柱温35 ℃，建立金丝桃苷与其他6个指标成分（芦丁、异槲皮苷、 棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3’-O-葡萄糖苷、槲皮素）间的相对校正因子（RCF），并利用校正因子计算黄蜀葵花中7个主要黄酮成分含量，实现一测多评。结果：在一定的线性范围内，金丝桃苷与芦丁、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3’-O-葡萄糖苷、槲皮素间的RCF值分别为0.827、1.312、0.494、0.989、1.608、1.516，且在不同实验条件下重现性良好（RSD〈5.0%），并与常规外标一点法比较，13批黄蜀葵花药材中7个黄酮成分一测多评法计算值与实测值间均无显著性差异（RSD〈5%）。结论：以金丝桃苷建立的6个黄酮成分校正因子可用于黄蜀葵花药材的定量分析及质量评价。

HPLC法同时测定黄葵胶囊中5种成分的含量

目的:测定不同批次黄葵胶囊中金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮苷、槲皮素-3′-葡萄糖苷和槲皮素的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Zorbax SB-C18柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸(梯度洗脱),检测波长为360nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,进样量为10μL。结果:3个批次黄葵胶囊中金丝桃苷的平均含量为1.64%,RSD=1.09%;异槲皮苷的平均含量为1.06%,RSD=1.13%;棉皮苷的平均含量为3.87%,RSD=1.15%;槲皮素-3′-葡萄糖苷的平均含量为1.50%,RSD=1.22%;槲皮素的平均含量为0.08%,RSD=1.45%。结论:黄葵胶囊3个批次中5种黄酮类成分的含量相似,其中棉皮苷、金丝桃苷、槲皮素-3′-葡萄糖苷、异槲皮苷含量较高。该方法简便、准确、重复性好,可为黄葵胶囊提供质量控制依据。

大鼠口服棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后尿液中代谢产物研究

目的:研究大鼠口服棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后尿液中的代谢产物。方法:健康大鼠口服250mg·kg-1棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后,收集0～48h的尿样,经HPD-600大孔吸附树脂分离纯化后采用HPLC-DAD-MSn方法对尿样中的原形药物及其代谢产物进行分析及结构推测。结果:在大鼠尿液中检测到棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的6个主要代谢产物,根据负离子模式下电喷雾质谱的裂解规律、紫外光谱特征以及与标准品对照的方法,鉴定了其中1个代谢产物的结构,推测了其他5个代谢产物的结构,其代谢过程主要是葡萄糖醛酸化、脱葡萄糖醛酸以及甲基化等。结论:本文建立的方法快速、灵敏,可用于棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷及其体内外代谢产物的研究。

UPLC-MS/MS法同时测定金花葵中11个活性成分

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定金花葵中11个活性成分(没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素、槲皮素-3’-O-葡萄糖苷、杨梅素、槲皮素)的含量。方法:色谱条件:采用Waters ACQUITY BEN C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.05%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min^(-1),柱温为30℃。质谱条件:采用电喷雾电离源(ESI),正负离子全扫模式(Full MS/dd-MS^2)扫描进行定量分析。结果:金花葵中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素、槲皮素-3’-O-葡萄糖苷、杨梅素、槲皮素的质量浓度分别在0.030 64～0.153 2、0.044 00～0.220 0、0.144 0～0.720 0、0.026 64～0.133 2、6.352～31.76、8.704～43.52、5.728～28.64、24.30～121.5、5.824～29.12、2.248～11.24、0.7264～3.632μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(R^2≥0.999 1),精密度、重复性、稳定性均良好,平均加样回收率在94.5%～100.7%之间,RSD≤3.2%;8批金花葵样品中上述11个活性成分的含量范围分别为0.005～0.049、0.008～0.122、0.032～0.267、0.012～0.033、2.439～4.214、4.904～7.216、3.915～5.945、12.126～17.518、4.006～5.423、0.573～1.753、0.186～1.243 mg·g^(-1)。结论:该方法可用于金花葵药材的质量控制。