幽门螺杆菌OipA、HopX、HopW基因的检测及序列分析

目的:检测幽门螺杆菌(H pylori)标准菌株NCTC11637及临床菌株外膜蛋白的三种基因(OipA、HopX、HopW及比较NCTC11637中三种基因与国际标准菌株(26695和J99)的同源性,为Hpylori疫苗的筛选提供实验依据.方法:运用PCR方法检测标准菌株NCTC 11637及27例临床菌株中的三种基因,并对其进行测序.运用GenBank比较与国际标准菌株(26695和J99)的同源性.结果:在标准菌株NCTC11637中检测到三种基因.在27例临床菌株中,有10例检测到OipA基因.在23例中检测到HopX基因,在27例中均检测到HopW基因.NCTC11637中OipA基因与26695和J99的核苷酸序列同源性分别为95.38%、94.60%,均低于两株国际标准菌株的同源性95.50%.HopX基因的同源性分别为94.90%和95.15%,同样低于两株国际标准菌株的同源性96.49%.HopW基因与26695和J99的同源性分别为97.38%、94.90%,两株标准菌株的同源性为95.20%.结论:在标准菌株NCTC11637和临床菌株中检测到三种基因.H pylori HopW基因核苷酸序列具有一定的保守性.

脑胶质瘤患者肿瘤组织和外周血HOPX基因甲基化的检测

目的检测脑胶质瘤肿瘤组织和外周血中homeodomain only protein X(HOPX)基因甲基化状态并探讨其临床意义。方法选取病理证实为脑胶质瘤患者的胶质瘤组织及其外周血血浆标本共52例为实验组,选取因颅脑外伤患者术中弃除的坏死脑组织及其外周血血浆标本共20例为对照组,采用甲基化特异性聚合酶链反应和亚硫酸氢盐测序PCR法检测实验组及对照组HOPX基因甲基化状态。结果实验组脑胶质瘤组织和对照组坏死脑组织中HOPX基因甲基化率分别为71.15%(37/52)和20.0%(4/20),实验组脑胶质瘤患者外周血血浆和对照组颅脑外伤患者外周血血浆中HOPX基因甲基化率分别为65.38%(34/52)和15.0%(3/20),脑胶质瘤患者肿瘤组织及外周血中HOPX基因甲基化率与患者性别、年龄、病理类型、肿瘤部位、病理分级间无明显相关性。结论脑胶质瘤患者肿瘤组织和外周血血浆中HOPX基因甲基化率较高,可能与脑胶质瘤的发生相关,因其检测灵敏度较高,有望为脑胶质瘤患者提供早期诊断的线索和依据,为脑胶质瘤的治疗提供新的思路。

鸡HOPX基因的克隆及表达分析

前期研究发现,HOPX基因在鸡脂肪组织高表达,为了解该基因在脂肪发育过程中的作用,采用RT-PCR方法,扩增和克隆鸡HOPX基因全长CDS区,并进行序列分析;采用real-time RT-PCR和半定量RT-PCR的方法,开展了HOPX基因的组织表达谱分析、HOPX基因在东北农业大学肉鸡高、低脂双向选择品系脂肪组织发育过程中的表达差异分析以及鸡脂肪细胞分化过程中的表达分析。研究结果显示,鸡HOPX基因的全长CDS区为222 bp,编码73个氨基酸。HOPX基因在鸡的多种组织中表达,其中,在脂肪组织中的表达量最高;在高、低脂系肉鸡的脂肪组织生长发育过程中,HOPX基因的表达均随年龄增长而上升,且高脂系鸡HOPX基因的表达量高于低脂系;在鸡脂肪细胞分化过程中,HOPX基因的表达呈上升趋势。HOPX基因的表达分析结果提示,该基因在鸡脂肪组织生长发育过程中发挥作用。

非小细胞肺癌组织HOPX基因表达及其临床意义

目的研究HOPX基因在人非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其临床意义。方法采用Envision二步法,检测140例肺腺癌和肺鳞癌及20例正常支气管组织中HOPX蛋白的表达,分析NSCLC组织中HOPX蛋白表达与临床病理参数之间的关系。结果 NSCLC组织中HOPX蛋白表达明显低于正常支气管组织,差异有显著性（χ^2=18.35,P〈0.05）;肺腺癌组织HOPX蛋白表达高于肺鳞癌组织（χ^2=32.04,P〈0.05）。HOPX蛋白表达与病人性别、吸烟、肿瘤部位、肿瘤直径及TNM分期有关（χ^2=5.61~25.45,P〈0.05）。结论 HOPX蛋白在NSCLC组织中表达明显减少,其低表达与肿瘤直径及TNM分期有关。HOPX在NSCLC中可能起抑癌作用,其可能成为NSCLC一种新的早期诊断及预后参考指标。