EMIA-ALK融合基因阳性非小细胞肺癌的诊疗进展

肺癌是世界范围内最常见和最致命的恶性肿瘤之一。非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer， NSCLC）约占肺癌的80．0％～85．0％。由于早期症状不明显，多数患者确诊时多为中晚期，传统的治疗方法如手术、放疗、化疗能改善患者的近期疗效，但对生存期的延长作用有限。近年来，肺癌的靶向药物研究取得很大进展，其中抗表皮生长因子受体（EGFR）和棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴激酶融合基因（EML4-ALK）的制剂已进入临床，并取得较好的治疗效果。

Sulforaphane protects liver injury induced by intestinal ischemia reperfusion through Nrf2-ARE pathway

AIM: To investigate the effect of sulforaphane (SFN) on regulation of NF-E2-related factor-2 (Nrf2)-antiox-idant response element (ARE) pathway in liver injury induced by intestinal ischemia/reperfusion (I/R). METHODS: Rats were divided randomly into four ex-perimental groups: control, SFN control, intestinal I/R and SFN pretreatment groups (n = 8 in each group). The intestinal I/R model was established by clamping the superior mesenteric artery for 1 h and 2 h reperfu-sion. In the SFN pretreatment group, surgery was performed as in the intestinal I/R group, with intraperitoneal administration of 3 mg/kg SFN 1 h before the op-eration. Intestine and liver histology was investigated. Serum levels of aspartate aminotransferase (AST), and alanine aminotransferase (ALT) were measured. Liver tissue superoxide dismutase (SOD), myeloperoxidase (MPO), glutathione (GSH) and glutathione peroxidase (GSH-Px) activity were assayed. The liver transcription factor Nrf2 and heme oxygenase-1 (HO-1) were determined by immunohistochemical analysis and Western blotting analysis.RESULTS: Intestinal I/R induced intestinal and liver injury, characterized by histological changes as well as a signif icant increase in serum AST and ALT levels (AST: 260.13 ± 40.17 U/L vs 186.00 ± 24.21 U/L, P < 0.01; ALT: 139.63 ± 11.35 U/L vs 48.38 ± 10.73 U/L, P < 0.01), all of which were reduced by pretreatment with SFN, respectively (AST: 260.13 ± 40.17 U/L vs 216.63 ± 22.65 U/L, P < 0.05; ALT: 139.63 ± 11.35 U/L vs 97.63 ± 15.56 U/L, P < 0.01). The activity of SOD in the liver tissue decreased after intestinal I/R (P < 0.01), which was enhanced by SFN pretreatment (P < 0.05). In ad-dition, compared with the control group, SFN markedly reduced liver tissue MPO activity (P < 0.05) and elevat-ed liver tissue GSH and GSH-Px activity (P < 0.05, P < 0.05), which was in parallel with the increased level of liver Nrf2 and HO-1 expression.CONCLUSION: SFN pretreatment attenuates liver injury induced by intestinal I/R in rats, attributable to the antioxidant effect through Nrf2-ARE pathway.

腹膜透析患者首发腹膜炎的临床特征与拔管风险

目的探讨腹膜透析患者首发腹膜炎的诱因、临床特征、致病菌及转归情况,为临床防治腹膜炎提供参考。方法本中心共有273例腹膜透析患者,本研究选择2002年8月至2013年10月所有在本院住院的首次发生腹膜炎患者67例,分析首发腹膜炎患者(发病组)与未发生腹膜炎患者(未发病组)的临床指标;根据首次发生腹膜炎患者的临床转归分为治愈组和拔管组,比较两组临床、实验室指标及腹膜炎病因等,并采用logistic回归分析拔管危险因素。所有患者确诊腹膜炎后立即留取标本培养并经验性抗感染治疗,再根据临床表现、病原微生物培养及药敏结果调整使用敏感抗生素;收集人口学资料、基础肾脏病、透析龄、诱因、临床指标、透出液常规、涂片和细菌培养结果、治疗方法、治疗时间、治疗效果、临床转归等。结果首发腹膜炎患者存在年龄偏大[发病组均龄(53.1±14.9)岁vs.未发病组均龄(46.6±14.3)岁]、低蛋白血症[白蛋白:发病时(27.4±4.0)g/L vs.未发病时(32.5±5.7)g/L]和操作不当(53.7%)情况。拔管组有更长透析龄[24(11.4,42)月vs.13.2(4.8,18.84)月,P=0.020],更严重低蛋白血症[(24.5±5.8)g/L vs.(29.3±4.1)g/L,t=-4.088,P=0.000],而且拔管组腹膜炎病因以非操作相关为主(61%vs.36%,χ2=13.075,P=0.011)、非G+菌感染为主(74%vs.41%,P=0.000)。结论首发腹膜炎患者存在较高年龄、营养欠佳、非规范化操作等情况,而长透析龄、严重低蛋白血症、非操作相关、非G+菌感染的患者有较高的拔管风险。

吡格列酮对糖尿病合并高尿酸血症患者血尿酸及颈动脉内膜IMT的影响

目的探讨吡格列酮对2型糖尿病(T2DM)合并高尿酸血症患者血尿酸的影响,以及尿酸水平与颈动脉内膜中层厚度(IMT)的关系。方法将106例T2DM合并高尿酸血症患者分两组治疗,治疗组及对照组均行常规降糖治疗,治疗组加服吡格列酮15 mg/次,1次/d,疗程均为12周;根据治疗前颈动脉超声结果分为正常组、IMT增厚组和斑块组,检测并比较各组血尿酸变化。结果与对照组治疗后比较,治疗组血尿酸明显降低(P<0.01);颈动脉内膜IMT随血尿酸水平升高而增厚。结论高尿酸血症是T2DM大血管病变的危险因素,吡格列酮可降低其血尿酸水平,延缓大血管病变发生。

黄芩茎叶总黄酮预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨黄芩茎叶总黄酮(Scutellaria baiculensis stem-leaf total flavonoid,SSTF)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法40只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和SSTF预处理组。SSTF组大鼠于术前1周分别灌胃不同剂量的SSTF〔(17.5、35、70mg/(kg.d)〕,另两组给等量生理盐水。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌缺血再灌注模型。缺血30min、再灌注2h后,观察大鼠心电图的变化;并用免疫组织化学法检测心肌组织中Bax和Bcl-2蛋白表达情况。结果SSTF抑制了缺血再灌注损伤大鼠心电图T波升高,降低了心律失常发生率。缺血再灌注组Bcl-2蛋白表达阳性细胞率明显比假手术组低(P<0.05),Bax蛋白表达阳性细胞率明显较假手术组高,而SSTF预处理组Bcl-2蛋白表达阳性细胞率明显高于缺血再灌注组(P<0.05),Bax蛋白表达阳性细胞率明显较缺血再灌注组为低(P<0.05)。结论SSTF预处理对缺血再灌注的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与上调Bcl-2和下调Bax蛋白表达进而抑制心肌细胞凋亡有关。

体外诱导建立NCI-H2228/Crizotinib耐药细胞株的方法学探讨及鉴定分析

背景与目的小分子靶向药物发生耐药的机制及寻找克服耐药的手段是目前提高临床疗效需要迫切解决的问题。本研究探讨采用不同方法建立对Crizotinib耐药的非小细胞肺癌NCI-H2228/Crizotinib细胞株的可行性及鉴定分析,为深入研究Crizotinib耐药发生的机制并寻找克服耐药的手段提供实验基础和理论依据。方法采用逐步增加药物浓度和化学诱变剂处理NCI-H2228细胞,诱导细胞对Crizotinib耐药。MTT法检测亲本细胞和耐药细胞的50%抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)和群体倍增时间。RT-PCR和Western blot实验检测棘皮动物微管相关蛋白样4-间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule-associated protein like 4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)基因表达。对耐药细胞和亲本细胞的EML4-ALK基因全长测序并对比分析发生耐药的机制。结果逐步增加药物浓度的方法耗时过长,细胞恢复生长缓慢,不能有效诱导NCI-H2228细胞对Crizotinib耐药;化学诱变剂ENU可以在短时间内诱导NCI-H2228细胞对Crizotinib耐药[IC50=(3.810±1.100)μmol/L,P=0.002,9,vs亲本细胞]。耐药细胞EML4-ALK基因发生点突变的频率高于亲本细胞。结论化学诱变剂诱导细胞耐药操作简便,可有效缩短实验流程,为深入研究耐药发生机制,寻找克服靶向药物耐药的手段提供了前期技术方法和实验依据。

存在EML4-ALK融合基因非小细胞肺癌患者的临床和病理学特征

研究一：Takahashi T，Sonobe M，Kobayashi M，et al．Clinicopathologic features of non—small-cell lung cancer with EML4-ALK fusion gene[J]．Ann Surg Oncol，2010，17（3）：889—897．

SAFE通路介导的炎症因子在大鼠心肌缺血再灌注致脑损伤中的作用

目的探讨生存活化因子增强通路(SAFE)介导的炎症因子在大鼠心肌缺血再灌注致脑损伤中的作用。方法 24只雄性SD大鼠按随机数表法分为三组(n=8):假手术组(Sham)、心肌缺血/再灌注组(IR)、心肌缺血/再灌注+AG490组(IR+AG490)。IR组及IR+AG490组通过结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min,再灌注120 min建立大鼠心肌缺血/再灌注模型。取大鼠脑组织,Western blot检测Janus激酶2(Jak2)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)蛋白表达及炎症因子白介素1(IL-1),白介素6(IL-6),白介素8(IL-8),TUNEL法检测细胞凋亡,比色法检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)活性。结果与Sham组比较,IR组p-Jak2[(1.8±0.13)vs(1.0±0)]、p-STAT3[(1.6±0.08)vs(1.0±0)]表达增高,炎症因子IL-1[(3.3±0.16)vs(1.0±0)]、IL-6[(3.3±0.16)vs(1.0±0)]、IL-8[(2.8±0.28)vs(1.0±0)]表达增多,TUNEL[(18.8±1.29)%vs(4.2±0.44)%]表达增多,Caspase3活性[(2.6±0.24)vs(1.0±0)]升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与IR组比较,IR+AG490组p-Jak2[(1.3±0.09)vs(1.8±0.13)],pSTAT3[(1.1±0.11)vs(1.6±0.08)]表达减少,炎症因子IL-1[(2.1±0.17)vs(3.3±0.16)]、IL-6[(1.9±0.22)vs(3.3±0.16)]、IL-8[(2.2±0.19)vs(2.8±0.28)表达降低,TUNEL[(13.2±1.03)%vs(18.8±1.29)%]表达降低,Caspase3活性[(2.1±0.21)vs(2.6±0.24)]降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制SAFE通路的激活可以降低其下游炎症因子的级联表达,从而减少细胞凋亡,减轻大鼠心肌缺血再灌注引起的脑损伤。

巴曲酶对围产期缺氧缺血性脑损伤神经保护作用的研究

目的 制备宫内缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)动物模型 ,应用巴曲酶研究其对 HIBD的神经保护作用。方法 宫内窒息 2 0 min为实验组 ,并设立正常对照组 ,实验组随机分为两组 ,1组于生后 3 0 min、2 4h、48h各给予腹腔注射巴曲酶 (8BU/ kg) 1次 ,共 3次 (巴曲酶干预组 ) ,另 1组 (缺氧缺血组 )及正常对照组于相同时间给予腹腔注射等量生理盐水。3组仔鼠生后 72 h、7d、14 d、2 1d断头处死 ,测量脑组织含水量及重量 ,并应用 TU NEL法观察凋亡细胞数。结果 缺氧缺血组 72 h脑含水量明显高于巴曲酶干预组及正常对照组 (P<0 .0 5) ,其余时间点 3组脑含水量无差异。缺氧缺血组 72 h脑重量高于巴曲酶干预组及正常对照组 (P<0 .0 5) ,14 d、2 1d脑重量显著低于巴曲酶干预组及正常对照组 (P<0 .0 5) ;巴曲酶干预组脑重量 14 d、2 1d低于正常对照组 ,差异显著 (P<0 .0 5)。缺氧缺血组72 h～ 14 d各时间点阳性细胞数显著高于巴曲酶干预组及正常对照组 (P<0 .0 5) ,2 1d 3组阳性细胞数无显著差异 ;巴曲酶干预组 72 h～ 7d凋亡细胞数高于正常对照组 (P<0 .0 5) ,14 d降至正常 ;正常对照组各时间点偶见阳性细胞。结论 巴曲酶可明显减轻 HIBD急性期脑水肿及恢复期脑萎缩 ,抑制 HIBD神经细胞凋亡 。

氢溴酸樟柳碱对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织细胞凋亡及ERK1/2磷酸化水平的影响

目的:研究氢溴酸樟柳碱对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织细胞凋亡及细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化(p-ERK1/2)水平的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(尼莫地平1.0 mg/kg)和氢溴酸樟柳碱高、中、低、极低剂量组(1.2、0.6、0.3、0.15 mg/kg),每组8只,采用线栓法建立大鼠急性脑缺血再灌注损伤模型。分别于脑缺血2 h和再灌注6 h时对各组大鼠尾iv给药1次,再灌注22 h后检测各组大鼠脑组织三磷酸腺苷(ATP)酶活性、Ca^(2+)含量、细胞凋亡情况、脑组织中p-ERK1/2蛋白表达和p-ERK1/2/总ERK1/2(t-ERK1/2)比例。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织ATP酶活性明显降低、Ca^(2+)含量明显增加、凋亡细胞密度明显增加,以上差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠脑组织凋亡细胞密度均明显减小,阳性对照组和氢溴酸樟柳碱高、低剂量组大鼠脑组织Ca^(2+)含量均明显降低,氢溴酸樟柳碱高、低、极低剂量组大鼠脑组织中p-ERK1/2/t-ERK1/2比例均明显增加,以上差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);其余差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:氢溴酸樟柳碱能抑制急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织细胞凋亡,其作用机制可能与激活ERK1/2信号通路和调节ATP酶活性,进而降低脑组织Ca^(2+)含量有关。

成人T细胞白血病淋巴瘤的免疫病理组织学研究

采用单克隆及多克隆抗体进行ABC法检查24例经石蜡包埋的成人T细胞白血病淋巴瘤切片的各型淋巴瘤及其他细胞。结果显示:石蜡切片的免疫组织化学方法对成人T细胞白血病淋巴瘤的病理组织诊断是有意义的。

共轭亚油酸对肥胖大鼠UCP2基因表达的影响

目的 通过研究共轭亚油酸(Conjugatedlinoleicacid ,CLA)对饮食诱导肥胖大鼠解偶联蛋白2 (Uncou plingprotein 2 ,UCP2 )基因表达的影响,探讨CLA降低体重、体脂作用的机制。方法 选用雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、高脂组、高脂+CLA组(每10 0g饲料含CLA分别为0 . 75 ,1 .5 0 ,3 .0 0g) ,每组动物10只,观察CLA对肥胖大鼠体重、体脂、血脂水平的影响,并应用RT PCR的方法检测UCP2mRNA的表达水平。结果 CLA可降低饮食诱导肥胖大鼠的体重和体脂含量,降低血清甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸水平,并可增加肥胖大鼠脂肪组织UCP2mR NA的表达水平。结论 CLA可改善肥胖大鼠的脂代谢紊乱,增加UCP2基因的表达,发挥降低体重、体脂的作用。

氩氦刀冷冻治疗泌胰岛素性多发性内分泌瘤Ⅰ型1例

通过对1例因胰腺占位病变、持续低血糖入院患者进行病理诊断和MEN1基因突变检测,确诊为泌胰岛素性多发性内分泌瘤Ⅰ型(multiple endocrine neoplasia type1,MEN1),尝试胰腺氩氦刀冷冻消融治疗,术后患者病灶呈大部低密度坏死,血糖恢复正常.结合患者病史及诊疗经过,提高对泌胰岛素性MEN1认识.

EML4-ALK融合基因在肺癌转移灶中的表达及临床特点

目的探讨肺癌患者转移灶中棘皮动物微管相关蛋白样4-间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)的阳性表达率及其与临床病理特征、血清指标的关系和使用靶向治疗后的效果。方法使用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)对71例肺癌转移灶中EML4-ALK融合基因进行检测,同时检测患者血清标志物癌胚抗原(CEA)、癌糖原(CA125)及血管内皮生长因子(VEGF)水平,分析EML4-ALK融合基因在转移灶中表达情况及与血清标志物水平的相关性。结果在淋巴结、脑、骨、体表软组织、肝、结肠和胸膜转移组织中检测到EML4-ALK融合基因阳性表达的组织有淋巴结、脑、骨和胸膜,总阳性表达率为7.04%。转移灶组织中EML4-ALK融合基因表达阳性率与病理类型、性别、年龄、吸烟状态、分化程度和分期因素无明显相关(P>0.05),但临床上仍以腺癌、不吸烟者人群较多见。血清CEA、CA125、VEGF水平在EML4-ALK融合基因阳性组和阴性组中差异无统计学意义(P>0.05)。接受克唑替尼治疗的肺癌患者6个月疾病控制率为66%。结论使用FQ-PCR技术检测肺癌转移灶中EML4-ALK融合基因是可行的,可以为腺癌、不吸烟这些优势人群提供靶向治疗策略。

左旋卡尼汀对兔缺血/再灌注心肌细胞死亡及心脏功能的影响

目的 探讨左旋卡尼汀对心肌缺血 再灌注 (MI R)后心肌细胞死亡 (坏死和凋亡 )及心脏功能的影响。方法 制备家兔MI R模型 ,缺血 45min ,再灌注 3h。 2 5只家兔随机分为 3组 :对照组 (Ⅰ组 ,n =5) ,丝线穿过冠状动脉左室支但不结扎 ;MI R组 (Ⅱ组 ,n =10 ) ,MI后 5min静脉滴注生理盐水至实验结束 ;左旋卡尼汀治疗组 (Ⅲ组 ,n =10 ) ,在缺血后 5min静脉滴注左旋卡尼汀 (1.5ml·kg- 1·h- 1)加生理盐水至实验结束。观察心率、左室压等的变化 ,再灌注结束后检测心肌梗死或用原位末端TUNEL法检测细胞凋亡指数 ,心肌组织游离脂肪酸 (FFA)含量。结果 MI R造成明显的心脏功能障碍 ,心肌梗死和缺血区细胞凋亡 ,组织FFA含量增多。与Ⅱ组比较 ,Ⅲ组的梗死面积明显缩小 (P <0 .0 5) ,凋亡指数减少 (P <0 .0 5) ,FFA减少 (P <0 .0 5)及促进再灌注后心脏收缩舒张功能恢复。结论 左旋卡尼汀可减少心肌梗死范围 。

不同方法筛检非小细胞肺癌中EML4-ALK融合基因的研究

1 文献来源 研究一： Takeuchi K, Choi YL, Soda M, et al. Multiplex reverse transcription-PCR screening for EMIA-ALK fusion transcripts [J]. Clin Cancer Res, 2008,14（20） ：6618-6624.

LDLR基因突变致家族性高胆固醇血症家系分析

目的对一家族性高胆固醇血症家庭成员进行医学外显子测定,揭示分子病因。方法先证者4岁,女孩,因皮肤肌腱多处大小不等黄色瘤、高血浆总胆固醇(TC)和高低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)就诊,随后检测发现先证者父母、弟弟均有不同程度的高TC和LDL-C。利用高通量测序技术对先证者及其父母进行了医学外显子测序,并进行基因序列比对分析,检测其中可能存在的基因变异,最后对先证者姐姐和弟弟进行了相关位点验证。结果先证者低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因有2个杂合突变:(1)c.727T>A(编码区第727号核苷酸由胸腺嘧啶变异为腺嘌呤),导致氨基酸改变p.C243S(第243号氨基酸由半胱氨酸变异为丝氨酸),经家系验证分析,该突变源自父亲,母亲该位点无变异。对先证者姐姐和弟弟进行验证,结果显示先证者弟弟该位点同先证者父亲为杂合变异,先证者姐姐该位点无变异。(2)c.1003G>T(编码区第1003号核苷酸由鸟嘌呤变异为胸腺嘧啶),导致氨基酸改变p.G335C(第335号氨基酸由甘氨酸变异为半胱氨酸),经家系验证分析,该突变源自母亲,父亲该位点无变异。对先证者姐姐和弟弟进行验证,结果显示先证者姐弟俩该位点均无变异。上述两个突变经蛋白功能预测软件预测为有害,可以改变蛋白质的结构,从而对LDL-R蛋白功能造成影响。结论LDL-R基因c.727T>A和c.1003G>T突变可以导致家族性高胆固醇血症。

非小细胞肺癌EML4-ALK融合基因检测结果的初步分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织棘皮动物微管样蛋白4-间变淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因的突变情况,及其与NSCLC临床病理特征和预后的关系。方法采用突变扩增阻滞系统检测26例NSCLC组织中EML4-ALK融合基因的9种突变和表皮生长因子受体(EGFR)的18、19、20、21外显子突变,进一步分析EML4-ALK融合基因突变与NSCLC临床病理特征和总生存期(OS)的关系。结果 26例NSCLC患者中检测到6例EML4-ALK融合基因突变。EML4-ALK融合基因突变与年龄、吸烟史、临床分期、组织分化和EGFR突变有关,与病理类型、性别、标本类型和血清癌胚抗原无关(P>0.05)。EML4-ALK融合基因阳性者的中位OS为9个月,低于阴性者的12个月,但差异无统计学意义(P=0.460)。结论 NSCLC中EML4-ALK融合基因突变多见于无吸烟史或少量吸烟、年龄较小、临床分期较晚、组织分化较差、无EGFR突变的患者。

慢性阻塞性肺疾病并发呼吸衰竭相关风险因素分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发呼吸衰竭的相关风险因素。方法选择珠海市人民医院2014年5月至2015年10月收治的COPD患者84例,收集其临床资料,包括性别、年龄、吸烟支数、病史、1年内发作次数及实验室检查等指标,并按血气分析指标将所有患者分成并发呼吸衰竭组和非呼吸衰竭组。采用单因素和多因素分析比较2组患者的临床资料。结果 84例患者中,呼吸衰竭组28例(33.3%),非呼吸衰竭组56例(66.7%)。单因素分析显示,COPD并发呼吸衰竭与白细胞计数、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平、1年内发作次数及白蛋白水平有关。多因素分析显示,白细胞计数≥10×109,白蛋白<30g·L-1及CRP≥12mg·L-1为COPD患者并发呼吸衰竭的独立风险因素。结论感染及低蛋白血症为COPD患者并发呼吸衰竭的风险因素,对于COPD急性发作患者,应注意观察白细胞计数、CRP及血浆白蛋白等指标,采取必要措施避免呼吸衰竭的发生。

miR-499通过Drp1介导线粒体自噬保护缺氧/复氧心肌细胞

目的探究miR-499对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用,并从线粒体自噬方面探究其可能机制。方法缺血/再灌注(I/R)诱导心肌细胞H9c2(2-1),建立缺氧/复氧(H/R)心肌细胞模型,使用miR-499 mimics和(或)P110处理细胞。将细胞分为BC组、I/R组、I/R+mi组、I/R+NC组、I/R+mi+P110组、I/R+NC+P110组。使用CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测ROS、线粒体膜电位和细胞凋亡,试剂盒检测MDA、SOD、ATP含量,qRT-PCR和Western blot检测线粒体融合、分裂、自噬相关基因Fis1、Mfn1、Parkin、LC3-Ⅱ、p62和Drp1的mRNA和蛋白表达水平,透射电镜观察线粒体自噬。结果miR-499 mimics和/或P110可使I/R诱导的心肌细胞增殖抑制率和凋亡率下降;线粒体膜电位下降、线粒体自噬减少、ATP含量上升;Fis1、Parkin、LC3-Ⅱ和Drp1的基因和蛋白表达水平下降,Mfn1和p62的基因和蛋白表达水平上升;细胞内ROS和MDA含量减少,SOD含量增加。结论miR-499可通过降低Drp1介导的线粒体自噬减少氧化应激的发生,从而保护I/R诱导的心肌细胞。