加减活络效灵丹的临床前安全性评价(英文)

目的:评估加减活络效灵丹口服应用的安全性。方法:检索TCMlars(www.cintcm.com)、PubMed(MEDLINE)文献和《中华本草》1999年版、《世界卫生组织精选医用植物》(Ⅰ～Ⅲ卷)关于活络效是丹及其组成药物的毒性方面的内容。大鼠单次给予最大剂量活络效灵丹(9.2 g/kg)评价药物急性毒性;给予4.6g/kg活络效灵丹,连续给药9 d,采用运动功能实验和行为学观察等评价药物亚慢性毒性或不良反应;活络效灵丹2.30g/kg灌胃42d,评价药物慢性毒性或不良反应。结果:文献检索提示,活络效灵丹及其11味组成中药在中文中医药文献中没有副作用或不良反应记载。在临床习用剂量下,《中华本草》和《世界卫生组织精选医用植物》中没有发现该方组成药物有毒副作用或不良反应。大鼠实验提示:(1)应用单次口服最大剂量9.2 g/kg,在14 d观察期中没有发现活络效灵丹对大鼠体征、体质量有明显影响,无大鼠死亡;(2)运动实验提示,每日喂服4.6 g/kg,连续9 d,活络效灵丹未造成运动功能的损害;(3)活络效灵丹9 d连续给药,弗氏完全佐剂致炎大鼠没有出现明显的行为改变、不良反应和体征(最大观察剂量4.6 g/kg),正常大鼠连续9日每日喂服活络效灵丹4.6 g/kg,在用药期间以及停药后14 d内,未出现明显的不良反应;(4)每日应用活络效灵丹2.30g/kg连续42 d喂服正常大鼠,未观察到大鼠出现明显的行为改变、不良反应和体征,以及血清生化和组织病理改变。结论:动物实验提示加减活络效灵丹安全,无明显毒副作用,且文献报道中未发现加减活络效灵丹临床试验或动物实验中有副作用。

活络效灵丹通过抑制脑组织炎症反应对缺血性脑损伤的保护作用

[目的]观察活络效灵丹是否能抑制脑缺血后炎症反应。【方法】使用朗格（Longer）线栓塞法大鼠脑缺血再灌注损伤模型，90只成年雄性SD大鼠，体重200-250g。随机分为5组：A、B、C、D、E组，每组6只大鼠。A为假手术组（sham）；B为损伤对照组（给予与药物等体积的生理盐水）；C、D，E组分别给与活络效灵丹（HLXLD）0．5、2．0、6．0g·kg^-1。采用TTC染色脑梗塞范围测定观察活络效灵丹对大鼠脑缺血损伤的作用，采用实时定量反转录PCK观察活络效灵丹对脑组织炎症反应介质肿瘤坏死因子（TumorNecrosisFactor—alpha，TNF—α），白介素1（Interleukin-1beta，IL-1β）的影响，采用蛋白质免疫印迹实验（WestemBlot）及磷酸化p-65蛋白抗体观察P-65蛋白磷酸化水平改变。[结果]与生理盐水对照组比较，活络效灵丹可以明显抑制缺血再灌注大鼠脑组织炎性因子的表达水平，显著缩小大鼠脑缺血再灌注损伤脑梗塞范围，明显改善脑缺血神经功能缺失症状。活络效灵丹明显抑制脑组织炎症信号通路NF—κB磷酸化反应。[结论]活络效灵丹对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用可能与其抑制脑组织炎症信号通路NF—κB磷酸化反应有关。

RP-HPLC双波长法同时测定活络效灵丹加减方中9种有效成分的含量

目的建立RP-HPLC双波长法同时测定活络效灵丹中3种丹参酮和6种乳香酸的含量。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Waters x BridgeTmC18柱（150 mm×4.6 mm,3.5μm）,流动相为体积分数为0.01%的磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^-1,检测波长为210 nm和254 nm,柱温为30℃。结果隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA、11-羰基-β-乳香酸（KBA）、11-羰基-β-乙酰乳香酸（AKBA）、α-乳香酸（α-BA）、β-乳香酸（β-BA）、乙酰基-α-乳香酸（A-α-BA）和乙酰基-β-乳香酸（A-β-BA）的质量浓度分别在0.252 0~8.064、0.157 2~5.030、0.937 5~30.00、3.156~101.0、25.10~803.2、6.250~200.0、6.813~218.0、13.50~432.0、12.50~400.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系（r≥0.999 3,n=6）,提取回收率均在97.2%~101.2%内。结论该方法可做为活络效灵丹中丹参酮类和乳香酸类化学成分的含量测定方法,为其质量控制提供参考依据。

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中阿魏酸的质量浓度及其比较药动学

目的建立测定阿魏酸在大鼠血浆中质量浓度的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法,并将该方法用于分别灌胃给予活络效灵丹、川芎提取物及当归提取物后正常大鼠及佐剂性关节炎大鼠体内阿魏酸的比较药动学研究。方法色谱柱为Shim-pack XR-ODS（75 mm×3.0 mm,2.2μm）柱,血浆样品酸化后经液-液萃取处理,流动相为甲醇-水（含体积分数0.1%甲酸溶液）（体积比30∶70）,负离子检测模式,扫描方式为多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）。结果阿魏酸在质量浓度2.5～1 250μg·L-1内线性关系良好,定量下限为2.5μg·L-1,日内和日间精密度（RSD）均〈15%,准确度（RE）在±15%以内,阿魏酸的平均提取回收率在88.6%～93.0%内,基质效应为86.4%～105.6%。结论该方法适用于阿魏酸在大鼠体内的比较药动学。

延胡索、乌药、金铃子散、小活络丹对神经病理性疼痛镇痛作用的比较

目的:比较延胡索、乌药、金铃子散、小活络丹对坐骨神经缩窄性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)的镇痛效果。方法:将SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=13)、生理盐水组(n=13)、延胡索组(n=16)、乌药组(n=10)、金铃子散组(n=20)、小活络丹组(n=7),共6组。采用坐骨神经结扎法造模,于造模后第4天各组给予相应的药物(延胡索组、乌药组、金铃子散组、小活络丹组大鼠均按剂量12 g·kg-1给药,假手术组、生理盐水组给予等量生理盐水)灌胃,连续14天。从开始给药起,每隔1天测定其热痛阈值。结果:与生理盐水组比较,延胡索、乌药、金铃子散、小活络丹各组大鼠给药后热痛阈值均升高,金铃子散的效果稍微优于延胡索,乌药、小活络丹效果较差。结论:延胡索、乌药、金铃子散、小活络丹对神经病理性疼痛均具有一定的镇痛作用,其中金铃子散的镇痛作用较强且起效快,其次为延胡索,乌药和小活络丹对该种神经病理性疼痛的镇痛效果较不稳定。

腹腔镜与中药结合保守治疗宫外孕

利用腹腔镜早期确诊，于异位妊娠局部注射小剂量氨甲喋呤，同时口服中药活络效灵丹为主方加减，配合外用定痛膏及子宫丸，即解决中药杀胚胎力量不足的缺，或，又充分发挥中药化瘀消，协助杀胚之长处。治疗组成功率（１００％）与中药组（７８．２６％）相比，有显著性差异（Ｐ＜０．０ｌ）。成功病例中两组相比，治疗组平均每日血ｈＣＧ下降快（Ｐ＜０．００５），平均腹痛消失时间及住院日缩短（Ｐ＜０．０１）。本疗法为最大限度保留生殖机能的新方法。

活络效灵丹加减方对大鼠急性软组织损伤的保护作用及机制初探

目的探讨活络效灵丹加减方对大鼠急性软组织损伤的保护作用,并对其可能机制进行初步探索。方法采用随机数字表法将72只大鼠分为正常组、模型组、对照组(阿司匹林,0.6g/d)和活络效灵丹低、中、高剂量组(活络效灵丹剂量分别为15、30、45g·kg^-1·d^-1),每组12只。除正常组大鼠外,其余各组大鼠采用击打法建立急性软组织损伤模型,模型建立后,活络效灵丹低、中、高剂量组大鼠每天分别通过灌胃方式给予相应剂量的活络效灵丹加减方,3次/d;对照组大鼠每天给予阿司匹林进行治疗,1次/d;正常组和模型组大鼠均给予等量纯化水。在灌胃给药后12h、1d、2d、3d、5d、7d6个时间点,观察并记录各组大鼠患侧伤肢肿胀及瘀斑等相关症候表现,评估损伤症候指数;分别测定第7天灌胃给药前和给药后30min、1h、2h,这4个时间点各组大鼠的基本痛阈值;连续灌胃7d后,测定各组大鼠全血高切(150/s)、中切(60/s)、低切(10/s)、血浆粘度及红细胞比容(HTC)5个血液粘度相关指标,Western blot法检测组织中Toll样受体2(TLR2)及核转录因子(NF-κB)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测组织中IL-1、IL-2、IL-3、IL-6、IL-8、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-10的表达。结果与模型组比较,络效灵丹加减方可改善急性软组织损伤大鼠患肢肿胀、瘀斑等症状,升高基本痛阈值、减轻疼痛,降低血液粘度、活血散淤,降低TLR2、NF-κB及IL-1、IL-2、IL-3、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α的表达,升高IL-10的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论活络效灵丹加减方,对大鼠急性软组织损伤具有一定保护作用,该作用可能与抑制TLR2/NF-κB信号通路,调节下游炎症因子的表达有关。

经皮椎间孔镜配合活络效灵丹治疗腰椎间盘突出症临床观察

目的：观察经皮椎间孔镜技术配合中药活络效灵丹加味治疗腰椎间盘突出症有效性及安全性。方法：选择自2011年5月-2013年5月56例单节段椎间盘突出症患者：男36例、女20例;年龄18-60岁,平均46.5岁。均存在明显的腰痛及下肢放射痛或麻木,患者术前完善腰椎正侧位、动力位X线片、CT、MRI.局麻下完成手术,术后通过辨证论治给以口服活络效灵丹加味,连续服用两周。采用JOA下腰痛评分（日本骨科学会）,视觉模拟评分系统（VAS）评分。结果：经皮椎间孔镜配合活络效灵丹治疗效果明显;术后1周、3个月、1年均明显优于单纯椎间孔镜治疗组（P〈0.05）。结论：经皮椎间孔配合中药活络效灵丹加味治疗腰椎间盘突出症安全、有效,中西医结合治疗取得良好效果。

活络效灵丹对大鼠膝骨关节炎的修复作用及机制

目的 探究活络效灵丹对大鼠膝骨关节炎的治疗作用及可能机制。方法 SD大鼠30只随机分成对照组(Control组)、模型组(KOA组)和活络效灵丹组(HLXL组),每组10只。HE染色观察软骨组织形态学变化;TUNEL法检测软骨组织细胞凋亡;免疫荧光检测软骨组织骨重塑介质表达;ELISA法检测关节液炎症因子水平;Western blot检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。结果 活络效灵丹能改善软骨组织形态;降低软骨组织细胞凋亡水平;降低RANKL表达;增加OPG表达;抑制关节液炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-18水平;激活PI3K/AKT信号通路。结论 活络效灵丹能改善大鼠膝骨关节炎,其机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。