期刊文献+
共找到47篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
CONSTRUCTION OF HUMAN INTERLUEKIN-18 DNA VACCINE AND IT'S EXPRESSION IN MAMMALIAN CELLS
1
作者 安小惠 王一理 +2 位作者 来宝长 耿一萍 司履生 《Academic Journal of Xi'an Jiaotong University》 2001年第2期156-158,共3页
Objective To construct the human interleukin 18 DNA plasmids vaccine and to express the eukaryotic plasmids vaccine in mammalian cell lines Cos 7 and D5.Methods Gene recombinant technique was used to construct hIL 18 ... Objective To construct the human interleukin 18 DNA plasmids vaccine and to express the eukaryotic plasmids vaccine in mammalian cell lines Cos 7 and D5.Methods Gene recombinant technique was used to construct hIL 18 eukaryotic expression vectors.Calcium phosphate method was performed to transect recombinant hIL 18 eukaryotic expression vectors into Cos 7 and D5 cells. In situ hybridization and Western Blot were implemented to verify the transient expression of recombinant hIL 18 in Cos 7 and D5.Results The eukaryotic expression plasmid pVAX1 IL 18 was constructed successfully.hIL 18 was transiently expressed in Cos 7 and D5.Conclusion The eukaryotic expression plasmid pVAX1 IL 18 was constructed. In situ hybridization and Western Blot results proved the successful transient expression of pVAX1 IL 18 in Cos 7 and D5.Therefore,the work has settled the foundation for further biological research on hIL 18,including immunogene therapy through hIL 18. 展开更多
关键词 human interleukin 18 gene clone eukaryotic expression DNA vaccine
下载PDF
人白细胞介素18(hIL-18)的cDNA基因克隆及序列测定 被引量:13
2
作者 何淑雅 薛志红 +3 位作者 Zhu Ming 朱敏 周钢 刘晓冬 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期30-32,共3页
目的 :克隆人白细胞介素 18(IL - 18)全长cDNA基因 ,进一步探讨人白细胞介素 18的功效。方法 :采用RT -PCR的方法从人胚肝组织中扩增出人白细胞介素 18(IL - 18)基因 ,并克隆到真核表达的绿色荧光蛋白报告载体pEGFP -N1中。结果 :经PCR... 目的 :克隆人白细胞介素 18(IL - 18)全长cDNA基因 ,进一步探讨人白细胞介素 18的功效。方法 :采用RT -PCR的方法从人胚肝组织中扩增出人白细胞介素 18(IL - 18)基因 ,并克隆到真核表达的绿色荧光蛋白报告载体pEGFP -N1中。结果 :经PCR及DNA序列测定得以证实其序列与文献报导一致。结论 :该实验成功地克隆了IL - 18cDNA ,并将其重组构建了含有IL - 18cDNA的真核表达载体pEGFP -N1-IL18。 展开更多
关键词 人白细胞介素18 CDNA基因 克隆 免疫调节因子
下载PDF
重组人白介素18在毕赤酵母中的高效分泌表达 被引量:4
3
作者 杨莉莉 魏枫 +3 位作者 刘虹 李慧 于津浦 任秀宝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1040-1043,共4页
目的:构建人白介素18(hIL-18)真核表达载体,在毕赤酵母中高效分泌表达hIL-18。方法:通过PCR法扩增得到hIL-18基因,构建其真核表达载体pPICZaC/hIL-18,电转化毕氏酵母X-33,PCR、SDS-PAGE、Western blot等方法筛选获得高效表达rhIL-18的... 目的:构建人白介素18(hIL-18)真核表达载体,在毕赤酵母中高效分泌表达hIL-18。方法:通过PCR法扩增得到hIL-18基因,构建其真核表达载体pPICZaC/hIL-18,电转化毕氏酵母X-33,PCR、SDS-PAGE、Western blot等方法筛选获得高效表达rhIL-18的工程菌株,疏水层析和阴离子交换层析纯化表达产物,并初步测定其生物学活性。结果:rhIL-18经甲醇诱导后其表达产量约为202mg/L。Western blot检测了rhIL-18的特异性结合活性;rhIl-18纯化后纯度达95%左右,并证明rhIL-18能够协同IL-2诱导PBMC分泌IFN-γ。结论:构建了重组hIL-18的基因工程菌,并在毕赤酵母中实现了高效分泌表达,为进一步研究其活性和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 人白细胞介素18 毕赤酵母 表达 纯化
下载PDF
鸡贫血病毒VP3基因与人IL-18基因的共表达对人肝癌细胞BEL-7402的作用 被引量:5
4
作者 连海 金宁一 +6 位作者 李霄 陈立刚 张静敏 管国芳 孙丽丽 李雪梅 郑洪玲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期229-232,共4页
目的利用凋亡素和IL18基因的抗肿瘤优势,设计构建共表达凋亡素和hIL-18基因的真核重组子,检测其在体外对人肝癌细胞BEL7402的作用效果,旨在探索新的肿瘤基因治疗方法。方法将凋亡素VP3基因与hIL-18基因一同克隆到真核表达载体pVAX1上,... 目的利用凋亡素和IL18基因的抗肿瘤优势,设计构建共表达凋亡素和hIL-18基因的真核重组子,检测其在体外对人肝癌细胞BEL7402的作用效果,旨在探索新的肿瘤基因治疗方法。方法将凋亡素VP3基因与hIL-18基因一同克隆到真核表达载体pVAX1上,构建重组质粒pVVP3IL-18,经脂质体介导,转染人肝癌细胞BEL7402,AO/EB染色,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法和流式细胞仪分别分析凋亡细胞的形态学变化、DNA断裂情况和不同细胞周期的DNA含量变化,透射电镜分析凋亡细胞超微结构变化。结果随着转染时间的延长,重组质粒pVVP3IL18所表达的目的蛋白对BEL7402细胞的杀伤作用逐渐增强,作用48h,形态学观察表明BEL7402细胞发生明显的凋亡,凋亡率可达(56.5±11.9)%,并且大部分细胞为TUNEL阳性着色,流式细胞术分析可见明显的亚二倍体凋亡峰,透射电镜观察可见细胞核固缩、染色质聚集等典型的凋亡超微结构变化。结论联合应用凋亡素与hIL18基因,在体外对人肝癌细胞BEL7402具有明显的凋亡诱导作用。 展开更多
关键词 鸡贫血病毒 凋亡素 人白细胞介素18 肝癌细胞 凋亡
下载PDF
白细胞介素-18与深静脉血栓疾病的相关性研究 被引量:3
5
作者 李光第 宋恩 +3 位作者 赵学凌 白云城 彭志 周如丹 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第5期600-604,共5页
目的探讨白细胞介素-18(IL-18)的表达变化与深静脉血栓疾病(DVT)发生、发展的相关性及临床意义。方法收集临床DVT病例(DVT组,n=40)、实验对照组(n=40)、健康对照组(n=20)的血液,以ELISA法检测其中IL-18的表达并分析差异;培养原代培养的... 目的探讨白细胞介素-18(IL-18)的表达变化与深静脉血栓疾病(DVT)发生、发展的相关性及临床意义。方法收集临床DVT病例(DVT组,n=40)、实验对照组(n=40)、健康对照组(n=20)的血液,以ELISA法检测其中IL-18的表达并分析差异;培养原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)行目标蛋白免疫荧光检测明确其定位;构建人IL-18过表达和干扰病毒载体(IL-18-pCDH-GFP、IL-18-LMP-shRNAmir1)感染HUVECs并进行基因表达谱芯片检测和KEGG Pathway等生物信息技术,分析IL-18与疾病的相关性。结果人血ELISA检测发现在DVT组和两对照组中IL-18的表达差异均有统计学意义(F=11.248,P<0.01);实验对照组与健康对照组之间IL-18的表达差异无统计学意义(P>0.05);免疫荧光检测显示目标蛋白定位于细胞质;人IL-18过表达和干扰载体经病毒转染后感染HUVECs;基因芯片检测发现与正常细胞比较,过表达载体IL-18-pCDH-GFP感染细胞有17条信号通路下调、16条上调;干扰载体IL-18-LMP-shRNAmir1感染细胞有23条信号通路下调、9条上调。结论 IL-18对HUVECs有确切影响,同时与DVT疾病密切相关,有希望作为深静脉血栓疾病临床预测诊断的候选分子标记物。 展开更多
关键词 静脉血栓形成 白细胞介素18 分子标记物 人脐静脉内皮细胞
下载PDF
人白细胞介素-18真核表达载体的构建及测序分析 被引量:7
6
作者 王福祥 孙永涛 李光玉 《医学研究生学报》 CAS 2004年第2期111-113,共3页
目的 :构建含有人白细胞介素 18(IL 18)基因的真核表达载体 ,并对其进行测序分析。 方法 :通过分子克隆技术 ,将IL 18基因插入真核表达载体 pVAX1中 ,构建真核表达载体pVAX1 IL 18,并经BamHⅠ /EcoRⅠ双酶切及测序鉴定。利用Blast程... 目的 :构建含有人白细胞介素 18(IL 18)基因的真核表达载体 ,并对其进行测序分析。 方法 :通过分子克隆技术 ,将IL 18基因插入真核表达载体 pVAX1中 ,构建真核表达载体pVAX1 IL 18,并经BamHⅠ /EcoRⅠ双酶切及测序鉴定。利用Blast程序 ,搜索NCBIGenBank中与重组质粒 (pVAX1 IL 18)中编码IL 18基因同源的序列。结果 :人IL 18基因成功地克隆至真核表达载体pVAX1中 ,pVAX1 IL 18中编码IL 18的序列与GenBank中所报道的IL 18编码序列完全一致。 结论 :成功地构建人IL 18基因真核表达载体 。 展开更多
关键词 人白细胞介素—18 真核表达载体 DNA测序分析
下载PDF
辛伐他汀抑制白细胞介素-18诱导的人脐静脉内皮细胞Fractalkine表达和黏附作用 被引量:3
7
作者 田轶伦 姜德谦 +1 位作者 崔晓兰 廖福龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1497-1502,共6页
目的观察辛伐他汀(simvastatin)对白细胞介素-18(interleukine-18,IL-18)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上调表达Fractalkine(FKN)的影响以及对FKN黏附作用的干预效应。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HEUVCs FKN的表达;应用Flo... 目的观察辛伐他汀(simvastatin)对白细胞介素-18(interleukine-18,IL-18)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)上调表达Fractalkine(FKN)的影响以及对FKN黏附作用的干预效应。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HEUVCs FKN的表达;应用Flowchamber观察FKN介导的HUVECs与单核细胞THP-1的黏附。结果IL-18可诱导FKN mRNA表达增加,FKN表达上调可明显增加对单核细胞THP-1的黏附作用(P<0.01);PDTC能够抑制FKN表达及细胞黏附(P<0.01);辛伐他汀能够抑制FKN mRNA表达(P<0.01),100μmol·L-1辛伐他汀可抑制细胞黏附(P<0.01)。结论辛伐他汀能够抑制FKN的表达以及FKN介导的黏附作用。 展开更多
关键词 辛伐他汀 趋化因子 FRACTALKINE 人脐静脉内皮细胞 单核细胞THP-1 黏附 白介素-18 动脉粥样硬化
下载PDF
重组人白细胞介素-18的高浓度复性、纯化和活性检测 被引量:3
8
作者 金腾川 张瑞军 +2 位作者 魏海明 何海辉 田志刚 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2004年第2期67-71,共5页
目的摸索大规模生产重组人白细胞介素 18(rhIL 18)高效简便、成本低廉的生产工艺。优化rhIL 18高浓度下最优复性、纯化方案 ,建立快速准确的活性检测方法。方法采用液相色谱和光谱学方法检测复性效率 ,筛选确定rhIL 18最优复性条件 ,再... 目的摸索大规模生产重组人白细胞介素 18(rhIL 18)高效简便、成本低廉的生产工艺。优化rhIL 18高浓度下最优复性、纯化方案 ,建立快速准确的活性检测方法。方法采用液相色谱和光谱学方法检测复性效率 ,筛选确定rhIL 18最优复性条件 ,再用SepheroseFFANX阴离子交换柱结合分子筛HiPrepSephacrylS 10 0进行纯化。采用3 H 掺入法检测rhIL 18产品对人外周血单个核细胞的促增殖作用 ,用流式细胞术检测其促γ 干扰素生成能力。结果建立了一套rhIL 18复性、纯化、活性检测方案。结论液相色谱和光谱学方法相结合 ,可用于检测rhIL 18的复性效率 ,流式细胞术也可用于检测rhIL 18的生物活性。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素-18 包涵体 复性 纯化 液相色谱
下载PDF
IL-18DNA免疫对HIV-1核酸疫苗诱导的免疫应答的影响 被引量:3
9
作者 王福祥 孙永涛 +4 位作者 孙永年 徐哲 王临旭 刘娟 康文臻 《中国病毒学》 CSCD 2004年第2期97-100,共4页
为了研究白细胞介素-18(IL-18)基因对人免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸疫苗诱导免疫应答的影响,将人IL-18基因插入到真核表达载体pVAX1中,构建了真核表达载体pVAX1-IL-18;将pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18或者pCI-neoGAG单独免疫Balb/c小鼠,检测... 为了研究白细胞介素-18(IL-18)基因对人免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸疫苗诱导免疫应答的影响,将人IL-18基因插入到真核表达载体pVAX1中,构建了真核表达载体pVAX1-IL-18;将pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18或者pCI-neoGAG单独免疫Balb/c小鼠,检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN-γ,同时观察免疫小鼠脾淋巴细胞增殖和小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。酶切及测序结果表明成功地构建了人IL-18基因真核表达载体;与pCI-neoGAG免疫组比较,pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠血清的抗HIV-1p24抗体滴度降低(P<0.01);而与pCI-neoGAG免疫组比较,pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠血清的IFN-γ升高(P<0.01);pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)以及特异性CTL活性均高于pCI-neoGAG免疫组(P<0.01)。IL-18基因联合HIV-1核酸疫苗免疫小鼠,可能增强特异性Th1细胞和CTL反应,白细胞介素-18基因对体液免疫有抑制作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-18 IL-18 基因 人免疫缺陷病毒 HIV-1 核酸疫苗 免疫
下载PDF
共表达VP3与hIL-18基因真核重组质粒的构建及对人结肠癌细胞的影响 被引量:1
10
作者 金宁一 连海 +5 位作者 米志强 李肖 徐敬龙 金洪涛 解丽华 李萍 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第9期43-46,共4页
先将鸡贫血病毒VP3基因插入真核表达载体pVAX1的多克隆位点,再将pIRES1载体上的IRES启动子及新霉素基因一同切下插入pVAX1的VP3基因下游,然后切下新霉素基因,将hIL-18基因插入其中,构建成pVVP3IL-18,将pVVP3IL-18转染Hela细胞。间接免... 先将鸡贫血病毒VP3基因插入真核表达载体pVAX1的多克隆位点,再将pIRES1载体上的IRES启动子及新霉素基因一同切下插入pVAX1的VP3基因下游,然后切下新霉素基因,将hIL-18基因插入其中,构建成pVVP3IL-18,将pVVP3IL-18转染Hela细胞。间接免疫荧光表明,在细胞膜和细胞浆观察到了特异的黄绿色荧光,证明表达了hIL-18。pVVP3IL-18转染人结肠癌细胞HCT-116后,经AO/EB染色及电镜观察,可见大量细胞凋亡。说明真核重组质粒pVVP3IL-18可在HeLa细胞中表达,并可在体外诱导人结肠癌细胞HCT-116凋亡。 展开更多
关键词 鸡贫血病毒 真核表达 载体 VP3 hIL-18 IRES启动子 HELA细胞 结肠癌细胞 凋亡素 真核重组质粒
下载PDF
急性冠脉综合征患者血浆白介素18、白介素10及其比值的变化和意义 被引量:7
11
作者 李巧汶 邱健 +4 位作者 马骏 洪长江 阮云军 向定成 顾晓龙 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第14期3282-3284,共3页
目的:观察急性冠脉综合征患者血浆白介素(IL)-18、IL-10及其比值的变化,探讨其在急性冠脉综合征发生中的意义。方法:采用酶联免疫吸附(EL ISA)法检测66例急性冠脉综合征患者和48例稳定型心绞痛患者血浆IL-18、IL-10等浓度变化。结果:急... 目的:观察急性冠脉综合征患者血浆白介素(IL)-18、IL-10及其比值的变化,探讨其在急性冠脉综合征发生中的意义。方法:采用酶联免疫吸附(EL ISA)法检测66例急性冠脉综合征患者和48例稳定型心绞痛患者血浆IL-18、IL-10等浓度变化。结果:急性冠脉综合征患者血浆IL-18、IL-10水平及其比值明显高于稳定性心绞痛患者(P<0.01);IL-18/IL-10比值与急性冠脉综合征的发生显著相关(OR=5.567,P<0.01)。结论:急性冠脉综合征患者炎症反应比稳定型心绞痛明显;IL-18/IL-10比值与急性冠脉综合征的发生明显相关,提示了IL-18/IL-10对预测急性冠脉综合征的发生有一定价值。 展开更多
关键词 急性病 冠状动脉疾病/血液/病理学 炎症 白细胞介素18/血液 白细胞介素10/血液 人类
下载PDF
含有重组人白细胞介素18基因的工程菌的产物表达和鉴定 被引量:1
12
作者 董宇清 李荣贵 +2 位作者 董春霞 赵进东 吴光耀 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期271-274,共4页
The cDNA of human Interleukin\|18 was obtained by RT\|PCR from the mRNA of human peripheral blood cells.The DNA sequencing was performed and the DNA was cloned into expression vector pBV220.The overexpression was perf... The cDNA of human Interleukin\|18 was obtained by RT\|PCR from the mRNA of human peripheral blood cells.The DNA sequencing was performed and the DNA was cloned into expression vector pBV220.The overexpression was performed in E.coli HB101.The expressive product was purified through Sephadex G100 and identified by N\|terminal amino acid sequencing and Western blot. 展开更多
关键词 人白细胞介素18 工程菌 表达产物鉴定 基因重组
下载PDF
人端粒酶逆转录酶和人白细胞介素18融合基因真核表达载体的构建和功能研究 被引量:1
13
作者 童向民 金洁 +2 位作者 姚航平 钱文斌 孟海涛 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第4期360-365,共6页
目的:以基因重组技术在真核细胞中表达人白细胞介素18(hIL-18)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)融合基因,并观察其生物学功能。方法:健康人单核细胞经RT-PCR扩增hIL-18后、T-A克隆。亚克隆至经N heⅠ、H indⅢ酶切的PCDNA 3.1(+)/hTERT中,限... 目的:以基因重组技术在真核细胞中表达人白细胞介素18(hIL-18)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)融合基因,并观察其生物学功能。方法:健康人单核细胞经RT-PCR扩增hIL-18后、T-A克隆。亚克隆至经N heⅠ、H indⅢ酶切的PCDNA 3.1(+)/hTERT中,限制性内切酶验证后,挑选出含有目标基因的正确克隆。经限制性内切酶和DNA测序分析两个基因是否已经正确连接到真核表达载体中。将hTERT/hIL-18融合基因质粒脂质体介导转染3T 3细胞中表达,经W estern-b lot验证目的基因表达产物,同时对转染细胞作免疫荧光染色。以EL ISA检测转染细胞刺激KG-1细胞分泌γ干扰素的能力,以流式细胞仪检测转染细胞抗MTX诱导凋亡的能力。结果:hTERT/hIL-18融合基因的真核表达载体PCDNA 3.1(+)构建成功,经限制性内切酶验证和DNA测序及同源性对比分析,该基因片段与NCB I基因库hIL-18和hTERT基因CDS序列同源性均达到99.9%;而细胞转染后经W estern-b lot验证,hTERT/hIL-18融合蛋白的分子量约127 kM r,与预期一致,荧光显微镜观察显示融合蛋白在细胞中弥散表达。此融合蛋白能刺激KG-1细胞分泌γ-干扰素,并具有抗MTX诱导凋亡的生物学功能。结论:本实验构建的PCDNA 3.1(+)/hTERT-hIL-18质粒能够在真核细胞中表达,并具有生物学功能,为进一步转染树突状细胞,研制肿瘤的治疗性疫苗提供基础。 展开更多
关键词 白细胞介素18 端粒 末端转移酶 基因表达 端粒酶逆转录酶 融合 蛋白
下载PDF
尖锐湿疣患者血清白细胞介素18和干扰素γ水平的研究 被引量:3
14
作者 刘国英 姚航平 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2003年第4期327-329,共3页
目的 :研究白细胞介素 18(IL- 18)和干扰素 γ(IFN- γ)在尖锐湿疣发病机理中的作用。方法 :采用酶联免疫吸附 (EL ISA)法 ,测定了 30例尖锐湿疣患者血清 IL- 18、IFN- γ含量。结果 :尖锐湿疣患者组的血清 IL- 18、IFN- γ水平显著高... 目的 :研究白细胞介素 18(IL- 18)和干扰素 γ(IFN- γ)在尖锐湿疣发病机理中的作用。方法 :采用酶联免疫吸附 (EL ISA)法 ,测定了 30例尖锐湿疣患者血清 IL- 18、IFN- γ含量。结果 :尖锐湿疣患者组的血清 IL- 18、IFN- γ水平显著高于正常人组 (IL- 18:132 .0 0± 5 2 .92 μg/ L vs5 0 .79± 2 3.4 8μg/ L,P<0 .0 1;IFN- γ:80 .83± 2 0 .4 6 μg/ Lvs2 0 .71± 11.18μg/ L,P<0 .0 1) ,且 IFN- γ水平增高与 IL- 18水平增高呈正相关 (r=0 .75 4,t=6 .0 81,P<0 .0 1)。结论 :在人类乳头瘤病毒感染时 ,机体的抗感染免疫有一定的激活 ,产生 IL- 18、IFN- γ等抗病毒因子 ,这可能与病毒最终被清除有一定关系。 展开更多
关键词 尖锐湿疣/病理生理 白细胞介素-18/血液 干扰素Ⅱ型/血液 乳头状瘤病毒
下载PDF
HCV、HBV、HIV间合并感染患者血清IL-18、VEGF、TGF-β_1的含量变化 被引量:4
15
作者 付汉东 张爱华 +1 位作者 余小燕 魏威 《中国感染控制杂志》 CAS 2011年第4期256-259,共4页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人免疫缺陷病毒(HIV)间合并感染患者血清白细胞介素(IL)-18、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HBV、HCV、... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人免疫缺陷病毒(HIV)间合并感染患者血清白细胞介素(IL)-18、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HBV、HCV、HIV间合并感染以及单纯HBV或HCV感染患者血清IL-18、VEGF、TGF-β_1含量,同时检测合并感染患者肝功能生化指标血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)含量,并分析它们与IL-18、VEGF、TGF-β_1的相关性;另从健康体检人群中随机抽取30例作对照组进行IL-18、VEGF、TGF-β_1检测,并进行统计学分析。结果 HBV、HCV、HIV间合并感染患者血清IL-18、VEGF、TGF-β_1含量变化与性别无相关性(P>0.05);比单纯HBV和HCV感染以及正常对照组均显著升高(P<0.01),其中IL-18、VEGF、TGF-β_1值以HBV+HCV+HIV感染模式最高[分别为(312.44±45.24)pg/L、(326.43±51.24)pg/mL、(283.51±49,27)μg/L],其次为HCV+HIV感染模式[分别为(224.32±34.37)pg/L、(257.72±47.72)pg/mL、(204.11±43.28)μg/L],HBV+HCV感染模式最低[分别为(129.44±27.62)pg/L、(147.67±41.22)pg/mL、(120.47±30.23)μg/L],三者间比较,差异有统计学意义(均P<0.01)。HBV、HCV、HIV间合并感染患者血清IL-18、VEGF、TGF-β_1水平与相应患者肝功能生化指标ALT、AST、GGT均呈正相关(r值分别为:0.667、0.652、0.672;0.643、0.618、0.623;0.712、0.673、0.705)。结论检测血清IL-18、VEGF、TGF-β_1含量,对HBV、HCV、HIV间合并感染患者病情的合理评价有重要意义。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 肝炎病毒 丙型 人免疫缺陷病毒 合并感染 白细胞介素18 血管内皮生长因子 转化生长因子β1 血传病原体
下载PDF
人IL-18的基因克隆、表达及纯化 被引量:1
16
作者 李越希 张锦海 郁兴明 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第3期78-83,共6页
目的 :克隆人IL 1 8基因 ,并构建高表达人IL 1 8的工程菌 ,纯化获得重组人IL 1 8。方法 :从人肿瘤组织内提取总RNA ,利用逆转录聚合酶链反应扩增人IL 1 8基因 ,在基因的 5′和 3′端分别加上NcoI和EcoRI酶切位点 ,酶切后直接克隆至质粒... 目的 :克隆人IL 1 8基因 ,并构建高表达人IL 1 8的工程菌 ,纯化获得重组人IL 1 8。方法 :从人肿瘤组织内提取总RNA ,利用逆转录聚合酶链反应扩增人IL 1 8基因 ,在基因的 5′和 3′端分别加上NcoI和EcoRI酶切位点 ,酶切后直接克隆至质粒表达载体pET2 8a( + )内 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3) ,挑选转化子 ,IPTG诱导后SDS PAGE筛选高表达人IL 1 8的工程菌。提取表达菌质粒进行DNA序列分析。表达菌大量培养及IPTG诱导后 ,超声破菌收集包涵体 ,十二烷基肌苷酸钠溶解后用阳离子柱和分子筛纯化。结果 :克隆的人IL 1 8基因序列完全正确 ,工程菌表达的人IL 1 8约占菌体蛋白 30 % ,以包涵体形式存在 ,经阳离子柱和分子筛纯化获得了较纯的人IL 1 8。结论 :可用构建的工程菌大量制备人IL 1 8,为开展人IL 1 8药物的临床前研究奠定了基础。 展开更多
关键词 IL-18 基因 克隆 表达 纯化 药物 白细胞介素18
下载PDF
人IL-18突变体D134R的构建及其生物学活性分析 被引量:1
17
作者 傅奕 裴冬生 +2 位作者 陆梁 胡书群 赵惠仁 《实用临床医药杂志》 CAS 2008年第3期24-27,41,共5页
目的研究IL-18结构与功能的关系。方法用重叠延伸PCR定点突变技术构建人白介素18(hIL-18)突变体hIL-18D134R。将突变体cDNA与原核表达载体pJW2重组并转化大肠杆菌DH5α。经热诱导表达蛋白质,SDS-PAGE证实,表达的目的蛋白质以包涵体形式... 目的研究IL-18结构与功能的关系。方法用重叠延伸PCR定点突变技术构建人白介素18(hIL-18)突变体hIL-18D134R。将突变体cDNA与原核表达载体pJW2重组并转化大肠杆菌DH5α。经热诱导表达蛋白质,SDS-PAGE证实,表达的目的蛋白质以包涵体形式存在。菌体经超声破碎后,包涵体以2 mol/L尿素洗涤,8 mol/L尿素溶解,并经Sephadex G-75柱纯化及稀释、透析复性。然后以诱导人外周血单个核细胞(PBMC)产生干扰素-γ(IFN-γ)及对核因子-κB(NF-κB)的激活能力为指标,检测突变体的生物学活性。结果构建的突变体hIL-18D134R可在大肠杆菌DH5α中高效表达,经包涵体洗涤和Sephadex G-75柱纯化后,纯度达92%以上。突变体D134R对IFN-γ的诱生能力及对NF-κB的激活能力分别为野生型hIL-18的19%和23%。结论在人IL-18的氨基酸序列中,Asp134对其生物学功能有非常重要的作用。 展开更多
关键词 白细胞介素18 定点突变 干扰素-Γ 核因子-ΚB
下载PDF
HIV/AIDS患者血清IL-18浓度变化与辅助受体CCR5/CXCR4表达的关系研究 被引量:2
18
作者 王清波 赵伟 吴引伟 《中国艾滋病性病》 CAS 2007年第3期204-206,245,共4页
目的研究人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)患者血清白细胞介质(IL)-18浓度的变化,及其与病毒载量、CD4+T细胞表面辅助受体CCR5/CXCR4表达的相关性。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对42例HIV/AIDS患者及12例正常对照... 目的研究人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)患者血清白细胞介质(IL)-18浓度的变化,及其与病毒载量、CD4+T细胞表面辅助受体CCR5/CXCR4表达的相关性。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对42例HIV/AIDS患者及12例正常对照者的血清IL-18浓度进行定量检测,分析其变化,并对其变化与病毒载量的相关性进行分析。应用流式细胞仪检测全部HIV/AIDS患者CD4+T细胞表面辅助受体CCR5/CXCR4的表达情况,并分析其与病毒载量及血清IL-18浓度变化之间的相关性。结果42例HIV/AIDS患者血清平均IL-18浓度显著高于正常对照组(P<0.01),且按美国疾病控制与预防中心(CDC)1993年标准,CDC C期显著高于A期(P<0.01)。所有患者血清IL-18浓度变化与HIV病毒载量之间呈正相关(P<0.05),与辅助受体CX-CR4的表达也呈正相关(P<0.01)。HIV病毒载量与辅助受体CXCR4的表达具有正相关性(P<0.05)。结论HIV/AIDS患者体内持续增长的IL-18加剧了其免疫功能的紊乱和低下,IL-18可能与疾病本身的致病机制有关。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) 获得性免疫缺陷综合征(AIDS) 白细胞介素(IL)-18 病毒载量 辅助受体CCR5/CXCR4
下载PDF
高糖和MBL对体外培养的人肾小球内皮细胞表达IL-18的影响 被引量:2
19
作者 武晓慧 宁晓霞 杨慧宇 《西部医学》 2012年第8期1452-1454,1459,共4页
目的观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)对体外培养的人肾小球内皮细胞(HRGEC)表达白细胞介素-18(IL-18)的影响。方法体外培养正常HRGEC,按干预条件随机分为对照组(5mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30mmol/L D-葡萄糖)和甘露醇组(5mmol/L D-... 目的观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)对体外培养的人肾小球内皮细胞(HRGEC)表达白细胞介素-18(IL-18)的影响。方法体外培养正常HRGEC,按干预条件随机分为对照组(5mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30mmol/L D-葡萄糖)和甘露醇组(5mmol/L D-葡萄糖+25mmol/L甘露醇),培养72小时后分别采用实时荧光定量RCR法(Real-time PCR)和ELISA法检测各组细胞IL-18的mRNA及细胞培养上清液中的蛋白表达。另取细胞随机分为单纯高糖组和高糖+MBL组,均用高糖培养72h后,分别加入等量的30%MBL缺乏人血清,高糖+MBL组另加10μg/ml MBL,继续培养4h。采用免疫荧光法检测各组细胞表面凝集素补体途径(LCP)激活终产物膜攻击复合物(MAC)的沉积,并检测各组细胞IL-18的mRNA和蛋白表达。结果与其他各组相比,高糖组细胞的IL-18mRNA以及蛋白表达均明显增加(P<0.05);高糖+MBL组细胞表面有明显MAC沉积,IL-18mRNA及蛋白表达与单纯高糖组相比明显增加(P<0.05)。结论高糖可以诱导人肾小球内皮细胞炎症因子过表达;高糖和MBL共存时可促成LCP激活,并对DN的炎症状态具有促进作用。 展开更多
关键词 甘露聚糖结合凝集素 高糖 糖尿病肾病 人肾小球内皮细胞 白细胞介素-18
下载PDF
白细胞介素-18在IgA肾病中的作用 被引量:2
20
作者 张桦 贾宁 +3 位作者 张慧涛 郭军利 汪悠悠 周文英 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第32期7818-7820,共3页
目的:观察不同临床情况下的IgA肾病(IgA-N)患者的血清白细胞介素(IL)-18水平及与相关指标的关系,探讨其临床作用。方法:IgA-N患者分为3组:肾病组(24例)、肾炎组(20例)和肾衰组(18例)。另设正常对照组(20例)。用ELISA方法检测血清IL-18... 目的:观察不同临床情况下的IgA肾病(IgA-N)患者的血清白细胞介素(IL)-18水平及与相关指标的关系,探讨其临床作用。方法:IgA-N患者分为3组:肾病组(24例)、肾炎组(20例)和肾衰组(18例)。另设正常对照组(20例)。用ELISA方法检测血清IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。比较各组间的差别。结果:IgA-N患者的血清IL-18水平在肾病组[(368.2±84.4)pg/ml]和肾衰组[(497.7±120.7)pg/ml]较对照组[(163.9±42.2)pg/ml]和肾炎组[(196.3±61.8)pg/ml]显著升高(P<0.05),而肾衰组明显高于肾病组和肾炎组(P<0.05),肾病组明显高于肾炎组(P<0.05)。患者的血清IL-18水平与TNF-α、hs-CRP、血肌酐、24 h尿蛋白量、总胆固醇、甘油三酯呈显著正相关,与肾小球滤过率、血清总蛋白、白蛋白呈显著负相关。结论:有大量蛋白尿和肾功能衰竭的IgA肾病患者的血清IL-18水平显著升高。IL-18与IgA肾病的进展和微炎症状态有关。 展开更多
关键词 白细胞介素18/分析 肾小球肾炎 IGA/血液/并发症 蛋白尿/并发症 肾功能衰竭/并发症 人类
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部