IVF-ET对子代胎盘PEG3、L3MBTL1、NF-κB表达的影响及临床意义

目的:观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)对子代胎盘父系表达基因3(PEG3)、父系印记基因L3MBTL1(L3MBTL1)、核转录因子-κB(NF-κB)表达水平影响及其临床意义。方法:选取2021年6月-2022年12月在本院产科行IVF-ET的剖宫产产妇及自然受孕剖宫产产妇各45例为IVF-ET组、对照组。胎盘娩出后收集两组胎盘组织,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot法测定胎盘组织中PEG3、L3MBTL1、NF-κB mRNA及蛋白表达;比较不同新生儿结局IVF-ET产妇胎盘组织中PEG3、L3MBTL1、NF-κB mRNA及蛋白表达;应用Spearman相关系数分析胎盘组织中各指标表达与新生儿结局关系。结果:IVF-ET组胎盘组织中PEG3、L3MBTL1 mRNA及蛋白表达均低于对照组,NF-κB mRNA及蛋白表达高于对照组;IVF-ET组中出现不良新生儿结局产妇胎盘组织中PEG3、L3MBTL1 mRNA及蛋白表达均低于无不良新生儿结局产妇,NF-κB mRNA及蛋白表达高于无不良新生儿结局产妇(均P<0.05)。Spearman相关系数分析显示,IVF-ET产妇胎盘组织中PEG3、L3MBTL1 mRNA及蛋白表达与新生儿结局呈正相关,NF-κB mRNA及蛋白表达与新生儿结局呈负相关(均P<0.05)。结论:IVF-ET子代胎盘PEG3、L3MBTL1、NF-κB异常表达,且表达与不良新生儿结局有关。

对House B/L的应用探析

通过对House B/L的有关法律法规、法律地位的研究,具体分析其主要业务流程,得出结论:House B/L是现代物流发展的必然产物,在实践中具有诸多优势;但由于与现行的国际公约、国内法规以及操作惯例存在一些冲突,相比Master B/L失去了贸易流通性,卖方易丧失货物控制权,所以在应用中要十分谨慎。卖方在House B/L条件下应避免无单放货、实现安全收汇、取得诉权,充分利用其灵活便捷的优势,降低风险,创造更多贸易机会。

针刀疗法对L_3横突综合征兔血浆血栓素B_2及6-酮-前列腺素水平的影响

目的 :观察针刀疗法对L3 横突综合征兔血浆TXB2 、6 keto PGF1α水平的影响。方法 :将实验兔 18只随机分为针刀干预组、模型对照组、正常对照组 ,每组 6只 ,于造模后 10d、15d、2 5d、30d检测结果 ,进行统计学分析。结果 :针刀干预组 10d、15d、2 5d、30dTXB2 含量与模型组比较差异无显著性(P >0 0 5 ) ,6 keto PGF1α含量、TXB2 /6 keto PGF1α比值与模型组差异有非常显著性 (P <0 0 1)。结论 :针刀干预使 6 keto PGF1α、TXB2 /PGF1α比值呈良性改变 ,从而改善局部微循环 ,促进炎症吸收 ,增强了组织修复再生能力。

丹酚酸B调控pSmad3C/pSmad3L发挥抗肝纤维化-肝细胞癌作用

目的观察丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导小鼠肝纤维化-肝细胞癌进程的影响,并探讨Sal B经由p Smad3C/p21介导的抑癌信号、p Smd3L/PAI-1/c-Myc介导的促肝纤维化-肝癌信号转换机制。方法昆明种♂小鼠100只,随机分组,DEN诱导小鼠肝纤维化-肝细胞癌模型,不同剂量Sal B(15、30mg·kg^(-1)·d^(-1),ig)及阳性药秋水仙碱(0.2 mg·kg^(-1)·d^(-1),ig)干预。于造模第12周、第16周分批处死小鼠,肝脏活检,苏木精-伊红(HE)染色、Van Gieson(VG)染色观察肝组织病理学特征,Western blot法检测肝组织中p Smad3C、p S-mad3L、p21、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)及c-Myc蛋白表达。结果正常组肝脏表面光滑、质地柔软,模型组第12周时肝脏表面粗糙、质地变硬,第16周时肝脏表面可见弥漫性结节、质地坚硬;而丹酚酸B干预组以上病变明显改善。HE及VG染色显示,正常组肝组织结构正常,模型组第12周时肝组织炎细胞浸润、胶原纤维增生,形成假小叶结构;第16周时肝小叶结构紊乱,细胞核变大、分裂相增多、异型性明显;Sal B干预组肝组织病变程度明显减轻。Western blot结果显示,正常组肝组织中p Smad3C、p Smad3L、PAI-1表达均较少,p21、c-Myc几乎不表达;模型组第12周时肝组织中p Smad3C无明显变化,p S-mad3L、PAI-1、p21表达增多,第16周时p Smad3C、p Smad3L、p21、PAI-1、c-Myc表达皆有增加;而Sal B干预组第12周时p Smad3C、p21表达明显增加,p Smad3L、PAI-1蛋白水平明显降低,第16周时p Smad3C表达明显增加,p21几乎无变化,p Smad3L、PAI-1、c-Myc表达明显降低。结论Sal B延缓DEN诱导的小鼠肝纤维化-肝细胞癌进程,其机制可能与调控p Smad3C/p21、p Smad3L/PAI-1/c-Myc信号转换有关。

人乳头瘤病毒-6L1蛋白B-细胞优势表位作为多肽疫苗的研究

本研究分析了人乳头瘤病毒-6 型 L1 外壳蛋白之 B-细胞优势表位,并拟以此为基础制作表位多肽疫苗。研究中采用 Goldkey 和 PC/Gene 软件系统综合分析 HPV6 之 L1 蛋白 B-细胞优势表位后,Fmoc 固相合成表位多肽,通过 HPLC 纯化和毛细管电泳分析其纯度。与佐剂完全乳化后,免疫小鼠,进行动物水平的免疫效果评价。取免疫小鼠血清,与 HPV-6 DNA 阳性的尖锐湿疣患者疣体组织上清液结合,以鉴定免疫小鼠所产生抗体的特异性。发现 L1 蛋白第 425-439 位和第 486-500 位具有较高的免疫原性,可明显诱导小鼠血清抗体滴度升高,且该抗体与人尖锐湿疣疣体组织上清液呈阳性反应。说明所选这两个肽段为 HPV6 之 L1 蛋白的 B-细胞优势表位,但诱导产生的抗体是否具有功能特异性,正在做进一步研究。

CD40L对B淋巴细胞表面分子及分泌IL-12的影响

在体外使用CD40L作用于B淋巴细胞使之活化,通过测定B淋巴细胞表面分子及分泌细胞因子的变化,探讨B淋巴细胞作为抗原递呈细胞在抗肿瘤免疫中的优势,为B淋巴细胞特异性活化细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte,CTL)进而发挥其肿瘤细胞杀伤效应奠定基础.取7名健康成人外周静脉血,经淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞(PBMC),分为对照组和实验组,实验组培养液中加入加入CD40L和IL-4,共培养21 d.观察B淋巴细胞生长状况,并在第7 d、第14 d和第21 d,用流式细胞仪(FCAS)测定其表面分子CD80、CD86和CD19,在第21 d,使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养液中的IL-12水平.结果显示,在CD40L的作用下,B淋巴细胞呈克隆样增殖,并高表达表面分子CD80/CD86和CD19,和对照组相比,B淋巴细胞分泌IL-12水平升高(P<0.05).上述实验结果说明通过CD40L的刺激,B淋巴细胞得到了活化,提示通过该途径活化的B淋巴细胞具备了作为抗原递呈细胞而发挥其抗肿瘤免疫治疗的能力.

食品添加剂2,3-丁二酮通过激活NF-κB诱发肝细胞L02发生凋亡

在现代社会中,食品添加剂在食品工业的生存和发展中起到了关键作用。作为食品添加剂家族的重要一员,2,3-丁二酮(2,3-butanedione,BUT)被广泛用于制造牛奶香精。然而为了降低成本,生产商使用BUT作为原料,对食品的安全性构成了极大的威胁。近年来,已发现BUT可引起肺部闭塞性细支气管炎,但BUT对肝脏是否具有潜在毒性仍然未知。本研究使用L02细胞作为体外模型,检测细胞暴露于BUT 12 h是否会引起肝毒性。实验结果表明,当BUT的剂量达到0.5 mM时,肝细胞活性显著降低,出现大量死细胞,细胞活性氧增加并且线粒体膜电位降低,Capase-3活性显著升高,Nf-κB和Caspase-3基因与蛋白表达量均升高。这些结果表明,当BUT浓度达到一定的剂量阈值时,可以引起一定程度的肝细胞凋亡。

基于LabVIEW与Modbus协议的多点温度采集实验设计

为培养学生工业通信协议应用能力,设计一种基于LabVIEW与Modbus协议的多点温度采集实验。该实验以LabVIEW为上位机,以TAM-18B20-8L模块实现对温度信号的采集;上位机通过485通信接口及Modbus协议读取温度数据进行处理并显示,通过DatabaseConnectivity工具包完成Access数据库的建立及数据存储。学生可以通过该实验更好地掌握Modbus协议、数据库建立访问的设计方法和工程实现方法。

RP11-366L20.3通过NF-κB通路调控E-cadherin表达

目的研究长链非编码RNA RP11-366L20.3在调控炎症因子表达中的作用。方法运用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激THP-1细胞6 h,然后收集细胞提取RNA并通过RT-qPCR筛选上调表达的长链非编码RNA,RACE(c DNA末端快速扩增)获取其基因全长,Northern blot验证基因的真实长度和LPS刺激效果,细胞通路抑制剂分析其转录调控通路和胞内分布,过表达和siRNA处理细胞分析RP11-366L20.3调控的下游炎症因子及机理。结果筛选出一个长链非编码RNA RP11-366L20.3,LPS刺激能上调该基因的表达,RACE扩增全长为833 bp,Northern blot也验证了RACE的实验结果,RP11-366L20.3主要分布于细胞核,其基因的转录受到NF-κB信号通路调控;同时RP11-366L20.3是一个TLR4通路的非编码RNA,过表达RP11-366L20.3能降低E-cadherin的基因表达,而siRNA敲低RP11-366L20.3则能上调E-cadherin的基因表达,RIP实验表明RP11-366L20.3能与P50蛋白直接结合,LPS刺激能增强RP11-366L20.3与p50的结合,从而抑制E-cadherin的基因表达。结论长链非编码RNA RP11-366L20.3通过NF-κB通路因子P50调控E-cadherin的基因表达。

静脉联合应用低剂量IL-2和中等剂量IFN_(α-2b)治疗肾透明细胞癌的初步探讨

目的:探讨经静脉应用低剂量IL-2联合中等剂量的IFNα-2b在肾透明细胞癌中的应用价值及安全性。方法:IFNα-2b小剂量递增至1000万U/m2·d～2000万U/m2·d,静脉滴注7～10d,随后IFNα-2b300万U～600万U/m2,皮下注射,每周2次;静滴IFNα-2b期间IL-260～100万U/d,分次静脉推注或滴注,连续5天;以上每1月为一疗程。结果:3例肿瘤完全切除术后应用者生存4月、53月和65月迄今无复发转移;余7例带瘤生存2年以上1例,3年以上5例,5年以上1例,其中完全缓解2例,死亡1例(生存26月);副作用主要有发热、肌肉关节酸痛、食欲减退、轻度WBC下降等。结论:静脉联合应用低剂量IL-2和中等剂量IFNα-2b治疗肾透明细胞癌有效、安全,值得临床进一步研究。

UBE2L3参与肺腺癌细胞有氧糖酵解的机制研究

目的探讨泛素蛋白连接酶L3(UBE2L3)对肺腺癌细胞有氧糖酵解的作用及其分子机制。方法通过生物信息学方法分析UBE2L3 mRNA表达水平与肺腺癌患者的总生存期的关系以及对肺腺癌组织中有氧糖酵解水平的影响。选择UBE2L3表达水平较低的HCC827细胞为研究对象,构建过表达质粒细胞HCC827/UBE2L3及HCC827/NC;选择UBE2L3表达水平较高的H1299细胞为研究对象,构建敲低细胞H1299/UBE2L3及H1299/NC,收集细胞用于后续实验。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,采用葡萄糖测定试剂盒测定葡萄糖消耗量,采用乳酸检测试剂盒测定乳酸生成量,采用Western blot检测有氧糖酵解关键蛋白M2-型丙酮酸激酶(PKM2)、L-乳酸脱氢酶(LDHA)表达水平。另外再通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)抑制剂Y294002阻断PI3K/Akt信号通路后检测细胞有氧糖酵解的变化。结果肺腺癌组织中UBE2L3蛋白表达水平高于正常肺组织(P<0.05)。UBE2L3高表达组患者总生存期低于低表达组(P<0.05)。UBE2L3 mRNA表达水平与LDHA和PKM2 mRNA表达水平均呈正相关(r=0.258和0.404,均P<0.01)。HCC827/UBE2L3组细胞在48、72、96 h时增殖能力均高于HCC827/NC组(均P<0.05),H1299/si-NC组细胞在48、72、96 h时增殖能力均高于H1299/si-UBE2L3组(均P<0.05)。HCC827/UBE2L3组细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量均大于HCC827/NC组,PKM2和LDHA蛋白表达水平均高于HCC827/NC组;H1299/si-UBE2L3组细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量均小于H1299/si-NC组,PKM2、LDHA蛋白表达水平均低于H1299/si-NC组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与HCC827/UBE2L3+二甲基亚砜组相比,经过抑制剂Y294002处理的HCC827/UBE2L3细胞增殖能力下降,Akt活性被抑制,磷酸化Akt、LDHA和PKM2蛋白表达水平均下降,葡萄糖消耗量、乳酸生成量均下降。结论UBE2L3可以通过激活PI3K/Akt信号通路从而促进肺腺癌细胞的有氧糖酵解过程。

FGFR-1、HMGB1、UCH-L1水平变化与重症颅脑损伤患者疾病转归的关联性分析

目的成纤维细胞生长因子受体-1(FGFR-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)水平变化与重症颅脑损伤(SBI)患者疾病转归的关联性。方法选取2018年1月-2020年10月我院SBI患者123例,根据随访28 d格拉斯哥预后量表(GOS)评分分为预后良好组(n=84,GOS评分>3分)、预后不良组(n=39,GOS评分≤3分),比较两组基线资料、入院时、入院3 d、7 d后血清FGFR-1、HMGB1、UCH-L1水平,分析血清FGFR-1、HMGB1、UCH-L1与GOS、Rankin量表(MRS)评分的相关性,探讨SBI患者预后影响因素。结果预后不良组入院时、入院3d、7d后血清HMGB1、UCH-L1水平高于预后良好组,血清FGFR-1水平低于预后良好组(P<0.05)。入院7d后,血清HMGB1、UCH-L1与GOS评分呈负相关性,与MRS评分呈正相关性,血清FGFR-1与GOS评分呈正相关性,与MRS评分呈负相关性(P<0.05);中线移位≥5mm、入院7d后血清HMGB1水平≥12.97mg/L、入院7d后血清UCH-L1水平≥27.22 ng/ml、入院7d后血清FGFR-1水平≤7.87μg/L是SBI患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论HMGB1、UCH-L1、FGFR-1异常表达可能增加SBI患者预后不良风险,早期检测三者水平,可为临床判断疾病转归、评估预后提供科学指导。

一汽-大众迈腾B8L车灯开关简介

2016年7月27日,一汽-大众品牌旗舰车型—全新迈腾B8L正式上市。此次上市的全新一代迈腾推出了280TSI（1.4T）、330TSI（1.8T）、380TSI（2.0T）3种动力共9款车型,拥有多项中国专属设计和配置,如轴距相比海外版加长80mm,车内空间更大;配备了中国专属的超大全景天窗及电动遮阳帘、3色可调尊贵内饰格调氛围灯;同时,针对后排乘客对舒适性、私密性的需求,全新一代迈腾还装备了后排舒适睡眠头枕,后排手动侧窗遮阳帘等众多专属配置。

环磷腺苷葡胺联合盐酸莫雷西嗪片对心律失常患者NF-κB、CD40L水平的影响

目的探讨环磷腺苷葡胺联合盐酸莫雷西嗪片对心律失常患者核因子-κB(NF-κB)、CD40L水平的影响。方法176例心律失常患者随机均分为两组,传统组口服盐酸莫雷西嗪片治疗,联合组在传统组基础上静脉滴注环磷腺苷葡胺治疗,比较两组的临床疗效、心率变异性以及NF-κB、CD40L水平。结果治疗后,联合组的总有效率显著高于传统组,SDANN、SDNN、RMSSD均显著高于传统组,NF-κB、CD40L水平均显著低于传统组(P<0.05)。结论环磷腺苷葡胺联合盐酸莫雷西嗪片治疗心律失常效果显著,可显著改善患者的心率变异性,降低NF-κB、CD40L水平。

盐酸法舒地尔对老年脑梗死患者疗效及血清高迁移率族蛋白B1、可溶性CD40L和单核细胞趋化因子1的影响

目的分析盐酸法舒地尔对老年脑梗死的治疗效果及对血清中高迁移率族蛋白(HMG)B1、可溶性CD40L(s CD40L)和单核细胞趋化因子(MCP)-1的影响。方法 146例老年脑梗死患者随机分为两组,对照组73例,应用常规治疗,观察组73例,在常规治疗基础上加用盐酸法舒地尔。应用酶联免疫实验检测治疗前、后血清中HMGB1、s CD40L和MCP-1的表达差别。结果两组治疗后显效率差别显著(P<0.05)。观察组治疗后血清中HMGB1、s CD40L和MCP-1表达的下降值明显高于对照组(P<0.05)。结论盐酸法舒地尔治疗脑梗死老年患者的疗效明显,且能有效下调血清中HMGB1、s CD40L和MCP-1的表达,优化内环境。

鼻渊舒口服液对CRS模型小鼠鼻窦黏膜IFN-γ及免疫检查点B7-H1/PD-1 mRNA表达的影响研究

目的:探讨鼻渊舒口服液对慢性鼻-鼻窦炎(CRS)模型小鼠γ干扰素(IFN-γ)的影响,并基于协同刺激分子B7同源物l(B7-H1)/程序性死亡因子1(PD-1)免疫检测点探讨其可能机制。方法:将雄性C57小鼠随机分为正常组、假手术组、化学药对照组(克拉霉素,103 mg/kg)和鼻渊舒低、中、高剂量组(鼻渊舒口服液,3.1、6.2、12.4 mL/kg),每组20只。除正常组不作任何处理外,其余各组小鼠均开放上颌窦,假手术组不填充带菌海绵,模型组和各给药组填充带菌海绵以复制CRS模型。自造模后第8周开始,正常组、假手术组和模型组小鼠均灌胃生理盐水0.2 mL,各给药组小鼠灌胃相应药物,每日1次,连续14 d。观察小鼠的鼻部症状和一般情况,采用苏木精-伊红染色法观察小鼠鼻窦黏膜的病理变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测小鼠鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1、PD-1 mRNA的表达情况。结果:正常组、假手术组小鼠未见鼻部异常,鼻窦黏膜上皮及纤毛完整,两组IFN-γ、B7-H1、PD-1 mRNA的相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组小鼠可见流涕且频繁挠鼻、喷嚏,鼻腔内有少量黄色分泌物,脱毛严重;其鼻窦黏膜严重缺损、纤毛脱落,黏膜下层腺体增生,可见淋巴细胞浸润;鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1、PD-1mRNA的相对表达量均较正常组显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠的鼻部症状、一般情况及鼻窦组织病理学变化均有不同程度的改善,化学药对照组和鼻渊舒中、高剂量组小鼠鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1 mRNA以及各给药组PD-1 mRNA的相对表达量均显著降低,且鼻渊舒中、高剂量上述指标均显著低于低剂量组,而鼻渊舒高剂量组IFN-γmRNA的相对表达量显著高于中剂量组。鼻渊舒低、高剂量组IFN-γmRNA,低剂量组B7-H1 mRNA以及各剂量组PD-1 mRNA的相对表达量均显著高于化学药对照组(P<0.05或P<0.01);鼻渊舒中剂量组上述指标水平与化学药对照组相当(P>0.05)。结论:鼻渊舒口服液可改善CRS模型小鼠鼻窦黏膜的慢性炎症,其机制可能与通过抑制IFN-γmRNA表达从而干预B7-H1/PD-1 mRNA过度表达有关。

TNFR2通过Akt和Wnt/β-4-4atenin信号途径对L428淋巴瘤细胞增殖和耐药的影响

目的探讨肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)通过蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)和Wnt/β-4-4atenin信号途径对L428淋巴瘤细胞增殖和耐药的影响。方法 L428细胞分为对照组、转染PcDNA3.1/TNFR2的上调组(UR组)、上调TNFR2并抑制Akt组(LY组)和上调TNFR2并抑制WNT通路组(DK组)。qRT-PCR检测各组TNFR2 mRNA表达,Western blot法检测TNFR2、磷酸化Akt(p-Akt)、Akt、β-4-4catenin蛋白表达,CCK-8法检测各组L428细胞增殖活性,分析阿霉素处理后IC50。过表达TNFR2后,采用TNFR2靶向拮抗剂处理,分别检测p-Akt、Akt、β-4-4catenin蛋白表达和细胞增殖率。结果 UR组、LY组和DK组TNFR2 mRNA和蛋白表达、p-Akt/Akt、β-4-4catenin均高于对照组,LY组p-Akt/Akt低于UR组,DK组β-4-4catenin低于UR组(P<0.05)。UR组、LY组、DK组细胞活力OD值均高于对照组,UR组高于LY组和DK组(P<0.05)。UR、LY和DK组IC50高于对照组,LY和DK组IC50低于UR组(P<0.05)。TNFR2拮抗剂处理后p-Akt/Akt和β-4-4catenin表达均降低,且L428增殖率明显下降(P<0.05)。结论 TNFR2通过Akt和WNT/β-4-4catenin途径促进淋巴瘤细胞L428增殖和ADM耐药,TNFR2可能是淋巴瘤治疗的新靶点。

小鼠B7-1基因RNAi慢病毒载体的构建及其沉默效应研究

目的：构建介导小鼠B7-1基因RNAi的慢病毒载体,研究其对L929细胞表面B7-1分子表达的沉默效应。方法：从小鼠B7-1基因编码区选择3段RNA干扰靶序列,制备转录双发夹RNA的前体DNA,并克隆至慢病毒穿梭质粒,构建B7-1的RNAi慢病毒穿梭载体,测序鉴定。将重组质粒及辅助质粒共转染293T细胞产生慢病毒,经超速离心获得浓缩慢病毒颗粒。通过测定293T细胞GFP表达水平确定病毒滴度,流式细胞术检测感染效率以及对细胞表面B7-1的干扰效率。病毒感染细胞经嘌呤霉素筛选及克隆培养获得小鼠B7-1基因RNAi慢病毒稳定感染的L929细胞,流式细胞术分析细胞中GFP及B7-1分子表达的状况;将感染细胞与分离的小鼠脾脏T细胞混合培养,分析B7-1稳定沉默细胞刺激T细胞增殖的能力。结果：成功了构建小鼠B7-1基因RNA干扰的重组慢病毒载体;获得了滴度达（3~5）×10~8TU/ml的浓缩重组慢病毒,重组慢病毒可有效感染L929细胞介导GFP表达以及沉默其表面的B7-1。经筛选获得慢病毒稳定感染的L929细胞,该细胞表面B7-1分子表达受到抑制,刺激T细胞增殖的能力显著下降（P〈0.05）。结论：构建了能够高效感染及沉默小鼠B7-1分子的RNAi慢病毒载体,该载体可稳定沉默L929细胞表面B7-1分子表达,抑制B7-1/CD28信号诱导的T细胞增殖效应。

小麦再生相关基因TaDCC1-2B的克隆与功能验证

硫氧还蛋白DCC1在拟南芥中依赖氧化还原修饰通过调节活性氧(ROS)的稳态来调控植物的再生。为深入了解小麦中该基因的序列特征及功能,从普通小麦‘中国春’中克隆获得一个小麦硫氧还蛋白基因 TaDCC1-2B,其CDS长度为645 bp,编码214个氨基酸。生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白分子质量为23.59 ku,理论等电点为8.94,亲水性总平均值为-0.409,推测为亲水性蛋白。系统进化分析表明该基因在不同物种间具有较强的保守性,启动子区域含有与分生组织形成和赤霉素响应相关的的顺式作用元件。利用农杆菌介导法将 TaDCC1-2B基因转入拟南芥硫氧还蛋白突变体dcc1中,转基因植株根尖诱导的再生芽的再生率接近于野生型,其体内 TaDCC1-2B和WUS基因的表达水平也显著高于突变体,表明转基因株系中 TaDCC1-2B基因的过量表达维持了愈伤组织中内源ROS水平的稳定,使得WUS基因得以正常表达,从而维持了拟南芥愈伤组织的再生能力,推测 TaDCC1-2B基因可能在小麦组织培养过程中也将发挥相似作用。