新鲜山羊输卵管液对体细胞克隆和转基因胚胎体外发育的影响

用添加不同浓度发情期山羊输卵管液的培养基,对正常单细胞受精卵、注射外源基因后受精卵和细胞核移植后山羊重构卵进行体外培养,探讨其对胚胎体外发育的影响。结果表明:添加20%输卵管液后正常受精卵桑椹胚分裂率为26.1%(11/42),极显著(P<0.01)高于对照组(未添加输卵管液)(7.6%)、50%输卵管液组(4.7%)和100%输卵管液组(0);添加20%输卵管液后,体外培养显微注射转基因受精卵有20.0%(8/40)发育至16-细胞,极显著(P<0.01)高于对照组(6.7%)和50%输卵管液组(4.8%);细胞核移植重构卵在含20%输卵管液的培养基中桑椹胚分裂率为7.3%,与体内培养桑椹胚分裂率(11.1%)差异不显著。在体外培养条件下,添加20%输卵管液可明显提高正常受精卵、转基因受精卵和克隆重构卵的分裂率和发育率。

蛋鸡输卵管积液中新城疫强毒的分离鉴定与分子特征

从病鸡输卵管积液中分离了一株新城疫病毒（命名为SHY06），经蚀斑纯化后测定其鸡胚平均死亡时间和1日龄雏鸡脑内致病指数分别为52h和2．0，F蛋白裂解位点氨基酸序列为112-RRQKRF-117，符合强毒NDV的特征。根据F基因（1-374 bp）对SHY06和19个NDV参考毒株进行基因分型结果表明SHY06属于基因Ⅶ型。F基因氨基酸序列同源性比较显示SHY06与基因Ⅶ型NDV分离株同源性为97．5％～99．5％，与基因Ⅸ型NDV（F48E9等）同源性为91．7％～92。4％，与基因Ⅱ型（疫苗株LaSota等）同源性为89．2％。HN基因氨基酸序列同源性比较显示SHY06与近年来分离株同源性较高，为92．1％～99．7％，与疫苗株（LaSota）和标准强毒株（F48E9）同源性较低，分别为87．6％和89．9％。

引起种(蛋)鸭输卵管积液综合征的新发病毒——C型禽偏肺病毒

【目的】明确引起种(蛋)鸭特征性输卵管积液和产蛋下降的新发疫病[俗称种(蛋)鸭输卵管积液综合征]的病原。【方法】对自闽粤赣浙皖桂等地产蛋率较高的部分鸭群表现以输卵管内乳糜性积液、黏膜出血水肿增厚及不同程度产蛋下降为特征的病(死)麻鸭、樱桃谷种鸭和种番鸭中采集的样品(输卵管积液、输卵管黏膜、卵巢和肝脾脏器),开展鸭已知病原核酸监测、病原分离鉴定和开产麻鸭人工感染试验。【结果】细菌分离显示,输卵管积液里未分离到细菌,排除细菌感染引起;经病毒核酸监测,只有C型禽偏肺病毒(Avain metapneumoviurs subgroup C,aMPV/C)阳性,未检测到其他引起禽产蛋异常的病毒;以aMPV/C单一阳性的样品经鸭胚进行病毒分离与传代,发现接种鸭胚未见死亡,但胚体表面稍水肿和出血、肝脏出血;对第5代鸭胚液进行RT-PCR检测,结果显示a MPV/C分离阳性率为72.2%;对获得的4株分离株(JX2126、FJ2228、FJ2375和GD2381株)的基因片段进行测序和序列分析发现,该片段与最早报道的番鸭a MPV/C法国分离株(Muscovy duck/1999/99178/France)同源性最高,为96.1%,而与A、B、D型禽偏肺病毒(Avain metapneumoviurs subgroup A,B,D,aMPV/A,B,D)分离株的同源性仅分别为67.8%~68.7%、66.1%~66.8%和71.4%,与人偏肺病毒(Human metapneumoviurs,hMPV)分离株的同源性为67.7%~68.3%;遗传进化分析表明,以上4株分离株与a MPV/C处于同一进化分支上,而与其他亚型aMPV和hMPV亲缘关系较远;经开产麻鸭人工感染试验,成功复制出与自然感染病例相同的临床病症,并能回收到病毒。【结论】明确引起种(蛋)鸭输卵管积液综合征的病原为C型禽偏肺病毒。本研究为该病的快速准确诊断和精准防控提供科学依据。

输卵管积液对小鼠胚胎体外发育的影响

目的 :了解输卵管积液是否具有胚治毒性。方法 :收集兔输卵管液和机械诱导的输卵管积液 ;小鼠超数排卵 ,收集 2 -细胞胚胎 ,随机分配到含有不同浓度输卵管积液、输卵管液 (正常对照 )和培养液 (空白对照 )中培养 ,观察并记录胚胎形态 ,同时测定新形成囊胚的细胞数和有丝分裂指数。结果 :1 0 0 %输卵管积液组囊胚形成率和胚胎孵化率均明显低于两对照组 (P<0 .0 0 1 ) ;而低浓度 (2 0 %和 1 0 % )积液组囊胚形成率和胚胎孵化率与两对照组相比 ,均无明显差异。各实验组囊胚的细胞数和有丝分裂指数均明显低于两对照组(P<0 .0 5)。结论 :机械诱导的输卵管积液 。

体外受精-胚胎移植中106例宫腔积液分析

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中宫腔积液产生的原因及其对助孕结局的影响。方法:回顾性分析2006年1月至2007年12月间在我院接受IVF助孕的1963个周期,其中106个周期出现宫腔积液。根据有无输卵管积液和宫腔积液分组,分析宫腔积液患者不育原因、超排卵反应及妊娠率。结果:输卵管积液组宫腔积液发生率为7.7%,无输卵管积液组宫腔积液发生率为4.8%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),两组发生卵巢过度刺激综合征(OHSS)的患者宫腔积液发生率分别为15.2%、9.1%,均高于同组未发生OHSS的患者(P<0.05);输卵管积液组患者出现宫腔积液后临床妊娠率显著下降(P<0.05)。结论:控制性超排卵中输卵管积液和OHSS均增加宫腔积液发生率;除输卵管积液患者外,助孕中出现宫腔积液IVF妊娠率不受影响。

输卵管积水对小鼠胚胎体外发育能力的影响

目的探讨输卵管积水对小鼠胚胎体外发育能力的影响。方法收集人输卵管积水,小鼠促超排卵,收集2细胞胚胎和囊胚,随机分配到含有不同浓度输卵管积水的培养液中,观察胚胎的发育,计算成囊率,囊胚孵出率。结果输卵管积水组的胚胎成囊率和囊胚孵出率低于无积水组,并呈剂量依赖性。结论输卵管积水能显著影响胚胎的早期发育潜能。

人输卵管积液对小鼠胚胎基质金属蛋白酶分泌的影响

目的探讨人输卵管积液对小鼠胚胎体外培养胚胎发育及着床能力的影响机制。方法收集人输卵管积液,小鼠促超排卵,自然受精后适时收集囊胚,并将其随机分配到含有不同浓度的输卵管积液的培养液中,进行体外培养,观察囊胚的发育,计算囊胚孵出率;采用逆转录聚合酶链反应及免疫印迹法测定囊胚和培养液中的基质金属蛋白酶9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)的含量。结果输卵管积液组的囊胚孵出率低于无积液组,囊胚及培养液中的MMP-9和TIMP-1低于无积液组,并呈剂量依赖性,MMP-9/TIMP-1随积液浓度增加而降低。结论输卵管积液通过降低胚胎MMP-9/TIMP-1的分泌和影响胚胎早期发育潜能,从而影响胚胎着床的能力。

输卵管积水对人早期胚胎体外发育的影响

目的:探讨人输卵管积水(HSF)对人早期胚胎体外发育的影响。方法:因输卵管积水、阻塞行IVF/ICSI-ET患者取卯时穿刺抽吸HSF30例,送细菌培养及成分分析等。同期收集161例行IVF/ICSI-ET患者受精第1日的261枚异常受精卵(1PN,≥3PN),随机分成3组,分别培养于含不同体积分数的HSF培养液中:A组(50%HSF,n=91)、B组(100%HSF,n=89)和C组(对照组,0%HSF,n=81),观察胚胎发育情况,计算卵裂率、优质胚胎率、囊胚形成及孵出率、优质囊胚率等。结果:4例HSF细菌培养阳性(13.33%);HSF中总蛋白及葡萄糖显著低于该患者同目的血清水平。与C组比,未放入卵子的A、B组培养液平衡后,pH值升高,B组渗透压降低(P<0.05)。3组卵裂率、优质胚胎率无统计学差异(P>0.05);囊胚形成率及优质囊胚率A组(15.38%,21.43%)、B组(11.24%,10%)明显低于C组(28.40%,82.61%)(P<0.05)。结论:HSF影响人囊胚形成及囊胚质量,可能与HSF中低葡萄糖、低蛋白、低渗透压、高pH有关,自然状态下可能还与存在一定比例的细菌有关。

积水输卵管液对精子运动及形态学的影响

目的:通过体外研究积水输卵管液对精子运动及形态学的影响,探讨输卵管积水引起不孕的原因,并为单侧输卵管积水(对侧输卵管通畅)患者的处理提供依据。方法:优化处理后的高质量的精子体外与输卵管积水患者的输卵管液(积水组n=18)及正常输卵管液(对照组n=18)孵育2h、7h和24h后,精子分析仪(CASA)测量精子的各项运动参数,应用精子Diff-Quick涂片染色法分析精子形态。结果:①培养2h、7h和24h后,各时间点积水组精子的前向性运动百分率、平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)、平均路径运动速度(VAP)、快速直线运动精子活率(MOT)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)及前向性(STR)各项精子运动参数均低于对照组(P<0.05),且输卵管积水加快精子的运动速度参数(VCL、VSL、VAP)随时间延长而降低的速度(P<0.05)。②培养2h、7h和24h后,积水组与对照组精子的正常形态率对比无统计学差异,且不随时间延长而改变(P>0.05)。结论:输卵管积水在体外能降低精子的前向性运动百分率、精子运动速度参数(VSL、VCL、VAP)及精子运动方式参数(MOT、LIN、WOB、STR)各项运动指标,并提示输卵管积水不仅干扰了精子活动力,并可能对精子的获能产生不良影响,推测体内输卵管积水对精子产生一定的损害作用,从而影响受孕,但对精子正常形态精子率未有明显影响。

八珍汤化裁治疗生殖系统疾病拾萃

金保方教授临床运用古方八珍汤化裁治疗生殖系统疾病,疗效甚佳。文章介绍了其辨治女性排卵功能障碍、子宫内膜过薄、输卵管积液、子宫腺肌症所导致不孕症,以及男性少弱精子症和免疫性不育症的经验各举1例,并加以分析,以飨同道;充分体现其整体论治的理念,辨病与辨证相结合的思维方式。

辅助生殖技术中围胚胎移植期宫腔积液及其处理

辅助生殖技术(ART)助孕治疗中经常出现宫腔积液,其与控制性卵巢刺激雌激素水平显著高于生理状态有关,也与合并输卵管积水、子宫内膜炎、子宫瘢痕憩室及生殖道畸形和病变等相关。异常的宫腔积液会影响胚胎发育、子宫内膜容受性,进而干扰胚胎种植,导致ART的助孕失败。文章就ART中围胚胎移植期出现宫腔积液的原因,以及其对ART助孕结局的影响和处理方式进行梳理和总结。