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Effect of Photodynamic Therapy with BPD-MA on the Proliferation and Apoptosis of Human Bladder Cancer Cells
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作者 Chuanshan Xu Shiming Wu +2 位作者 Zhigang Wang Lehua Yu Qing Yang 《Chinese Journal of Clinical Oncology》 CSCD 2005年第5期776-780,共5页
OBJECTIVE To explore the effect of photodynamic therapy with benzoporphyrin derivative monoacid ring A (BPD-MA) on the proliferation and apoptosis of human bladder cancer cells. METHODS Photosensitization of BPD-MA ... OBJECTIVE To explore the effect of photodynamic therapy with benzoporphyrin derivative monoacid ring A (BPD-MA) on the proliferation and apoptosis of human bladder cancer cells. METHODS Photosensitization of BPD-MA was activated with a red light laser (632.8 nm) delivered at 10 mw/cm^2 to give a total dose of 2.4 J/cm^2. Cellular proliferative activity was measured using the 3-(4,5.- dimethylethiazil-2-yl)-2,5-Diph3-eyl tetrazolium bromide (MFi-) assay and 3H-thymidine incorporation. Cell apoptosis was determined with flow cytometry analysis and the terminal deoxyuridine nicked-labeling (TUNEL) assay. RESULTS At 24 h post photodynamic treatment, photodynamic therapy significantly decreased cellular proliferative activity. The rate of apoptosis in BIU-87 cells 8 h after photodynamic treatment significantly increased up to 26.11± 2.59% as analyzed with flow cytometry. In situ labeling of DNA cleavage products with the terminal deoxyuridine nicked-labeling (TUNEL) assay reinforced these observations, BPD-MA-mediated photosensitization increased the number of TUNEL-positive cells compared to the controls. However, laser irradiation alone, BPD-MA alone and sham radiation did not affect cellular proliferative activity or apoptosis of the human bladder cancer BIU-87 cells. CONCLUSION Photodynamic therapy with BPD-MA significantly decreases cellular proliferative activity and enhances apoptosis. Therapy using this method might be a promising approach to treat patients with bladder cancer. 展开更多
关键词 photodynamic therapy BPO-MA human bladder cancer cells PROLIFERATION apoptosis.
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Study of wavy laminar growth of human urinary bladder cancer cell line in vitro
2
作者 邓国宏 丛延广 +2 位作者 刘俊康 徐启旺 袁泽涛 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2001年第1期40-44,共5页
Objective: To observe the ordered growth behavior of human urinary bladder cancer cell line (BIU) under culture in vitro. Methods: The suspension of BIU cells was spread locally in a culture container. When the cells ... Objective: To observe the ordered growth behavior of human urinary bladder cancer cell line (BIU) under culture in vitro. Methods: The suspension of BIU cells was spread locally in a culture container. When the cells grew a-long the wall to form a cellular colony, macroscopic and microscopic observations complemented with measurements of the parameters including expanding diameter, expanding rate, cell shape. average cell density, average cell size. dehydrogenase activity and sensitivity to pH were conducted dynamically. Results: During cell culture, obvious laminar characteristics appeared in localized growing BIU cell colonies and there was difference between the cells of different zones in shape, size, density, dehydrogenase activity and sensitivity to pH. Conclusion: Space closing and bio-dissipation result in self-organization of BIU cells with ordered growth behavior. The present experiment offers a simple, controllable model for the study of wavy growth of human cells. 展开更多
关键词 human urinary bladder cancer cell line cell culture SELF-ORGANIZATION growth behavior
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Apoptosis Induced by Photodynamic Therapy with Benzoporphyrin Derivative Monoacid Ring A and Exploration of its Potential Mechanism in Bladder Cancer Cells
3
作者 Chuanshan Xu Shiming Wu +3 位作者 Zhigang Wang Lehua Yu Qing Yang Xiabo Zeng 《Chinese Journal of Clinical Oncology》 CSCD 2005年第6期837-841,共5页
OBJECTIVE To investigate apoptosis induced by photodynamic therapy with benzoporphyrin derivative monoacid ring A (BPD-MA) and explore its potential mechanism in human bladder cancer cells. METHODS Photosensitizatio... OBJECTIVE To investigate apoptosis induced by photodynamic therapy with benzoporphyrin derivative monoacid ring A (BPD-MA) and explore its potential mechanism in human bladder cancer cells. METHODS Photosensitization of BPD-MA was activated with a red light Laser (632.8nm) delivered at 10 mW/cm^2 to give a total dose of 2.4 J/cm^2. Cellular apoptosis was measured with flow cytometry analysis and an insitu terminal deoxyuridine nick end-labeling (TUNEL) assay. Changes in mitochondrial membrane potential (△φm) were monitored by a flow cy-tometric method with Rhodamine 123 staining and the expression of bcl- 2 in BIU-87 cells was detected with immunocytochemical staining. RESULTS At 8 h following photodynamic treatment, the degree of apoptosis was significantly increased when analyzed with flow cytometry and TUNEL assay. Treatment of the BIU-87 cells by PDT with BPD-MA resulted in the collapse of the △φm and a decrease of bcl-2 expression. CONCLUSION BPD-MA-mediated PDT can effectively induce apoptosis in BIU-87 cells. The mechanism probably is through a mitochondrial-initiated pathway. 展开更多
关键词 photoch/namic therapy BPD-MA human bladder cancer cell APOPTOSIS mitochondrial membrane potential bcl-2.
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罗哌卡因抑制膀胱癌J82细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究
4
作者 杨欣宇 杨阳 王立娟 《检验医学与临床》 CAS 2024年第21期3195-3200,共6页
目的探讨罗哌卡因对人膀胱癌J82细胞增殖、迁移和侵袭的影响及对c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的调控作用。方法体外培养人膀胱癌J82细胞,该研究分为预实验和正式实验两个部分。预实验分组:对照组(不进行干预),低、中、高浓度罗哌卡因... 目的探讨罗哌卡因对人膀胱癌J82细胞增殖、迁移和侵袭的影响及对c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的调控作用。方法体外培养人膀胱癌J82细胞,该研究分为预实验和正式实验两个部分。预实验分组:对照组(不进行干预),低、中、高浓度罗哌卡因组(200、400、800μmol/L罗哌卡因);正式实验分组:对照组、罗哌卡因组(有显著作用浓度的罗哌卡因)、阳性药物组(100 nmol/L紫杉醇)、抑制剂组(罗哌卡因+20μmol/L JNK信号通路抑制剂SP600125)和激活剂组(罗哌卡因+1μg/mL JNK信号通路激活剂茴香霉素),干预24 h。分别采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、划痕法、Transwell小室法、蛋白免疫印迹法检测细胞活力、增殖率、迁移率、侵袭细胞数、上皮间质转化(EMT)及JNK通路相关蛋白水平。结果预实验中,与对照组比较,高浓度罗哌卡因组细胞活力明显降低(P<0.05),以高浓度罗哌卡因(800μmol/L)进行正式实验。正式实验中,罗哌卡因组和阳性药物组细胞增殖率、迁移率、侵袭细胞数,以及N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)和磷酸化(p)-JNK表达水平较对照组降低(P<0.05),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平较对照组升高(P<0.05)。与罗哌卡因组相比,抑制剂组细胞增殖率、迁移率、侵袭细胞数,以及N-cadherin、Vimentin、FN和p-JNK表达水平降低(P<0.05),E-cadherin表达水平升高(P<0.05),而激活剂组上述指标趋势则正好相反(P<0.05)。结论罗哌卡因可能通过阻断JNK信号通路活化抑制人膀胱癌J82细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程。 展开更多
关键词 膀胱癌 罗哌卡因 人膀胱癌J82细胞 c-Jun氨基末端激酶信号通路 增殖 迁移 侵袭 上皮间质转化
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木犀草素联合卡介苗治疗膀胱癌的协同效应及其机制 被引量:7
5
作者 杨关天 王增军 +3 位作者 王伟 周翔 胡向农 杨建军 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期371-378,共8页
目的:研究木犀草素(Luteolin,Lu)联合卡介苗(bacillus calmette-guerin,BCG)抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖的作用及其机制。方法:体外培养膀胱癌BIU-87细胞株,分别用不同浓度的Lu(20,40,60,80,100,160μmol/L)单独及联合BCG(100,200 mg/L)处... 目的:研究木犀草素(Luteolin,Lu)联合卡介苗(bacillus calmette-guerin,BCG)抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖的作用及其机制。方法:体外培养膀胱癌BIU-87细胞株,分别用不同浓度的Lu(20,40,60,80,100,160μmol/L)单独及联合BCG(100,200 mg/L)处理BIU-87细胞,作用6,12,24,48 h。采用Hoechst 33258核荧光染色观察细胞形态学变化,MTT法检测Lu和BCG对BIU-87细胞增殖的抑制作用和半数抑制率IC50,流式细胞术分析肿瘤细胞的凋亡及细胞周期,比色法测定caspase-3蛋白活性,Western印迹分析磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinases,P-JNK)的表达。结果:Hoechst 33258核荧光染色提示Lu可诱导细胞凋亡,并增强BCG诱导的细胞凋亡。MTT法检测显示Lu及BCG对BIU-87细胞增殖均有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;Lu与BCG联合作用对BIU-87细胞的增殖抑制具有显著的协同效应(P<0.05)。流式细胞术提示Lu及BCG均诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡,并具有明显的协同增敏效应(P<0.05)。Lu及BCG均可上调caspase-3活性及P-JNK表达水平,二者联合作用明显增强(P<0.05)。结论:Lu与BCG均可抑制BIU-87细胞增殖,诱导细胞凋亡,并呈浓度依赖性,二者具有明显的协同增敏作用;Caspase-3蛋白活化及JNK的激活是其可能的分子机制,Lu可作为BCG免疫治疗的有效增敏剂用于对膀胱肿瘤的治疗。 展开更多
关键词 膀胱癌细胞 木犀草素 卡介苗 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 磷酸化c-Jun氨基末端激酶 协同作用 凋亡
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苦参碱对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的抑制作用及其机制研究 被引量:10
6
作者 姚莉 武兴斌 秦龙 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第16期2177-2180,共4页
目的:研究苦参碱对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:以0(阴性对照)、0.5、1.0、2.0、4.0 mg/ml苦参碱分别作用于人膀胱癌BIU-87细胞24、48、72 h后,MTT法检测细胞活性并计算细胞增殖抑制率;以0(阴性对照)、0.5、... 目的:研究苦参碱对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:以0(阴性对照)、0.5、1.0、2.0、4.0 mg/ml苦参碱分别作用于人膀胱癌BIU-87细胞24、48、72 h后,MTT法检测细胞活性并计算细胞增殖抑制率;以0(阴性对照)、0.5、1.0、2.0、4.0 mg/ml苦参碱作用于细胞48 h后,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,Western blot法检测细胞中生存素、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3及Caspase-7蛋白的表达。结果:与阴性对照比较,1.0-4.0 mg/ml苦参碱作用24、48、72 h后均对BIU-87细胞增殖有显著的抑制作用(P〈0.05或P〈0.01),增殖抑制率呈浓度和时间依赖性升高;作用48 h后,G0/G1期细胞比例升高、S期及G2/M期细胞比例降低、凋亡率升高(P〈0.05或P〈0.01)。0.5-4.0 mg/ml苦参碱作用48 h后,细胞中生存素蛋白表达减弱、Caspase-3及Caspase-7蛋白表达增强(P〈0.05或P〈0.01)。结论:苦参碱可抑制人膀胱癌BIU-87细胞的增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡,其机制可能与调控细胞中生存素及Caspase-3、Caspase-7的表达有关。 展开更多
关键词 苦参碱 人膀胱癌BIU-87细胞 增殖 凋亡
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北五味子多糖对人膀胱癌细胞体外增殖和凋亡作用的研究 被引量:2
7
作者 孙红霞 刘春旭 +4 位作者 安学俊 崔光华 王靖宇 佟双喜 杨晓秋 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2022年第4期461-465,共5页
目的探讨北五味子多糖(Schisandra chinensis polysaccharide,SCP)对体外培养的人膀胱癌细胞T24的作用.方法采用SCP 50、100、200μg/mL 3个剂量处理体外培养的人膀胱癌细胞T24,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测SCP对T24细胞增殖的抑制效应,显... 目的探讨北五味子多糖(Schisandra chinensis polysaccharide,SCP)对体外培养的人膀胱癌细胞T24的作用.方法采用SCP 50、100、200μg/mL 3个剂量处理体外培养的人膀胱癌细胞T24,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测SCP对T24细胞增殖的抑制效应,显微镜下观察细胞的形态学改变;流式细胞仪(FCM)检测SCP对细胞周期百分率的影响;Hoechst33258荧光染色法检测SCP对T24细胞凋亡的影响;Western blot(WB)法检测SCP对T24细胞中cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.结果与对照组比较,SCP可显著抑制T24细胞增殖(P<0.05),促进T24细胞凋亡;FCM结果显示:与对照组比较,SCP能明显促进凋亡,增加凋亡率(P<0.05);SCP能明显降低T24细胞中Bcl-2蛋白表达,提高Bax蛋白表达,增加cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9的蛋白表达,与对照组比较差异显著(P<0.05).结论SCP能抑制人膀胱癌T24细胞增殖,并促进其凋亡,其机制可能与诱导细胞凋亡和调控相关基因表达有关. 展开更多
关键词 北五味子多糖 人膀胱癌细胞 增殖 凋亡作用
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三氧化二砷抑制人膀胱癌EJ细胞增殖及其作用机制探讨 被引量:3
8
作者 夏俊 陈俊霞 +1 位作者 于丽华 崔秀云 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2005年第3期160-162,共3页
背景与目的:观察三氧化二砷(Arsenictrioxide,As2O3)对人膀胱癌EJ细胞生长抑制作用,并探讨其作用机理。材料与方法:四甲基偶氮唑蓝(3_[4,5_dimethylthiazol_2_yl]_2,5diphenyltetrazoliumbromid,MTT)法检测EJ细胞增殖活力;荧光染色观察... 背景与目的:观察三氧化二砷(Arsenictrioxide,As2O3)对人膀胱癌EJ细胞生长抑制作用,并探讨其作用机理。材料与方法:四甲基偶氮唑蓝(3_[4,5_dimethylthiazol_2_yl]_2,5diphenyltetrazoliumbromid,MTT)法检测EJ细胞增殖活力;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化;流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡;免疫细胞化学染色观察caspase_3蛋白的表达。结果:As2O3 与EJ细胞生长抑制率之间有显著的浓度依赖关系,IC50 为22.51μmol/L;荧光显微镜下观察到经As2O3 作用后,EJ细胞出现凋亡现象;流式细胞术结果表明20μmol/L的As2O3 处理EJ细胞48h后,细胞周期变化无显著性差异,细胞凋亡率从对照组的3.37 %上升到19.07 %;免疫细胞化学染色结果显示,20μmol/L的As2O3 处理EJ细胞48h后,能够诱导caspase_3蛋白的表达。结论:As2O3 能显著抑制EJ细胞增殖,诱导caspase_3蛋白表达,并进一步诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 三氧化二砷 人膀胱癌EJ细胞 增殖抑制作用 CASPASE-3 细胞凋亡
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VX-680诱导人膀胱癌T24细胞凋亡及其对Bcl-2表达的影响 被引量:4
9
作者 肖宁 周兴 +1 位作者 曾格瓦 赵晓昆 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第7期1060-1062,共3页
目的:探讨Aurora A激酶抑制剂VX-680对人膀胱癌T24细胞凋亡的诱导作用及对Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响及意义。方法:体外培养T24细胞,分别给予不同浓度及作用时间的VX-680,Annexin V/PI检测细胞凋亡;Hoechst染色法检测细胞凋亡形态学改... 目的:探讨Aurora A激酶抑制剂VX-680对人膀胱癌T24细胞凋亡的诱导作用及对Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响及意义。方法:体外培养T24细胞,分别给予不同浓度及作用时间的VX-680,Annexin V/PI检测细胞凋亡;Hoechst染色法检测细胞凋亡形态学改变;RT-PCR和Western blot检测细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达。结果:Annexin V/PI显示,凋亡率分别随着浓度增高和时间增长而增加,呈浓度及时间依赖性;Hoechst染色发现细胞在处理72 h后,其凋亡增多程度及Bcl-2 mRNA和蛋白表达下调水平均随浓度增高而增加,呈浓度依赖性。结论:Aurora激酶抑制剂VX-680可能通过下调Bcl-2表达显著诱导人膀胱癌T24细胞凋亡,且具有浓度依赖性。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 VX-680 人膀胱癌T24细胞 细胞凋亡 BCL-2
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CpG寡聚脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞在裸鼠体内的生长 被引量:2
10
作者 何威 周佩军 +1 位作者 沈周俊 马斌斌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期930-933,共4页
目的:观察不同剂量的CpG ODN 1668对裸鼠皮下接种人膀胱移行细胞癌T24细胞生长的抑制作用,并与卡介苗的作用进行比较。方法:通过皮下接种T24细胞,建立裸鼠皮下接种人膀胱癌细胞的动物模型。将裸鼠随机分为5组,(1)对照组;(2)BCG组;(3)小... 目的:观察不同剂量的CpG ODN 1668对裸鼠皮下接种人膀胱移行细胞癌T24细胞生长的抑制作用,并与卡介苗的作用进行比较。方法:通过皮下接种T24细胞,建立裸鼠皮下接种人膀胱癌细胞的动物模型。将裸鼠随机分为5组,(1)对照组;(2)BCG组;(3)小剂量CpG ODN 1668组;(4)中等剂量CpG ODN 1668组;(5)大剂量CpG ODN 1668组。自肿瘤细胞接种后第1天起给药,共4次(第1、8、15、22天),在肿瘤周围多点注射相应药物(早期给药);同样方式另设5组动物,自肿瘤细胞接种后第7天起(第7、14、21、28天)于肿瘤周围多点注射相应药物(延迟给药)。观察肿瘤体积和裸鼠的生存率。结果:早期给药时,在CpG ODN 1668各剂量组和BCG组,肿瘤生长均被抑制,裸鼠的生存期得到延长。中等剂量和大剂量CpG ODN 1668组对肿瘤细胞生长的抑制作用强于BCG组。延迟给药时,CpG ODN 1668各剂量组肿瘤体积和裸鼠的生存率,与对照组和BCG组的差异无显著统计学意义。结论:CpG ODN 1668的早期应用,可抑制人膀胱癌细胞T24在裸鼠体内的生长,并表现为剂量依赖性;其抗肿瘤效应是非T细胞依赖的。当加大使用剂量时,CpG ODN 1668对膀胱癌细胞生长的抑制作用强于BCG。而当肿瘤负荷较大时,CpG ODN 1668和BCG的延迟使用对膀胱肿瘤细胞在裸鼠体内的生长无抑制作用。 展开更多
关键词 卡介苗 CPG寡聚脱氧核苷酸 人膀胱癌细胞 裸鼠
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人膀胱癌细胞波状层次生长的研究 被引量:2
11
作者 邓国宏 丛延广 +2 位作者 刘俊康 徐启旺 袁泽涛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期465-469,共5页
目的 观察人膀胱癌细胞 (BIU)在体外培养条件下的生长有序行为。方法 将BIU细胞悬液进行局限区域接种 ,待其形成贴壁生长的群落后进行宏观和显微动态观察及参数测量 (扩展直径、扩展速率、细胞形态、细胞平均密度、细胞平均大小、脱... 目的 观察人膀胱癌细胞 (BIU)在体外培养条件下的生长有序行为。方法 将BIU细胞悬液进行局限区域接种 ,待其形成贴壁生长的群落后进行宏观和显微动态观察及参数测量 (扩展直径、扩展速率、细胞形态、细胞平均密度、细胞平均大小、脱氢酶活性、对pH的敏感性等 )。结果 体外细胞培养条件下 ,局限区域生长的BIU细胞群落能出现明显的层次特性 ,不同区域细胞的形态、大小、密度、脱氢酶活性以及对pH的敏感性均存在差异。结论 空间封闭和生物耗散导致细胞自组织 ,其结果表现为生长有序行为。 展开更多
关键词 膀胱癌 癌细胞培养 生物波 肿瘤细胞生长
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IL-18基因转染人膀胱癌T-24细胞及其表达的研究 被引量:1
12
作者 倪晓辰 刘爽 +1 位作者 张爱莉 刘铁军 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期652-655,共4页
目的:建立表达IL-18基因的人膀胱癌细胞系IL-18/T-24,探讨外源性IL-18基因对T-24细胞生长及其生物学性状的影响。方法:将插入IL-18基因的质粒,应用逆转录病毒载体LXSN感染ψ2(ecotropic)和PA317(amphotropic)两种包装细胞,通过药物G418... 目的:建立表达IL-18基因的人膀胱癌细胞系IL-18/T-24,探讨外源性IL-18基因对T-24细胞生长及其生物学性状的影响。方法:将插入IL-18基因的质粒,应用逆转录病毒载体LXSN感染ψ2(ecotropic)和PA317(amphotropic)两种包装细胞,通过药物G418筛选获得表达IL-18蛋白的PA317阳性细胞克隆,用IL-18/PA317培养上清转染T-24细胞,获得表达IL-18的IL-18/T-24细胞。分别用RT-PCR、ELISA和免疫组化染色分析IL-18/T-24细胞表达IL-18的mRNA和蛋白的水平,筛选出高表达IL-18的IL-18/T-24细胞克隆用于下层研究中;用流式细胞仪检测转染前后细胞的周期变化及细胞凋亡情况;用ELISA法检测IL-18/T-24细胞培养上清诱导脾细胞分泌IFN-γ的能力;采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)比色法,测定转染前后细胞增殖及黏附能力的变化。结果:外源性IL-18基因转染的人膀胱癌细胞系IL-18/T-24,在mRNA水平和蛋白水平均可获得稳定表达;并且,IL-18/T-24细胞的培养上清可明显促进小鼠脾细胞分泌IFN-γ(P<0.01)。IL-18/T-24细胞与LXSN/T-24和T-24比较,细胞周期及细胞凋亡率无显著性差异(P>0.05),IL-18/T-24细胞的增殖率与LXSN/T-24和T-24细胞相比虽有所降低,但无显著性差异(P>0.05)。结论:建立的稳定表达IL-18的IL-18/T-24细胞,既保持了肿瘤细胞原有的免疫原性,又具有分泌IL-18的功能,引起较强的免疫应答反应。IL-18/T-24细胞与LXSN/T-24和T-24细胞相比较,其生物学性状无明显差异,可进一步用于肿瘤相关免疫基因治疗的研究。 展开更多
关键词 逆转录病毒载体 IL-18基因 转染 人膀胱癌细胞
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氧化苦参碱通过PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响研究 被引量:7
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作者 孙超群 杨树立 +2 位作者 陈桂平 郝阳 莫承强 《新中医》 CAS 2019年第9期9-12,共4页
目的:探讨氧化苦参碱能否通过第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因/3-磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶向基因(Phosphatase and tension homolog deleted on chromosome ten/phosphoinositide 3-kinase/protein kin... 目的:探讨氧化苦参碱能否通过第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因/3-磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶向基因(Phosphatase and tension homolog deleted on chromosome ten/phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin,PTEN/PI3K/Akt/mTOR)通路对人膀胱癌T24细胞的增殖、凋亡产生影响。方法:T24细胞复苏传代后与不同剂量氧化苦参碱共培养,MTT法检测不同剂量氧化苦参碱对T24细胞增殖的影响,流式细胞仪检测氧化苦参碱对T24细胞凋亡的影响,Hoechst光镜观察氧化苦参碱对T24细胞核形态的影响,Western blot检测氧化苦参碱对T24细胞PI3K、Akt、mTOR、PTEN蛋白表达的影响。结果:与0μmol/L组比较,氧化苦参碱各剂量组T24细胞的增殖率下降,凋亡率升高,PI3K、Akt、mTOR蛋白表达下降,PTEN蛋白表达上升,且在一定范围内存在剂量依赖性(P<0.05)。结论:氧化苦参碱可能通过PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路抑制T24细胞的增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 人膀胱癌T24细胞 PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路 细胞实验
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融合蛋白TAT-EGFP的表达及其对膀胱癌细胞和组织的穿膜活性鉴定 被引量:1
14
作者 吴刚 周洁 +1 位作者 王启辉 聂振 《广西医学》 CAS 2012年第6期653-656,共4页
目的构建穿膜肽-增强型绿色荧光蛋白(TAT-EGFP)融合蛋白的原核表达系统,研究该融合蛋白在体外对人膀胱癌细胞(EJ细胞)和膀胱癌组织的跨膜作用。方法以pEGFP-1载体为模板,设计包含TAT序列的引物,用PCR技术扩增TAT-EGFP基因,扩增产物插入... 目的构建穿膜肽-增强型绿色荧光蛋白(TAT-EGFP)融合蛋白的原核表达系统,研究该融合蛋白在体外对人膀胱癌细胞(EJ细胞)和膀胱癌组织的跨膜作用。方法以pEGFP-1载体为模板,设计包含TAT序列的引物,用PCR技术扩增TAT-EGFP基因,扩增产物插入载体pET30a,构建成重组质粒pET30a-TAT-EGFP。将重组质粒转入大肠杆菌BL21中,IPTG诱导TAT-EGFP融合蛋白表达。表达产物用十二烷基硫钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,Ni-NTA Superflow Cartvidge亲和层析柱纯化融合蛋白。将融合蛋白TAT-EGFP加入培养的EJ细胞和膀胱癌组织,荧光显微镜观察TAT-EGFP融合蛋白进入EJ细胞和膀胱癌组织的情况。结果成功构建了高表达pET30a-TAT-EGFP重组子,纯化了分子质量约为31 kD的融合蛋白TAT-EGFP。不同浓度的TAT-EGFP融合蛋白对膀胱癌细胞均无明显毒性。TAT-EGFP融合蛋白具有穿过膀胱癌细胞和膀胱癌组织的作用。结论通过对TAT-EGFP融合蛋白表达纯化及活性分析,证实TAT的蛋白转导作用,为肽类及生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。 展开更多
关键词 穿膜肽-增强型绿色荧光蛋白 融合蛋白 穿膜 人膀胱癌细胞 膀胱癌组织
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HMGN5基因敲除对人膀胱上皮癌细胞顺铂化疗敏感性的影响 被引量:1
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作者 周剑文 罗广承 +1 位作者 王新君 颜志坚 《实用药物与临床》 CAS 2019年第9期907-911,共5页
目的探讨HMGN5基因敲除对人膀胱上皮癌细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法采用不同浓度CDDP(0、1、2、4,8、16μg/ml)处理人UBC细胞系,采用Western blot、菌落形成、细胞侵袭、细胞凋亡及Hoechst 33342染色法评价HMGN55蛋白敲除对UBC细胞C... 目的探讨HMGN5基因敲除对人膀胱上皮癌细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法采用不同浓度CDDP(0、1、2、4,8、16μg/ml)处理人UBC细胞系,采用Western blot、菌落形成、细胞侵袭、细胞凋亡及Hoechst 33342染色法评价HMGN55蛋白敲除对UBC细胞CDDP敏感性的影响,同时分析HMGN5基因参与到UBC细胞CDDP治疗环节可能分子机制。结果 UBC细胞株5637、t24及UM-UC-3中HMGN5蛋白表达,其中5637细胞系HMGN5蛋白水平最高,而UM-UC-3细胞中最低(P<0.05);5637细胞系对CDDP敏感性显著低于其他两种(P<0.05),且UM-UC-3细胞系敏感性最高;UBC细胞系HMGN5敲除后P-Akt表达显著下降(P<0.05);CDDP处理后P-Akt活性亦随之降低(P<0.05);CDDP处理还可下调VEGF-C和SLUG表达,上调E-Cad表达(P<0.05);5637细胞HMGN5基因敲除后早期凋亡率显著提高,而加入IGF-1可逆转这一过程(P<0.05);与阴性对照组和IGF-1治疗组相比,HMGN5敲除组凋亡核百分比显著升高(P<0.05);与对照组相比,HMGN5基因敲除显著下调P-AKT和VEGF-C表达,上调E-Cad、细胞色素C、裂解半胱天冬酶-3、裂解PARP表达(P<0.05);而添加IGF-1可逆转以上蛋白质表达变化(P<0.05)。结论 HMGN5可能是顺铂治疗潜在靶点,抑制HMGN5基因有助于增加UBC细胞化疗敏感性,这一作用主要通过干扰PI3K/Akt信号通路实现。 展开更多
关键词 HMGN5基因 人膀胱上皮癌细胞 顺铂 化疗 敏感性
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猪苓多糖通过调节HuR介导bcl-2表达诱导T24细胞凋亡 被引量:6
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作者 沈耿 徐谦 +1 位作者 黄羽 曾星 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期160-164,共5页
目的研究猪苓多糖(polyporus polysaccharide,PPS)对膀胱癌T24细胞凋亡的作用及其机制。方法 T24细胞常规培养后加入不同剂量PPS,利用Hoechst染色、流式细胞术检测PPS对细胞凋亡的影响,利用q RT-PCR检测PPS对T24细胞bcl-2 m RNA表达水... 目的研究猪苓多糖(polyporus polysaccharide,PPS)对膀胱癌T24细胞凋亡的作用及其机制。方法 T24细胞常规培养后加入不同剂量PPS,利用Hoechst染色、流式细胞术检测PPS对细胞凋亡的影响,利用q RT-PCR检测PPS对T24细胞bcl-2 m RNA表达水平及其稳定性的影响,通过Western Blot法检测PPS对T24细胞bcl-2蛋白、人抗原R(human antigen R,Hu R)蛋白的表达及对Hu R蛋白胞浆及胞核内分布的影响。结果与对照组比较,中、高剂量的PPS作用24 h后,T24细胞凋亡明显增多(P<0.05),bcl-2 m RNA稳定性降低(P<0.05),bcl-2蛋白及m RNA表达减少(P<0.05),总Hu R蛋白没有明显变化,但胞浆Hu R蛋白表达下降(P<0.05),胞核Hu R蛋白表达升高(P<0.05)。结论 PPS可诱导T24细胞凋亡,其作用可能与影响Hu R在细胞内定位,降低bcl-2 m RNA稳定性及减少bcl-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 猪苓多糖 人抗原R 膀胱癌 T24细胞 凋亡 BCL-2
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塞来昔布对膀胱癌细胞T24增殖的影响 被引量:3
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作者 田晶 崔艳茹 屈飞 《肿瘤药学》 CAS 2011年第4期379-381,共3页
目的观察塞来昔布对人膀胱癌细胞T24增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法不同浓度塞来昔布(25、50、100和200μmoL·L-1)分别作用于人膀胱癌细胞T24不同时间(24h、48h和72h),MTT检测T24细胞增殖抑制率,半定量RT-PCR和Western-b... 目的观察塞来昔布对人膀胱癌细胞T24增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法不同浓度塞来昔布(25、50、100和200μmoL·L-1)分别作用于人膀胱癌细胞T24不同时间(24h、48h和72h),MTT检测T24细胞增殖抑制率,半定量RT-PCR和Western-blot检测T24细胞中COX-2表达的变化。结果塞来昔布对膀胱癌T24细胞抑制作用存在剂量、时间依赖性,200μmoL·L-1塞来昔布作用72h时抑制率达75.7±1.9%,明显高于其它各组(P<0.05或0.01);半定量RT-PCR和Western-blot方法显示塞来昔布可显著降低T24细胞中COX-2mRNA和蛋白水平(P<0.05),且呈时间依赖性。结论塞来昔布可通过减少COX-2的表达抑制人膀胱癌细胞T24的增殖,并呈时间和剂量依赖性。 展开更多
关键词 塞来昔布 人膀胱癌细胞 环氧化酶-2 凋亡
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膀胱癌患者尿脱落细胞中人巨细胞病毒的定量分析 被引量:2
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作者 秦逸秋 张云英 +4 位作者 沈红 王文静 钟淑梅 李延红 阮素云 《劳动医学》 北大核心 2001年第3期151-153,共3页
[目的 ]初步探讨人巨细胞病毒感染与膀胱癌的关系。 [方法 ]采用一种新的PCR产物定量测定技术 ,对 12例膀胱癌病人 ,2 4例健康人的尿脱落细胞病理标本进行人巨细胞病毒 (HCMV)的定量检测 ,并结合临床资料 ,探讨膀胱癌与HCMV感染的关系... [目的 ]初步探讨人巨细胞病毒感染与膀胱癌的关系。 [方法 ]采用一种新的PCR产物定量测定技术 ,对 12例膀胱癌病人 ,2 4例健康人的尿脱落细胞病理标本进行人巨细胞病毒 (HCMV)的定量检测 ,并结合临床资料 ,探讨膀胱癌与HCMV感染的关系。 [结果 ] 12例膀胱癌病人中有 8例阳性 ,2 4例对照人群中无阳性发现 ,表明膀胱癌细胞内存在有HCMV基因的DNA。 [结论 ]膀胱癌病人中有较高的HCMV感染 ,并可能在膀胱癌的发生和发展中起着重要作用。 展开更多
关键词 膀胱癌 人巨细胞病毒 定量PCR 脱落细胞
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端粒酶hTERT基因反义核酸对膀胱癌细胞T24端粒酶活性的影响 被引量:3
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作者 高晓东 陈一戎 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期779-781,785,共4页
目的探讨hTERT基因的全硫代修饰反义寡核苷酸(ASPS-ODN)对膀胱癌细胞T24端粒酶活性的影响。方法采用TRAP-PCR-ELISA法检测膀胱癌细胞的端粒酶活性;采用RT-PCR方法检测hTERT基因mRNA的表达水平;以免疫组化通过流式细胞仪检测hTERT基因蛋... 目的探讨hTERT基因的全硫代修饰反义寡核苷酸(ASPS-ODN)对膀胱癌细胞T24端粒酶活性的影响。方法采用TRAP-PCR-ELISA法检测膀胱癌细胞的端粒酶活性;采用RT-PCR方法检测hTERT基因mRNA的表达水平;以免疫组化通过流式细胞仪检测hTERT基因蛋白水平的变化。结果hTERT基因的全硫代修饰反义寡核苷酸(ASPS-ODN)作用于T24细胞48h,其端粒酶活性下降,作用72h,其端粒酶活性受到抑制。结论通过hTERT基因的全硫代修饰反义寡核苷酸(ASPS-ODN)特异性抑制hTERT基因mRNA的表达降低膀胱癌细胞T24端粒酶活性。 展开更多
关键词 端粒酶 反义寡核苷酸 人类端粒酶催化亚单位 T24细胞
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磁转染MUC1/Y基因入树突状细胞抗膀胱肿瘤的免疫效应研究 被引量:4
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作者 孙璇 周四维 +2 位作者 庄乾元 管维 叶章群 《临床泌尿外科杂志》 2007年第5期379-382,共4页
目的:研究体外磁转染人MUC1/Y基因至人树突状细胞(DC)的可行性,以及在体外诱导特异性抗MUC1/Y膀胱癌的免疫效应。方法:以葡聚糖磁性纳米颗粒(DMN)作为载体,在多聚赖氨酸(PLL)的辅助下,通过静电作用结合MUC1/Y基因的真核表达载体pEGFP-C1... 目的:研究体外磁转染人MUC1/Y基因至人树突状细胞(DC)的可行性,以及在体外诱导特异性抗MUC1/Y膀胱癌的免疫效应。方法:以葡聚糖磁性纳米颗粒(DMN)作为载体,在多聚赖氨酸(PLL)的辅助下,通过静电作用结合MUC1/Y基因的真核表达载体pEGFP-C1-MUC1/Y,在铜-硼-锡磁块的固定磁场作用下转染至人DC中,荧光显微镜下以及流式细胞仪观察其转染效率;再将这种转基因DC与自体T细胞共培养,观察其致敏的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对MUC1/Y特异性抗膀胱癌(膀胱肿瘤BIU87细胞系)的杀伤活性,即分别用LDH释放法检测CTL杀伤活性和透射电镜观察CTL诱导靶细胞凋亡情况;ELISA法测定基因修饰后的DC刺激自体T细胞分泌IFN-γ的能力。结果:pEGFP-C1/-MUC1/Y转染效率为15%左右,荧光显微镜下可观察到明显绿色荧光蛋白的表达;与自体T细胞混合培养后能诱导出显著的MUC1/Y特异性的CTL,对BIU87细胞的杀伤实验表明T-DC-MUC1的杀伤活性约为52%,显著高于对照组T-DC诱导的CTL;在透射电镜下也可以清楚的观察到部分BIU87膀胱肿瘤细胞出现了细胞核核仁消失,染色质浓集于核膜周围等早期凋亡表现;基因修饰后的DC能刺激自体T细胞分泌高水平的IFN-γ,与未转染的DC相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:葡聚糖磁性纳米颗粒(DMN)在固定磁场的作用下成功将MUC1/Y基因转入DC,并可有效诱导出特异性的抗MUC1/Y膀胱癌的免疫效应。 展开更多
关键词 MUC1/Y基因 膀胱癌 人树突状细胞 免疫效应 葡聚糖磁性纳米颗粒 转染
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