两种杂交石斑鱼子一代及其亲本的线粒体COⅠ基因遗传变异分析

对两种杂交石斑鱼子一代(青龙斑和虎龙斑)及其亲本(斜带石斑鱼、棕点石斑鱼和鞍带石斑鱼)的线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)基因序列进行了测序分析。在15个样本中,同源序列片段(1 551bp)中共检测到9个单倍型和249个核苷酸多态位点。序列差异分析和遗传距离比较结果显示,核苷酸序列同源性在88.1%～100%之间,无明显遗传分化。虎龙斑的2个COⅠ基因单倍型与母本棕点石斑鱼单倍型的同源性为99%和100%,而与父本鞍带石斑鱼的同源性均为88.1%。青龙斑的2个单倍型与母本斜带石斑鱼的3个单倍型的同源性在99.7%～100%之间,而与父本鞍带石斑鱼的同源性分别为89.3%和89.4%,结果表明两种杂交子一代在线粒体DNA COⅠ基因上严格遵循母性遗传规律。

饥饿—复投喂对虎龙斑FAS及CPT-1A表达的影响

目的:探究饥饿-复投喂对虎龙斑脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthase,FAS)及肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(Carnitine Palmitoyltransferase 1A,CPT-1A)表达的影响,为进一步研究饥饿对虎龙斑脂肪代谢调控的分子机理奠定基础.方法:设计0d,10d,20d,30d,40d的饥饿区间,饥饿10d后复投喂10d,每隔10d取样,测定其体长、体重,并取肝组织.首先提取肝组织的总酶,用酶联免疫法(ELISA)测定不同饥饿程度和复投喂对FAS和CPT-1A含量的影响;其次通过异硫氰酸胍-酚法(Trizol法)提取肝组织总RNA,经逆转录得cDNA,用实时荧光定量PCR技术检测不同饥饿程度和复投喂对FAS和CPT-1A基因表达的影响.结果:(1)连续饥饿可使虎龙斑肝脏中的FAS含量显著下降(P<0.05),复投喂后肝脏中FAS的含量略为升高(P>0.05),但仍显著低于对照组的水平(P<0.05);饥饿组的FAS基因表达量均显著低于对照组(P<0.05),饥饿10d、20d后复投喂,FAS基因表达量显著上升(P<0.05).(2)连续饥饿使虎龙斑肝脏中的CPT-1A含量及CPT-1A基因的表达量显著上升(P<0.05),而复投喂则降低了CPT-1A含量和CPT-1A基因的表达水平(P<0.05).结论:饥饿可明显降低虎龙斑肝脏中FAS的表达,减少体脂的沉积;相反,饥饿可显著提高虎龙斑肝脏中CPT-1A的表达,用以分解肝脏脂肪,产生能量以维持正常的基础代谢活动.