微小RNA-129-5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响

目的研究微小RNA-129-5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响。方法采用实时定量实时荧光定量PCR仪(RT-qPCR)检测喉鳞状细胞癌、癌旁组织及喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中miR-129-5p表达水平,转染miR-129-5p模拟物(mimics)喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为mimics组,转染miR-129-5p mimics空白对照组(NC)喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为mimics-NC组,将未转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为NC组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、平板克隆试验检测各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖情况;采用Transwell各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞侵袭情况;采用蛋白质印迹法试验检测各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖、侵袭相关蛋白表达水平。结果与癌旁组织(1.03±0.14)比较,喉鳞状细胞癌组织中miR-129-5p(0.48±0.08)表达水平显著降低(P<0.05)。同一时间和不同时间NC组、mimic-NC组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制率、平板克隆形成率、侵袭细胞数、一抗鼠源原癌基因(c-Myc)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。同一时间与NC组、mimics-NC组比较,mimics组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制显著增加(P<0.05),与24 h比较,48 h mimics组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制显著增加(P<0.05)。平板克隆形成率为(98.96±10.60)%、(97.57±10.82)%、(46.91±9.03)%、侵袭细胞数为(235.62±36.18)、(227.31±35.90)、(94.38±19.86)个、c-Myc(3.92±0.71)、(3.89±0.60)、(2.18±0.46)、Cyclin D1(1.54±0.27)、(1.52±0.30)、(0.39±0.08)、MMP-2(1.12±0.28)、(1.11±0.25)、(0.36±0.07)、MMP-9(1.03±0.14)、(0.98±0.13)、(0.29±0.05)蛋白水平均显著降低(均P<0.05)。结论miR-129-5p在喉鳞状细胞癌组织中低表达,上调miR-129-5p可抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖及侵袭。

小细胞肺癌患者检测自身抗体结果分析

目的探讨抗核抗体(ANA)及抗着丝点抗体(ACA)检测对小细胞肺癌(SCLC)患者的诊断意义。方法对江西省南昌市新建区中医院和南昌大学第二附属医院2015年1月-2016年5月间符合纳入标准的66例SCLC患者、116例其他肿瘤患者及40例健康体检者血清作为研究对象,并分别以人喉癌上皮细胞-20-10(HEp-20-10)和人喉癌上皮细胞-2(HEp-2)作基质采用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA、ACA,并对结果进行回顾性分析。结果与非小细胞肺癌(NSCLC)相比,SCLC血清中ANA阳性率显著增加(P<0.01);SCLC患者ANA检出率与肝癌患者相比,差异无统计学意义(P>0.01);SCLC与各病例对照组相比,ACA检出率明显增多,差异均具有统计学意义(P<0.01);各肺癌组血清中ANA和ACA的检出率与健康对照组相比均显著性升高(P<0.01);分别采用HEp-20-10和HEp-2作为基质的IIF法对血清ACA进行检测,SCLC患者差异无统计学意义(P=0.824),Kappa一致性分析,P<0.01,有显著性差异,但Kappa=0.333,一致性较差;联合2种不同基质检测SCLC患者结果显示其阳性率显著提高(P<0.05),但从临床评价指标可见:基质为HEp-20-10的IIF检测结果的临床意义更显著。结论 ACA的检测对SCLC患者的临床诊断及鉴别诊断具有重要的临床意义,采用HEp-20-10细胞株检测ACA抗体更有助于SCLC患者检出率。

斑蝥素酸镁与斑蝥酸钠对喉癌Hep-2细胞抑制活性比较的初步研究

目的:探讨自主研发产物--斑蝥素酸镁对人喉癌上皮细胞的增殖抑制活性是否好于临床抗癌药物斑蝥酸钠。方法:采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)、细胞集落形成实验分别考察斑蝥素酸镁和斑蝥酸钠对人喉癌上皮细胞Hep-2的影响。结果:与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁作用喉癌Hep-2细胞的效果更加显著。其IC50仅为2.19μmol·L-1,远低于斑蝥酸钠的IC50(15.75μmol·L-1)。细胞集落形成实验显示,与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁明显阻止细胞集落的形成,最低有效浓度为1.75μmol·L-1,远低于斑蝥酸钠的最低有效浓度(3.50μmol·L-1)。结论:与斑蝥酸钠相比,斑蝥素酸镁对喉癌Hep-2细胞具有更加显著的抑制效果,可进行更加深入的研究。