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过表达miR-23b-3p对甲状腺未分化癌FRO细胞侵袭和迁移的影响
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作者 张晶 罗雯 +1 位作者 甘卓 杨宇 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第3期335-339,共5页
目的 探讨miR-23b-3p对甲状腺未分化癌(ATC)FRO细胞侵袭和迁移能力的影响。方法 qRT-PCR法检测52例ATC癌组织及其癌旁组织中miR-23b-3p和锌指E盒结合同源框1(ZEB1)的表达水平,并分析两者的相关性。培养人ATC细胞株FRO,将miR-23b-3p mimi... 目的 探讨miR-23b-3p对甲状腺未分化癌(ATC)FRO细胞侵袭和迁移能力的影响。方法 qRT-PCR法检测52例ATC癌组织及其癌旁组织中miR-23b-3p和锌指E盒结合同源框1(ZEB1)的表达水平,并分析两者的相关性。培养人ATC细胞株FRO,将miR-23b-3p mimic及其阴性对照转染至FRO细胞中,qRT-PCR检测miR-23b-3p和ZEB1 mRNA表达水平。体外三维培养观察细胞血管生成拟态(VM)形成能力;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力;Western blotting检测ZEB1、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达水平,双荧光素酶报告实验验证miR-23b-3p和ZEB1的靶向调控关系。结果 ATC组织中miR-23b-3p表达水平低于癌旁组织,而ZEB1的表达水平高于癌旁组织,且两者在ATC组织中的表达水平呈负相关。过表达miR-23b-3p能显著下调ZEB1表达水平,抑制FRO细胞VM形成以及侵袭和迁移能力,同时抑制细胞中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达。荧光素酶报告实验证实ZEB1是miR-23b-3p的靶基因。结论 过表达miR-23b-3p可能通过靶向下调ZEB1表达抑制FRO细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 甲状腺未分化癌 侵袭 迁移 miR-23b-3p 锌指E盒结合同源框1 fro细胞
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Small Cell Carcinoma:a Rare Subtype of Thyroid Cancer with Unanticipated Prognosis 被引量:1
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作者 Wei SHI Qiu-yang ZHAO +2 位作者 Ze-ming LIU Shun-tao WANG Chun-ping LIU 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2019年第2期265-269,共5页
The prognosis of small cell thyroid carcinoma(SCTC)in a large cohort has not been well reported in the literature.In this study,we analyzed the mortality of SCTC,in comparison to medullary thyroid cancer(MTC)and anapl... The prognosis of small cell thyroid carcinoma(SCTC)in a large cohort has not been well reported in the literature.In this study,we analyzed the mortality of SCTC,in comparison to medullary thyroid cancer(MTC)and anaplastic thyroid cancer(ATC),based on the Surveillance,Epidemiology,and End Results(SEER)Program of the National Cancer Institute,to determine the prognosis of SCTC.Information regarding patients with a diagnosis of MTC,ATC,or SCTC,between 2004 and 2013,was acquired from the SEER database.Patient survival curves were assessed by Cox proportional hazards regression analyses,Kaplan-Meier analyses,and log-rank tests.In a Kaplan-Meier analysis of the entire cohort of thyroid cancer patients,cancer-specific survival declined sharply for patients with SCTC,but it declined more modestly for patients with MTC.The cancer-specific survival was not significantly different between SCTC and ATC.Unadjusted Cox regression analysis showed that SCTC had a higher cancer-specific mortality than MTC but a similar prognosis as ATC.SCTC showed a higher cancer-specific mortality than MTC and ATC after adjustments for various confounding factors.SCTC was found to have a more highly lethal clinical course than MTC and had a similar death rate to ATC.Therefore,we recommend that aggressive,radical treatment like surgery or radiation should be performed tor these patients. 展开更多
关键词 small cell carcinoma MEDULLARY thyroid CANCER anaplastic thyroid CANCER
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Clinical significance of HBME-1,Galectin-3,and CK19 expression and the status of BRAF mutation in papillary thyroid carcinoma 被引量:4
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作者 Li Zheng Min Zhao +7 位作者 Xiangyang Hu Jin Huang Ling Ang Hongguang Hu Qiang Zou Jin Wang Mingqiang Liu Yang Zhao 《Oncology and Translational Medicine》 2016年第4期174-178,共5页
Objective The aim of this study was to explore the clinical significance of the expression of proteins human bone marrow endothelial cell markers(HBME-1), Galectin-3, and cytokeratin19(CK19), as well as the status of ... Objective The aim of this study was to explore the clinical significance of the expression of proteins human bone marrow endothelial cell markers(HBME-1), Galectin-3, and cytokeratin19(CK19), as well as the status of v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1(BRAF) mutation in papillary thyroid carcinoma(PTC). Methods Immunohistochemical staining was performed in 82 specimens each of PTC and papillary benign lesions to detect the expression of HBME-1, Galectin-3, and CK19. Polymerase chain reaction(PCR) and gene sequencing were performed on 60 specimens each of PTC and papillary benign lesions to detect the status of BRAF mutation. Results The positive expression ratios of HBME-1, Galectin-3, and CK19 in PTC were 98.8%, 97.6% and 100% respectively, which were significantly higher than the expressions in papillary benign lesions(P < 0.05). No significant relationship was observed between the expression of these makers and the clinicopathological features of PTC. The sensitivity of co-expression of HBME-1 and CK19 or HBME-1 and Galectin-3 as diagnostic criteria of PTC was 99.9%, with a specificity of 95.4%. BRAF mutation was detected in 40 of 60 PTC(66.7%) specimens. There was a statistical difference in BRAF mutations between PTC and papillary benign lesions(P < 0.05); there were no associations between BRAF mutation and the clinicopathological features of PTC. Conclusion Combined immunohistochemical staining of HBME-1, Galectin-3, and CK19 can further improve the sensitivity and specificity of differential diagnosis of PTC. BRAF mutation is a significant genetic event, which may have diagnostic value for PTC. 展开更多
关键词 papillary thyroid carcinoma(PTC) human bone marrow endothelial cell markers(HBME-1) Galectin-3 cytokeratin19(CK19) v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1(BRAF)
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PTCSC3对谷氨酸诱导SH-SY5Y神经细胞凋亡的影响
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作者 苗峥 胡雨 +6 位作者 米山 焦明丽 韩明明 王轶博 胡勇 黄锋 詹合琴 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2024年第9期1222-1235,共14页
目的探讨乳头状甲状腺癌易感性候选基因3(papillary thyroid carcinoma susceptibility candidate 3,PTCSC3)对谷氨酸(glutamicacid,Glu)诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的影响及其机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,谷氨酸损伤SH-SY5... 目的探讨乳头状甲状腺癌易感性候选基因3(papillary thyroid carcinoma susceptibility candidate 3,PTCSC3)对谷氨酸(glutamicacid,Glu)诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的影响及其机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,谷氨酸损伤SH-SY5Y细胞24 h,转染技术对PTCSC3进行抑制及过表达,采用Hoechst 33258染色法、流式细胞技术、AO/EB染色及四甲基偶氮唑盐比色(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法检测抑制或过表达PTCSC3后对各组细胞凋亡、生存的影响;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术检测各组细胞中PTCSC3、CCAAT/增强子结合蛋白β(CAAT/enhancer binding protein beta,C/EBP-β)及Cbp/p300结合转化激活因子4(Cbp/p300 interacting transactivator with Glu/Asp rich carboxy-terminal domain 4,CITED4)的基因表达情况;Western blot检测各组细胞中C/EBP-β、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)及CITED4、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、原癌基因n-Myc的蛋白表达水平。结果2000μmol·L^(-1)Glu处理24 h对PTCSC3细胞有明显的损伤作用;与模型组比较,PTCSC3抑制剂可有效改善Glu诱导SH-SY5Y细胞凋亡率的增加和细胞存活率的下降;明显降低C/EBP-β基因及蛋白、Bax蛋白的表达,促进BDNF、p-Akt、Bcl-2蛋白的表达;增加CITED4、Cyclin D1和n-Myc的表达水平。反之,过表达PTCSC3则出现与上述结果相反的结果。结论PTCSC3可能通过调控C/EBP-β,进而调控下游信号通路BDNF/Akt和CITED4/Cyclin D1信号通路,改善Glu诱导SH-SY5Y神经细胞的凋亡和生存状态。 展开更多
关键词 乳头状甲状腺癌易感性候选基因3 人神经母细胞瘤细胞 细胞凋亡 作用 分子机制
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去甲斑蝥素对人未分化甲状腺癌FRO细胞增殖和凋亡的影响及机制 被引量:4
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作者 樊丽 许景伟 +2 位作者 王晓鑫 赵雪松 陈宏月 《广西医学》 CAS 2020年第10期1257-1260,共4页
目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对人未分化甲状腺癌FRO细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法取对数生长期的FRO细胞,分别加入终浓度为0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的NCTD,分别干预12 h、24 h、48 h后,检测... 目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对人未分化甲状腺癌FRO细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法取对数生长期的FRO细胞,分别加入终浓度为0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的NCTD,分别干预12 h、24 h、48 h后,检测细胞增殖情况,计算增殖抑制率。取对数生长期的FRO细胞,分为0μg/mL组、10μg/mL组、20μg/mL组、40μg/mL组,加入相应浓度的NCTD,干预24 h后检测细胞凋亡情况、B淋巴细胞肿瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)凋亡相关因子mRNA表达情况、线粒体膜电位;干预2周后克隆形成实验检测细胞克隆率。结果随着NCTD浓度增大、干预时间延长,FRO细胞增殖抑制率增加(P<0.05)。10μg/mL组、20μg/mL组、40μg/mL组均出现细胞凋亡,且浓度越高凋亡现象越明显。0μg/mL组、10μg/mL组、20μg/mL组、40μg/mL组细胞克隆形成率、细胞线粒体膜电位、Bcl-2 mRNA表达水平依次降低,Bax mRNA表达水平依次升高(均P<0.05)。结论NCTD可以抑制FRO细胞增殖,并促进其凋亡,其机制可能与降低线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 未分化甲状腺癌 去甲斑蝥素 fro细胞 细胞凋亡 细胞增殖 线粒体膜电位
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大气压低温等离子体抑制甲状腺未分化癌CAL-62细胞生长的机制研究
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作者 吴慧 刘芳 +3 位作者 张利伟 刘磊 宋文成 王宏志 《安徽大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第1期93-102,共10页
为了探究大气压低温等离子体(CAP)抑制间变性甲状腺癌的作用机制,应用转录组测序技术,借助生物信息学分析手段研究CAP对CAL-62的抑制作用,筛选出差异基因进行KEGG富集分析和GO分类,最后选取部分基因进行Western blot(WB)验证.结果表明,... 为了探究大气压低温等离子体(CAP)抑制间变性甲状腺癌的作用机制,应用转录组测序技术,借助生物信息学分析手段研究CAP对CAL-62的抑制作用,筛选出差异基因进行KEGG富集分析和GO分类,最后选取部分基因进行Western blot(WB)验证.结果表明,与对照组相比CAP处理组共有674个差异表达基因,以BIK和CDKN1C等为代表的287个基因上调表达,以TANC2、ESM1和CBL等为代表的387个基因下调表达.KEGG富集分析表明差异基因主要富集在MAPK、Rap1等信号通路及癌症转录失调等.GO分类表明差异基因主要富集在免疫反应、细胞凋亡过程等方面.WB检测部分差异基因的变化趋势,得到与转录组相一致的结果.该研究从转录组学角度去解释CAP抑制CAL-62细胞的机制,以期为CAP应用于甲状腺未分化癌治疗提供一定的理论基础. 展开更多
关键词 大气压低温等离子体 甲状腺未分化癌 转录组 细胞凋亡 抑制机制
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帕比司他对人未分化甲状腺癌ARO细胞增殖、凋亡及转移的影响
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作者 樊丽 李洋 +2 位作者 周建文 陈宏月 许景伟 《中国医药科学》 2023年第24期4-7,38,共5页
目的 探讨帕比司他对人未分化甲状腺癌ARO细胞增殖、凋亡和转移的影响及可能机制。方法 体外培养ARO细胞,并将其分为对照组及帕比司他低、中、高剂量(2、4、8μmol/L)组进行实验,采用MTT法检测帕比司他对ARO细胞增殖抑制作用;划痕实验... 目的 探讨帕比司他对人未分化甲状腺癌ARO细胞增殖、凋亡和转移的影响及可能机制。方法 体外培养ARO细胞,并将其分为对照组及帕比司他低、中、高剂量(2、4、8μmol/L)组进行实验,采用MTT法检测帕比司他对ARO细胞增殖抑制作用;划痕实验检测不同浓度的帕比司他对ARO细胞迁移能力的影响;流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)实验检测B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)相关X蛋白(BAX)、BCL-2和基质金属蛋白酶9(MMP9)的基因和蛋白水平的影响。结果 MTT结果显示,与对照组比较,帕比司他对ARO细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性(P <0.05);划痕实验结果显示,ARO细胞迁移能力随药物浓度的增加而降低,与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05);流式细胞仪结果显示,ARO细胞凋亡率随药物浓度的增加而增高,与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05);RT-qPCR和Western blot检测结果显示,与对照组比较,2、4、8μmol/L组BAX的基因和蛋白表达水平均升高(P <0.05)、BCL-2和MMP9的基因和蛋白水平均降低(P <0.05);与2、4μmol/L组比较,8μmol/L组BAX的基因和蛋白表达水平均升高(P <0.05)、BCL-2和MMP9的基因和蛋白水平均降低(P <0.05)。结论 帕比司他可促进ARO细胞凋亡,从而抑制细胞的增殖和转移。 展开更多
关键词 帕比司他 人未分化甲状腺癌 B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白 B淋巴细胞瘤-2
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促甲状腺激素受体及碘钠泵在人甲状腺癌中的表达及临床意义 被引量:7
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作者 刘春萍 楚慧敏 +2 位作者 明洁 潘华雄 黄韬 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期756-759,共4页
目的研究促甲状腺激素受体(TSHR)、碘钠泵(NIS)在甲状腺癌中的表达,探讨其在人甲状腺癌治疗中的作用。方法采用免疫组织化学SABC法,检测TSHR、NIS在45例人正常甲状腺组织、45例乳头状甲状腺癌及21例未分化甲状腺癌中的表达。结果TSHR及... 目的研究促甲状腺激素受体(TSHR)、碘钠泵(NIS)在甲状腺癌中的表达,探讨其在人甲状腺癌治疗中的作用。方法采用免疫组织化学SABC法,检测TSHR、NIS在45例人正常甲状腺组织、45例乳头状甲状腺癌及21例未分化甲状腺癌中的表达。结果TSHR及NIS在人正常甲状腺组织的表达均高于其在乳头状甲状腺癌和未分化甲状腺癌中的表达。在人正常甲状腺组织,TSHR和NIS蛋白均定位于滤泡上皮细胞膜上;在乳头状甲状腺癌组织,TSHR蛋白定位于细胞膜和细胞质中,NIS蛋白仅在细胞质中有阳性表达;在未分化甲状腺癌,TSHR和NIS均定位于细胞质。结论TSHR、NIS的定位及表达水平与甲状腺癌的分化程度密切相关,可能成为预测甲状腺癌促甲状腺激素抑制治疗及131I治疗是否有效的指标。 展开更多
关键词 促甲状腺激素受体 碘钠泵 乳头状甲状腺癌 未分化甲状腺癌 免疫组织化学
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LY294002抑制PI3K-Akt信号通路对人甲状腺癌细胞的影响 被引量:5
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作者 方海生 马晔 +1 位作者 刘柳 沈美萍 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期789-793,共5页
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮(LY294002)对人甲状腺未分化癌HTH-15细胞中PI3K-丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路、细胞生长、细胞凋亡及细胞侵袭性的影响。方法:HTH-15细胞用不同浓度(0... 目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮(LY294002)对人甲状腺未分化癌HTH-15细胞中PI3K-丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路、细胞生长、细胞凋亡及细胞侵袭性的影响。方法:HTH-15细胞用不同浓度(0~100μmol/L)LY294002处理,以DMSO处理作为对照组,四甲基偶氮唑盐(MTT)试验检测细胞抑制率;流式细胞仪检测细胞周期百分比;Western blot检测磷酸化Akt(p-Akt)蛋白、基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达;Transwell小室检测细胞侵袭性。结果:LY294002能抑制HTH-15细胞的增殖,且呈一定的浓度及时间依赖性,经LY294002处理组后细胞停留在G1期的百分比明显高于DMSO对照组(P<0.05);LY294002能明显抑制p-Akt蛋白和MMP-2蛋白表达,且应用LY294002后,能降低HTH-15细胞的侵袭性。结论:甲状腺未分化癌HTH-15细胞中存在有活性的PI3K-Akt通路,表达高水平的p-Akt蛋白,LY294002可能通过抑制PI3K-Akt信号通路中p-Akt的表达抑制HTH-15细胞增殖,促进细胞凋亡,降低细胞侵袭能力。 展开更多
关键词 LY294002 磷脂酰肌醇3-激酶 丝氨酸苏氨酸激酶 甲状腺未分化癌细胞 基质金属蛋白酶
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活化白细胞黏附分子、E-钙黏蛋白和β-连环蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 被引量:6
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作者 孙琳 张文静 +1 位作者 张静 吴靖芳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期221-227,共7页
目的通过对甲状腺乳头状癌(PTC)、结节性甲状腺肿和癌旁正常组织中活化白细胞黏附分子(ALCAM)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平的检测,分析三者在PTC发生、发展过程中的作用及三者之间的相关性,探讨ALCAM... 目的通过对甲状腺乳头状癌(PTC)、结节性甲状腺肿和癌旁正常组织中活化白细胞黏附分子(ALCAM)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平的检测,分析三者在PTC发生、发展过程中的作用及三者之间的相关性,探讨ALCAM、E-cadherin和β-catenin在PTC中的作用机制。方法采用免疫组织化学法、Western blotting法检测ALCAM、E-cadherin和β-catenin在PTC中的表达并分析三者的变化与临床病理特征的关系。结果 PTC组织中ALCAM的阳性率明显高于结节性甲状腺肿和癌旁正常组织(P<0.05);PTC组织中E-cadherin的阳性表达率明显低于结节性甲状腺肿和癌旁正常组织(P<0.05);PTC样本中β-catenin的异位表达率明显高于结节性甲状腺肿和癌旁正常组织(P<0.05)。三者的阳性率在结节性甲状腺肿和癌旁正常组织中无明显差异(P>0.05)。三者的异常表达与PTC淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论在PTC组织中ALCAM、β-catenin高表达,E-cadherin呈现低表达,三者的异常表达与淋巴结转移相关。三者在PTC的发生、发展和转移的过程中起重要的作用。 展开更多
关键词 活化白细胞黏附分子 E-钙黏蛋白 Β-连环蛋白 甲状腺乳头状癌 免疫印迹法
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白毛藤多糖通过抑制JNK信号通路活性促进人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞凋亡及机制的初步探讨 被引量:2
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作者 刘璟瑶 段薇 +2 位作者 金成吉 郝国华 孙建平 《医学分子生物学杂志》 CAS 2021年第3期217-221,共5页
目的探索白毛藤多糖对人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的影响及其调控机制.方法在体外用不同浓度(0、0.4、0.8、1.6 mg/ml)的白毛藤多糖处理人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,白毛藤多糖对TPC-1细胞增殖活性的影响采用MTT法检测,对TPC-1细胞凋亡的... 目的探索白毛藤多糖对人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的影响及其调控机制.方法在体外用不同浓度(0、0.4、0.8、1.6 mg/ml)的白毛藤多糖处理人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,白毛藤多糖对TPC-1细胞增殖活性的影响采用MTT法检测,对TPC-1细胞凋亡的影响采用Hoechest 33258染色法检测,同时通过Western印迹检测白毛藤多糖对TPC-1细胞JNK蛋白表达及JNK磷酸化的影响.结果MTT结果显示,与空白组相比,不同浓度白毛藤多糖处理后TPC-1细胞增殖抑制率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);且白毛藤多糖浓度越高、处理时间越长,对TPC-1细胞增殖活性的抑制作用越明显(P<0.05).Hoechest 33258染色结果显示,与空白组相比,不同浓度白毛藤多糖处理后TPC-1细胞凋亡率显著升高,且呈浓度依赖(P<0.05);同时,Western印迹结果表明,与空白组相比,不同浓度白毛藤多糖处理后TPC-1细胞中Bcl-2/Bax比率凋亡率显著降低,且呈浓度依赖(P<0.05).经不同浓度白毛藤多糖处理后TPC-1细胞中,JNK及p-JNK蛋白表达均显著降低,且随着白毛藤多糖浓度的增加,其对JNK及p-JNK蛋白表达的抑制逐渐增强(P<0.05);此外,白毛藤多糖对p-JNK的抑制更为显著,随着白毛藤多糖浓度的增加,p-JNK/JNK比值逐渐下降(P<0.05).结论白毛藤多糖对人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖具有抑制作用,其机制可能与凋亡通路中活化Bax蛋白、抑制Bcl-2蛋白及抑制JNK磷酸化有关. 展开更多
关键词 白毛藤多糖 人甲状腺乳头状癌 TPC-1细胞 细胞凋亡
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RNAi介导ObR基因沉默对人乳头状甲状腺癌K1细胞增殖与侵袭能力的影响 被引量:3
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作者 王帅 孔霞 +2 位作者 张国安 侯森 崔文 《济宁医学院学报》 2015年第2期99-102,共4页
目的探讨用RNAi介导瘦素受体基因(ObR)沉默人乳头状甲状腺癌K1细胞(K1细胞)增殖与侵袭能力的影响。方法使用siRNA干扰技术瞬时转染构建siRNA-ObR。瞬时转染后,Real-time PCR和Western blotting在mRNA水平和蛋白水平检测siRNA-ObR是否有... 目的探讨用RNAi介导瘦素受体基因(ObR)沉默人乳头状甲状腺癌K1细胞(K1细胞)增殖与侵袭能力的影响。方法使用siRNA干扰技术瞬时转染构建siRNA-ObR。瞬时转染后,Real-time PCR和Western blotting在mRNA水平和蛋白水平检测siRNA-ObR是否有效抑制K1细胞内靶基因的表达;MTT实验研究ObR沉默后K1细胞的增殖能力;Transwell实验检测ObR沉默后K1细胞的侵袭能力。结果 Realtime PCR实验结果显示,ObR基因沉默后K1细胞ObR mRNA表达显著降低;Western blotting实验结果显示,ObR基因沉默后K1细胞ObR蛋白表达显著降低;MTT实验结果显示ObR对K1细胞的增殖没有意义;Transwell实验结果显示ObR沉默后K1细胞侵袭能力显著下降。结论 ObR基因沉默能有效抑制K1细胞ObR基因的表达,降低K1细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 RNAI 基因沉默 SIRNA 人乳头状甲状腺癌K1细胞 OBR基因
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甲状腺未分化癌人源单链抗体制备及初步鉴定
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作者 刘倩 刘琼 +4 位作者 李文波 许璐 周静 刘影 庞华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期981-985,共5页
目的从大容量甲状腺未分化癌(anaplastic thyroid carcinoma,ATC)人源单链抗体(single chain variable fragments,sc Fv)库中筛选特异性抗ATC单链抗体并进行生物特性鉴定。方法对该抗体库进行4轮筛选后,挑取抗ATC阳性克隆感染E.coli HB2... 目的从大容量甲状腺未分化癌(anaplastic thyroid carcinoma,ATC)人源单链抗体(single chain variable fragments,sc Fv)库中筛选特异性抗ATC单链抗体并进行生物特性鉴定。方法对该抗体库进行4轮筛选后,挑取抗ATC阳性克隆感染E.coli HB2151;并用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导该sc Fv抗体可溶性表达,ELISA法检测其可溶性表达;经HiTrap^(TM) Anti E-tag亲和柱层析纯化抗体;细胞ELISA鉴定可溶性抗体与细胞结合的特异性,分别设置TT细胞、ARO细胞、人肝癌Hep G2细胞及PBS空白对照组,用酶标仪检测各组在450 nm处的吸光度。SDS-PAGE法及Western blot检测抗体的表达和相对分子质量;流式细胞术观察细胞凋亡情况。结果经4轮筛选后抗体实现了显著富集,并得到了纯化抗体。ELISA结果表明筛选出的抗体与甲状腺未分化癌细胞能够特异性结合。SDS-PAGE和Western blot检测结果显示ATC抗体的相对分子质量约为2.9×10~4。流式细胞术结果显示ARO细胞经sc Fv特异性作用后细胞明显凋亡。结论成功获得抗ATC特异性人源单链抗体,鉴定结果显示抗体活性较好。 展开更多
关键词 噬菌体 人源单链抗体 甲状腺未分化癌 鉴定
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荷瘤裸鼠肌肉内基因电转染对移植瘤的作用
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作者 孙辉 王金国 +2 位作者 付言涛 栾杉 郑泽霖 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2005年第1期51-54,共4页
目的 以人甲状腺未分化癌细胞系TA K建立的人甲状腺未分化癌裸鼠皮下移植模型为对象 ,研究裸鼠肌肉内电转染对移植瘤的作用。方法 将皮下移植肿瘤的裸鼠分为 5组 :空白对照组、pcDNA 3质粒肌肉电转染组、TIMP 3质粒肌肉注射组、TIMP ... 目的 以人甲状腺未分化癌细胞系TA K建立的人甲状腺未分化癌裸鼠皮下移植模型为对象 ,研究裸鼠肌肉内电转染对移植瘤的作用。方法 将皮下移植肿瘤的裸鼠分为 5组 :空白对照组、pcDNA 3质粒肌肉电转染组、TIMP 3质粒肌肉注射组、TIMP 3质粒肌肉电转染组及TIMP 3质粒肿瘤电转染组。肌肉电转染采用的参数是电场强度为 2 0 0V/cm ,脉冲时值为 2 0ms ,8次 ,1Hz;肿瘤内电转染采用的参数是电场强度为 6 0 0V/cm ,脉冲时值为 2 0ms,1次 ,1Hz。结果 TIMP 3质粒肌肉内电转染组和TIMP 3质粒肿瘤内电转染组肿瘤生长受到抑制 ,与另外 3组相比肿瘤生长速度明显减缓 (P<0 .0 5 ) ,且两组肿瘤组织中TIMP 3蛋白量过度表达。结论 抑癌基因可通过肌肉内DNA电转染起到抗肿瘤效果。 展开更多
关键词 转染 抗肿瘤 TIMP-3 移植瘤 肌肉 裸鼠 质粒 DNA 基因 脉冲
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PD-L1、HBME-1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义
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作者 周翼 吴林军 雷建东 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第16期2003-2007,共5页
目的研究程序性死亡因子配体-1(PD-L1)、人骨髓内皮细胞标记物-1(HBME-1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义。方法选取2017年4月至2019年5月该院收治的102例甲状腺乳头状癌患者为研究对象,手术切除病灶组织及癌旁正常组织,分别作... 目的研究程序性死亡因子配体-1(PD-L1)、人骨髓内皮细胞标记物-1(HBME-1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义。方法选取2017年4月至2019年5月该院收治的102例甲状腺乳头状癌患者为研究对象,手术切除病灶组织及癌旁正常组织,分别作为观察组(n=102)与对照组(n=102)。通过免疫组化染色,观察两组PD-L1、HBME-1表达情况。通过单因素及多因素分析PD-L1、HBME-1表达量与甲状腺乳头状癌一般特征的关系。结果PD-L1在观察组中阳性率为69.61%(71/102),明显高于对照组的15.69%(16/102),差异有统计学意义(χ^2=60.625,P<0.001)。HBME-1在观察组中阳性率为73.53%(75/102),明显高于对照组的6.86%(7/102),差异有统计学意义(χ^2=94.291,P<0.001)。多因素分析结果显示,PD-L1及HBME-1表达阳性是肿瘤发生淋巴结转移及侵犯包膜的危险因素(P<0.05)。结论PD-L1与HBME-1在甲状腺乳头状癌组织中均处于高表达状态,且与患者肿瘤发生淋巴结转移及侵犯包膜密切相关,PD-L1与HBME-1可辅助诊断患者肿瘤发展情况。 展开更多
关键词 程序性死亡因子配体-1 人骨髓内皮细胞标记物-1 甲状腺乳头状癌 表达量
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曲古抑菌素A对甲状腺未分化癌DRO细胞株生长及其端粒酶逆转录酶mRNA表达影响的研究 被引量:1
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作者 闻晓烽 沈美萍 +1 位作者 刘翠萍 矛晓东 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1565-1568,共4页
目的:观察曲古抑菌素A(TSA)对甲状腺未分化癌DRO细胞株的体外作用,探讨TSA对甲状腺未分化癌的作用机制。方法:倒置相差显微镜观察细胞形态变化;MTT法检测TSA对DRO细胞增殖的抑制效应;流式细胞术检测经TSA1.0μmol/L作用24、48、72h后细... 目的:观察曲古抑菌素A(TSA)对甲状腺未分化癌DRO细胞株的体外作用,探讨TSA对甲状腺未分化癌的作用机制。方法:倒置相差显微镜观察细胞形态变化;MTT法检测TSA对DRO细胞增殖的抑制效应;流式细胞术检测经TSA1.0μmol/L作用24、48、72h后细胞周期和凋亡率的变化;RT-PCR方法观察经TSA1.0μmol/L作用48h后细胞内hTERT和p21基因的表达情况。结果:在0.1~1.5μmol/LTSA作用下,DRO细胞生长明显受抑制;倒置相差显微镜检测DRO细胞经TSA处理后形态发生明显变化;1.0μmol/LTSA作用于DRO细胞,48h后出现明显的细胞周期阻滞;hTERT经TSA诱导后表达明显下调,呈量效关系。结论:一定浓度的TSA可以抑制甲状腺未分化癌细胞株DRO增殖。其作用机制可能与下调hTERT表达有关。 展开更多
关键词 曲古抑菌素A 甲状腺未分化癌 细胞增殖 端粒酶催化亚单位
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四项免疫组化标志物在诊断甲状腺乳头状癌中的临床意义 被引量:4
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作者 李天一 吴钢 蔡端 《上海医药》 CAS 2014年第10期24-27,共4页
目的 :探讨Ki67核抗原(Ki67),甲状腺转录因子-1(TTF-1),人表皮生长因子受体-2(HER-2/neu)和人骨髓内皮细胞-1(HBME-1)对于鉴别诊断甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)和甲状腺良性结节的临床意义。方法 :回顾分析180例PTC... 目的 :探讨Ki67核抗原(Ki67),甲状腺转录因子-1(TTF-1),人表皮生长因子受体-2(HER-2/neu)和人骨髓内皮细胞-1(HBME-1)对于鉴别诊断甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)和甲状腺良性结节的临床意义。方法 :回顾分析180例PTC和190例甲状腺良性结节的石蜡切片,采用免疫组化法检测Ki67,TTF-1,HBME-1和HER-2/neu水平。结果 :4种标志物在PTC中表达的阳性率明显高于甲状腺良性结节(P=0.000)。采用单一标志物检测时,HER-2/neu的敏感性最高(79.4%),TTF-1的特异性最高(96.8%)。Ki67+HER-2/neu+HBME-1 3者联合检测的敏感性最高(89.8%),HER-2/neu+TTF-1和HER-2/neu+TTF-1+HBME-1联合检测具有相同的特异性(99.4%,P<0.01)。结论:在PTC中,Ki67和TTF-1在联合HER-2/neu或(和)HBME-1检测时,可显著提高单项指标检测PTC的敏感性和特异性。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 Ki67核抗原 甲状腺转录因子-1 人表皮生长因子受体-2 人骨髓上皮细胞-1
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人脐带间充质干细胞培养上清液对甲状腺乳头状癌细胞诱导人脐静脉内皮细胞血管形成的影响 被引量:2
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作者 丁超 董利阳 +4 位作者 郑婷婷 刘佳梦 康萍 张助 毛朝明 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2020年第3期229-233,238,共6页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)血管形成的作用。方法:使用不同浓度的hUCMSCs培... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)血管形成的作用。方法:使用不同浓度的hUCMSCs培养上清液(hUCMSC-CM)刺激甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1;采用基质胶小管形成实验检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞对HUVEC血管形成的影响;CCK-8法检测hUCMSC-CM对TPC-1细胞增殖能力的影响;实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测经hUCMSC-CM作用后的TPC-1细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA和蛋白表达及其培养上清液中VEGF的含量。结果:与对照组相比,hUCMSC-CM可显著抑制TPC-1细胞的增殖(P<0.05和P<0.01);经hUCMSC-CM刺激后的TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成能力显著下调(P<0.001),且TPC-1细胞中VEGF的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.001),其培养上清液中VEGF含量显著降低(P<0.05)。结论:hUCMSC-CM可显著下调TPC-1细胞中VEGF的表达及分泌,抑制TPC-1细胞诱导HUVEC血管形成的能力。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 甲状腺乳头状癌 血管内皮生长因子 血管形成 人脐静脉内皮细胞
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黄芪扶正汤抑制人甲状腺乳头状癌细胞的机制研究 被引量:1
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作者 王亮萍 王鸿程 +2 位作者 林晶 张志明 陈炯 《医学理论与实践》 2020年第17期2794-2797,2801,共5页
目的:研究黄芪扶正汤抑制人甲状腺乳头状癌细胞增殖及诱导凋亡的机制。方法:体外培养人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,分为对照组(加完全培养基,黄芪扶正汤药物0g/L)、不同剂量实验组(黄芪扶正汤质量浓度0.5、1.0、2.5、5、10g/L)。MTT法检... 目的:研究黄芪扶正汤抑制人甲状腺乳头状癌细胞增殖及诱导凋亡的机制。方法:体外培养人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,分为对照组(加完全培养基,黄芪扶正汤药物0g/L)、不同剂量实验组(黄芪扶正汤质量浓度0.5、1.0、2.5、5、10g/L)。MTT法检测各组细胞增殖情况,IC50评价检测出最优有效浓度;流式细胞术检测对照组和最优有效浓度组的细胞周期及凋亡情况;qPCR法检测对照组和最优有效浓度组细胞Rb、CDK4 mRNA的表达情况。结果:IC50评价检测系统结果显示,实验组黄芪扶正汤抑制TPC-1增殖的最优有效浓度为6.118g/L,可引起细胞发生G0/G1期阻滞;与对照组相比,最优有效浓度组细胞凋亡明显增多(P<0.05);Rb及CDK4 mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:黄芪扶正汤可有效下调Rb及CDK4 mRNA的表达,从而抑制人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 黄芪扶正汤 人甲状腺乳头状癌 视网膜母细胞瘤蛋白 细胞周期素依赖性激酶4 凋亡 细胞增殖
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甲状腺肿瘤干细胞及其生物学特性的研究进展
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作者 杨春莲 曹仁贤 《中国医学创新》 CAS 2013年第30期159-162,共4页
近年来越来越多关于肿瘤干细胞的研究已经为许多人类肿瘤提供了新的临床治疗途径。全面而深刻地认识和研究肿瘤干细胞能更好地了解它在导致肿瘤形成上的一些分子学事件,并且能为临床提供更多精确的诊断方法和有效的治疗手段。和许多其... 近年来越来越多关于肿瘤干细胞的研究已经为许多人类肿瘤提供了新的临床治疗途径。全面而深刻地认识和研究肿瘤干细胞能更好地了解它在导致肿瘤形成上的一些分子学事件,并且能为临床提供更多精确的诊断方法和有效的治疗手段。和许多其他人类肿瘤一样目前已经有研究证明在人甲状腺癌中也存在肿瘤干细胞,但是他们在肿瘤发生发展方面的具体作用机制尚未完全明确。在本文中,笔者将讨论甲状腺肿瘤干细胞的起源与其在分子和细胞方面的生物学特性。同时探讨人甲状腺肿瘤干细胞对发现新的临床治疗途径的潜在作用。 展开更多
关键词 甲状腺干细胞 甲状腺肿瘤干细胞 乳头状癌 未分化甲状腺癌 致瘤性
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