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人成骨肉瘤MG-63细胞分化特性及分化过程中的基因表达 被引量:8
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作者 罗湘杭 廖二元 +1 位作者 周后德 伍贤平 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期107-110,共4页
观察人成骨肉瘤MG 6 3细胞分化特性及分化过程中的基因表达。在细胞培养的不同时间 ,用α 磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;放射免疫法测定骨钙素 (BGP)含量 ;半定量逆转录聚合酶链反应测I型胶原、基质金属蛋白酶 (MMP) 1和基质... 观察人成骨肉瘤MG 6 3细胞分化特性及分化过程中的基因表达。在细胞培养的不同时间 ,用α 磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;放射免疫法测定骨钙素 (BGP)含量 ;半定量逆转录聚合酶链反应测I型胶原、基质金属蛋白酶 (MMP) 1和基质金属蛋白酶抑制因子 (TIMP) 1基因mRNA表达 ;VanGieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果表明MG 6 3细胞接种培养第 7d后I型胶原基因表达较高。MMP 1表达量随时间推移逐渐增加 ,至第 2 4d达到高峰。第 1~ 9dTIMP 1表达量逐渐增加 ,其后基本恒定。ALP活性第 0~ 12d逐渐增高 ,至第 12d达最高 ,其后逐渐下降。第 18d后 ,细胞有许多大小不等的结节形成 ,I型胶原结节染色较无结节处深。MG 6 3细胞具有成骨细胞表型特征。MG 6 3细胞生长分为细胞增殖、骨基质成熟、骨基质矿化阶段 ,且I型胶原 ,MMP 1,TIMP 1基因表达及ALP活性呈时间特异性。 展开更多
关键词 mg-63细胞 细胞分化 骨肿瘤 基因表达 人成骨肉瘤
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二膦酸盐对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞中OPG/RANKL表达的影响 被引量:1
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作者 徐万龙 孙治国 +1 位作者 王浩 袁宏 《食品与药品》 CAS 2011年第9期315-318,共4页
目的研究二膦酸盐作用于人骨肉瘤细胞株MG-63细胞后,对细胞中成骨细胞护骨素(OPG)及细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法人骨肉瘤细胞株MG-63细胞培养、传代后分为:二膦酸盐10μmol/L组、二膦酸盐50μmol/L组和阴性... 目的研究二膦酸盐作用于人骨肉瘤细胞株MG-63细胞后,对细胞中成骨细胞护骨素(OPG)及细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法人骨肉瘤细胞株MG-63细胞培养、传代后分为:二膦酸盐10μmol/L组、二膦酸盐50μmol/L组和阴性对照组3组,保温72 h后,应用RT-PCR和Western blot检测干预后OPG和RANKL mRNA和蛋白水平的表达。结果二膦酸盐作用于人骨肉瘤细胞株MG-63细胞后,细胞中OPG mRNA和蛋白水平表达升高,RANKL mRNA及蛋白水平则降低(均P<0.05)。结论二膦酸盐可能通过调节人骨肉瘤细胞株MG-63细胞OPG/RANKL轴的表达,抑制骨肉瘤的溶骨性破坏,对治疗人骨肉瘤有潜在价值。 展开更多
关键词 二膦酸盐 人骨肉瘤细胞株mg-63细胞 护骨素 破骨细胞分化因子
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直接原位RT-PCR检测人成骨肉瘤MG-63细胞株雌激素受体亚型表达 被引量:3
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作者 杨开初 廖二元 +1 位作者 罗湘杭 周后德 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第4期440-444,共5页
目的观察人成骨肉瘤MG63细胞株雌激素受体亚型mRNA表达特征。方法用直接原位RTPCR及激光共聚焦显微镜观察MG63细胞株在培养第6及第9天ERα、ERβmRNA表达。结果各检测点均见一定量的荧光弥散于细胞内。阳性对照点荧光较其他两点强,阴性... 目的观察人成骨肉瘤MG63细胞株雌激素受体亚型mRNA表达特征。方法用直接原位RTPCR及激光共聚焦显微镜观察MG63细胞株在培养第6及第9天ERα、ERβmRNA表达。结果各检测点均见一定量的荧光弥散于细胞内。阳性对照点荧光较其他两点强,阴性对照点荧光明显减弱,仅见少量背景荧光。ERα的荧光强度强于ERβ。结论(1)MG63细胞株作为成骨细胞模型,存在ERα和ERβ基因的mRNA表达。(2)骨基质成熟早期阶段MG63细胞株的ERα表达比ERβ丰富,这表明两者在功能上存在差异。 展开更多
关键词 成骨肉瘤 mg-63细胞株 雌激素受体亚型 原位RT-PCR 激光共聚焦显微镜 检测
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人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响 被引量:2
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作者 王立民 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1715-1719,共5页
目的:探讨人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:采用流式细胞术Annexin V-PI双染法和MTT法检测MG-63细胞的凋亡变化;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Cyt C和激活型caspase-3的蛋白水平。结果:流式细... 目的:探讨人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:采用流式细胞术Annexin V-PI双染法和MTT法检测MG-63细胞的凋亡变化;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Cyt C和激活型caspase-3的蛋白水平。结果:流式细胞术和MTT法结果显示人参皂苷Rh2呈浓度依赖性促进MG-63细胞的凋亡。免疫印迹法结果表明,与空白对照组相比,给药组细胞Bax的蛋白表达显著增加,Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bcl-2/Bax比值减少;线粒体中Cyt C蛋白表达显著减少,而胞浆中表达显著增加;激活型caspase-3蛋白水平显著增加(P<0.05)。结论:人参皂苷Rh2呈浓度依赖性促进MG-63细胞的凋亡,其凋亡过程可能与调控线粒体凋亡通路相关蛋白有关。 展开更多
关键词 人参皂苷RH2 人骨肉瘤细胞mg-63 细胞凋亡
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Establishment and characterization of cell sublines with high and low metastatic potential derived from human osteosarcoma 被引量:2
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作者 SHIXiao-bing CHENAn-ming +3 位作者 CAIXian-hua GUOFen-jing LIAOGuo-ning MADing 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2005年第8期687-690,共4页
The most frequent cause of death of patients with osteosarcoma is the metastasis of tumour cells. In spite of successful control of the primary tumour, the mortality of the patients due to metastatic spread is more th... The most frequent cause of death of patients with osteosarcoma is the metastasis of tumour cells. In spite of successful control of the primary tumour, the mortality of the patients due to metastatic spread is more than 30% within 5 years. 1 Recent studies about osteosarcoma metastatic mechanism are based on osteosarcoma matrilineal cell lines. 2 For further studies of metastatic mechanism of osteosarcoma the establishment of a better metastatic experimental model of osteosarcoma is needed. We isolated and established two cell sublines, with high and low metastatic potentials, respectively, derived from human osteosarcoma MG-63 cell line by cloning in vitro and transplantation in vivo , then analysed and identified their biological characteristics. 展开更多
关键词 mg-63 cell line OSTEOSARCOMA METASTASIS cell subline
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甲状腺激素对成骨样MG-63细胞甲状腺激素受体不同亚型表达的影响 被引量:2
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作者 杨宇虹 左爱军 +3 位作者 朱志峰 赵学勤 郭刚 张镜宇 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期242-245,共4页
目的 检测人类成骨样细胞MG-63中甲状腺激素受体(TR)的表达情况以及甲状腺激素(T3或T4)对其的影响.方法 用实时荧光定量PCR法对MG-63细胞中TR的主要4个亚型,α1、α1、β1、β2的mRNA表达进行了测定.结果 TRα1 mRNA的表达水平最高,... 目的 检测人类成骨样细胞MG-63中甲状腺激素受体(TR)的表达情况以及甲状腺激素(T3或T4)对其的影响.方法 用实时荧光定量PCR法对MG-63细胞中TR的主要4个亚型,α1、α1、β1、β2的mRNA表达进行了测定.结果 TRα1 mRNA的表达水平最高,为10.70±0.45;TRβ1仅及其半,为5.75±0.10;TRβ2不低,相当于TRβ1的60%,为3.34±0.08;TRα2的表达极低,仅为(3.66±0.59)×10-2.分别加入不同浓度的T3或T4,仅TRα1和TRα2对T3表现明显的降调节,且TRα1和TRα2的表达与相应T3浓度之间负相关,其他亚型无显著性变化,也无相关关系;同样浓度范围的T4作用各亚型,表达均无显著性变化.结论 在骨细胞发育分化中TRα1起关键作用. 展开更多
关键词 甲状腺激素 甲状腺激素受体 人类成骨样细胞系mg-63 基因表达
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工频磁场对不同细胞密度人骨肉瘤细胞MG-63体外增殖的影响 被引量:1
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作者 赵文春 吴华 +3 位作者 马伟明 郝海虎 张海军 胡安 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期300-302,共3页
目的研究工频磁场对不同细胞密度人骨肉瘤细胞MG-63体外增殖的影响,为揭示磁场所致生物学效应的作用机制提供实验依据。方法在某一细胞密度下(0.90×10^4个/m1),用不同磁感应强度(1mT、2mT、3mT、4mT)的工频磁场对MG-63细... 目的研究工频磁场对不同细胞密度人骨肉瘤细胞MG-63体外增殖的影响,为揭示磁场所致生物学效应的作用机制提供实验依据。方法在某一细胞密度下(0.90×10^4个/m1),用不同磁感应强度(1mT、2mT、3mT、4mT)的工频磁场对MG-63细胞进行体外辐射,然后改变细胞密度进行重复实验(细胞接种密度分别为0.95×10^4个/ml、1.00×10^4个/ml、1.10×10^4个/ml和1.50×10^4个/m1)。完成磁场辐射处理后,采用四唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖水平。结果磁场对MG-63细胞的增殖有明显的诱导效应,不同细胞密度所对应的磁效应明显不同,其中2mT磁刺激组的增值诱导效应最显著。结论工频磁场对MG-63细胞体外增殖的影响不仅与磁场强度有关,也与细胞密度密切相关。 展开更多
关键词 工频磁场 人骨肉瘤细胞mg-63 增殖 细胞密度
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成骨样细胞MG-63中的甲状腺激素受体Ⅰ——细胞核可溶性甲状腺激素受体与激素(T3)结合的动力学
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作者 杨宇虹 左爱军 +3 位作者 朱志峰 赵学勤 郭刚 张镜宇 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期125-127,共3页
建立人类成骨样细胞系MG-63中甲状腺激素受体的结合实验的方法,测定受体动力学参数。体外培养MG-63细胞,制备细胞核提取液,对其细胞核提取物中的甲状腺激素受体与激素(主要是T3)结合的动力学进行了Seatchard分析。MG-63细胞核内存... 建立人类成骨样细胞系MG-63中甲状腺激素受体的结合实验的方法,测定受体动力学参数。体外培养MG-63细胞,制备细胞核提取液,对其细胞核提取物中的甲状腺激素受体与激素(主要是T3)结合的动力学进行了Seatchard分析。MG-63细胞核内存在高亲和力(Ka为7.68×10^9L/mol)和有限结合容量的甲状腺激素受体,最大结合容量为(111.25±10.73)fmol/mg蛋白。建立了一个简易的自培养细胞制备纯净细胞核的方法,为进一步研究成骨样细胞及骨组织中的甲状腺激素受体奠定基础。 展开更多
关键词 甲状腺激素受体 人类成骨样细胞系mg-63 Scatchard分析
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17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物家族的作用
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作者 黄秋霞 周后德 +1 位作者 廖二元 杜巍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期140-145,共6页
目的观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞和人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物家族 (insulin receptor substrate IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对骨的作用机制。方法从正常骨折病人骨组织中分离正常人成骨细胞,经纯化和培养后,用Van ... 目的观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞和人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物家族 (insulin receptor substrate IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对骨的作用机制。方法从正常骨折病人骨组织中分离正常人成骨细胞,经纯化和培养后,用Van Gieson行Ⅰ型胶原染色、钙钴法行碱性磷酸酶染色、茜素红行钙化结节染色进行成骨细胞鉴定。用半定量RT-PCR检测细胞IRS-1、- 2、-3 mRNA表达量。结果分离和培养的细胞具有正常人成骨细胞的形态,能分泌Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶并形成钙化结节。17β-雌二醇和/或孕酮均不影响人成骨细胞和MG-63细胞IRS-1mRNA 的表达(P>0.05),可诱导人成骨细胞和MG-63细胞IRS-2 mRNA的表达上调(P<0.05),IRS- 3 mRNA的表达下调(P<0.05)。二者联合干预时作用明显加强(P<0.01)。结论 17β-雌二醇和孕酮均不影响IRS-1 mRNA的表达,但可使人成骨细胞和MC-63细胞IRS-2 mRNA的表达上调, IRS-3mRNA的表达下调,二者联合干预具有正性协同效应。不同的IRS家族成员对同一细胞具有效应的多样性。 展开更多
关键词 17Β-雌二醇 胰岛素受体底物 人成骨细胞 孕酮 mg-63细胞 receptor IRS-1 碱性磷酸酶染色 mRNA表达量 IRS-2 钙化结节 表达上调 表达下调 人成骨肉瘤 PCR检测 培养的细胞 作用机制 骨折病人 胶原染色 细胞鉴定 Ⅰ型胶原
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白花蛇舌草注射液对人骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制作用的实验研究 被引量:1
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作者 谢克恭 唐毓金 +2 位作者 黄煜朗 曾文容 黄可 《中国基层医药》 CAS 2015年第5期663-665,共3页
目的:探讨白花蛇舌草注射液体外对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用。方法通过培养人骨肉瘤MG-63细胞株,以50μL/mL、100μL/mL、200μL/mL、400μL/mL 4个不同浓度的白花蛇舌草注射液作用于该细胞,在12 h、24 h和48 h后通过3... 目的:探讨白花蛇舌草注射液体外对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用。方法通过培养人骨肉瘤MG-63细胞株,以50μL/mL、100μL/mL、200μL/mL、400μL/mL 4个不同浓度的白花蛇舌草注射液作用于该细胞,在12 h、24 h和48 h后通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞的活性及数量。结果50μL/mL白花蛇舌草注射液作用12 h、24 h及48 h后,对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制率分别为(2.87±2.22)%、(13.42±2.14)%、(30.8±3.67)%;100μL/mL白花蛇舌草注射液作用12 h、24 h及48 h后,对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制率分别为(22.25±1.58)%、(43.34±2.84)%、(66.46±2.64)%,抑制率逐渐增加,差异有统计学意义( t12 h =12.319,t24 h =14.573,t48 h =12.319,均 P<0.05);加药组200μL/mL与400μL/mL浓度作用24 h后细胞完全死亡,镜下观察可见细胞变圆、漂浮,核质比例减少,细胞碎片较多。结论白花蛇舌草注射液对人骨肉瘤MG-63细胞增殖有一定的抑制作用,且抑制作用在一定的剂量范围内呈浓度、时间依赖性,其机制值得进一步研究。 展开更多
关键词 人骨肉瘤mg-63细胞 细胞增殖 白花蛇舌草注射液
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人成骨细胞胰岛素受体底物的表达
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作者 黄秋霞 周后德 +1 位作者 廖二元 杜巍 《中国医师杂志》 CAS 2005年第5期597-599,共3页
目的观察人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞(humanosteoblast-likecellsHOB)胰岛素受体底物(insulinreceptorsubstrateIRS)的表达。方法半定量RT-PCR检测IRSmRNA表达,免疫共沉淀检测IRS蛋白表达。结果人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成... 目的观察人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞(humanosteoblast-likecellsHOB)胰岛素受体底物(insulinreceptorsubstrateIRS)的表达。方法半定量RT-PCR检测IRSmRNA表达,免疫共沉淀检测IRS蛋白表达。结果人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞均有IRS-1、-2、-3、-4mRNA和蛋白质的表达,以IRS-1的表达丰度最高,IRS-4表达丰度最低。其中IRSmRNA和蛋白质在MG-63细胞中的表达丰度较在正常人成骨细胞中的表达丰度稍高。结论人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞均可表达IRSmRNA和蛋白质。且IRS不同成员在同一细胞中的表达丰度不同。 展开更多
关键词 胰岛素受体底物 人成骨细胞 mg-63细胞 定量RT-PCR检测 人成骨肉瘤 表达丰度 IRS-1 mRNA表达 cells 免疫共沉淀 IRS-4 蛋白质 蛋白表达 正常人
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Sustained local delivery of insulin for potential improvement of peri-implant bone formation in diabetes 被引量:2
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作者 HAN Yong ZHANG XueYan +2 位作者 E LingLing WANG DongSheng LIU HongChen 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2012年第11期948-957,共10页
Dental implantation is an effective standard treatment modality to restore missing teeth and maxillofacial defects. However, in diabetics there is an increased risk for implant failure due to impaired peri-implant oss... Dental implantation is an effective standard treatment modality to restore missing teeth and maxillofacial defects. However, in diabetics there is an increased risk for implant failure due to impaired peri-implant osseous healing. Early topical insulin treat- ment was recently shown to normalize diabetic bone healing by rectifying impairments in osteoblastic activities. In this study, insulin/poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) microspheres were prepared by a double-emulsion solvent evaporation method. Microspheres were then incorporated in fibrin gel to develop a local drug delivery system for diabetic patients requiring im- plant treatment. In vitro release of insulin from fibrin gel loaded with these microspheres was assessed, and sustained prolonged insulin release over 21 days ascertained. To assess the bioactivity of released insulin and determine whether slow release might improve impaired diabetic bone formation, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), alkaline phosphatase (ALP) activity, mineralized nodule formation, and ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) assays were performed. The insulin released from the drug delivery system stimulated cell growth in previously inhibited cells, and ameliorated the impaired bone-forming ability of human MG-63 cells under high glucose conditions. Fibrin gel loaded with insulin/PLGA microspheres shows potential for improving peri-implant bone formation in diabetic patients. 展开更多
关键词 INSULIN controlled release peri-implant bone formation DIABETES HYPERGLYCEMIA human mg-63 cells osteoblastic ac-tivity
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Algal oligosaccharides ameliorate osteoporosis via up-regulation of parathyroid hormone 1-84 and vascular endothelial growth factor 被引量:1
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作者 Wang Li Wang Haiya Fang Ningyuan 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2016年第3期332-339,共8页
OBJECTIVE: To determine whether algal oligosaccharide affects the levels of parathyroid hormone 1-84(PTH1-84) and vascular endothelial growth factor(VEGF).METHODS: An osteoporosis rat model was established via bilater... OBJECTIVE: To determine whether algal oligosaccharide affects the levels of parathyroid hormone 1-84(PTH1-84) and vascular endothelial growth factor(VEGF).METHODS: An osteoporosis rat model was established via bilateral ovariectomy. The model rats were fed algal oligosaccharides(molecular weights:600-1, 200 Da) for 4 months. Bone mineral density(BMD) was then measured. MG-63 human osteoblastic cells were treated with algal oligosaccharides. The expression of PTH1-84 and VEGF was then examined. Oligosaccharide-treated cells were transfected with PTH1-84 short hairpin RNA(sh RNA), VEGF sh RNA, and PTH1-84-VEGF small interfering RNA(si RNA). The growth rates were then compared between transfected and non-transfected cells.RESULTS: Algal oligosaccharides increased the BMD of the osteoporosis rat model compared with untreated controls(P < 0.05). When MG-63 cells were treated with algal oligosaccharides, the growth rate increased by 25% compared with the control group at day 3(P < 0.05). In addition, the expression of PTH84 and VEGF was enhanced. Con-versely, when the cells were transfected with PTH84 sh RNA, VEGF sh RNA, or PTH1-84-VEGF si RNA, the growth rate was decreased by 17%, 35% and 70%, respectively, compared with controls at day 3(P < 0.05).CONCLUSION: Algal oligosaccharides ameliorate osteoporosis via up-regulation of PTH1-84 and VEGF. Algal oligosaccharides should be developed as a potential drug for osteoporosis treatment. 展开更多
关键词 OSTEOPOROSIS Bone density SARGASSUM OLIGOSACCHARIDES Parathyroid hormone Vascular endothelial growth factor A mg-63 human osteoblastic cells
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