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Amnion epithelial cells——a novel therapy for ischemic stroke? 被引量:3
1
作者 Megan A.Evans Brad R.S.Broughton +5 位作者 Grant R.Drummond Henry Ma Thanh G.Phan Euan M.Wallace Rebecca Lim Christopher G.Sobey 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第8期1346-1349,共4页
Stroke is a leading cause of death and disability and new therapies are desperately needed. Given the complex nature of ischemic brain injury, it has been postulated that cell-based therapies may be useful. However, c... Stroke is a leading cause of death and disability and new therapies are desperately needed. Given the complex nature of ischemic brain injury, it has been postulated that cell-based therapies may be useful. However, cell resources, invasive extraction procedures, immunological rejection, tumorigenesis and ethical challenges make it unlikely that many stem cell types could serve as a practical source for therapy. By contrast, these issues do not pertain to human amnion epithelial cells(h AECs), which are placenta-derived stem cells. We recently assessed the effects of systemically delivered hAECs on stroke outcome using four animal models of stroke. We demonstrated that when injected intravenously after ischemia onset, hAECs migrate preferentially to the spleen and injured brain to limit apoptosis and inflammation, and attenuate early brain infiltration of immune cells, progression of infarction and systemic immunosuppression and to ultimately ameliorate functional deficits. When administration of hAECs is delayed by 1-3 days poststroke, long-term functional recovery can still be enhanced in young and aged mice of either sex. Moreover, our proof-of-principle findings suggest that h AECs are effective at limiting post-stroke infarct development in non-human primates. Overall, the results suggest that hAECs could be a viable clinical stroke therapy. 展开更多
关键词 ischemic stroke cerebral infarction stem cells human amnion epithelial cells INFLAMMATION IMMUNOSUPPRESSION brain repair MOUSE non-human primate
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人参皂苷Rg1联合人羊膜间充质干细胞移植治疗卵巢功能不全的效用及机制
2
作者 祝叶 张青云 +2 位作者 莫晓莉 张林 何连利 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第3期201-206,213,共7页
目的:评估人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1)联合人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)移植治疗卵巢功能不全(POI)的疗效优势。方法:共使用40只大鼠,随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、单纯hAD-MSCs治疗(hAD-MSCs)组和hAD-MSCs联合Rg1治疗(h... 目的:评估人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1)联合人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)移植治疗卵巢功能不全(POI)的疗效优势。方法:共使用40只大鼠,随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、单纯hAD-MSCs治疗(hAD-MSCs)组和hAD-MSCs联合Rg1治疗(hAD-MSCs+Rg1)组,每组10只,其中5只用于采集卵巢和血液等组织样本,另5只进行卵母细胞诱导和卵母细胞线粒体功能测定相关实验。模型组构建放疗辐射诱导的POI大鼠模型。结果:与Control组相比,Model组大鼠卵巢存在较大程度的卵泡耗竭和器质性病变,初级卵泡、次级卵泡、窦卵泡和排卵前卵泡均减少,卵巢指数下降,血清FSH升高,E2降低,卵巢组织TUNEL阳性细胞数量增加,ROS水平上升,卵母细胞线粒体膜电势降低,ATP生成量减少(P<0.05)。与单纯hAD-MSCs组相比,hAD-MSCs+Rg1联合组POI大鼠卵巢组织卵泡耗竭和器质性病变明显缓解,初级卵泡、次级卵泡、窦卵泡和排卵前卵泡明显增加,卵巢指数回升显著,血清FSH降低,E2回升,卵巢组织TUNEL阳性细胞数量明显下降,ROS水平明显降低,卵母细胞线粒体膜电势回升,ATP生成量回升显著(P<0.05)。结论:Rg1通过增强hAD-MSCs移植改善卵母细胞线粒体功能的机制并缓解POI大鼠模型疾病进展。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 人羊膜间充质干细胞 放疗 卵巢功能不全
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小鼠囊胚在人羊膜上着床行为的超微观察 被引量:6
3
作者 谭毅 顾美礼 +2 位作者 艾玲 白晋 王智彪 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期20-23,F003,T001,共6页
目的 :建立一种较理想的体外着床模型。方法 :将妊娠 d4的小鼠囊胚培养在人羊膜的基膜面。结果 :发现囊胚能在羊膜上正常脱带、贴附和扩展。光镜观察显示 ,滋养层细胞对羊膜有侵入 ,二者在结构上有交错。扫描电镜下 ,囊胚紧贴于羊膜表... 目的 :建立一种较理想的体外着床模型。方法 :将妊娠 d4的小鼠囊胚培养在人羊膜的基膜面。结果 :发现囊胚能在羊膜上正常脱带、贴附和扩展。光镜观察显示 ,滋养层细胞对羊膜有侵入 ,二者在结构上有交错。扫描电镜下 ,囊胚紧贴于羊膜表面 ,被无数长短一致、粗细均匀的微绒毛覆盖。透射电镜显示部分滋养层细胞及内细胞团细胞已侵入羊膜之中 ,滋养层细胞膜下和微绒毛内可见许多小泡样结构。结论 展开更多
关键词 囊胚 羊膜 着床 超微结构 小鼠
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生物衍生羊膜对大鼠跟腱粘连影响的实验研究 被引量:20
4
作者 罗静聪 杨志明 李秀群 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2004年第5期431-434,共4页
目的 研究生物衍生羊膜预防 SD大鼠跟腱粘连的效果 ,并为临床预防术后跟腱粘连提供实验数据。方法 以 2 8只 SD大鼠后肢跟腱为实验模型 ,切断并缝合跟腱 ,实验侧跟腱包裹生物衍生羊膜 ,对侧不包裹作为对照 ,术后 1、2、4、6、8和 12... 目的 研究生物衍生羊膜预防 SD大鼠跟腱粘连的效果 ,并为临床预防术后跟腱粘连提供实验数据。方法 以 2 8只 SD大鼠后肢跟腱为实验模型 ,切断并缝合跟腱 ,实验侧跟腱包裹生物衍生羊膜 ,对侧不包裹作为对照 ,术后 1、2、4、6、8和 12周分别取跟腱 ,大体及组织学观察跟腱的粘连、愈合情况。 结果 术后各时间点两侧跟腱吻合处炎性细胞浸润情况、跟腱愈合进程无明显差别 ,跟腱粘连的半定量评分表明实验侧和对照侧差异有统计学意义 ( P<0 .0 5 )。 结论 生物衍生羊膜能有效预防跟腱粘连 ,是一种较为理想的预防跟腱粘连的生物材料。 展开更多
关键词 跟腱 粘连 羊膜 术后 预防 SD大鼠 对照 生物 组织学观察 实验数据
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人类羊膜细胞表达神经干细胞特异性蛋白研究 被引量:8
5
作者 蔡哲 潘琳 +5 位作者 舒峻 张岚 郭艳茹 耿同超 牟亮 左萍萍 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第12期965-967,i0001,共4页
目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-N... 目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达。结果人羊膜组织中存在nestin/GFAP双阳性细胞,此外,还表达musashi-1、vi mentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白;培养羊膜细胞中存在vi mentin和PSA-NCAM阳性细胞,以及nestin/GFAP双阳性细胞。结论羊膜组织和培养羊膜细胞中有神经干细胞特异性标记蛋白的表达。 展开更多
关键词 人类羊膜细胞 神经前体细胞 巢蛋白 MUSASHI-1
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组织工程法修复兔肌腱缺损 被引量:7
6
作者 何清义 李起鸿 +1 位作者 许建中 杨柳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期571-574,共4页
目的 应用组织工程的原则 ,种植成纤维细胞于人羊膜细胞外基质 (HA ECM)以修复兔的肌腱缺损。方法 从胎兔分离的成纤维细胞用 5 溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)标记后种植于人羊膜细胞外基质上。以 1cm长的兔跟腱缺损为修复对象 ,用聚酯聚... 目的 应用组织工程的原则 ,种植成纤维细胞于人羊膜细胞外基质 (HA ECM)以修复兔的肌腱缺损。方法 从胎兔分离的成纤维细胞用 5 溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)标记后种植于人羊膜细胞外基质上。以 1cm长的兔跟腱缺损为修复对象 ,用聚酯聚二氧杂环己烷缝线 (PDS)轴心桥接肌腱缺损 ,外包种植有成纤维细胞的HA·ECM膜。术后进行功能锻炼。结果 成纤维细胞在HA·ECM上生长良好 ,放射状或平行排列。成纤维细胞 HA ECM组能够修复肌腱缺损并且腱化的速度和质量明显优于仅用PDS和HA ECM(无成纤维细胞 )修复组 ,与正常肌腱相似 ,抗张强度达正常腱的 81 8%。BrdU免疫组化显示成纤维细胞在腱化过程中起了重要的作用。术后的功能锻炼促进了修复腱的腱化及抗张强度的提高。结论 成纤维细胞 HA·ECM膜能够有效修复肌腱缺损 ,可作为肌腱修复的另一种选择方法。 展开更多
关键词 肌腱缺损 人羊膜 组织工程
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胚胎干细胞源性表皮干细胞对小鼠全层皮肤缺损的修复 被引量:8
7
作者 刘爱军 黄锦桃 李海标 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期296-299,共4页
目的研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨ES细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用。方法以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层... 目的研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨ES细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用。方法以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层皮肤缺损创面。术后1-8周连续取材,HE染色,β1整合素、CK15、CK19、CK10、CEA免疫组织化学和荧光双标显色。结果术后2周,创面完全长合,较厚的新生皮覆盖创面,基底层细胞增生,形成许多大小不一的细胞柱伸向真皮层,真皮层中可见管腔样结构,免疫荧光双标显示,1-3周新生表皮中可见核标记的细胞呈β1整合素、CK15阳性,真皮层中带有核标记的管状或泡状结构呈β1整合素、CK15阳性;4周后新生表皮开始变薄,基底层细胞呈CK19、CK10阳性,汗腺样结构呈CEA阳性,6-8周新生表皮下可见毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构。结论ES细胞源性表皮干细胞植入小鼠全层皮肤缺损创面,可修复缺损的表皮,并在其下真皮层内具有分化为汗腺样、毛囊样和皮脂腺样结构的潜能。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 表皮干细胞 定向分化 皮肤附属结构 免疫组织化学 人羊膜 小鼠
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血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞利于超长随意皮瓣的成活 被引量:11
8
作者 金文虎 周爱婷 +3 位作者 吴中桓 范振海 王达利 魏在荣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第21期3349-3356,共8页
背景:研究证实血管内皮生长因子能够诱导新生血管形成,人羊膜间充质干细胞也可通过多种机制改善皮瓣移植的缺血再灌注损伤。因此,用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞为促进皮瓣成活提供了可能。目的:探索局部应用血管内皮生... 背景:研究证实血管内皮生长因子能够诱导新生血管形成,人羊膜间充质干细胞也可通过多种机制改善皮瓣移植的缺血再灌注损伤。因此,用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞为促进皮瓣成活提供了可能。目的:探索局部应用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞对超长比例随意皮瓣成活的影响。方法:将30只成年SD大鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组10只,在其背部左右分别构建2 cm×8 cm超长缺血随意皮瓣模型,皮瓣蒂部位于髂棘水平,分别为Ⅰ-left,Ⅰ-right,Ⅱ-left,Ⅱ-right,Ⅲ-left,Ⅲ-right。皮瓣掀起后即刻,Ⅰ-left、Ⅱ-left注射0.5m LLG-DMEM培养基划分为对照组,Ⅰ-right、Ⅲ-left注射0.5m L细胞浓度为1×10~9 L^(-1)的人羊膜间充质干细胞悬液划分为实验组1,Ⅱ-right、Ⅲ-right注射0.5 mL细胞浓度为1×109L-1转染血管内皮生长因子基因的人羊膜间充质干细胞悬液划分为实验组2,每个皮瓣共注射5点,每点注射0.1m L。移植后即刻、24,48h以及4,7d,激光多普勒血流监测仪监测皮瓣中部和蒂部的血流灌注值,移植后7d观察各组皮瓣的成活率,取成活皮瓣组织通过组织学观察各组皮瓣毛细血管密度,荧光显微镜观察人羊膜间充质干细胞在皮瓣内的分布及存活状况,Westernblot检测皮瓣组织中血管内皮生长因子蛋白水平。结果与结论:①实验组2皮瓣成活率、血流灌注值、皮瓣毛细血管密度明显高于实验组1及对照组,实验组1皮瓣成活率、血流灌注值、皮瓣毛细血管密度明显高于对照组,差异有显著性意义(P <0.05);②在荧光显微镜下观察发现,实验组1、实验组2皮瓣组织内有CM-Dil标记的人羊膜间充质干细胞;③各组皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达均呈阳性,实验组2皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达明显高于实验组1及对照组,实验组1皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P <0.05);④结果证实,在超长随意皮瓣中、远部位应用人羊膜间充质干细胞可明显改善皮瓣成活率;人羊膜间充质干细胞经血管内皮生长因子基因转染后能够分泌更多的血管内皮生长因子蛋白,进而促进超长随意皮瓣血管新生,提高皮瓣成活率。 展开更多
关键词 超长缺血随意皮瓣模型 人羊膜间充质干细胞 血管内皮生长因子 基因转染 皮瓣成活率
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体外培养人羊膜间充质细胞的神经生物学特点 被引量:5
9
作者 胡景伟 蔡哲 +10 位作者 周忠蜀 张岚 舒峻 潘琳 黄小杰 徐波 向青 贺春 徐杨 高艳 崔晓慧 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1070-1073,1086,I0002,共6页
目的:探讨体外培养人羊膜间充质细胞(hAMCs)的神经生物学特征。方法:应用MTS分析法、BrdU掺人法和增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫荧光染色.探讨体外培养hAMCs的增殖活性。利用免疫细胞化学法检测hAMCs中间充质细胞标记(STRO-1、Vimentin)... 目的:探讨体外培养人羊膜间充质细胞(hAMCs)的神经生物学特征。方法:应用MTS分析法、BrdU掺人法和增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫荧光染色.探讨体外培养hAMCs的增殖活性。利用免疫细胞化学法检测hAMCs中间充质细胞标记(STRO-1、Vimentin)、神经干细胞标记蛋白(Nestin、PSA-NCAM)、神经细胞标记蛋白(β-tubulin-Ⅲ、TH)和神经分化相关蛋白(math-1、mash-1)的表达。结果:MTS分析法显示hAMCs在接种后第6-8天增殖速度最快,第8-24天活细胞数基本保持稳定;BrdU和PCNA的免疫荧光染色结果显示体外培养hAMCs中具有大量BrdU和PCNA阳性细胞存在;体外培养的hAMCs表达间充质干细胞特异性标记物STRO-1和Vimentin,也表达神经干细胞标记物Nestin和PSA-NCAM,同时还可见神经元特异性标记物β-tubulin-Ⅲ和TH,以及神经元分化相关蛋白math-1和mash-1的表达;体外培养hAMCs中存在有TH/BrdU和β-tubulin-Ⅲ/BrdU双阳性细胞。结论:体外培养的hAMCs表达间充质干细胞、神经干细胞、神经元的特异性标记蛋白,同时具有增殖活性:hAMCs表达神经元分化相关蛋白。 展开更多
关键词 人羊膜间充质细胞 神经细胞 增殖
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人羊膜对糖尿病患者创面愈合的促进作用 被引量:6
10
作者 高素珍 于广远 +2 位作者 王晓箴 赵婷婷 练练 《解放军护理杂志》 2007年第12B期10-11,14,共3页
目的探讨局部应用新鲜人羊膜(以下简称羊膜)对糖尿病创面愈合的治疗作用。方法选择有难愈性创面的糖尿病患者120例,采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组各60例,观察组局部创面应用新鲜羊膜覆盖治疗,对照组采用常规换药法,分别于第... 目的探讨局部应用新鲜人羊膜(以下简称羊膜)对糖尿病创面愈合的治疗作用。方法选择有难愈性创面的糖尿病患者120例,采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组各60例,观察组局部创面应用新鲜羊膜覆盖治疗,对照组采用常规换药法,分别于第3、7、14天比较两组患者的创面愈合情况(包括上皮葡行面积及肉芽成熟程度)。结果两组糖尿病患者的局部创面在第3天无明显变化;第7、14天,观察组局部创面的上皮葡行速度及肉芽组织生长均明显优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论局部应用羊膜能从多方面促进糖尿病患者创面的愈合,建议在临床推广使用。 展开更多
关键词 人羊膜 糖尿病 创面 愈合
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大气中不同粒径颗粒物诱导人羊膜FL细胞UDS的研究 被引量:4
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作者 原福胜 邢权 马亚萍 《环境与健康杂志》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 1994年第2期49-51,共3页
本研究以诱导人羊膜细胞UDS为指标,对太原市大气不同粒径的颗粒物提取液进行了致突变性检验,结果表明,不同粒径颗粒物的提取液均可产生一定的遗传毒性,尤以3.3μm以下的颗粒物的遗传毒性较强。
关键词 大气监测 颗粒物 人羊膜细胞 UDS
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液氮快速冻存法保存人羊膜抗冻剂筛选研究 被引量:4
12
作者 杨文贤 刘亮 +5 位作者 朱富军 吕礼芳 詹球 王磊 辛海明 童亚林 《华南国防医学杂志》 CAS 2013年第4期229-233,共5页
目的观察不同抗冻剂预处理人羊膜后快速液氮保存的效果。方法剥取剖宫产胎膜中羊膜,分别用生理盐水(C)组、DMEM/甘油(D1)组、DMEM/甘油/二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(D2)组、DMEM/甘油/DM-SO/海藻糖(D3)组预处理并标记后直接投... 目的观察不同抗冻剂预处理人羊膜后快速液氮保存的效果。方法剥取剖宫产胎膜中羊膜,分别用生理盐水(C)组、DMEM/甘油(D1)组、DMEM/甘油/二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(D2)组、DMEM/甘油/DM-SO/海藻糖(D3)组预处理并标记后直接投入液氮中保存。于冻存第1、3、6、12个月取出,行台盼蓝、苏木精-伊红(hema-toxylin-eosin,HE)染色,计算羊膜上皮细胞存活百分率(存活率)、上皮细胞结构(细胞结构),并与新鲜羊膜比较。结果C、D1组随着保存时间延长,存活率1>3>6>12个月(P<0.05),细胞结构破坏也逐步加重。D2组内存活率1>3个月(P<0.05),3>6>12个月(P>0.05),保存1、3个月的羊膜细胞结构接近新鲜羊膜,6、12个月有轻微改变。D3组内各时间点存活率有下降(P>0.05),细胞结构变化不明显。各组各时间点羊膜细胞存活率:新鲜羊膜>D3>D2>D1>C(P<0.05;D3组保存1个月与新鲜羊膜比较,P>0.05)。D2、D3组各时间点存活率>新鲜羊膜的70%。结论DMEM/甘油/DMSO/海藻糖抗冻剂预处理的羊膜,经快速液氮冻存1年后的效果最好。 展开更多
关键词 人羊膜 羊膜上皮细胞存活率 抗冻剂 液氮快速冻存法
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人羊膜成纤维细胞的分离和鉴定 被引量:3
13
作者 张啸环 段明华 +4 位作者 闫玉礼 潘新 李海清 周长龙 赵天倚 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期845-848,894,共5页
目的:建立人羊膜成纤维细胞的体外培养方法,通过细胞的形态特征和免疫组织化学进行鉴定,从而获得人羊膜成纤维细胞,为后续的干细胞研究奠定基础。方法:从足月分娩人胎盘剥离羊膜,胰蛋白酶和胶原酶消化后分离人羊膜成纤维细胞,采用含表... 目的:建立人羊膜成纤维细胞的体外培养方法,通过细胞的形态特征和免疫组织化学进行鉴定,从而获得人羊膜成纤维细胞,为后续的干细胞研究奠定基础。方法:从足月分娩人胎盘剥离羊膜,胰蛋白酶和胶原酶消化后分离人羊膜成纤维细胞,采用含表皮生长因子(EGF)的DMEM培养基进行培养。显微镜下观察细胞形态表现,采用HE染色和免疫组织化学染色分析细胞特征,采用流式细胞术(FCM)分析人羊膜成纤维细胞的纯度。结果:采用胰蛋白酶和胶原酶先后消化获得人羊膜成纤维细胞,显微镜下观察,细胞呈放射状或旋涡状生长。免疫组织化学染色,人羊膜成纤维细胞明显表达成纤维细胞标志物波形蛋白(Vimentin),不同程度地表达S100钙结合蛋白A4(S100A4),不表达上皮细胞标志物角蛋白19(CK19)。流式细胞术分析,人羊膜成纤维细胞的纯度为86.1%。结论:成功建立了人羊膜成纤维细胞分离和鉴定方法,获得的细胞具有成纤维细胞的特异标志和表型特征。 展开更多
关键词 人羊膜成纤维细胞 HE染色 免疫组织化学 流式细胞术
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EGF对hAMSCs基因表达谱影响及生物信息学分析 被引量:3
14
作者 庞希宁 李彩虹 +5 位作者 施萍 王竟 刘晓玉 张涛 张殿宝 赵峰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第11期1391-1397,共7页
目的探讨表皮生长因子(EGF)对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)基因表达谱影响及分子机制。方法采用基因表达谱测序(Illumina RNA-Seq)技术和生物信息学分析方法,对100 ng/mL EGF干预前后的hAMSCs基因表达测序比对,确定hAMSCs基因表达谱,RT-... 目的探讨表皮生长因子(EGF)对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)基因表达谱影响及分子机制。方法采用基因表达谱测序(Illumina RNA-Seq)技术和生物信息学分析方法,对100 ng/mL EGF干预前后的hAMSCs基因表达测序比对,确定hAMSCs基因表达谱,RT-PCR检测进行验证。结果筛选出差异表达基因104个(FDR≤0.001和|log2Ratio|≥1),其中上调差异表达基因56个,下调差异表达基因48个;GO生物学过程富集分析26个生物学过程具有显著性差异(P≤0.05);KEGG信号通路富集分析细胞因子与细胞因子相互作用信号通路具有显著性差异(Q≤0.05),RT-PCR检测验证与基因表达谱结果一致。结论 EGF干预hAMSCs引起基因表达谱的变化,显著差异表达的基因和信号通路可能在hAMSCs增殖和迁移及促进创伤修复过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 表皮生长因子 人羊膜间充质干细胞 基因表达谱 测序 生物信息学
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调控人羊膜上皮细胞AQP8表达的cAMP-PKA信号转导通路研究 被引量:4
15
作者 漆洪波 路炜 段赵宁 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2010年第2期81-86,共6页
目的:研究调控人羊膜上皮细胞AQP8表达的cAMP-PKA信号转导通路。方法:用RNA转录抑制剂ACT-D、蛋白合成抑制剂Cycloheximide(CHX)及蛋白激酶A抑制剂H-89处理被8-Br-cAMP诱导的WISH细胞。采用Western blot技术定量WISH细胞AQP8蛋白表达水... 目的:研究调控人羊膜上皮细胞AQP8表达的cAMP-PKA信号转导通路。方法:用RNA转录抑制剂ACT-D、蛋白合成抑制剂Cycloheximide(CHX)及蛋白激酶A抑制剂H-89处理被8-Br-cAMP诱导的WISH细胞。采用Western blot技术定量WISH细胞AQP8蛋白表达水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测WISH细胞AQP8 mRNA的表达。结果:8-Br-cAMP处理组WISH细胞AQP8 mRNA和蛋白表达水平分别为0.083±0.007和0.144±0.008,与对照组的0.026±0.003;0.027±0.004比较,差异有统计学意义(P<0.05)。ACT-D处理组WISH细胞AQP8 mRNA的表达水平为0.021±0.004,低于对照组的0.026±0.003,差异有统计学意义(P<0.05)。ACT-D+8-Br-cAMP处理组WISH细胞的AQP8 mRNA表达水平为0.031±0.006,明显低于8-Br-cAMP处理组,但高于ACT-D处理组,差异均有统计学意义(P<0.05)。H-89处理组WISH细胞AQP8 mR-NA和蛋白表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。H-89+8-Br-cAMP处理组WISH细胞AQP8 mRNA和蛋白表达水平均明显低于8-Br-cAMP处理组,但高于H-89处理组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CHX处理组WISH细胞AQP8 mRNA和蛋白的表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CHX+8-Br-cAMP处理组WISH细胞AQP8 mRNA和蛋白表达水平均明显低于8-Br-cAMP处理组,但高于CHX处理组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ACT-D、CHX和H-89抑制cAMP诱导的人羊膜上皮细胞AQP8 mRNA和蛋白表达增加的效应,cAMP可能是通过PKA信号转导途径在基因转录、蛋白合成等多个水平调控人羊膜上皮细胞AQP8表达。 展开更多
关键词 人羊膜上皮细胞 水通道蛋白8 信号转导通路 CAMP
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人羊膜对皮肤创面修复的临床应用研究 被引量:3
16
作者 高素珍 于广远 +2 位作者 曹家树 赵婷婷 李英 《解放军护理杂志》 2005年第12期19-20,47,共3页
目的探讨新鲜人羊膜对部队训练致皮肤创伤面的镇痛效果及治疗作用.方法对600例门诊就诊患者随机分为实验组和对照组,实验组采用单层新鲜人羊膜(以下简称羊膜)贴敷治疗,对照组采用碘尔康液涂擦治疗.结果两组显示,浅Ⅱ度皮肤损伤的创面用... 目的探讨新鲜人羊膜对部队训练致皮肤创伤面的镇痛效果及治疗作用.方法对600例门诊就诊患者随机分为实验组和对照组,实验组采用单层新鲜人羊膜(以下简称羊膜)贴敷治疗,对照组采用碘尔康液涂擦治疗.结果两组显示,浅Ⅱ度皮肤损伤的创面用羊膜治疗比对照组提前治愈4~5 d,深Ⅱ度皮肤损伤创面用羊膜治疗比对照组提前治愈7~10 d.结论羊膜用于皮肤创伤面的治疗,在镇痛、防止创面感染、加速创面愈合、减轻瘢痕畸形等方面都比对照组要优越、有效,具有良好的治疗作用. 展开更多
关键词 人羊膜 皮肤 创面 修复
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羊膜联合自体角膜缘上皮移植重建严重碱烧伤的兔眼表面 被引量:2
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作者 于颖 阎筠 +2 位作者 杜志山 鲍震 张虹 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2001年第4期319-321,共3页
目的  探讨利用甘油保存的人羊膜联合自体角膜缘上皮移植,在重建严重碱烧伤后眼表面中的作用。方法 将右眼被碱严重烧伤的新西兰白兔20只20眼随机分为3组:甲组6眼,单纯角结膜病灶切除;乙组7眼,联合羊膜移植;丙组7眼,... 目的  探讨利用甘油保存的人羊膜联合自体角膜缘上皮移植,在重建严重碱烧伤后眼表面中的作用。方法 将右眼被碱严重烧伤的新西兰白兔20只20眼随机分为3组:甲组6眼,单纯角结膜病灶切除;乙组7眼,联合羊膜移植;丙组7眼,联合羊膜及自体角膜缘上皮移植。结果  术后乙组 14~18天(平均 14.20天)、两组6~8天(平均7.60天)角膜表面上皮完全覆盖,二者在术后临床愈合过程中差异有显著性( P< 0.05),抑制新生血管的作用丙组优于乙组。结论  人羊膜联合角膜缘上皮移植重建角膜基底膜和角膜缘部结构治疗碱烧伤后的角结膜损伤是一种合理有效的治疗方法。 展开更多
关键词 人羊膜 角膜缘上皮 眼化学伤 角膜移植 动物实验
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人羊膜间充质干细胞静脉移植后在心肌梗死大鼠体内的定植及分化 被引量:2
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作者 王钰莹 方宁 +3 位作者 陈代雄 余丽梅 刘祖林 万雪 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1583-1586,共4页
目的观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响。方法SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只。分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征。制模... 目的观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响。方法SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只。分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征。制模后1 w经舌下静脉移植Brdu标记的hAD-MSCs,于移植后6 w将大鼠心脏取出并切片行组织病理学、免疫组织化学、双重免疫荧光染色等检测,以观察植入的细胞在MI区的定植、分化,在肝、脾中的分布情况。结果分离的hAD-MSCs具有典型的间充质干细胞表型特征,高表达CD44和波形蛋白;静脉移植后6 w,心脏MI区、肺脏和脾脏中均可见Brdu阳性细胞,但在肝脏中未见阳性细胞,移植的hAD-MSCs表达心肌特异蛋白连接蛋白-43和α-辅肌动蛋白。移植后6 w,移植组大鼠心功能没有进一步恶化。结论 hAD-MSCs经静脉移植能够定植于大鼠MI区域,可分化为心肌细胞,并改善心功能。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 心肌梗死 细胞移植
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人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后NGF、BDNF和Nogo-A mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 喻皇飞 马晶晶 +4 位作者 方宁 余丽梅 章涛 刘祖林 陈代雄 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期924-929,共6页
目的:观察人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及轴突生长抑制因子(Nogo-A)mRNA表达的影响。方法:成年雌性SD大鼠24只,随机分成hAMSCs移植组(12只)、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(1... 目的:观察人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及轴突生长抑制因子(Nogo-A)mRNA表达的影响。方法:成年雌性SD大鼠24只,随机分成hAMSCs移植组(12只)、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(12只)。体外分离培养、鉴定hAMSCs,并以终浓度为10μg/ml 4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染料标记hAMSCs。在建立大鼠T11脊髓全横断损伤模型后,立即以微量注射器吸取约3×106个hAMSCs悬液于横断损伤处头尾两端原位移植,对照组注射相同体积的PBS液。分别于术后3d、7d利用荧光显微镜观察hAMSCs存活情况,并采用RT-PCR分析损伤脊髓段NGF mRNA、BDNF mRNA及Nogo-A mRNA的表达。结果:术后3d和7d hAMSCs移植组均可观察到植入的hAMSCs在宿主脊髓组织内存活。术后3d、7d,hAMSCs移植组NGF mRNA的表达均高于对照组(P<0.05,P<0.01),Nogo-A mRNA的表达均低于对照组(P<0.05);术后3d时hAMSCs移植组BDNF mRNA的表达与对照组比较无显著性差异(P>0.05),但术后7d其表达高于对照组(P<0.05)。结论:hAMSCs移植可上调大鼠受损脊髓组织内NGF mRNA和BDNF mRNA的表达、下调Nogo-A mRNA的表达,有利于促进脊髓损伤后的功能修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 移植 人羊膜间充质干细胞 神经营养因子 大鼠
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两种人羊膜细胞的表型鉴定和分化潜能测定(英文) 被引量:4
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作者 王佳萍 欧阳桂芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期146-153,共8页
本研究旨在分离、培养和表型鉴定两种人羊膜细胞并分析其多向分化潜能。羊膜中可分离出来源于外胚层的羊膜上皮细胞和来源于中胚层的羊膜间充质细胞。用流式细胞术和免疫荧光法对其进行表型鉴定,同时用免疫荧光法分析其多向分化潜能。... 本研究旨在分离、培养和表型鉴定两种人羊膜细胞并分析其多向分化潜能。羊膜中可分离出来源于外胚层的羊膜上皮细胞和来源于中胚层的羊膜间充质细胞。用流式细胞术和免疫荧光法对其进行表型鉴定,同时用免疫荧光法分析其多向分化潜能。结果表明:两种人羊膜细胞阳性表达HLA-A,B,C和间充质干细胞的标志(CD29,CD73,CD44,CD59,CD90,CD105,CH166),不表达造血干细胞的标志(CD31,CD34,CD45,HLA-DR),弱表达协同刺激分子(CD40,CD40L,CD80,CD86),且这些表型的表达量在第3-7代都维持稳定。免疫荧光法显示羊膜上皮细胞表达角蛋白19,不表达波形蛋白,而羊膜间充质细胞则相反。对其多向分化潜能测定显示,羊膜间充质细胞更好地向心肌细胞分化,而羊膜上皮细胞更好地向神经细胞分化。结论:从羊膜中可分离出羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞,两种细胞的表型相似,多向分化潜能却不同。羊膜上皮细胞具有更好的外胚层分化潜能,而羊膜间充质细胞更好地向中胚层分化。此结论对细胞治疗有很好的指导作用。 展开更多
关键词 羊膜上皮细胞 羊膜间充质细胞 免疫表型 分化潜能
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