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ITS2 barcoding DNA region combined with high resolution melting(HRM) analysis of Hyoscyami Semen, the mature seed of Hyoscyamus niger 被引量:5
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作者 XIONG Chao HU Zhi-Gang +7 位作者 TU Yuan LIU He-Gang WANG Ping ZHAO Ming-Ming SHIi Yu-Hua WU Lan SUN Wei CHEN Shi-Lin 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2016年第12期898-903,共6页
Hyoscyami Semen, the mature dried seed of Hyoscyamus niger L., has long been used as a traditional Chinese medicine to treat human diseases. Hyoscyami Semen is found in local markets in China. In markets, sellers and ... Hyoscyami Semen, the mature dried seed of Hyoscyamus niger L., has long been used as a traditional Chinese medicine to treat human diseases. Hyoscyami Semen is found in local markets in China. In markets, sellers and buyers commonly inadvertently mix the seeds of H. niger with the seeds of related species such as Hygrophila salicifolia(Vahl) Nees, Astragalus complanatus R. Br., Cuscuta australis R. Br., Cuscuta chinensis Lam., and Impatiens balsamina L. because of their similar morphologies or similar names. Thus, developing a reliable method for discriminating H. niger seeds from its adulterants is necessary to reduce confusion and ensure the safe use of Hyoscyami Semen. The present study was designed to evaluate the efficiency of high-resolution melting analysis combined with DNA barcoding(Bar-HRM) with internal transcribed spacer 2 to discriminate H. niger. Our results show that Bar-HRM successfully identified the adulterants and detected the proportion of H. niger DNA extract within an admixture. In particular, HRM detected H. niger DNA extract in A. complanatus DNA extract at concentrations as low as 1%. In conclusion, the Bar-HRM method developed in the present study for authenticating H. niger is rapid and cost-effective. It can be used in the future to guarantee the purity of Hyoscyami Semen for the clinical use. 展开更多
关键词 hyoscyami semen Bar-HRM Identification Clinical safe medication
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大孔树脂分离纯化天仙子总生物碱的研究 被引量:25
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作者 李岩 赵欣 +4 位作者 李晓静 孙婷 孟庆勇 程雪梅 王长虹 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期89-94,共6页
目的研究大孔树脂分离天仙子中总生物碱的最佳工艺条件。方法采用HPLC法测定,以东莨菪碱、莨菪碱的吸附量和解吸率为考察指标,分别考察东莨菪碱、莨菪碱在5种类型的大孔树脂(LSA5B、LSA21、LSD001、HPD600、D101)上的吸附和解吸附行为,... 目的研究大孔树脂分离天仙子中总生物碱的最佳工艺条件。方法采用HPLC法测定,以东莨菪碱、莨菪碱的吸附量和解吸率为考察指标,分别考察东莨菪碱、莨菪碱在5种类型的大孔树脂(LSA5B、LSA21、LSD001、HPD600、D101)上的吸附和解吸附行为,并分析提取液p H、吸附体积流量、洗脱体积流量等参数对分离的影响。结果所比较的5种树脂中,LSA5B型大孔吸附树脂对天仙子总生物碱分离纯化效果最好,富集能力强,最佳富集工艺条件为以1.5 BV/h的体积流量上样,4 BV蒸馏水洗去水溶性杂质,最佳的洗脱溶剂为体积分数为50%乙醇,最佳洗脱体积流量为1.5 BV/h,洗脱用量为10 BV,东莨菪碱和莨菪碱的洗脱率可达74%和86%。结论经LSA5B型大孔吸附树脂纯化的天仙子总生物碱中东莨菪碱、莨菪碱可达1.85%、4.03%。 展开更多
关键词 天仙子 莨菪碱 东莨菪碱 大孔吸附树脂
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HPLC法测定天仙子东莨菪碱和莨菪碱的含量 被引量:7
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作者 李岩 孟庆勇 +4 位作者 赵欣 孙婷 李晓静 程雪梅 王长虹 《新疆医科大学学报》 CAS 2015年第1期64-66,共3页
目的:建立天仙子药材中东莨菪碱和莨菪碱的高效液相测定方法。方法采用 Symmetrix ODS-H色谱柱,以乙腈-0.1%三氟乙酸水(14∶86)为流动相,检测波长210 nm,流速1.0 mL/min,测定天仙子药材中东莨菪碱和莨菪碱的含量。结果氢溴... 目的:建立天仙子药材中东莨菪碱和莨菪碱的高效液相测定方法。方法采用 Symmetrix ODS-H色谱柱,以乙腈-0.1%三氟乙酸水(14∶86)为流动相,检测波长210 nm,流速1.0 mL/min,测定天仙子药材中东莨菪碱和莨菪碱的含量。结果氢溴酸东莨菪碱和硫酸阿托品的线性范围分别为4.02~513.64μg/mL (r =0.9999)和4.00~512.00μg/mL (r=0.9998),平均回收率分别为98.41%和98.79%。结论 HPLC法测定准确、可控,能快速、简便地控制天仙子药材的质量。 展开更多
关键词 天仙子 莨菪碱 东莨菪碱 高效液相色谱法
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天仙子及其混伪品的微性状鉴别 被引量:5
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作者 杨青山 吴秋芳 +3 位作者 姚强 周建理 谢冬梅 孟祥松 《安徽中医药大学学报》 CAS 2014年第4期89-92,共4页
目的对天仙子及其混伪品进行鉴别。方法查阅文献,在明确天仙子及其混伪品种类的基础上,应用中药微性状鉴定法对其进行鉴别研究。结果天仙子及其混伪品呈现不同的微性状特征,在性状、大小、色泽、表面光滑程度、表面附属物等方面有较明... 目的对天仙子及其混伪品进行鉴别。方法查阅文献,在明确天仙子及其混伪品种类的基础上,应用中药微性状鉴定法对其进行鉴别研究。结果天仙子及其混伪品呈现不同的微性状特征,在性状、大小、色泽、表面光滑程度、表面附属物等方面有较明显的区别。结论利用中药微性状鉴定法可以对天仙子及其混伪品进行鉴别。 展开更多
关键词 天仙子 混伪品 微性状鉴别
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天仙子与其伪品的电镜扫描观察 被引量:5
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作者 许欣荣 赵华英 +1 位作者 陈永林 霍德兰 《山东医科大学学报》 1992年第1期82-84,共3页
对抗癌中药天仙子Semen Hyoscyami与其伪品水蓑衣Hygrophila salici-folia(Vahl)Nees和麦瓶草Silene conoidea L.的种子做了电镜扫描观察,为鉴别天仙子的真伪提供了超微结构的鉴别依据。
关键词 天仙子 水蓑衣 麦瓶草 鉴定
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细小种子类毒性药材天仙子的DNA条形码鉴定 被引量:7
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作者 凃媛 熊超 +3 位作者 师玉华 明孟碟 胡志刚 黄必胜 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第11期2337-2342,共6页
目的:毒性中药的误用滥用对人类健康造成了严重危害。本研究应用DNA条形码技术对细小种子类毒性药材天仙子及其混淆品进行鉴定,为中药材的安全使用提供保障。方法:使用试剂盒提取61份样本的总DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序... 目的:毒性中药的误用滥用对人类健康造成了严重危害。本研究应用DNA条形码技术对细小种子类毒性药材天仙子及其混淆品进行鉴定,为中药材的安全使用提供保障。方法:使用试剂盒提取61份样本的总DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,应用Codon Code Aligner v 4.25对测序峰图进行校对拼接,去除低质量序列及引物区获得ITS2序列。用MEGA 6.0软件计算物种种内和种间Kimura2-Parameter(K2P)遗传距离,分析变异位点并构建邻接(NJ)系统聚类树。结果:天仙子的基原植物莨菪种内最大K2P遗传距离为0.005,远小于其与混淆品之间的种间最小K2P遗传距离(0.360);NJ树结果显示莨菪独自聚为一支,表现出良好的单系性,与混淆品明显区分开。结论:ITS2序列能准确鉴别毒性药材天仙子及其混淆品,为保障临床用药的安全提供了有效的技术手段。 展开更多
关键词 天仙子 毒性药材 ITS2序列 鉴定
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毒性中药天仙子有效成分的液相色谱-质谱法定性定量分析 被引量:5
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作者 祁文娟 王兆基 +5 位作者 吴志成 刘秋铭 粟晓黎 林瑞超 郑秀云 冯国培 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期599-602,共4页
目的:总结中药天仙子毒性毒理,针对现有质量标准检定方法建立一个专属性较强的毒性药效成分定性与定量分析方法。方法:采用Restek Allure PFP Propyl(2.1 mm×100 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-醋酸铵缓冲液(20∶80),流速200μL.min... 目的:总结中药天仙子毒性毒理,针对现有质量标准检定方法建立一个专属性较强的毒性药效成分定性与定量分析方法。方法:采用Restek Allure PFP Propyl(2.1 mm×100 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-醋酸铵缓冲液(20∶80),流速200μL.min-1,分流比率9∶1,进样量10μL;正离子多反应监测模式监测,扫描范围为m/z 200~350的高效液相色谱-质谱联用方法,对天仙子中毒性药效成分进行定性鉴别和含量测定。结果:利用东莨菪碱及阿托品的液相色谱分离及其特征质谱-质谱图,对3批不同产地药材进行定性定量分析,总莨菪碱(以阿托品计)含量范围为0.02%~0.05%之内。结论:本文建立的液相色谱-质谱联用技术具有专属性强等优点,可为质量标准修订提供参考。 展开更多
关键词 中药材 莨菪 天仙子(莨菪子) 东莨菪碱 阿托品 高效液相色谱-质谱联用 毒性药效成分 定性鉴别 含量测定 标准修订
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