Long non-coding RNA CDKN2B-AS1 promotes hepatocellular carcinoma progression via E2F transcription factor 1/G protein subunit alpha Z axis

BACKGROUND A series of long non-coding RNAs(lncRNAs)have been reported to play a crucial role in cancer biology.Some previous studies report that lncRNA CDKN2B-AS1 is involved in some human malignancies.However,its role in hepatocellular carcinoma(HCC)has not been fully deciphered.AIM To decipher the role of CDKN2B-AS1 in the progression of HCC.METHODS CDKN2B-AS1 expression in HCC was detected by quantitative real-time polymerase chain reaction.The malignant phenotypes of Li-7 and SNU-182 cells were detected by the CCK-8 method,EdU method,and flow cytometry,respectively.RNA immunoprecipitation was executed to confirm the interaction between CDKN2B-AS1 and E2F transcription factor 1(E2F1).Luciferase reporter assay and chromatin immunoprecipitation were performed to verify the binding of E2F1 to the promoter of G protein subunit alpha Z(GNAZ).E2F1 and GNAZ were detected by western blot in HCC cells.RESULTS In HCC tissues,CDKN2B-AS1 was upregulated.Depletion of CDKN2B-AS1 inhibited the proliferation of HCC cells,and the depletion of CDKN2B-AS1 also induced cell cycle arrest and apoptosis.CDKN2B-AS1 could interact with E2F1.Depletion of CDKN2B-AS1 inhibited the binding of E2F1 to the GNAZ promoter region.Overexpression of E2F1 reversed the biological effects of depletion of CDKN2B-AS1 on the malignant behaviors of HCC cells.CONCLUSION CDKN2B-AS1 recruits E2F1 to facilitate GNAZ transcription to promote HCC progression.

益气升清方调节HIF-1α/NLRP3信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的影响

目的 探究益气升清方调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组(S组),模型组(M组),益气升清方低、中、高剂量组(3.465、6.930、13.860 g/kg)及益气升清方高剂量+HIF-1α激活剂DMOG组(13.860 g/kg益气升清方+40 mg/kg DMOG),每组15只。采用线栓法构建脑卒中模型。造模成功后进行神经功能缺陷评估;TTC染色评估脑梗死体积;ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平;HE染色检测缺血皮质区病理变化;TUNEL染色检测神经元凋亡;Western blot检测焦亡及HIF-1α/NLRP3通路相关蛋白表达。结果 与S组比较,M组神经功能缺陷评分、梗死体积、IL-1β含量、IL-18含量、神经细胞凋亡率、胞膜穿孔蛋白D-N端(GSDMD-N)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、HIF-1α、NLRP3蛋白水平均上升(P<0.05);与M组比较,低、中、高剂量益气升清方组神经功能缺陷评分、梗死体积、IL-1β含量、IL-18含量、神经细胞凋亡率、GSDMD-N、Caspase-1、HIF-1α、NLRP3蛋白水平均下调(P<0.05);DMOG减弱了高剂量益气升清方对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的改善作用。结论 益气升清方可能通过下调HIF-1α/NLRP3信号通路减轻缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡。

不同方法联合放疗治疗薄型瘢痕疙瘩的疗效及对MMPs、HIF-1α、TGF-β1的影响

目的探讨不同方法联合放疗治疗薄型瘢痕疙瘩的疗效及对基质金属蛋白酶(MMPs)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法回顾性选取2020年10月至2022年9月内蒙古医科大学附属肿瘤医院(内蒙古自治区肿瘤医院)整形外科收治的胸腹部瘢痕疙瘩患者62例(瘢痕疙瘩数94个),依据治疗方法不同分为激光联合放疗(LCR)组(30例,瘢痕疙瘩数47个)、手术联合放疗(SCR)组(32例,瘢痕疙瘩数47个)。LCR组行CO 2点阵LCR,SCR组行SCR。观察两组治疗12个月后临床疗效、复发情况。比较两组治疗前、治疗12个月后的患者与观察者瘢痕评估量表(POSAS)评分、温哥华瘢痕量表(VSS)评分、瘢痕组织基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、HIF-1α、TGF-β1等细胞因子水平的变化。结果LCR组总有效率(93.62%)大于SCR组(76.60%),复发率(4.26%)小于SCR组(19.15%),差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗12个月后,LCR组POSAS、VSS评分分别为(23.96±2.64)、(5.28±0.54)分,均低于SCR组[(33.96±3.59)、(6.55±0.68)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。LCR组瘢痕组织MMP-2、MMP-9及HIF-1α、TGF-β1表达量分别为111.65±13.55、106.76±12.68、1.24±0.14、1.10±0.12,均低于SCR组(127.96±14.71、121.08±14.33、1.55±0.17、1.22±0.13),差异均有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较(38.30%vs.46.81%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论LCR和SCR均可改善薄型瘢痕疙瘩症状,抑制瘢痕疙瘩复发,但LCR的治愈率更高,复发率更低,对瘢痕组织MMPs及HIF-1α、TGF-β1表达抑制作用更强,且安全性较高,值得临床推荐。

MiR-181c-5p对卵巢癌干细胞样细胞肿瘤血管生成拟态的作用及其机制

目的探讨miR-181c-5p对卵巢癌干细胞样细胞(OCS-LCs)肿瘤血管生成拟态(VM)的作用及其机制。方法采用无血清悬浮培养法将人卵巢癌细胞系OVCAR3细胞诱导形成OCS-LCs。将OVCAR3细胞分为A~C组,各组分别转染NC-miR-181c-5p、siRNA-miR-181c-5p和pRNA-miR-181c-5p。通过成球实验评估A~C组细胞成球能力。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测A~C组细胞miR-181c-5p的相对表达量,采用Western blot实验检测A~C组细胞Oct-4、Nanog、HIF-1α和VEGF蛋白相对表达量。采用CCK-8实验检测A~C组细胞的活性,采用三维立体培养实验检测A~C组的血管形成率。结果OVCAR3细胞成功被诱导形成OCS-LCs。RT-qPCR实验结果显示,B组细胞的miR-181c-5p相对表达量显著低于A组,C组高于A组(t=2.25、8.68,P<0.05)。成球实验结果显示,B组与A组、A组与C组相比,细胞的成球周期显著缩短,最大的细胞球直径显著增大,成球率显著增加(t=5.56~33.66,P<0.05)。Western blot实验结果表明,B组与A组、A组与C组相比,Oct-4、Nanog、HIF-1α和VEGF蛋白相对表达量显著升高(t=4.51~56.15,P<0.05)。CCK-8实验结果显示,B组的细胞活性高于A组,C组低于A组(F=97.70~281.80,P<0.05)。三维立体培养实验结果显示,B组与A组、A组与C组相比较,血管形成率显著性提高(t=3.70、18.67,P<0.05)。结论miR-181c-5p可能通过降低细胞中HIF-1α和VEGF蛋白的表达,从而抑制OCS-LCs的VM形成。

丁苯酞软胶囊联合瑞舒伐他汀治疗急性脑梗死患者的临床观察及对血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平的影响

目的探究丁苯酞软胶囊联合瑞舒伐他汀治疗急性脑梗死患者的疗效及对血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA)、应激诱导蛋白2(Sestrin2)水平的影响。方法前瞻性选取2021年1月至2022年12月在秦皇岛市第一医院治疗的急性脑梗死患者101例作为研究对象,按照信封法将患者分为对照组(n=50)和研究组(n=51)。对照组行常规治疗并瑞舒伐他汀治疗,研究组在对照组基础上联合丁苯酞软胶囊治疗。统计分析两组患者治疗前及治疗14 d后的美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分、FuglMeyer评测法(FMA)评分、改良Rankin量表(mRS)评分、血流动力学指标(血浆黏度、全血高切黏度、低切黏度、红细胞压积、红细胞变形指数)、血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平并比较临床疗效的组间差异。结果治疗14 d后,两组患者的NIHSS评分和mRS评分均较治疗前降低,FMA较治疗前升高,且研究组患者的NIHSS评分和mRS评分分别为(4.03±0.38)、(3.01±0.45)分,均低于对照组,FMA为(80.64±9.16)分,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗14 d后,两组患者的血浆黏度、全血高切黏度、低切黏度、红细胞压积均较治疗前降低,红细胞变形指数均较治疗前升高,且研究组的血浆黏度、全血高切黏度、低切黏度、红细胞压积分别为(1.56±0.33)mPa·s、(4.78±0.31)mPa·s、(9.81±0.64)mPa·s、(0.37±0.05)%,均低于对照组,红细胞变形指数为0.78±0.11,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗14 d后,两组患者的血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平均降低,且研究组患者血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平分别为(690.56±65.12)ng/mL、(13.65±2.13)μg/L、(11.33±1.45)ng/mL,均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组近期疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05);研究组总有效率为90.20%,高于对照组(64.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用丁苯酞软胶囊联合瑞舒伐他汀治疗急性脑梗死患者可显著提高患者临床治疗效果,提高肢体活动能力,缓解神经功能损伤,降低血清HIF-1α、Lp-PLA、Sestrin2水平,具有较高的临床应用潜力。

急性呼吸窘迫综合征患儿外周血单个核细胞中CD73、HIF-1α的表达及其临床意义

目的探究急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿外周血单个核细胞(PBMCs)中5′胞外核苷酸酶(CD73)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达及其临床意义。方法选取2022年2月至2023年4月广安市人民医院收治的117例ARDS患儿为研究对象,根据病情严重程度分为轻症组(n=27)、中症组(n=38)和重症组(n=52)。比较3组患儿PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平及肺部感染指数(CPIS)评分。采用Pearson相关系数分析CD73、HIF-1α表达水平与CPIS评分的相关性。治疗后随访3个月,根据患儿生存状况分为生存组(n=34)和死亡组(n=83),比较两组患儿PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平对ARDS患儿预后的诊断价值。结果轻症组PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平分别为0.44±0.06、0.60±0.11、(4.82±0.81)分,均显著低于中症组[0.53±0.10、0.76±0.14、(6.33±1.02)分]、重症组[0.62±0.07、0.89±0.08、(7.03±1.14)分],中症组PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平均显著低于重症组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关系数分析结果显示,CD73、HIF-1α相对表达水平与CPIS评分均呈显著正相关(r=0.623、0.687,P<0.05)。生存组PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平分别为0.53±0.08、0.74±0.15,显著低于死亡组(0.60±0.08、0.88±0.09),差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CD73、HIF-1α单独及联合预测ARDS患儿预后的敏感度分别为79.41%、85.29%、94.12%,曲线下面积(AUC)为0.746、0.801、0.843,联合检测预测价值更高。结论ARDS患儿PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平随疾病严重程度增加而升高,且与患儿肺部感染呈显著相关性,检测患儿PBMCs中CD73、HIF-1α表达水平对预后具有较高的诊断价值。

LncRNA PSMA3-AS1调节miR-140-3p/DDX5轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的探讨长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型的反义RNA1(PSMA3-AS1)调节miR-140-3p/DEAD box p68 RNA解旋酶(DDX5)轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法qRT-PCR、Western blot、免疫组化法分别检测40例肺癌组织和细胞系中PSMA3-AS1、miR-140-3p、DDX5表达。将A549细胞分为:control组、si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3-AS1+inhibitor-NC组、si-PSMA3-AS1+miR-140-3p inhibitor组,qRT-PCR检测转染效率;MTT法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭;Western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及DDX5蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与PSMA3-AS1和DDX5的关系;构建肺癌裸鼠模型,分为si-NC、si-PSMA3-AS1组,测量肿瘤质量与体积,qRT-PCR检测移植瘤组织中miR-140-3p表达,免疫组化法检测移植瘤组织Ki-67、DDX5蛋白表达。结果在肺癌组织/细胞系中,PSMA3-AS1 mRNA、DDX5蛋白表达升高,miR-140-3p mRNA表达水平降低(P<0.05);敲低PSMA3-AS1表达可显著抑制A549细胞增殖、迁移与侵袭,降低PCNA、MMP-2、vimentin、DDX蛋白表达,促进miR-140-3p、Bax、E-cadherin表达及细胞凋亡(P<0.05);下调miR-140-3p,可减弱敲低PSMA3-AS1对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用及对细胞凋亡的促进作用(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-140-3p与PSMA3-AS1、miR-140-3p与DDX5存在靶向调控关系(P<0.05);体内实验显示,抑制PSMA3-AS1表达可显著降低移植瘤质量和体积,降低Ki-67、DDX5表达水平,升高miR-140-3p表达(P<0.05)。结论敲低PSMA3-AS可能通过调节miR-140-3p/DDX5轴,抑制肺癌细胞的增殖和EMT,促进细胞凋亡。

miR-519d-3p靶向HIF-1α抑制高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞功能障碍及血管生成

目的:明确miR-519d-3p对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)功能障碍与血管生成的影响,并阐明其对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的调控机制。方法:通过5、30mmol/L葡萄糖分别诱导HRMEC建立正常(NG)和高糖(HG)细胞模型。将HRMEC分为对照组(HG细胞模型转染阴性对照模拟物)、甘露醇组(对照组加入25mmol/L甘露醇)、miR-519d-3p过表达组(HG细胞模型转染miR-519d-3p模拟物)、miR-519d-3p联合HIF-1α过表达组(HG细胞模型共转染miR-519d-3p模拟物和HIF-1α过表达载体)。实时荧光定量PCR法检测各组miR-519d-3p的表达情况。Western blotting法检测各组HIF-1α蛋白的表达情况。荧光素酶报告基因实验检测miR-519d-3p和HIF-1α的结合位点情况。CCK-8法检测各组细胞增殖情况。Hoechst 33342染色法检测各组细胞凋亡情况。ELISA法检测各组细胞外液炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6蛋白的表达情况。小管形成实验检测各组新生毛细血管管腔样结构形成情况。结果:与NG相比,HG细胞模型中miR-519d-3p表达显著减少,而HIF-1α蛋白表达显著增加(均P<0.01)。与对照组比较,miR-519d-3p过表达组中HIF-1α蛋白表达显著降低(P<0.01)。miR-519d-3p中“CGUGAAA”序列可以与HIF-1α3'-非编码区(3'-UTR)中“GCACUUU”序列特异性结合。与对照组比较,miR-519d-3p过表达组细胞24、48、72h吸光度值均显著增加,细胞凋亡率显著减少,细胞外液TNF-α、IL-1β、IL-6浓度均显著减少,新生毛细血管管腔样结构数量显著减少(均P<0.01)。与miR-519d-3p过表达组比较,miR-519d-3p联合HIF-1α过表达组细胞24、48、72h吸光度值均显著减少,细胞凋亡率显著增加,细胞外液TNF-α、IL-1β、IL-6浓度均显著增加,新生毛细血管管腔样结构数量显著增加(均P<0.01)。对照组和甘露醇组中上述各指标比较无差异(均P>0.05)。结论:高糖诱导HRMEC模型中miR-519d-3p表达下调,而HIF-1α蛋白表达上调。HIF-1α是miR-519d-3p的靶基因,miR-519d-3p靶向HIF-1α增加细胞增殖并降低细胞凋亡和炎症反应,从而减轻高糖诱导的HRMEC功能障碍并抑制血管生成。

巨噬细胞PDHA1基因敲除对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝细胞凋亡的影响

目的:探讨巨噬细胞丙酮酸脱氢酶E1 α1亚基(pyruvate dehydrogenase E1 subunit alpha 1), PDHA1在同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)中对肝细胞凋亡的作用。方法:随机选取6周龄体重相近的PDHA1基因正常野生型小鼠和巨噬细胞特异性PDHA1基因敲除(PDHA1^(iΔMΦ/iΔMΦ))小鼠各12只,均分别给予普通饮食和高Hcy饮食喂养12周后用于后续实验。应用琼脂糖凝胶电泳技术对PDHA1^(iΔMΦ/iΔMΦ)小鼠进行基因鉴定;Western blot检测两种基因型小鼠骨髓巨噬细胞PDHA1蛋白表达;使用全自动生化分析仪检测小鼠血清Hcy和丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)水平;试剂盒检测肝组织上清液甘油三酯(triglyceride, TG)和ALT水平;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察小鼠肝组织结构改变;qRT-PCR和Western blot检测小鼠肝组织中凋亡相关指标Bax和caspase-3的mRNA和蛋白表达。结果:PDHA1^(iΔMΦ/iΔMΦ)小鼠均表达Lyz2-Cre及PDHA1-flox,且巨噬细胞中PDHA1蛋白表达减少(P<0.05),表明巨噬细胞特异性PDHA1敲除小鼠模型构建成功。高Hcy饮食组PDHA1^(iΔMΦ/iΔMΦ)小鼠血清Hcy水平升高(P<0.05),表明高Hcy血症模型构建成功。高Hcy饮食组小鼠肝组织上清液TG和ALT水平显著升高(P<0.05),且巨噬细胞中PDHA1敲除后,血清及肝组织中ALT水平升高更为显著。HE染色结果表明,高Hcy饮食使小鼠肝脏发生脂肪变性,巨噬细胞中PDHA1基因敲除可加重肝细胞的变性坏死。PDHA1^(iΔMΦ/iΔMΦ)组凋亡相关指标Bax和caspase-3表达均显著升高(P<0.05)。结论:抑制小鼠巨噬细胞中PDHA1表达,可促进高Hcy饮食诱导的NAFLD小鼠模型中肝细胞的凋亡,这可能是加重NAFLD肝损伤的其中一个机制。

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/Yes相关蛋白(YAP)在非酒精性脂肪性肝病中的调控作用

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是目前最为常见的慢性肝病,并与多种代谢性疾病密切相关,如2型糖尿病、胰岛素抵抗,以及与高血压和血脂异常相关的心脑血管并发症。NAFLD病因和病理机制复杂,微环境因素和基因表达调节异常存在于疾病进展的各个阶段,并通过累加效应促进疾病发展。缺氧诱导因子(HIF)是核转录因子、Yes相关蛋白(YAP)是转录辅助调节因子,二者通过调节肝脂质沉积与氧化应激,促进炎性因子释放,与NAFLD进展密切相关。本文对HIF-1α/YAP在NAFLD及其相关代谢性疾病进展中的作用进行综述,为探索NAFLD疾病进展过程中的相关治疗靶点提供理论依据。

微小RNA⁃630对U251神经胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨微小RNA-630(miR-630)对U251神经胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其调控机制。方法荧光定量PCR(qPCR)检测人脑胶质瘤组织和细胞的miR-630表达水平。采用脂质体转染法向U251细胞转染miR-630模拟物mimics(miR-630 mimics组)及阴性对照序列(miR-NC mimics组),另选取未转染细胞为空白对照(Control)组,经qPCR验证miR-630 mimics显著增强miR-630基因表达后进一步进行功能研究:CCK-8和Hoechst染色法检测细胞增殖变化,采用流式细胞术、qPCR和Western blot分别检测凋亡细胞百分率和凋亡基因表达,qPCR和双荧光素酶报告基因系统分别检测20S蛋白酶体α1亚基(PSMA1)的表达及其与miR-630靶向关系验证。结果miR-630在胶质瘤组织和细胞表达下调。与Control组和miR-NC mimics组相比,miR-630 mimics组U251细胞增殖能力下降,细胞凋亡增加,抗凋亡基因Bcl-2表达降低,cleaved caspase-3表达增加。过表达miR-630显著降低PSMA1表达和荧光素酶活性,而对突变后PSMA1荧光素酶活性无影响。PSMA1在胶质瘤组织表达上调,且其表达与miR-630呈负相关。结论过表达miR-630可能通过降低PSMA1表达来抑制U251神经胶质瘤细胞增殖并促进凋亡。

MicroRNA-210在缺血性脑卒中中的作用研究进展

缺血性脑卒中是我国成年人致残和死亡的主要原因之一,可导致脑细胞和组织缺血缺氧性损害,引发机体神经功能障碍。其病因复杂,发病率高,预后差,一直是临床医学研究的重点。然而,目前脑卒中治疗方法仍然有限,机制尚且不明。MicroRNA-210是一种短核苷酸链,以转录后的方式调节蛋白质表达,具有治疗缺血性脑卒中的潜力。在神经细胞中,MicroRNA-210参与缺血性脑卒中的抗炎症反应、抗凋亡作用、抑制氧化应激、促进神经元可塑性和血管生成,发挥神经保护作用,这将为缺血性脑卒中的治疗提供有效靶点和干预策略。

齐齐哈尔地区汉族人群钠离子通道1A基因DNA甲基化与家族性原发性高血压的关系研究

目的探究齐齐哈尔地区汉族人群钠离子通道1A(SCNN1A)基因DNA甲基化与家族性原发性高血压的关系。方法选取2020年10月—2022年1月在齐齐哈尔市居住≥3代且年龄>18岁的汉族原发性高血压患者180例作为研究对象。根据高血压确诊时间将其分为初诊组(入组时新发高血压)和既往组(入组前已确诊高血压),每组90例。另选取该地区90例无高血压家族史的健康体检者作为对照组。收集并整理各组患者的临床基础资料,采用焦磷酸测序法检测SCNN1A基因DNA甲基化,比较各组患者的SCNN1A基因编码区CpG1~CpG6位点DNA甲基化,以多因素Logistic回归分析家族性原发性高血压的影响因素。结果各组性别、年龄、BMI、吸烟史、饮酒史、LDL、TC及FBG比较,差异无统计学意义(P>0.05)。初诊组和既往组TG、UA高于对照组,HDL低于对照组(P<0.05)。各组SCNN1A基因编码区CpG3、CpG4、CpG5、CpG6位点甲基化比较,差异无统计学意义(P>0.05)。初诊组和既往组SCNN1A基因编码区CpG2位点甲基化低于对照组,既往组CpG1位点甲基化高于对照组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:HDL[OR=5.078(95%CI:2.326,11.090)]及CpG2[OR=6.322(95%CI:2.845,13.805)]位点甲基化降低,TG[OR=4.486(95%CI:2.054,9.797)]、UA[OR=5.557(95%CI:2.545,12.134)]及CpG1[OR=5.463(95%CI:2.502,11.930)]位点甲基化升高是家族性原发性高血压的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CpG1、CpG2位点DNA甲基化单一及联合诊断家族性原发性高血压诊断的AUC分别为0.743(95%CI:0.621,0.865)、0.707(95%CI:0.612,0.841)和0.839(95%CI:0.753,0.925)。结论齐齐哈尔地区汉族人群DNA甲基化与家族性原发性高血压关系密切,且SCNN1A基因CpG1位点甲基化存在升高趋势,CpG2位点甲基化存在降低趋势。

缺氧诱导因子1α与卵泡抑素样蛋白1对老年急性脑梗死患者功能结局预测价值

目的探讨老年急性脑梗死(ACI)患者卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与凋亡分子的表达,对功能结局的预测价值。方法选取2021年6月至2022年6月温州市人民医院收治的220例老年ACI患者作为ACI组,同期200例老年健康体检者作为健康组。ACI患者溶栓治疗后3个月日常生活活动能力量表评分≤60分记为功能结局不良组,>60分记为功能结局良好组。检测所有入组患者血清FSTL1、HIF-1α及相关凋亡分子B淋巴细胞瘤2基因(Bcl-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达。结果ACI组血清HIF-1α、FSTL1、Caspase-3表达水平显著高于健康组,Bcl-2表达水平显著低于健康组(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,ACI组血清HIF-1α、FSTL1表达水平与Caspase-3呈正相关(P<0.01),与Bcl-2表达水平呈负相关(P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,入院美国国立卫生研究院卒中量表评分(OR=1.933,95%CI:1.008~3.705,P=0.047)、发病至治疗时间(OR=2.038,95%CI:1.335~3.112,P=0.001)、HIF-1α(OR=1.865,95%CI:1.202~2.892,P=0.005)和FSTL1(OR=2.160,95%CI:1.142~4.084,P=0.018)是影响老年ACI患者溶栓治疗后功能结局的独立危险因素。HIF-1α和FSTL1联合检测的敏感性(87.9%)和曲线下面积(0.804)显著高于单项检测(P<0.05)。结论HIF-1α、FSTL1可能通过调节凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2表达,HIF-1α和FSTL1与神经损伤相关,对于老年ACI患者早期溶栓后功能结局具有预测价值。

磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α通过调控跨膜受体蛋白1对子宫内膜癌病人中性粒细胞的影响

目的探究磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)基因通过调控跨膜受体蛋白1(Notch1)的表达对子宫内膜癌病人血中性粒细胞的影响。方法选择2020年3月至2021年9月在海南医学院第一附属医院接受治疗的50例子宫内膜癌病人(病例组)和50例健康女性(对照组)为分析对象。检测病例组和实验组血清中中性粒细胞(NE)、淋巴细胞(LY)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT),计算NLR指数(中性粒细胞计数/淋巴细胞计数)。逆转录PCR(RT-PCR)和Western blotting检测PIK3CA和Notch1的相对表达量。选取人原髓细胞白血病细胞/全反式维甲酸细胞(HL-60/ATRA细胞),在不同时间下进行培养,验证PIK3CA通过Notch1对NE的影响。结果病例组病人NE、LY、PLT指标以及NLR指数为(6.03±0.40)×10^(9)/L、(2.15±0.31)×10^(9)/L、(257.40±37.51)×10^(9)/L、(3.69±0.41)分别高于对照组的(5.13±0.50)×10^(9)/L、(1.68±0.16)×10^(9)/L、(202.10±23.39)×10^(9)/L、(2.44±0.39),病例组病人Hb水平为(138.72±13.79)g/L低于对照组Hb水平(149.52±10.65)g/L,说明子宫内膜癌病人炎症微环境异常。病例组PIK3CA和Notch1相对表达量为(3.351±0.496)、(3.467±0.440)高于对照组的(1.581±0.275)、(1.519±0.279)。HL-60/ATRA细胞培养实验验证了PIK3CA高表达促进Notch1高表达进而抑制NE的增殖。结论在NE中,Notch1表达量随着PIK3CA表达量升高而升高,NE细胞活力逐渐下降,初步证实了PIK3CA基因通过调控Notch1的表达对子宫内膜癌中NE产生影响。

超声下肺腺癌血流分级与肿瘤组织MVD、VEGF、HIF-1α表达及临床分期的关系及其意义

目的探讨超声下肺腺癌血流分级与肿瘤组织微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及临床分期的关系及其意义。方法回顾性分析108例肺腺癌患者的临床资料,根据肿瘤超声下血流分级分为血流0级组(A组)、Ⅰ级组(B组)、Ⅱ级组(C组)、Ⅲ级组(D组)。对比4组患者肿瘤组织MVD值及VEGF、HIF-1α阳性表达情况,分析超声下肺腺癌血流分级与肿瘤组织MVD值及VEGF、HIF-1α表达及临床分期的相关性。结果各组肿瘤组织MVD值和VEGF、HIF-1α阳性表达比例比较差异均具有显著性(F=116.487,χ^(2)=7.143、6.982,P<0.05),B、C、D组肿瘤组织MVD值明显高于A组,C、D组明显高于B组,D组明显高于C组(P<0.05);C、D组VEGF、HIF-1α阳性表达比例均高于A组,D组高于B、C组(χ^(2)=4.589~112.502,P<0.05)。血流分级与肿瘤组织MVD值、VEGF阳性表达比例、HIF-1α阳性表达比例及临床分期均呈正相关(r=0.705~0.836,P<0.05)。结论超声下肺腺癌血流分级与肿瘤组织MVD值及VEGF、HIF-1α表达均具有相关性,且与临床分期相关,此有助于超声下对肿瘤早期及术前情况进行评估。

高原久居汉族老年男性血清骨代谢生化指标、Chemerin与缺氧诱导因子1α的变化及相关性

背景:研究表明,低氧对成骨细胞生成的影响与氧浓度及低氧持续时间有关。然而高原低氧环境下老年男性久居汉族血清骨代谢如何?与脂肪细胞因子Chemerin和缺氧诱导因子的关系未见报道。目的:分析高原老年男性久居汉族血清骨代谢生化指标、脂肪细胞因子Chemerin、缺氧诱导因子的变化情况及不同指标的相关性。方法:162例高原老年男性久居汉族人分为1 980 m组83例和3 300 m组79例。采集2组受试者外周静脉血,利用酶联免疫吸附法检测两组受试者血清骨特异性碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶5b、人脂肪细胞因子Chemerin水平、缺氧诱导因子1α水平,并进行比较分析。结果与结论:(1)1 980 m组的Chemerin因子水平显著低于3 300 m组,骨特异性碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶5b显著高于3 300 m组(P<0.05);(2)1 980 m组的缺氧诱导因子1α水平显著低于3 300 m组(P<0.05);(3)人脂肪细胞因子Chemerin、缺氧诱导因子1α与抗酒石酸酸性磷酸酶5b、骨特异性碱性磷酸酶血清水平之间呈负相关(P均<0.01)。(4)结果表明,海拔较高环境下老年男性久居汉族血清骨代谢生化指标、脂肪细胞因子Chemerin等指标会发生一定的变化,低氧环境产生了重要的影响。

胃癌中HIF-1a、VEGF及Glut1的表达

目的探讨HIF-1a、VEGF及Glut1在胃癌中的表达及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学SP法检测120例胃癌组织中HIF-1a、VEGF及Glut1的表达。结果HIF-1a、VEGF及Glut1在胃癌组织中的阳性表达率分别为70%、61.7%、69.2%,明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。HIF-1a、Glut1的阳性表达与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);VEGF的阳性表达与组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);HIF-1a分别与VEGF及Glut1在胃癌组织中表达存在密切的相关性(rs1=0.681,P<0.001;rs2=0.626,P<0.001)。结论HIF-1a、VEGF及Glut1的阳性表达可以作为胃癌侵袭转移潜能的生物学指标,且这些指标的表达对于临床早期干预治疗具有重要的指导意义。

红细胞分布宽度和血管生成素2及缺氧诱导因子1α对慢性心力衰竭远期预后的影响

目的探究外周血红细胞分布宽度(RDW)、血管生成素2(Ang-2)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达水平对慢性心力衰竭(心衰)患者远期预后的影响。方法选择慢性心衰急性发作患者287例,根据远期预后情况分为存活组244例和死亡组43例,比较2组血清Ang-2、RDW、HIF-1α、B型钠尿肽(BNP)水平,采用ROC曲线分析预测价值。结果与存活组比较,死亡组血清Ang-2、RDW、HIF-1α、BNP水平明显升高(P=0.000)。血清Ang-2、RDW、HIF-1α水平与慢性心衰患者远期预后呈正相关(r=0.542,r=0.443,r=0.477,P=0.000),是慢性心衰患者远期不良预后的危险因素(P<0.01)。3项指标联合检测预测慢性心衰患者远期预后的曲线下面积为0.974(95%CI:0.947~1.000),明显高于各项指标单独检测(P<0.05)。结论血清Ang-2、RDW、HIF-1α增加是慢性心衰患者远期不良预后的危险因素,3项指标联合检测对慢性心力衰竭患者远期预后有较高的预测价值。

HIF-1α与VEGF在动脉粥样硬化闭塞症患者缺血下肢血管及肌组织中的表达及意义

目的:研究缺氧诱导因子1(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)在动脉粥样硬化闭塞症(ASO)患者缺血下肢的表达及分布规律,为应用HIF-1α基因治疗缺血性疾病提供实验依据。方法:应用免疫组织化学SP法对15例ASO截肢患者肢体的血管、肌组织及3例正常人肌组织中的HIF-1α、VEGF蛋白进行检测;同时应用CD34标记血管,根据CD34阳性的血管内皮细胞数测定微血管密度(MVD)。结果:ASO患者缺血肢体主干血管及缺血肌组织内HIF-1α、VEGF表达灰度值较正常人均明显增加,MVD计数增加。增加最高的是胫后动脉(HIF-1α为932.5±545.2,VEGF为354.5±75.8,MVD为38.4±8.4),股浅动脉、胫前动脉、小腿缺血肌肌间动脉、小腿缺血肌以及足坏死肌中HIF-1α和VEGF表达量均明显低于胫后动脉;在缺血血管壁内,HIF-1α、VEGF表达量及MVD计数均随着缺血程度的加重而增加;而在缺血肌组织内,HIF-1α、VEGF表达量及MVD计数增加均与缺血程度无关联;HIF-1α、VEGF在缺血肌组织内的表达量均明显低于缺血大血管。结论:HIF-1α、VEGF在ASO患者缺血肢体主干血管和缺血肌组织中均有较高水平表达,但在缺血肌组织内的表达均明显低于缺血大血管。