高原肺水肿动物模型的初步研究

目的通过模拟高原环境,研究大鼠在复合缺氧寒冷运动时诱发高原肺水肿（high altitude pulmonary edema, HAPE）的可能性.方法利用低压氧舱减压大鼠,观察大鼠在复合缺氧寒冷运动条件下的肺血流动力学、肺组织病理形态学改变.结果在模拟高原海拔4 000 m、白昼10 ℃、夜间4 ℃、适度运动条件下,PaO2、SaO2、PaCO2均显著降低,24、48、72 h之间无显著差异;肺动脉压在72 h时显著升高,这与临床观察到HAPE通常在进入高原2～5 d发病相符.病理切片结果：缺氧寒冷运动组70.2%可见肺间质增厚、肿大,大量多核细胞,肺泡腔变小,肺泡腔内无液体渗出,呈间质性肺水肿改变,未见肺泡型肺水肿发生.结论可采用该实验模型复制间质性HAPE动物模型,而肺泡型HAPE有待进一步研究.

甲醛吸入致大鼠急性肺水肿动物模型的建立

[目的]探讨甲醛所致急性肺水肿动物模型的建立方法,为甲醛急性中毒肺水肿的治疗及机制研究提供实验动物模型。[方法]大鼠共20只随机分为对照组和甲醛组,称重后放入小铁笼并置于自制染毒缸,缸内放置钠石灰50g,缸内对角分别放置2个盛有50ml40％甲醛原液的培养皿,并通过接有导管的加氧泵持续给甲醛原液内通入氧气,为大鼠供氧并促进甲醛挥发。大鼠在缸内连续吸入甲醛蒸汽染毒2h,待5h后处死,取心、肺称重并计算心肺系数、肺体系数,肺组织作常规病理检查。对照组用生理盐水,处理方法同甲醛组。[结果]与对照组比较,甲醛组心肺系数显著增大,分别为1．747±0．162和1．577±0．095,P<0．05,肺体指数也显著增大,分别为5．38±0．60和4．67±0．34,P<0．01。病理切片显示肺泡内大量液体及肺泡间隔增宽等病理改变。[结论]甲醛挥发吸入能成功地复制大鼠急性肺水肿动物模型。

油酸诱导大鼠肺水肿动物模型的建立

[目的]制备油酸诱导大鼠肺水肿的动物模型,便于进行肺水肿的发病机制和相关治疗的研究。[方法]将试验大鼠随机分为对照组和油酸组,尾静脉注射油酸0.2ml/kg,观察动物的体征变化及病理切片,确定大鼠肺水肿动物模型。[结果]油酸能引起大鼠肺水肿,其临床症状和病理变化明显。[结论]油酸诱发的肺水肿模型临床症状典型、方法简单、成本低、便于操作且重复性好,能为教学、临床、科研提供较为理想的动物模型。

急性肺水肿大鼠肺组织中IL-6,SOD和MDA的变化

目的探讨急性缺氧致大鼠急性肺水肿模型肺组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和白细胞介素-6(Interleukin 6,IL-6)的变化及其意义。方法成年Wistar大鼠50只,随机分为A组(正常组)、B组(急性肺水肿模型,缺氧24 h)、C组(急性肺水肿模型,缺氧48 h),D组(急性肺水肿模型,缺氧72 h)和E组(急性肺水肿激素治疗组,缺氧72 h)。对B,C,D,E组大鼠腹腔内注射6%氯化氨建立急性肺水肿模型,E组在注入6%氯化氨30 min后经尾静脉给药,给予地塞米松6.0 mg/kg。造模成功后的24 h,48h,72 h,分别处死4组大鼠,分离大鼠血浆,摘取大鼠肺脏,制备10%肺组织匀浆,用ELISA检测肺组织中MDA、SOD,IL-6和血浆中IL-6的含量和活性。结果 B,C,D三组可见大鼠肺组织水肿明显,湿重明显增加,与A组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。A组大鼠肺组织无明显充血水肿,肺组织形态大致正常。B,C,D大鼠模型肺组织充血水肿,肺组织间质间隙、肺泡和细支气管内充满含有蛋白质的液体,肺泡内有透明膜形成。且D组大鼠肺组织充血水肿最为明显。而E组大鼠全肺组织水肿普遍较轻,HE染色显示E组大鼠肺组织肺泡融合,间隔较小,水肿液大多已吸收,肺泡内散在少量嗜伊红液体。B组与A组比较,肺组织中MDA,IL-6升高、SOD降低,但差异无统计学意义(P>0.05),随着肺水肿时间的延长,C,D组大鼠肺组织中MDA升高,SOD降低,血浆中的IL-6升高,和A组相比变化明显,差异有统计学意义(P<0.05)。和D组相比,E组大鼠肺组织中MDA降低,SOD升高,血浆中的IL-6降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论急性肺水肿的发生和氧化应激有关,机体抗氧化能力降低、自由基增加是肺水肿发生的重要机制,肺组织中IL-6,SOD和MDA含量对病情变化有指导意义。

骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性肺水肿病理学影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞移植对SD大鼠急性肺水肿模型的病理学影响。方法:将80只大鼠随机分为肺水肿组、干细胞治疗组、干细胞预防组、空白对照组、干细胞对照组5组,每组16只。对SD大鼠腹腔注射6%NH4Cl建立急性肺水肿模型,预防组、治疗组分别于肺水肿模型建立前后30min移植干细胞,移植后不同时间(30min,2h,1d,7d)活杀SD大鼠取肺脏,固定后用常规光镜及扫描电镜观察大鼠肺脏病理学变化。结果:肺水肿模型大鼠30min肺泡结构基本正常,2h时肺泡腔内可见大量渗出物,肺泡壁毛细血管明显充血。7d时部分肺泡壁增厚。干细胞治疗组大鼠30min肺组织结构基本正常,2h时部分区域肺泡腔内可见少许渗出物。7d时肺组织结构基本正常。干细胞预防性移植大鼠的肺组织在30min,2h,1d,7d病理学改变基本同肺水肿模型大鼠。结论:腹腔注射氯化铵可建立急性肺水肿模型,骨髓间充质干细胞治疗性移植可减轻急性肺水肿病理学改变,而骨髓间充质干细胞预防性移植不能减轻急性肺水肿病理学改变。

在体与离体肺模型肺泡液体清除率的比较

目的研究大鼠在体与离体动物模型肺泡液体清除率。方法将Evans蓝(0.15 mg/mL)标记5%白蛋白等渗生理盐水溶液及特布他林、氨氯吡咪混合后分别灌注到在体与离体大鼠肺内,根据灌注前及孵育后白蛋白浓度的变化计算肺泡液体清除率。结果在体和离体大鼠肺泡液体清除率在15 min内差异无显著性,30 min离体大鼠肺泡液体清除率是在体大鼠的83%,1 h离体大鼠肺泡液体清除率仅为在体大鼠的60%。氨氯吡咪分别使在体和离体肺脏肺泡液体清除率降低了54.3%和50.4%,特布他林分别使在体和离体肺脏肺泡液体清除率增加了49.7%和44.5%。结论虽然离体肺模型肺泡液体清除率低于在体肺模型,但两者对于药物的反应都是相似的。肺脏离体短时间内,可用于肺泡液体清除功能的研究。

急性肺水肿动物模型复制

目的—探讨氯化氨诱发大鼠肺水肿动物模型效果和机理。方法—将实验大鼠随机分为对照组、氯化氨组,腹腔注射方法注入6%氯化氨(♀:6~8 ml/kg,♂:9~12 ml/kg),观察动物的一般情况、肺系数计算及病理切片,确定建立大鼠肺水肿动物模型。结果—氯化铵能引起大鼠肺水肿,其临床表现有明显特点。结论—氯化铵诱发的肺水肿模型,临床症状典型,方法简单,经济易行且重复性好,能为教学、临床、科研提供较为理想的动物模型。

不同低氧胁迫方式构建SD大鼠高原肺水肿模型的比较研究

目的研究不同低氧胁迫方式构建高原肺水肿模型的效果。方法将60只SD大鼠随机分为3组:对照组(海拔400 m),低压氧舱组(模拟海拔6000 m低氧胁迫48 h),实地低氧组(海拔4200 m低氧胁迫28 d);每组20只。通过检测实验大鼠肺组织的干湿比、形态学和病理生理学特征、关键基因水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP-1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达,以及氧化应激水平,比较不同低氧胁迫方式构建SD大鼠高原肺水肿模型的效果。结果与对照组相比,低压氧舱组和实地低氧组大鼠的肺动脉压和肺组织含水量均显著升高(均P<0.01),而氧分压及氧饱和度显著下降(均P<0.01)。对照组肺组织形态在光镜和电镜下均显示结构正常;低压氧舱组和实地低氧组肺组织在光镜下均可见肺泡壁且肺泡间隔明显增宽,大量红细胞和炎性细胞溢出,且在肺泡间隔出现明显水肿。两实验组大鼠肺组织中AQP-1 mRNA和蛋白水平均较对照组明显升高(均P<0.01),VEGF mRNA和蛋白水平均较对照组明显降低(均P<0.01),而且血清中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平明显降低,丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平明显升高。结论低压氧舱模拟海拔6000 m低氧胁迫48 h,以及海拔4200 m实地低氧胁迫28 d,均可有效构建SD大鼠高原肺水肿模型;其中,应用低压氧舱构建SD大鼠高原肺水肿模型相对更占优势。

七叶皂苷钠对大鼠高原肺水肿的干预研究

目的探讨七叶皂苷钠对大鼠高原肺水肿模型的干预研究。方法 24只SD大鼠随机均分为正常对照组(N)、高原肺水肿模型组(HAPE)、七叶皂苷钠治疗组(SA)。在模拟海拔6000m高原环境中通过大鼠运动建立出血性肺泡型肺水肿模型。模型复制成功后按相应措施处理观察并取血取材检测相关指标。观察检测指标有肺组织形态学、肺湿/干重(W/D)、血气分析动脉血氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2);采用ELISA试剂盒检测血清中白介素-6(IL-6)的含量。结果与模型组比,治疗组大鼠PaO2明显上升,PaCO2、W/D值明显下降,血清中IL-6含量也均下降。结论七叶皂苷钠可减轻高原肺水肿的发生,为临床治疗高原肺水肿提供了一个可能的途径。

电针足三里对严重烫伤致大鼠急性肺损伤的影响

目的 探讨电针足三里对严重烫伤致大鼠急性肺损伤的影响.方法 雄性SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为5组（n=8）：对照组、烫伤组、足三里组、非经非穴组和α-银环蛇毒素组（α-BGT组）.对照组尾静脉注射生理盐水1 ml.烫伤组、足三里组、非经非穴组和α-BGT组先制备30%总体表面积Ⅲ度烫伤模型,然后烫伤组尾静脉注射生理盐水1 ml;足三里组于双侧足三里穴垂直进针7 mm,给予脉冲电流（电压3V,电流2ms,频率3 Hz）持续刺激12 mim,间隔8 h刺激1次,持续2 d;非经非穴组于双侧足三里穴旁5mm处给予脉冲刺激,方法同足三里组;α-BGT组尾静脉注射α-BGT 1.0 μg/kg,再于双侧足三里穴给予脉冲刺激,方法同足三里组.各组处理结束后,处死大鼠,取肺组织,光镜下观察病理学结果,电镜下观察超微结构,采用ELISA法测定肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGBl）含量,采用免疫组化法测定HMGBl蛋白表达,采用RT-PCR法测定HMGBl mRNA表达.结果 烫伤组肺组织光镜下可见肺泡壁崩解,泡内大量渗出液,间质水肿、肥厚和增生,伴大量炎性细胞浸润;电镜下可见细胞核形态不规则,核膜僵硬,部分凸凹不平和核溶解,胞质内板层小体明显减少,肺组织病理损伤程度较对照组减轻.与对照组比较,烫伤组、非经非穴组和α-BGT组肺组织HMGBl含量升高,HMGBl蛋白及其mRNA的表达上调（P〈0.05）,足三里组各指标差异无统计学意义（P〉0.05）;与烫伤组比较,足三里组肺组织HMGBl含量降低,HMGBl蛋白及其mRNA的表达下调,非经非穴组和α-BGT组肺组织HMGBl mRNA表达下调（P〈0.05）;与足三里组比较,非经非穴组和α-BGT组肺组织HMGBl含量升高,HMGBl蛋白及其mRNA的表达上调（P〈0.05）.结论 电针足三里可减轻严重烫伤致大鼠急性肺损伤,其机制与激活含α7亚基N型胆碱能受体介导的胆碱能抗炎通路,抑制肺组织HMGBl的表达有关.