Long non-coding RNA CDKN2B-AS1 promotes hepatocellular carcinoma progression via E2F transcription factor 1/G protein subunit alpha Z axis

BACKGROUND A series of long non-coding RNAs(lncRNAs)have been reported to play a crucial role in cancer biology.Some previous studies report that lncRNA CDKN2B-AS1 is involved in some human malignancies.However,its role in hepatocellular carcinoma(HCC)has not been fully deciphered.AIM To decipher the role of CDKN2B-AS1 in the progression of HCC.METHODS CDKN2B-AS1 expression in HCC was detected by quantitative real-time polymerase chain reaction.The malignant phenotypes of Li-7 and SNU-182 cells were detected by the CCK-8 method,EdU method,and flow cytometry,respectively.RNA immunoprecipitation was executed to confirm the interaction between CDKN2B-AS1 and E2F transcription factor 1(E2F1).Luciferase reporter assay and chromatin immunoprecipitation were performed to verify the binding of E2F1 to the promoter of G protein subunit alpha Z(GNAZ).E2F1 and GNAZ were detected by western blot in HCC cells.RESULTS In HCC tissues,CDKN2B-AS1 was upregulated.Depletion of CDKN2B-AS1 inhibited the proliferation of HCC cells,and the depletion of CDKN2B-AS1 also induced cell cycle arrest and apoptosis.CDKN2B-AS1 could interact with E2F1.Depletion of CDKN2B-AS1 inhibited the binding of E2F1 to the GNAZ promoter region.Overexpression of E2F1 reversed the biological effects of depletion of CDKN2B-AS1 on the malignant behaviors of HCC cells.CONCLUSION CDKN2B-AS1 recruits E2F1 to facilitate GNAZ transcription to promote HCC progression.

TSLP、HIF-1α、RANKL在义齿修复后种植体周围炎患者龈沟液中的表达及意义

目的研究胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)在义齿修复后种植体周围炎(PI)患者龈沟液中的表达及意义。方法回顾性选取2019年8月至2023年8月大同市第五人民医院收治的义齿修复患者86例作为研究对象,根据术后3个月是否发生PI将患者分为预后良好组(n=61)和预后不良组(n=25)。比较两组患者的临床资料及术前龈沟液TSLP、HIF-1α及RANKL水平,采用多因素Logistic回归分析对龈沟液TSLP、HIF-1α及RANKL水平与义齿修复患者术后发生PI的关系进行分析,采用受试者操作特征(ROC)曲线分析TSLP、HIF-1α及RANKL水平对义齿修复患者的预后评估价值。结果两组患者临床资料(性别、年龄、病程、义齿种植原因及种植颗数)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。预后良好组患者的龈沟液中TSLP、HIF-1α、RANKL水平分别为(122.57±11.30)ng/L、(417.79±115.43)ng/mL、(116.02±13.45)pg/μL,均明显低于预后不良组[(138.93±12.70)ng/L、(576.55±177.60)ng/mL、(133.24±15.69)pg/μL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析义齿修复患者预后,结果显示龈沟液中TSLP水平升高、HIF-1α水平升高和RANKL水平升高是义齿修复患者术后发生PI的独立危险因素(OR=1.119,95%CI:1.048~1.195;OR=1.007,95%CI:1.002~1.013;OR=1.065,95%CI:1.016~1.117;P<0.05)。ROC曲线分析龈沟液中TSLP、HIF-1α、RANKL水平预测义齿修复患者预后的价值,结果显示曲线下面积(AUC)值分别为0.833、0.786和0.809。其中,RANKL具有最高的特异度(0.852),而HIF-1α具有最高的敏感度(0.800),具有较好的预测价值(P<0.05)。结论龈沟液中TSLP、HIF-1α、RANKL水平升高是义齿修复患者术后并发PI的独立危险因素,且均具有较高的预测义齿修复患者预后的价值。

益气升清方调节HIF-1α/NLRP3信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的影响

目的 探究益气升清方调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组(S组),模型组(M组),益气升清方低、中、高剂量组(3.465、6.930、13.860 g/kg)及益气升清方高剂量+HIF-1α激活剂DMOG组(13.860 g/kg益气升清方+40 mg/kg DMOG),每组15只。采用线栓法构建脑卒中模型。造模成功后进行神经功能缺陷评估;TTC染色评估脑梗死体积;ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平;HE染色检测缺血皮质区病理变化;TUNEL染色检测神经元凋亡;Western blot检测焦亡及HIF-1α/NLRP3通路相关蛋白表达。结果 与S组比较,M组神经功能缺陷评分、梗死体积、IL-1β含量、IL-18含量、神经细胞凋亡率、胞膜穿孔蛋白D-N端(GSDMD-N)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、HIF-1α、NLRP3蛋白水平均上升(P<0.05);与M组比较,低、中、高剂量益气升清方组神经功能缺陷评分、梗死体积、IL-1β含量、IL-18含量、神经细胞凋亡率、GSDMD-N、Caspase-1、HIF-1α、NLRP3蛋白水平均下调(P<0.05);DMOG减弱了高剂量益气升清方对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的改善作用。结论 益气升清方可能通过下调HIF-1α/NLRP3信号通路减轻缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡。

不同方法联合放疗治疗薄型瘢痕疙瘩的疗效及对MMPs、HIF-1α、TGF-β1的影响

目的探讨不同方法联合放疗治疗薄型瘢痕疙瘩的疗效及对基质金属蛋白酶(MMPs)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法回顾性选取2020年10月至2022年9月内蒙古医科大学附属肿瘤医院(内蒙古自治区肿瘤医院)整形外科收治的胸腹部瘢痕疙瘩患者62例(瘢痕疙瘩数94个),依据治疗方法不同分为激光联合放疗(LCR)组(30例,瘢痕疙瘩数47个)、手术联合放疗(SCR)组(32例,瘢痕疙瘩数47个)。LCR组行CO 2点阵LCR,SCR组行SCR。观察两组治疗12个月后临床疗效、复发情况。比较两组治疗前、治疗12个月后的患者与观察者瘢痕评估量表(POSAS)评分、温哥华瘢痕量表(VSS)评分、瘢痕组织基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、HIF-1α、TGF-β1等细胞因子水平的变化。结果LCR组总有效率(93.62%)大于SCR组(76.60%),复发率(4.26%)小于SCR组(19.15%),差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗12个月后,LCR组POSAS、VSS评分分别为(23.96±2.64)、(5.28±0.54)分,均低于SCR组[(33.96±3.59)、(6.55±0.68)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。LCR组瘢痕组织MMP-2、MMP-9及HIF-1α、TGF-β1表达量分别为111.65±13.55、106.76±12.68、1.24±0.14、1.10±0.12,均低于SCR组(127.96±14.71、121.08±14.33、1.55±0.17、1.22±0.13),差异均有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较(38.30%vs.46.81%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论LCR和SCR均可改善薄型瘢痕疙瘩症状,抑制瘢痕疙瘩复发,但LCR的治愈率更高,复发率更低,对瘢痕组织MMPs及HIF-1α、TGF-β1表达抑制作用更强,且安全性较高,值得临床推荐。

MiR-181c-5p对卵巢癌干细胞样细胞肿瘤血管生成拟态的作用及其机制

目的探讨miR-181c-5p对卵巢癌干细胞样细胞(OCS-LCs)肿瘤血管生成拟态(VM)的作用及其机制。方法采用无血清悬浮培养法将人卵巢癌细胞系OVCAR3细胞诱导形成OCS-LCs。将OVCAR3细胞分为A~C组,各组分别转染NC-miR-181c-5p、siRNA-miR-181c-5p和pRNA-miR-181c-5p。通过成球实验评估A~C组细胞成球能力。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测A~C组细胞miR-181c-5p的相对表达量,采用Western blot实验检测A~C组细胞Oct-4、Nanog、HIF-1α和VEGF蛋白相对表达量。采用CCK-8实验检测A~C组细胞的活性,采用三维立体培养实验检测A~C组的血管形成率。结果OVCAR3细胞成功被诱导形成OCS-LCs。RT-qPCR实验结果显示,B组细胞的miR-181c-5p相对表达量显著低于A组,C组高于A组(t=2.25、8.68,P<0.05)。成球实验结果显示,B组与A组、A组与C组相比,细胞的成球周期显著缩短,最大的细胞球直径显著增大,成球率显著增加(t=5.56~33.66,P<0.05)。Western blot实验结果表明,B组与A组、A组与C组相比,Oct-4、Nanog、HIF-1α和VEGF蛋白相对表达量显著升高(t=4.51~56.15,P<0.05)。CCK-8实验结果显示,B组的细胞活性高于A组,C组低于A组(F=97.70~281.80,P<0.05)。三维立体培养实验结果显示,B组与A组、A组与C组相比较,血管形成率显著性提高(t=3.70、18.67,P<0.05)。结论miR-181c-5p可能通过降低细胞中HIF-1α和VEGF蛋白的表达,从而抑制OCS-LCs的VM形成。

丁苯酞软胶囊联合瑞舒伐他汀治疗急性脑梗死患者的临床观察及对血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平的影响

目的探究丁苯酞软胶囊联合瑞舒伐他汀治疗急性脑梗死患者的疗效及对血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA)、应激诱导蛋白2(Sestrin2)水平的影响。方法前瞻性选取2021年1月至2022年12月在秦皇岛市第一医院治疗的急性脑梗死患者101例作为研究对象,按照信封法将患者分为对照组(n=50)和研究组(n=51)。对照组行常规治疗并瑞舒伐他汀治疗,研究组在对照组基础上联合丁苯酞软胶囊治疗。统计分析两组患者治疗前及治疗14 d后的美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分、FuglMeyer评测法(FMA)评分、改良Rankin量表(mRS)评分、血流动力学指标(血浆黏度、全血高切黏度、低切黏度、红细胞压积、红细胞变形指数)、血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平并比较临床疗效的组间差异。结果治疗14 d后,两组患者的NIHSS评分和mRS评分均较治疗前降低,FMA较治疗前升高,且研究组患者的NIHSS评分和mRS评分分别为(4.03±0.38)、(3.01±0.45)分,均低于对照组,FMA为(80.64±9.16)分,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗14 d后,两组患者的血浆黏度、全血高切黏度、低切黏度、红细胞压积均较治疗前降低,红细胞变形指数均较治疗前升高,且研究组的血浆黏度、全血高切黏度、低切黏度、红细胞压积分别为(1.56±0.33)mPa·s、(4.78±0.31)mPa·s、(9.81±0.64)mPa·s、(0.37±0.05)%,均低于对照组,红细胞变形指数为0.78±0.11,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗14 d后,两组患者的血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平均降低,且研究组患者血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平分别为(690.56±65.12)ng/mL、(13.65±2.13)μg/L、(11.33±1.45)ng/mL,均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组近期疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05);研究组总有效率为90.20%,高于对照组(64.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用丁苯酞软胶囊联合瑞舒伐他汀治疗急性脑梗死患者可显著提高患者临床治疗效果,提高肢体活动能力,缓解神经功能损伤,降低血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平,具有较高的临床应用潜力。

急性呼吸窘迫综合征患儿外周血单个核细胞中CD73、HIF-1α的表达及其临床意义

目的探究急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿外周血单个核细胞(PBMCs)中5′胞外核苷酸酶(CD73)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达及其临床意义。方法选取2022年2月至2023年4月广安市人民医院收治的117例ARDS患儿为研究对象,根据病情严重程度分为轻症组(n=27)、中症组(n=38)和重症组(n=52)。比较3组患儿PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平及肺部感染指数(CPIS)评分。采用Pearson相关系数分析CD73、HIF-1α表达水平与CPIS评分的相关性。治疗后随访3个月,根据患儿生存状况分为生存组(n=34)和死亡组(n=83),比较两组患儿PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平对ARDS患儿预后的诊断价值。结果轻症组PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平分别为0.44±0.06、0.60±0.11、(4.82±0.81)分,均显著低于中症组[0.53±0.10、0.76±0.14、(6.33±1.02)分]、重症组[0.62±0.07、0.89±0.08、(7.03±1.14)分],中症组PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平均显著低于重症组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关系数分析结果显示,CD73、HIF-1α相对表达水平与CPIS评分均呈显著正相关(r=0.623、0.687,P<0.05)。生存组PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平分别为0.53±0.08、0.74±0.15,显著低于死亡组(0.60±0.08、0.88±0.09),差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CD73、HIF-1α单独及联合预测ARDS患儿预后的敏感度分别为79.41%、85.29%、94.12%,曲线下面积(AUC)为0.746、0.801、0.843,联合检测预测价值更高。结论ARDS患儿PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平随疾病严重程度增加而升高,且与患儿肺部感染呈显著相关性,检测患儿PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平对预后具有较高的诊断价值。

miR-519d-3p靶向HIF-1α抑制高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞功能障碍及血管生成

目的:明确miR-519d-3p对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)功能障碍与血管生成的影响,并阐明其对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的调控机制。方法:通过5、30mmol/L葡萄糖分别诱导HRMEC建立正常(NG)和高糖(HG)细胞模型。将HRMEC分为对照组(HG细胞模型转染阴性对照模拟物)、甘露醇组(对照组加入25mmol/L甘露醇)、miR-519d-3p过表达组(HG细胞模型转染miR-519d-3p模拟物)、miR-519d-3p联合HIF-1α过表达组(HG细胞模型共转染miR-519d-3p模拟物和HIF-1α过表达载体)。实时荧光定量PCR法检测各组miR-519d-3p的表达情况。Western blotting法检测各组HIF-1α蛋白的表达情况。荧光素酶报告基因实验检测miR-519d-3p和HIF-1α的结合位点情况。CCK-8法检测各组细胞增殖情况。Hoechst 33342染色法检测各组细胞凋亡情况。ELISA法检测各组细胞外液炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6蛋白的表达情况。小管形成实验检测各组新生毛细血管管腔样结构形成情况。结果:与NG相比,HG细胞模型中miR-519d-3p表达显著减少,而HIF-1α蛋白表达显著增加(均P<0.01)。与对照组比较,miR-519d-3p过表达组中HIF-1α蛋白表达显著降低(P<0.01)。miR-519d-3p中“CGUGAAA”序列可以与HIF-1α3'-非编码区(3'-UTR)中“GCACUUU”序列特异性结合。与对照组比较,miR-519d-3p过表达组细胞24、48、72h吸光度值均显著增加,细胞凋亡率显著减少,细胞外液TNF-α、IL-1β、IL-6浓度均显著减少,新生毛细血管管腔样结构数量显著减少(均P<0.01)。与miR-519d-3p过表达组比较,miR-519d-3p联合HIF-1α过表达组细胞24、48、72h吸光度值均显著减少,细胞凋亡率显著增加,细胞外液TNF-α、IL-1β、IL-6浓度均显著增加,新生毛细血管管腔样结构数量显著增加(均P<0.01)。对照组和甘露醇组中上述各指标比较无差异(均P>0.05)。结论:高糖诱导HRMEC模型中miR-519d-3p表达下调,而HIF-1α蛋白表达上调。HIF-1α是miR-519d-3p的靶基因,miR-519d-3p靶向HIF-1α增加细胞增殖并降低细胞凋亡和炎症反应,从而减轻高糖诱导的HRMEC功能障碍并抑制血管生成。

缺氧诱导因子1α与卵泡抑素样蛋白1对老年急性脑梗死患者功能结局预测价值

目的探讨老年急性脑梗死(ACI)患者卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与凋亡分子的表达,对功能结局的预测价值。方法选取2021年6月至2022年6月温州市人民医院收治的220例老年ACI患者作为ACI组,同期200例老年健康体检者作为健康组。ACI患者溶栓治疗后3个月日常生活活动能力量表评分≤60分记为功能结局不良组,>60分记为功能结局良好组。检测所有入组患者血清FSTL1、HIF-1α及相关凋亡分子B淋巴细胞瘤2基因(Bcl-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达。结果ACI组血清HIF-1α、FSTL1、Caspase-3表达水平显著高于健康组,Bcl-2表达水平显著低于健康组(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,ACI组血清HIF-1α、FSTL1表达水平与Caspase-3呈正相关(P<0.01),与Bcl-2表达水平呈负相关(P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,入院美国国立卫生研究院卒中量表评分(OR=1.933,95%CI:1.008~3.705,P=0.047)、发病至治疗时间(OR=2.038,95%CI:1.335~3.112,P=0.001)、HIF-1α(OR=1.865,95%CI:1.202~2.892,P=0.005)和FSTL1(OR=2.160,95%CI:1.142~4.084,P=0.018)是影响老年ACI患者溶栓治疗后功能结局的独立危险因素。HIF-1α和FSTL1联合检测的敏感性(87.9%)和曲线下面积(0.804)显著高于单项检测(P<0.05)。结论HIF-1α、FSTL1可能通过调节凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2表达,HIF-1α和FSTL1与神经损伤相关,对于老年ACI患者早期溶栓后功能结局具有预测价值。

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/Yes相关蛋白(YAP)在非酒精性脂肪性肝病中的调控作用

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是目前最为常见的慢性肝病,并与多种代谢性疾病密切相关,如2型糖尿病、胰岛素抵抗,以及与高血压和血脂异常相关的心脑血管并发症。NAFLD病因和病理机制复杂,微环境因素和基因表达调节异常存在于疾病进展的各个阶段,并通过累加效应促进疾病发展。缺氧诱导因子(HIF)是核转录因子、Yes相关蛋白(YAP)是转录辅助调节因子,二者通过调节肝脂质沉积与氧化应激,促进炎性因子释放,与NAFLD进展密切相关。本文对HIF-1α/YAP在NAFLD及其相关代谢性疾病进展中的作用进行综述,为探索NAFLD疾病进展过程中的相关治疗靶点提供理论依据。

MicroRNA-210在缺血性脑卒中中的作用研究进展

缺血性脑卒中是我国成年人致残和死亡的主要原因之一,可导致脑细胞和组织缺血缺氧性损害,引发机体神经功能障碍。其病因复杂,发病率高,预后差,一直是临床医学研究的重点。然而,目前脑卒中治疗方法仍然有限,机制尚且不明。MicroRNA-210是一种短核苷酸链,以转录后的方式调节蛋白质表达,具有治疗缺血性脑卒中的潜力。在神经细胞中,MicroRNA-210参与缺血性脑卒中的抗炎症反应、抗凋亡作用、抑制氧化应激、促进神经元可塑性和血管生成,发挥神经保护作用,这将为缺血性脑卒中的治疗提供有效靶点和干预策略。

超声下肺腺癌血流分级与肿瘤组织MVD、VEGF、HIF-1α表达及临床分期的关系及其意义

目的探讨超声下肺腺癌血流分级与肿瘤组织微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及临床分期的关系及其意义。方法回顾性分析108例肺腺癌患者的临床资料,根据肿瘤超声下血流分级分为血流0级组(A组)、Ⅰ级组(B组)、Ⅱ级组(C组)、Ⅲ级组(D组)。对比4组患者肿瘤组织MVD值及VEGF、HIF-1α阳性表达情况,分析超声下肺腺癌血流分级与肿瘤组织MVD值及VEGF、HIF-1α表达及临床分期的相关性。结果各组肿瘤组织MVD值和VEGF、HIF-1α阳性表达比例比较差异均具有显著性(F=116.487,χ^(2)=7.143、6.982,P<0.05),B、C、D组肿瘤组织MVD值明显高于A组,C、D组明显高于B组,D组明显高于C组(P<0.05);C、D组VEGF、HIF-1α阳性表达比例均高于A组,D组高于B、C组(χ^(2)=4.589~112.502,P<0.05)。血流分级与肿瘤组织MVD值、VEGF阳性表达比例、HIF-1α阳性表达比例及临床分期均呈正相关(r=0.705~0.836,P<0.05)。结论超声下肺腺癌血流分级与肿瘤组织MVD值及VEGF、HIF-1α表达均具有相关性,且与临床分期相关,此有助于超声下对肿瘤早期及术前情况进行评估。

胃癌中HIF-1a、VEGF及Glut1的表达

目的探讨HIF-1a、VEGF及Glut1在胃癌中的表达及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学SP法检测120例胃癌组织中HIF-1a、VEGF及Glut1的表达。结果HIF-1a、VEGF及Glut1在胃癌组织中的阳性表达率分别为70%、61.7%、69.2%,明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。HIF-1a、Glut1的阳性表达与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);VEGF的阳性表达与组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);HIF-1a分别与VEGF及Glut1在胃癌组织中表达存在密切的相关性(rs1=0.681,P<0.001;rs2=0.626,P<0.001)。结论HIF-1a、VEGF及Glut1的阳性表达可以作为胃癌侵袭转移潜能的生物学指标,且这些指标的表达对于临床早期干预治疗具有重要的指导意义。

高原久居汉族老年男性血清骨代谢生化指标、Chemerin与缺氧诱导因子1α的变化及相关性

背景:研究表明,低氧对成骨细胞生成的影响与氧浓度及低氧持续时间有关。然而高原低氧环境下老年男性久居汉族血清骨代谢如何?与脂肪细胞因子Chemerin和缺氧诱导因子的关系未见报道。目的:分析高原老年男性久居汉族血清骨代谢生化指标、脂肪细胞因子Chemerin、缺氧诱导因子的变化情况及不同指标的相关性。方法:162例高原老年男性久居汉族人分为1 980 m组83例和3 300 m组79例。采集2组受试者外周静脉血,利用酶联免疫吸附法检测两组受试者血清骨特异性碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶5b、人脂肪细胞因子Chemerin水平、缺氧诱导因子1α水平,并进行比较分析。结果与结论:(1)1 980 m组的Chemerin因子水平显著低于3 300 m组,骨特异性碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶5b显著高于3 300 m组(P<0.05);(2)1 980 m组的缺氧诱导因子1α水平显著低于3 300 m组(P<0.05);(3)人脂肪细胞因子Chemerin、缺氧诱导因子1α与抗酒石酸酸性磷酸酶5b、骨特异性碱性磷酸酶血清水平之间呈负相关(P均<0.01)。(4)结果表明,海拔较高环境下老年男性久居汉族血清骨代谢生化指标、脂肪细胞因子Chemerin等指标会发生一定的变化,低氧环境产生了重要的影响。

红细胞分布宽度和血管生成素2及缺氧诱导因子1α对慢性心力衰竭远期预后的影响

目的探究外周血红细胞分布宽度(RDW)、血管生成素2(Ang-2)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达水平对慢性心力衰竭(心衰)患者远期预后的影响。方法选择慢性心衰急性发作患者287例,根据远期预后情况分为存活组244例和死亡组43例,比较2组血清Ang-2、RDW、HIF-1α、B型钠尿肽(BNP)水平,采用ROC曲线分析预测价值。结果与存活组比较,死亡组血清Ang-2、RDW、HIF-1α、BNP水平明显升高(P=0.000)。血清Ang-2、RDW、HIF-1α水平与慢性心衰患者远期预后呈正相关(r=0.542,r=0.443,r=0.477,P=0.000),是慢性心衰患者远期不良预后的危险因素(P<0.01)。3项指标联合检测预测慢性心衰患者远期预后的曲线下面积为0.974(95%CI:0.947~1.000),明显高于各项指标单独检测(P<0.05)。结论血清Ang-2、RDW、HIF-1α增加是慢性心衰患者远期不良预后的危险因素,3项指标联合检测对慢性心力衰竭患者远期预后有较高的预测价值。

HIF-1α与VEGF在动脉粥样硬化闭塞症患者缺血下肢血管及肌组织中的表达及意义

目的:研究缺氧诱导因子1(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)在动脉粥样硬化闭塞症(ASO)患者缺血下肢的表达及分布规律,为应用HIF-1α基因治疗缺血性疾病提供实验依据。方法:应用免疫组织化学SP法对15例ASO截肢患者肢体的血管、肌组织及3例正常人肌组织中的HIF-1α、VEGF蛋白进行检测;同时应用CD34标记血管,根据CD34阳性的血管内皮细胞数测定微血管密度(MVD)。结果:ASO患者缺血肢体主干血管及缺血肌组织内HIF-1α、VEGF表达灰度值较正常人均明显增加,MVD计数增加。增加最高的是胫后动脉(HIF-1α为932.5±545.2,VEGF为354.5±75.8,MVD为38.4±8.4),股浅动脉、胫前动脉、小腿缺血肌肌间动脉、小腿缺血肌以及足坏死肌中HIF-1α和VEGF表达量均明显低于胫后动脉;在缺血血管壁内,HIF-1α、VEGF表达量及MVD计数均随着缺血程度的加重而增加;而在缺血肌组织内,HIF-1α、VEGF表达量及MVD计数增加均与缺血程度无关联;HIF-1α、VEGF在缺血肌组织内的表达量均明显低于缺血大血管。结论:HIF-1α、VEGF在ASO患者缺血肢体主干血管和缺血肌组织中均有较高水平表达,但在缺血肌组织内的表达均明显低于缺血大血管。

骨形态发生蛋白2联合突变型低氧诱导因子1α修复激素性股骨头缺血性坏死

背景:骨形态发生蛋白2是目前发现的唯一的一种可单独诱导骨形成的生长因子,但是研究发现骨形态发生蛋白2单一基因的促血管生成作用较弱,无法在新生骨组织处产生足量的毛细血管,所以在诱导骨形成过程中还需要与其他诱导因子协同作用。低氧诱导因子1α在促进新生血管的形成方面有重要作用。目的:观察腺病毒介导的人骨形态发生蛋白2联合突变型低氧诱导因子1α(Ad-BMP-2-IRES-HIF-1α^(mu))转染骨髓间充质干细胞对激素性股骨头缺血性坏死的修复作用。方法:(1)转染Ad-BMP-2-IRES-HIF-1α^(mu)到骨髓间充质干细胞,检测碱性磷酸酶活性、钙结节茜素红染色检测其成骨能力;(2)建立激素性股骨头缺血性坏死兔模型,随机分为3组:实验组股骨坏死部位移植转染Ad-BMP-2-IRES-HIF-1α^(mu)的骨髓间充质干细胞;对照组移植未转染的骨髓间充质干细胞;空白组移植细胞培养液。移植8周后,Westen blot法检测骨形态发生蛋白2和低氧诱导因子1α蛋白表达;苏木精-伊红染色组织学观察股骨头缺血性坏死修复情况;墨汁灌注透明切片血管形态学观察股骨头缺损区域血管生成情况。结果与结论:(1)转染Ad-BMP-2-IRES-HIF-1α^(mu)的骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶活性和钙结节数量均高于未转染的细胞,说明转染Ad-BMP-2-IRES-HIF-1α^(mu)能促进骨髓间充质干细胞的成骨分化;(2)实验组骨形态发生蛋白2和低氧诱导因子1α蛋白表达高于对照组与空白组(P<0.05);移植8周后,实验组缺损区周边观察到明显的成骨反应,与对照组及空白组相比,实验组空骨陷窝率低(P<0.05),骨小梁面积百分比高(P<0.05);墨汁灌注实验显示:实验组出现血管化现象,并出现骨陷窝结构,血管间有清晰的连通脉络相互间构成网络,股骨头下血管分布及血管网的形成基本正常,实验组墨汁灌注血管面积为114.22±3.78,高于对照组(63.78±2.61)和空白组(21.39±3.52),差异有显著性意义(P<0.05);(3)提示:骨形态发生蛋白2联合突变型低氧诱导因子1α可以促进激素性股骨头缺血性坏死的修复。

携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达

背景:人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达,具有提高成骨活性的作用。目的:观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法:通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α,构建携带低氧诱导因子1α的慢病毒表达质粒Lenti-HIF-1α-eGFP,与LentiPac HIV混合包装质粒共包装293Ta细胞,获得病毒;采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1,4,7,14 d后,用实时荧光定量PCR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论:Lenti-HIF-1α-eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞,实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti-HIF-1α-eGFP感染后第4天开始明显过表达,且持续至14 d。结果表明低氧诱导因子1α可以提高骨髓间充质干细胞的成骨活性。

乏氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子C及CD44v6在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)中乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)和CD44v6蛋白的表达情况及其与食管癌临床病理特征的关系。方法选择58例ESCC患者,取其手术标本或胃镜活检病理组织,采用免疫组织化学SP法检测ESCC组织中HIF-1α、VEGF-C和CD44v6蛋白的表达。结果 58例患者的ESCC组织中,HIF-1α、VEGF-C和CD44v6均呈高表达,阳性表达率分别为51.7%、53.4%和60.3%。不同性别、临床分期、分化程度的患者,其ESCC组织中HIF-1α、VEGF-C和CD44v6的阳性表达率间差异无统计学意义(P>0.05),而淋巴结转移者ESCC组织中VEGF-C和CD44v6的阳性表达率显著高于无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α表达与VEGF-C表达呈相关(P<0.05)。结论 VEGF-C、CD44v6表达与淋巴结转移有关,检测二者可作为判定ESCC侵袭转移能力的客观指标,而HIF-1α表达在食管癌淋巴结转移中的作用尚待进一步扩大样本验证。

斯钙素蛋白1下调钙离子及缺氧诱导因子1α水平调控肾癌细胞抗缺氧增殖平衡

目的：研究缺氧条件下斯钙素蛋白1（STC-1）下调钙离子及缺氧诱导因子1α（HIF-1α）水平后对肾癌细胞增殖平衡的影响.方法：构建正常及缺氧两种条件肾癌细胞（GRC-1）模型,分别用0.1、0.5、1.0 nmol/L的STC-1溶液干预48h,并设空白对照（只加生理盐水）.MTT法检测肾癌细胞生长情况,逆转录PCR和ELISA方法检测细胞内STC-1、HIF-1α的基因和蛋白表达,荧光分光光度计检测细胞内钙离子水平,分光光度计检测三磷酸腺苷（ATP）含量.结果：缺氧可使肾癌细胞内HIF-1α、STC-1基因和蛋白的表达和钙离子水平均显著升高（均P＜0.05）,而外源性STC-1可逆转上述改变（均P＜0.05）,并存在量效关系;缺氧明显抑制肾癌细胞的生长和ATP的生成（均P＜0.05）,而外源性STC-1亦可逆转上述改变（均P ＜0.05）,随着外源性STC-1浓度的增高,ATP生成逐渐增加,但STC-1对两种条件下肾癌细胞模型的增殖促进作用却减少.结论：外源性STC-1可能通过下调细胞内钙离子含量,提高ATP产量来促进肾癌细胞的抗缺氧增殖,但对HIF-1α的进行性抑制又阻碍了肾癌细胞的增殖,该作用可能参与了肾癌抗缺氧增殖的机制.