地鼠肾细胞狂犬病纯化疫苗临床研究观察

了解地鼠肾细胞狂犬病纯化疫苗接种安全性及有效性。分别以 1.0ml及 0 .5ml的剂量 ,按暴露后及暴露前免疫程序给 313人接种 ,用小鼠中和试验法检测血清中和抗体效价。结果显示 :临床副反应轻微 ,副反应率为0 .89%～ 15 % ;免疫全量疫苗和半量疫苗的人群均获保护力 ,抗体阳转率为 10 0 % ,免后抗体GMT滴度分别为35 .2IU/ml(n =32 )和 31.4IU/ml(n =37) ,经检验两组无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;免疫全量疫苗和半量疫苗两组的免疫前、后相比 ,经检验有显著性差异 (P <0 .0 5 ) 。

人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)基质残余蛋白标准品的建立

目的:研制用于人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)中地鼠肾细胞蛋白质残留量检测(ELISA法)的国家标准品。方法:分两步进行协作标定和量值溯源,第一步采用Lowry法对原代地鼠肾细胞蛋白质标准品原液进行赋值,第二步采用ELISA法对原代地鼠肾细胞蛋白质标准品进行赋值。结果:数据经统计学处理结果,最终原代地鼠肾细胞蛋白质标准品量值为4.0μg·mL^(-1),95%可信限为:(4.0±0.5)μg·mL^(-1)。结论:建立了国家原代地鼠肾细胞蛋白质标准品,赋值准确可靠、科学严谨,可用于人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)基质残余蛋白的质量控制。

学龄前儿童接种人二倍体细胞狂犬疫苗与Vero细胞纯化狂犬疫苗的安全性对比分析

目的探讨学龄前儿童接种人二倍体细胞狂犬疫苗与Vero细胞纯化狂犬疫苗的安全性,并对其进行对比分析。方法回顾性分析2019年10月至2020年10月在中山市博爱医院急诊科接种狂犬疫苗的学龄前患儿203例,将接种Vero细胞纯化狂犬疫苗者列为对照组,接种人二倍体细胞狂犬疫苗者列为观察组。3级暴露者建议联用人狂犬病免疫球蛋白。对照组共收集病例118例,观察组共收集病例85例。比较两组患儿的不良反应发生情况以及联用免疫球蛋白的不良反应发生情况。结果对照组总不良反应发生率为22.03%,观察组总不良反应发生率为2.35%,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组患儿不良反应主要表现是全身发热,其次为注射部位红肿、疼痛,而观察组不良反应则明显较少,差异有统计学意义(P<0.05)。联用人狂犬病免疫球蛋白者不良反应发生率为4.44%,未联用者不良反应发生率为4.43%,两组之间不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论在学龄前儿童人群中,接种人二倍体细胞狂犬疫苗的安全性显著高于接种Vero细胞纯化狂犬疫苗,具有较高的临床推广价值。

β-丙内酯在人用纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗制备中的应用研究

我们将β－丙内酯（简称ＢＰＬ）用于人用纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗的灭活，虽然ＢＰＬ是一种致癌物，但极易水解，用毛细管气相色谱法检测含ＢＰＬ的疫苗在３７℃水浴中水解０ｈ、０．５ｈ、１．０ｈ、１．５ｈ、２．０ｈ 时的含量（ｐｐｍ ）分别为２６２．０、７０．０、１３．０、５．１，未检出，结果表明疫苗中的ＢＰＬ随水解时间延长，其含量逐渐变小，２ｈ 以后彻底消失，这为我们应用ＢＰＬ灭活狂犬病毒所需水解时间提供了科学依据。用病毒灭活试验及病毒增殖试验的常规方法对用ＢＰＬ灭活后的疫苗进行有效性实验，结果小白鼠均健康存活，这表明已无活病毒存在。

冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)过敏性试验研究

目的研究冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)有无过敏反应。方法采用豚鼠主动全身过敏试验、小鼠腘窝淋巴结试验和大鼠被动皮肤过敏试验,全面评价冻干人用狂犬病疫苗肌肉注射能否引起过敏反应。结果冻干人用狂犬病疫苗豚鼠主动全身过敏试验出现弱阳性反应;小鼠腘窝淋巴结试验结果为阳性,大鼠被动皮肤过敏试验出现潜在的阳性反应。结论冻干人用狂犬病疫苗肌肉给药可能引起过敏反应,临床应用需密切关注。

冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)肌肉刺激性试验研究

目的观察冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)肌肉给药后有无刺激反应。方法选取新西兰兔4只,左侧股四头肌肌肉注射冻干人用狂犬病疫苗1 m L 3次,右侧同法肌肉注射生理盐水作为对照。药后72 h取给药部位肌肉进行病理组织学检查。结果病理组织学检查结果显示给药侧肌组织肌纤维呈凝固性坏死,间质出血、水肿,单核细胞浸润;对照侧肌肉亦未见刺激反应。结论冻干人用狂犬病疫苗肌肉注射可能引起注射部位刺激反应。

人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)的免疫原性评价

目的研究狂犬病病毒aG株生产的人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)免疫接种后抗体动态水平,评价疫苗的免疫原性,并对企业A和企业B生产的狂犬病疫苗进行效力评价。方法采用企业A和B生产的人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)(简称狂苗)按暴露后免疫程序接种受试者,分别于免疫前、第1针免疫后3、7、14、42 d抽血并分离血清,用快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)检测中和抗体滴度,比较2组受试者血清样本的抗体阳转率和抗狂犬病中和抗体滴度;并对2015年1月至2023年3月企业A和企业B申报批签发的狂苗抽检效价结果进行回顾性分析,效力检测采用《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)2020版(三部)人用狂犬病疫苗效价测定法。结果企业A和企业B生产的狂苗第1针免疫后7 d抗体阳转率分别为50.6%、51.5%,14、42 d阳转率均为100%,抗体阳转率差异无统计学意义(χ^(2)=0.0161,P=0.899);第1针免后7 d中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为1.5、2.2 IU/mL,差异无统计学意义(t=0.316,P=0.752);第1针免后14 d的GMT分别为5.7、8.7 IU/mL,差异无统计学意义(t=0.864,P=0.388);第1针免后42 d的GMT分别为9.7、9.8 IU/mL,差异无统计学意义(t=0.092,P=0.925)。参照《中国药典》2015版附录3503和《中国药典》2020版附录3503第一法(NIH法)检测的企业A和企业B的疫苗效价几何均值分别为6.8和6.0 IU/剂,差异无统计学意义(t=1.699,P=0.094)。参照《中国药典》2020版附录3503第二法(改良NIH法)检测的企业A和企业B生产的狂苗效价均≥4.0 IU/剂。结论2家企业利用狂犬病病毒aG株在原代地鼠肾细胞上生产的狂苗均可以及时地在人体内诱导产生保护性抗体,回顾分析表明效价检测结果全部符合规定,疫苗具有良好的免疫原性。

狂犬病病毒aG株在人用狂犬病疫苗中应用的研究进展

狂犬病是由狂犬病病毒感染引起的以中枢神经系统症状为主的一种动物源性传染病,病死率几乎100%,狂犬病疫苗是预防狂犬病的主要手段。1931年,研究者从狂犬病病犬脑中分离获得狂犬病病毒,经兔脑传至30多代,经驯化后获得一种固定毒(北京株),后续经多家机构合作,将狂犬病病毒北京株在豚鼠脑和原代地鼠肾细胞中交替传代15年,获得地鼠肾细胞适应株,即aG株,用于人用狂犬病疫苗生产。本文就狂犬病病毒aG株的传代适应方法、基因特性及其制备相应疫苗的免疫保护作用作一综述。

冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产毒种的筛选

目的筛选冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产毒种。方法将原代地鼠肾细胞传毒种(北京固定毒7aG)和豚鼠脑传毒种(北京固定毒6aG4)平行接种于10层细胞工厂培养的原代单层地鼠肾细胞,收获病毒液,共收获8次,1、3、5、7、9号细胞工厂接种脑毒,2、4、6、8、10号细胞工厂接种细胞毒。1次收获(简称1收)培养72h,从2次收获(简称2收)开始,培养24h,收获液经超滤浓缩、柱层析纯化、除菌过滤、再浓缩配制成人用狂犬病疫苗半成品,检测各项指标,筛选最佳毒种。结果6aG4株毒种制备的病毒收获液、浓缩液、纯化液、纯化除菌过滤液、狂犬病疫苗半成品的各项检定指标都优于7aG毒种。结论豚鼠脑传毒种(6aG4)明显优于原代地鼠肾细胞传毒种(7aG),选择豚鼠脑传毒种(6aG4)作为人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产毒种。

人用狂犬病疫苗原代地鼠肾细胞蛋白质国家对照品的建立

目的建立用于人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)中地鼠肾细胞蛋白质残留量检测(ELISA法)的国家对照品。方法采用ELISA法,用原代地鼠肾细胞蛋白质标准品(量值为4.0μg/mL)对原代地鼠肾细胞蛋白质对照品进行协作标定赋值,并进行均匀性和稳定性分析。结果协作标定的数据经统计学分析后,原代地鼠肾细胞蛋白质对照品量值为34.7 ng/mL,95%参考范围为(34.7±10.1)ng/mL,该对照品的均匀性和稳定性考察也符合要求。结论建立了人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)原代地鼠肾细胞蛋白质国家对照品(批号为:250025-201901),以确保检测体系的准确、可靠。

628例接种人用纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗者血清IgG抗体水平调查

目的了解人用纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗的免疫接种效果。方法收集2009年1月-2011年12月接种人用地鼠肾细胞狂犬纯化疫苗628人的流行病学资料,并分别采集接种疫苗后第7 d和第15 d的血清标本。用ELISA方法检测血清IgG抗体,对不同性别、不同年龄组和接种后不同时间的血清抗体水平进行比较分析。结果共检测疫苗接种人群628人,免疫后7 d和15 d的IgG抗体阳性率分别为59.71%和94.11%,经χ2检验,两者间差异有统计学意义(P<0.01)。10岁以下年龄组接种人群无论是接种7 d还是接种15 d的血清IgG抗体阳性率高于60岁以上年龄组(P<0.05)。不同性别免疫接种7 d后与免疫接种15 d后的IgG抗体阳性率间差异无统计学意义(P>0.05)。结论接种人用纯化地鼠肾细胞狂犬疫苗的人群IgG抗体阳性率与接种人群的年龄、接种后的时间相关,接种后15 d的IgG抗体阳性率达到94.11%,60岁以上年龄组的IgG抗体阳性率明显低于10岁以下年龄组。