凝血酶与神经细胞凋亡的实验观察

目的 观察凝血酶与脑细胞凋亡的关系及使用凝血酶抑制剂(如水蛭素)及钙离子拮抗剂(尼莫地平),能否减轻凝血酶对脑细胞的毒性损伤、存在治疗的有效时间。方法 分别以不同剂量的凝血酶注入SD大鼠尾状核,建立SD大鼠模型,在普通光镜(采用HE染色,TUNEL法)及电镜下观察脑细胞凋亡。SD大鼠随机分为6组。1组:生理盐水组;2组:小剂量凝血酶组;3组:大剂量凝血酶组;4组:小剂量凝血酶与小剂量水蛭素同时注入组;5组:大剂量凝血酶与大剂量水蛭素同时注入组;6组:尼莫地平组。每组每时相(4h、24h、48h、3d、7d)各5只SD大鼠)。结果 建立动物模型后各时相点大剂量凝血酶组凋亡细胞数与其余各组比P<O.01,尼莫地平组与其余各组比P<O.05,大剂量凝血酶组与尼莫地平组比P>O.05。结论 大剂量凝血酶可导致神经细胞凋亡.早期(4h)即出现,其高峰时间在24～48h,可持续1周以上,水蛭素能特异性抑制凝血酶的作用,而钙离子拮抗剂可减少或延迟凋亡细胞的出现。脑出血后血肿释放的凝血酶是早期诱导细胞凋亡的重要因素,如能尽早抗凝血酶治疗或抗凋亡治疗(本实验提示最好在48h内),将为脑出血治疗提供新的途径。

凝血酶与脑水肿的实验研究

目的 观察凝血酶与脑水肿的关系及使用凝血酶抑制剂 (如水蛭素 )、钙离子拮抗剂(尼莫地平 )是否能减轻凝血酶对脑细胞的毒性损伤 ,是否存在治疗的有效时间。方法 分别以不同剂量的凝血酶注入SD大鼠尾状核 ,建立SD大鼠模型 ,采用干湿重法及普通光镜 (HE染色 )观察脑水肿情况。SD大鼠随机分为 6组。 1组 :生理盐水组 ;2组 :小剂量凝血酶组 ;3组 :大剂量凝血酶组 ;4组 :小剂量凝血酶与小剂量水蛭素同时注入组 ;5组 :大剂量凝血酶与大剂量水蛭素同时注入组 ;6组 :尼莫地平组。每组每时相 (4h、2 4h、48h、3d、7d)各 5只SD大鼠。结果 大剂量凝血酶组脑含水量与其余各组比P <0 0 1,尼莫地平组与其余各组比P <0 0 5 ,大剂量凝血酶组与尼莫地平比P <0 0 5 ,而 3d和 7d二个时相点 6组组间无明显差异P >0 0 5。结论 大剂量凝血酶可早期 (4h)引起明显脑水肿 ,其高峰时间为 2 4～ 48h ,3至 7天后水肿逐渐消褪且趋于正常 ,凝血酶致脑水肿作用可被其特异性抑制剂水蛭素有效抑制 ,钙离子拮抗剂 (尼莫地平 )早期即能减轻凝血酶致脑水肿作用。研究提示如能在脑出血早期 (特别是 4～ 2 4h ,这一时期可能是治疗脑出血的关键时期 )有效抑制凝血酶致水肿的作用 (如使用水蛭素及尼莫地平等 ) ,将会明显减轻脑出血后脑?

凝血酶与神经细胞骨架蛋白的研究

目的 观察凝血酶与神经细胞骨架蛋白的关系及使用凝血酶抑制剂 (如水蛭素 )及钙离子拮抗剂 (尼莫地平 )是否能减轻凝血酶对脑细胞的毒性损伤 ,是否存在治疗的有效时间。方法 分别以不同剂量的凝血酶注入SD大鼠尾状核 ,建立SD大鼠模型。采用免疫组化法观察神经细胞骨架蛋白的改变。SD大鼠随机分为 6组。 1组 :生理盐水组 ;2组 :小剂量凝血酶组 ;3组 :大剂量凝血酶组 ;4组 :小剂量凝血酶与小剂量水蛭素同时注入组 ;5组 :大剂量凝血酶与大剂量水蛭素同时注入组 ;6组 :尼莫地平组。每组每时相 (4h、2 4h、4 8h、3d、7d)各 5只SD大鼠。结果 大剂量凝血酶的早期 (4h)即能引起细胞骨架蛋白的变化 ,2 4h～ 4 8h可进一步导致可逆或不可逆损伤 ,3至 7d则主要造成神经细胞不可逆损伤即坏死 ,而生理盐水 ,小剂量疑血酶无此作用。水蛭素可拮抗凝血酶的这种作用 ,尼莫地平组 4h神经细胞骨架蛋白无明显变化 ,2 4h～ 4 8h可导致神经细胞可逆损伤 ,3至 7d则主要造成神经细胞不可逆损伤。结论 钙离子拮抗剂 (尼莫地平 )能减轻或延缓凝血酶对脑细胞的毒性作用 ,有保护神经元的作用 ,为进一步治疗赢得时间。由以上结果可推测早期脑水肿是由于凝血酶对脑细胞的毒性作用所致 ,这种作用 (可能通过凝血酶受体 )可引起神经细?