SD大鼠乳鼠原代皮质神经元和小胶质细胞同时提取并培养的实验方法

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质神经元及小胶质细胞的方法。方法:取24 h内新生SD大鼠乳鼠,将大脑取出放入装有DMEM的培养皿中,去除软脑膜后备用。同一脑组织,先提取原代神经元,再将剩余脑组织用于提取小胶质细胞,整个过程在冰上操作。原代皮质神经元提取培养步骤:镊子夹取2.0-3.0 mm厚度大脑皮质组织置于培养皿,用木瓜蛋白酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈互相粘连的组织悬液,吸上清细胞悬液,过滤、分装到15 mL离心管中,离心并重悬后将细胞接种于左旋多聚赖氨酸包被的6孔板爬片上放入细胞培养箱,每隔1 d观察神经元形态,第7天进行MAP2和β-Tubulin免疫荧光染色鉴定。小胶质细胞提取培养步骤:夹取上一步取皮质后剩余脑组织,厚度8-10 mm,置于培养皿,用胰酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈匀浆,然后将匀浆转移到培养瓶中培养,第14天将培养瓶封口后进行恒温水平摇床振荡2 h,小胶质细胞脱落于上清中;取纯化后的小胶质细胞继续培养3 d进行Iba1免疫荧光染色鉴定。结果与结论:(1)神经元培养24 h后贴壁、胞体变大,部分神经元长出突触;培养到第3,5天时胞体进一步增大,大部分神经元已呈突触形态,部分神经元成团生长;第7天时,神经元突触延长增粗并互相连接成网。经β-Tubulin、MAP2免疫荧光染色鉴定为神经元。(2)小胶质细胞培养第1天换液后可见细胞贴壁生长;第3,5,7天时细胞密度均较小,细胞形态呈高亮椭圆或圆形,但已基本成团块状生长于其他细胞上层;第10天时小胶质细胞密度明显增大;第14天时小胶质细胞呈致密团块状生长于其他细胞上层,此时可进行分离纯化。取分离纯化后细胞再培养至第3天,经Iba1免疫荧光鉴定为小胶质细胞,且纯度大于95%。(3)结果表明,经此法提取并培养获得的原代皮质神经元和小胶质细胞纯度高、形态好、成活率高。

Mer受体酪氨酸激酶与SD大鼠糖尿病周围神经病变的相关性

背景:糖尿病周围神经病变的发病机制目前尚未明确,TAM(Tyro3、Axl和MerTK)受体酪氨酸激酶具有控制中枢神经系统凋亡细胞和抑制炎症反应的作用。目的:探讨2型糖尿病及其周围神经病变SD大鼠血浆及坐骨神经组织Mer受体酪氨酸激酶水平的差异,研究Mer受体酪氨酸激酶与糖尿病周围神经病变的关联性。方法:40只雄性SD大鼠随机分为对照组15只、2型糖尿病组10只及2型糖尿病周围神经病变组15只。对照组大鼠喂普通饲料,实验组大鼠行高脂高糖饮食6周,并腹腔内注射单剂量小剂量链脲佐菌素35 mg/kg,14 d尾静脉取血检测血糖≥16.7 mmol/L为2型糖尿病造模成功。周围神经病变组大鼠动物继续高糖、高脂喂养8周。麻醉后活体分离检测大鼠坐骨神经传导速度,腹主动脉取血,取坐骨神经组织。光镜下观察各组神经纤维组织学改变,确认糖尿病周围神经病变造模成功。ELISA检测大鼠外周血血糖、血脂及血清MerTK水平,苏木精-伊红染色观察坐骨神经组织学改变;免疫荧光、免疫组化及免疫蛋白印迹检测坐骨神经组织中MerTK的表达。结果与结论:①实验成功构建SD大鼠2型糖尿病及2型糖尿病周围神经病变大鼠模型,糖尿病周围神经病变成模率80%;与对照组比较,2型糖尿病及糖尿病周围神经病变组大鼠血糖水平显著升高(P<0.0001),糖尿病周围神经病变组高于2型糖尿病组;坐骨神经传导速度明显下降(P<0.05),糖尿病周围神经病变组低于2型糖尿病组。②组织学检查:与对照组相比,2型糖尿病组大鼠坐骨神经核减少,有部分空泡变性,出现吞噬细胞;糖尿病周围神经病变组胞体肿胀,核间距增大,出现空泡变性,髓鞘周围出现隔断、不平滑,轴索变为网格状。③血清中MerTK水平:糖尿病周围神经病变组显著高于对照组(P<0.05)。④坐骨神经组织中MerTK的表达:与对照组比较,糖尿病周围神经病变组中明显上调(P<0.05)。⑤结论:糖尿病周围神经病变大鼠血浆及坐骨神经组织中Mer受体酪氨酸激酶水平升高,推测与其抗炎及免疫调节作用有关。

吸入暴露途径下纳米塑料在SD大鼠体内的富集特征研究

为探讨吸入暴露纳米级塑料在生物体呼吸系统以外组织上的富集特征,以100 nm聚苯乙烯微球对SD大鼠进行2 h短期吸入暴露,使用热裂解-气相色谱质谱法测定大鼠肝脏、肾脏、心脏以及脑组织上的聚苯乙烯浓度。结果显示:暴露组大鼠肾脏、心脏和肝脏中的浓度[(0.416±0.143)、(0.633±0.278)和(0.617±0.179)g/g]显著高于对照组大鼠[(0.249±0.020)、(0.070±0.096)和(0.101±0.140)g/g],差异具有统计学意义(P<0.05),但各组织间的相关性不显著(P>0.05);2组大鼠脑组织均未检出聚苯乙烯。研究表明,100 nm聚苯乙烯微球吸入暴露2 h后,可通过肺泡进入血液循环,进而在大鼠肝脏、肾脏、心脏中形成沉积。通过探讨纳米级塑料在生物体内的累积特征,为深入开展吸入纳米塑料对人体的健康影响研究提供数据支撑。

菜籽油对SD大鼠糖脂代谢的影响

本实验采用微波对菜籽进行预处理并压榨制成菜籽油(rapeseed oil,RO),探究RO干预后对高糖高脂饮食SD大鼠糖脂代谢的影响。结果表明:RO能够抑制SD大鼠体内HbAlc的上升和促进肝糖原的合成以改善血糖代谢。RO能够显著降低SD大鼠血浆中TC、TG、LDL-C的水平和提高HDL-C以改善血脂代谢,同时提高SD大鼠血浆中GSH-Px、SOD、CAT的活性和GSH含量,并减少降低MDA的生成以降低血糖血脂对脏器的损伤。此外,RO通过降低ApoB含量以及增加ApoA1含量来调控LDL-C和HDL-C。因此,RO可有效地调节血糖血脂代谢、提高血浆抗氧化能力,缓解氧化应激。RO具备开发成为辅助降血糖血脂制品原料的潜力。

刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育的影响

目的:观察刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育的影响。方法:实验设刺山柑果风湿止痛凝胶膏高(117.8 g/m^(2))、中(58.9 g/m^(2))、低(29.5 g/m^(2))剂量组,辅料对照组(辅料帖)和阳性对照组(环磷酰胺),妊娠第6天(GD6)~GD15每天经皮给药1次,阳性对照组于GD12皮下注射环磷酰胺。实验期间观察孕鼠的一般状况、体质量和饲料消耗量;GD20处死孕鼠,取胎仔,检查子宫连胎质量、黄体数、着床数、胎仔质量、胎仔身长、胎仔尾长、活胎数、死胎数、吸收胎数、胎仔性别及外观、内脏和骨骼畸形。结果:刺山柑果风湿止痛凝胶膏各剂量组孕鼠体质量、体质量增量、摄食量、子宫连胎质量、子宫和卵巢的脏器质量及其系数、平均黄体数、着床前丢失率、平均着床数、着床率、平均活胎数、活胎率、死胎率、吸收胎率、胎仔性别比、胎仔的外观异常率、窝均体质量、窝均身长、窝均尾长、骨骼畸形率和内脏畸形率与辅料对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论:刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性的未见不良反应水平为117.8 g/m^(2),是临床拟用体表剂量的12倍。在本试验条件下,SD大鼠经皮给予刺山柑果风湿止痛凝胶膏对胚胎-胎仔发育无毒性影响。

基于液质联用法测定嘧啶核苷类化合物GY005在SD大鼠体内的药代动力学实验研究

建立LC-MS/MS法测定嘧啶核苷类化合物GY005在大鼠血浆中的浓度,并应用于大鼠体内的药代动力学研究。以特非那定为内标,经乙腈-甲醇沉淀蛋白后,采用ACE 5 C4 column(50 mm×2.1 mm,2.5μm)色谱柱,以0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈为流动相,进行梯度洗脱分离,流速0.7 mL·min^(-1),进样量10μL;采用电喷雾离子源(ESI),正离子扫描方式,MRM扫描,分别以m/z 445.15→270.10和m/z 472.40→436.40作为化合物GY005和内标(特非那定)的质谱检测条件。大鼠灌服2 mg·kg^(-1)化合物GY005后,不同时间点取样测定其血浆浓度,计算药代动力学参数。雌雄SD大鼠单次静脉注射2 mg·kg^(-1)的受试品后,化合物GY005在雄性大鼠体内的暴露量(AUC_(last))为(228±44)h·ng·mL^(-1),消除半衰期(T_(1/2))为(0.30±0.01)h,清除率(CL)为(149±29)mL·min^(-1)·kg^(-1)。化合物GY005在雌性大鼠体内的暴露量(AUC_(last))为(215±158)h·ng·mL^(-1),消除半衰期(T_(1/2))为(0.32±0.03)h,清除率(CL)为(226±162)mL·min^(-1)·kg^(-1)。雌雄间暴露水平相当,没有显著性差异。这个方法具有简便、灵敏、快捷,适用于化合物GY005的药代动力学研究。

基于SD-PLUS耦合模型的陕西省土地利用变化及碳储量多情景预测

[目的]为探讨不同土地利用方式对区域生态系统碳储量的影响。[方法]以陕西省为研究对象,利用SD-PLUS耦合模型,采用国际耦合模式比较计划第6阶段(CMIP6)提出的耦合共享社会经济路线和代表性浓度路线(SSP-RCP)情景,对2030年陕西省的土地利用变化进行预测,然后利用InVEST模型模拟未来不同情景下陕西省碳储量及其空间分布。[结果](1)对构建的SD模型进行历史检验,其误差<5%,PLUS模型模拟的2020年土地利用Kappa指数为0.86,模型精度和可靠性总体符合要求;(2)3种情景下,未来建设用地面积均增加,增长速率从低到高的情景分别为SSP126、SSP245、SSP585;在所有情景下,林地面积均增加,水域面积均保持稳定;草地面积在SSP126情景下有小幅度增加,其他情景下减少;耕地面积3种情景下均减少;(3)3种情景下,陕西省碳储量均减少,关中平原建设用地的扩张占用大量的耕地是造成陕西省碳储量下降的主要原因。[结论]在SSP126情景下,建设用地扩张所占用的生态用地面积最小,碳储量损失最少,该情景同时考虑社会经济发展及生态保护的需要,可为未来陕西省国土资源保护和高质量发展提供参考模式。

基于AHM-SD模型的老旧小区加装电梯中居民参与意愿演化研究

老旧小区加装电梯能增强居民的幸福感和获得感,而居民参与意愿是老旧小区能否顺利加装电梯的关键。首先运用文献研究法和专家访谈法对老旧小区加装电梯中居民参与意愿影响因素进行识别和优化,构建老旧小区加装电梯中居民参与意愿影响因素体系。其次引入AHM(属性层次模型)构建老旧小区加装电梯中居民参与意愿影响因素属性层次结构,计算各影响因素的权重,确定居住楼层等6个影响因素为主要影响因素。再次建立包含居住环境等5个子系统的老旧小区加装电梯中居民参与意愿SD(系统动力学)模型,厘清老旧小区加装电梯中居民参与意愿演化路径,对老旧小区加装电梯中居民参与意愿演化进行仿真模拟,并通过综合对比分析确定了居住楼层、牵头人能力、居民出资比例、电梯使用费用和需求迫切度共5个关键影响因素。最后针对性地提出了优化老旧小区加装电梯中居民参与意愿的建议。

SD-265法治疗心胆气虚型慢性失眠的实效性随机对照研究

目的观察SD-265法治疗心胆气虚型慢性失眠患者的临床疗效。方法将2020年8月—2022年8月就诊于中国中医科学院广安门医院(南区)睡眠医学中心、中国中医科学院广安门医院针灸门诊及招募的64例慢性失眠患者随机分为2组,观察组34例采用SD-265法治疗,对照组30例采用温胆汤口服,2组均治疗1周。观察2组治疗前后主观指标[匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)总分、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率]及客观指标(体动记录仪记录的睡眠潜伏期、清醒次数、入睡后清醒时间、总睡眠时间、睡眠效率)变化。结果与治疗前比较,2组治疗后PSQI总分均明显降低,入睡时间均明显缩短,睡眠时间均明显增加,观察组睡眠效率明显提高,且观察组治疗后PSQI总分明显低于对照组,睡眠效率明显高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);与治疗前比较,2组治疗后睡眠潜伏期均明显缩短,睡眠效率均明显提高,观察组清醒次数减少,且观察组治疗后睡眠潜伏期明显短于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论SD-265法可在短期内缩短患者睡眠潜伏期,增加睡眠时长,提高睡眠效率,从而改善心胆气虚型失眠患者睡眠质量。

认知行为干预在冠心病临床护理中的应用效果及对SAS、SDS评分的影响

目的:研究冠心病患者实施认知行为干预后的成效。方法:将聊城市第二人民医院2022年10月至2023年10月收治的80例冠心病患者作为研究对象,采用随机数字表法随机分成试验组和对照组,各40例。试验组受试者实施认知行为干预,对照组受试者实施常规护理。对干预后两组患者的护理满意度、抑郁焦虑评分、生活质量评分等观察指标进行评价。结果:干预后,试验组护理满意度高于对照组(P<0.05);干预后,试验组抑郁焦虑评分低于对照组(P<0.05);干预后,试验组生活质量评分高于对照组(P<0.05)。结论:对于冠心病患者展开认知行为干预的成效显著。该护理能够将患者的护理满意度、生活质量提升,使其心理状态得以改善。

基于SD法的澳门博物馆空间文化感知评价研究

博物馆作为历史发展和社会进步的重要标志,其最大的魅力在于传承文明和传播文化。研究选取澳门地区有代表性的博物馆作为研究对象,采用语义差分法和因子分析法,探究公众对澳门地区不同类型博物馆空间的客观感知和心理印象,并利用SPSS软件进行因子分析,并建立博物馆空间文化感知的综合评价体系。针对分析结果,从交互式设计文化体验、功能性设计文化认同、城市空间形象和室内空间形式这四方面总结博物馆空间文化性的设计优化策略,为澳门博物馆的后续评价研究与可持续发展提供理论支撑。

基于ISM-SD的地下洞室群施工进度风险传递路径研究

针对水电工程地下洞室群施工进度风险存在传递问题,提出了基于解释结构模型(ISM)和系统动力学(SD)的地下洞室群施工进度风险传递路径分析方法。根据地下洞室群的施工特点,建立了地下洞室群施工进度风险指标体系;结合风险传递机理,运用解释结构模型分析风险因素间传递关系,建立了风险因素传递矩阵,并总结归纳出风险因素关系对照表,通过系统动力学分析风险因素间传递路径,揭示了施工进度风险传递路径网络;集成ISM-SD构建了地下洞室群施工进度风险传递路径分析模型,并结合西南地区某大型水电站地下洞室群工程进行分析。结果表明,该方法可有效识别施工进度风险重要因素和关键传递路径,为地下洞室群施工进度风险管理提供了决策依据。

紫檀芪调控微小RNA-340-5p/髓细胞白血病-1轴对胆囊癌SD细胞生物学行为的影响实验研究

目的:探究紫檀芪(PTS)调控微小RNA-340-5p(miR-340-5p)/髓细胞白血病-1(MCL-1)轴对胆囊癌SD(GBC-SD)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养人GBC-SD细胞,使用不同浓度PTS(0、5、10、20、40、80μmol/L)处理GBC-SD细胞,然后检测细胞存活率。将GBC-SD细胞分为对照组(DMEM培养基常规培养GBC-SD细胞)、PTS组(加入80μmol/L的PTS培养GBC-SD细胞)、PTS+空载质粒组(加入80μmol/L的PTS培养GBC-SD细胞,并转染空载质粒)、PTS+miR-340-5p沉默组[加入80μmol/L的PTS培养GBC-SD细胞,并转染miR-340-5p小干扰RNA(siRNA)质粒]。分别检测各组GBC-SD细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-340-5p和MCL-1 mRNA表达。蛋白印迹法检测MCL-1及增殖凋亡相关蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-340-5p与MCL-1的靶向关系。裸鼠移植瘤实验检测PTS对裸鼠肿瘤生长及miR-340-5p/MCL-1轴的影响。结果:随着PTS浓度的升高,GBC-SD细胞存活率逐渐降低(均P<0.05)。与对照组比较,PTS组细胞存活率、集落形成数、细胞迁移率、细胞侵袭数、MCL-1 mRNA和蛋白、Ki67、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达降低,细胞凋亡率、miR-340-5p、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达升高(均P<0.05)。沉默miR-340-5p可逆转PTS对GBC-SD细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及miR-340-5p/MCL-1轴的作用效果(均P<0.05)。miR-340-5p与MCL-1存在靶向调控关系。PTS能抑制裸鼠肿瘤生长和MCL-1 mRNA和蛋白表达,促进miR-340-5p表达(均P<0.05)。结论:PTS可通过上调miR-340-5p表达下调MCL-1表达,抑制GBC-SD细胞增殖、迁移和侵袭,促进GBC-SD细胞凋亡。

SD分析法在滨水空间活力评价与提升中的应用

采用SD分析法,选取六安市中心城区6个滨水空间,设置可达性、植物多样性、景观美感度、亲水性、河流水质、历史文化延续性和娱乐活动多样性等评价因子,测定出六安市的滨水空间建设应该重点关注景观环境、亲水性和历史文化延续性三个特性,并基于这三个特性实施滨水空间活力提升策略:加强植物景观的设计、水体岸线的打造和地域文化特色的塑造。

早期心理干预对乳腺癌患者术后SAS、SDS及SIS评分的影响

目的探讨早期心理干预对乳腺癌患者术后SAS(焦虑自量量表)、SDS(抑郁自量量表)及SIS评分(社会影响量表)的影响。方法应用奇偶法随机将150例乳腺癌患者分为对照组和研究组,对照组行常规护理,研究组在其基础上实施早期心理干预,评估两组患者术后心理情况、病耻感、生活质量及护理满意度。结果研究组患者SAS评分、SDS评分及SIS评分均低于对照组(P<0.05);研究组患者社会功能、生理功能、躯体能力及活力均高于对照组(P<0.05);研究组患者护理满意度(96.00%)高于对照组(84.00%)(P<0.05)。结论在乳腺癌患者治疗中实施早期心理护理干预有助于稳定患者情绪、减少病耻感,生活质量与满意度更高,值得临床推广。

优质护理在急性肠胃炎患者中的护理效果观察及SDS、SAS评分影响分析

分析急性肠胃炎患者接受优质护理对SAS评分、SDS评分及护理效果影响。方法 本院急性肠胃炎患者抽选100例,就诊时间2021年1月-2022年12月,电脑抽签法分组。优质护理纳入研究组,基础护理纳入对照组。结果 研究组急性肠胃炎症状改善时间均较对照组短(P<0.05);研究组SAS评分、SDS评分均较对照组低(P<0.05);研究组生存质量分数均较对照组高(P<0.05);研究组护理满意度较对照组高(P<0.05)。结论 优质护理用于急性肠胃炎护理中,可稳定急性肠胃炎患者情绪、缩减急性肠胃炎症状持续时间、优化急性肠胃炎患者生存质量,值得推广应用。

基于SD法的图书馆阅览空间环境设计研究——以沈阳建筑大学图书馆为例

文章系统地分析了沈阳建筑大学图书馆阅览空间的特点,旨在为今后高校图书馆阅览空间的优化和完善提供重要的理论依据和数据参考。文章利用SD法以高校图书馆阅览空间为研究主题展开读者使用后的评价研究,并根据读者的客观评价结果进行定量分析,继而分析各因子之间的相互关联性。同时,采用多因子变量分析法,确定出影响学校图书馆阅读空间评估结果的五大综合评估因子和各要素的影响权重。根据读者的需求对沈阳建筑大学图书馆阅览空间进行整体评估,根据评估结果提供相应的解决方法,以期对高校图书馆阅览空间的建设与改造具有一定的指导与借鉴意义。

SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验背景数据的建立

目的总结国家药物安全评价监测中心2013-2022年SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验各指标的正常值范围,建立SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验各指标的背景数据库,为药物胚胎-胎仔发育毒性评价提供参考。方法对本中心2013-2022年11项SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中对照组共计205只孕鼠和3037只胎鼠各项胚胎发育和胎仔生长发育指标进行统计分析,计算其平均数、标准差、变异系数和95%置信区间。指标包括孕鼠妊娠期体重和体重增长幅度、孕鼠摄食量、妊娠结局(妊娠率、平均黄体数、平均着床数、平均活胎数、活胎率、吸收胎率、死胎率)、胎仔生长发育情况(胎仔重、胎盘重、性别比)、胎仔外观异常率、内脏异常率和骨骼异常率。结果孕鼠妊娠期体重呈增长趋势,妊娠后期体重增长幅度明显增大。孕鼠摄食量随着妊娠时间的增加呈增长趋势。妊娠第20天进行剖腹产,妊娠率为93.2%,平均黄体数、着床数和活胎数分别为18.0±3.2,15.9±2.8和14.8±3.0,活胎率为93.4%,死胎率为6.6%;胎仔雄/雌性别比为0.94,平均体重为(3.6±0.3)g,胎盘平均重量为(0.6±0.3)g。胎仔外观异常发生率约为0.2%,内脏异常率约为0.8%。骨骼异常率约为1.2%,未骨化和骨化不全的发生率较高,主要发生于胸骨和舌骨等,胎仔的掌骨骨化数、跖骨骨化数和骶尾椎骨化数分别为7.0±0.7,8.0±0.1和7.4±0.5,第Ⅰ~Ⅳ胸骨骨化率较高,平均为98.6%~99.9%,第Ⅴ胸骨骨化率为(68.0±28.4)%,第Ⅵ胸骨骨化率为(82.8±23.9)%。结论初步建立了本GLP实验室SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中各指标背景数据库,为生殖毒性研究提供参考。

肾虚血瘀型SD大鼠膝骨关节炎模型的建立与验证

背景:肾虚血瘀证候作为膝骨关节炎常见中医证候,又是膝骨关节炎的基本病机,二者之间有着重要联系。但肾虚血瘀证候如何促进膝关节软骨损伤及其潜在机制并不明确,还需进一步研究。目的:探讨肾虚血瘀证候对SD大鼠膝骨关节炎进程的影响。方法:将16只SD大鼠随机分为模型观察组和对照组,每组8只。模型观察组采用卵巢摘除方法建立肾虚模型,2个月后采用改良HULTH手术进行膝骨关节炎造模,HULTH手术后1周皮下注射盐酸肾上腺素进行血瘀造模;对照组给予卵巢摘除假手术,改良HULTH手术,皮下注射生理盐水。HULTH手术后第5周,检测血液流变学、凝血四项、三碘甲状腺原氨酸、四碘甲状腺原氨酸及雌二醇水平;同时,拍摄膝关节X射线片,进行膝关节苏木精-伊红染色、番红-固绿染色和免疫组化染色。结果与结论:①与对照组相比,模型观察组全血黏度低切、中切、高切和血浆黏度显著升高,凝血四项中纤维蛋白原水平显著升高,凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间显著下降;三碘甲状腺原氨酸、四碘甲状腺原氨酸及雌二醇水平均显著下降;②影像学结果显示模型观察组大鼠膝关节间隙狭窄程度更严重且表面欠光滑,出现高密度影;③苏木精-伊红染色和番红-固绿染色表明,模型观察组大鼠软骨损伤更严重,并且OARSI评分和Mankin评分明显高于对照组;④免疫组化染色结果显示,相较于对照组,模型观察组大鼠软骨外基质Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖蛋白表达显著下降,炎症因子基质金属蛋白酶13、解聚蛋白样金属蛋白酶5蛋白表达显著升高。结果表明,该研究成功建立了SD大鼠肾虚血瘀型膝骨关节炎模型;肾虚血瘀证候通过促进炎症因子表达进一步加重软骨外基质裂解和软骨退变,促进大鼠膝骨关节炎进程。

不同低氧胁迫方式下SD大鼠急进高原模型的比较研究

目的对SD大鼠在高原实地和模拟高原环境这2种低氧胁迫方式下建立的急进高原模型进行比较研究,进而鉴定模拟高原实验舱的可靠性。方法将SD大鼠分别急进模拟高原动物实验舱(4000 m)或高原实地实验室(4010 m)来建立大鼠急进高原模型,在暴露24 h或72 h后采集并测定高原生理病理变化相关指标,主要包括血常规、血生化、血气、氧化损伤指标(超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px))、炎症指标(白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6))、病理组织分析和低氧敏感基因(低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,Hif-1α)和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,Vegfa))等,最终对结果进行差异性分析,得出差异性评估报告。结果相同海拔高度下,高原实地或模拟高原暴露72 h后均可以产生明显的肺部和脑部损伤。相同暴露时间下,动物机体的血常规、血生化和血气结果相近,炎症指标(IL-6,IL-1β,MCP-1和IFN-γ)、氧化损伤指标(MDA,SOD和GSH)和脑部低氧敏感基因(Hif-1α和Vegfa)等检测结果无显著性差异。但是,模拟72 h组的二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PaCO_(2))和碱剩余(base excess,BE)显著高于其他低氧处理组、模拟72 h组的肺部低氧敏感基因(Hif-1α和Vegfa)与空白对照组无显著性差异,以及高原实地处理组脑系数显著高于模拟高原处理组等结果提示高原实地和模拟高原环境可能存在细微区别。结论模拟高原实验舱在4000 m海拔可成功建立急进高原动物模型,最优暴露时间应大于24 h但略短于72 h。模拟高原实验舱具有良好的可靠性,但条件允许情况下应尽量前往高原实地来建立急进高原动物模型。