HIV-1 Tat蛋白激活AKT信号调节肝细胞脂肪代谢基因表达

目的 研究人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)Tat蛋白在调节人肝细胞脂肪代谢基因表达中的作用。方法 根据人肝脏中调节脂质生成的转录因子固醇调节元件结合蛋白-1c(Serbp1c)和碳水化合物调节元件结合蛋白(ChREBP)及其下游基因(Dgat、Lpk、Fasn和Scd-1)的cDNA碱基序列,设计并合成引物;培养人肝细胞株LO2,PI3K/AKT信号通路抑制剂PD98059预处理,Tat蛋白刺激细胞后,提取不同时间点的细胞总RNA,逆转录生成cDNA,应用定量PCR(q-PCR)检测人肝细胞中Srebp1c和ChREBP及其下游基因Dgat、Lpk、Fasn和Scd-1mRNA转录水平。结果 Tat蛋白显著增强人肝细胞中Srebp1c和ChREBP及其下游基因Dgat、Lpk、Fasn和Scd-1 mRNA表达水平,在刺激6h后达到峰值;而且PI3K/AKT信号通路抑制剂PD98059显著下调Tat诱导的Srebp1c和ChREBP及其下游基因Dgat、Lpk、Fasn和Scd-1基因转录。结论 HIV Tat蛋白在人肝细胞中对脂质生成有促进作用,进而调节肝细胞脂肪代谢。

吗啡对HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞中复制的影响

目的 附测定双抗体夹心法检测p24抗原表达.用Student-t检验或方差分析（ANOVA）比较不同细胞处理组间p24抗原表达差异;采用重复测量数据的方差分析比较不同时间吗啡处理组比对照组的p24抗原表达增加或减少倍数的变化趋势.结果 HIV-1感染MT2细胞后第3、4、5和6天,3个浓度的吗啡处理的（1）组的p24抗原表达[第3天：（4.44±0.30）、（5.59±0.25）和（4.60±0.24） ng/ml;第4天：（24.30±2.66）、（31.73±1.17）和（26.02±0.37） ng/ml;第5天：（56.30±1.26）、（81.77±2.49）和（63.66±2.57） ng/ml;第6天：（150.70±8.97）、（243.09±8.93）和（173.72±7.73） ng/ml]均高于（4）组[第3~6天分别为（1.93±0.05）、（8.03±0.09）、（15.30±0.91）、（41.01±0.84） ng/ml],差异有统计学意义（第3天：t值分别为14.15、24.74和19.14,P均〈0.01;第4天：t值分别为10.59、34.92和81.2,P均〈0.01;第5天：t值分别为45.83、43.51和30.07,P均〈0.01;第6天：t值分别为20.09、39.02和29.55,P均〈0.01）.3个浓度的吗啡处理的（1）组的p24抗原表达比（4）组增加的倍数,随HIV-1感染MT2细胞的时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义（F=842.18,P〈0.01）.HIV-1感染巨噬细胞组后第4、6、8和10天,3个浓度的吗啡处理的（5）组的p24抗原表达[第4天：（0.68±0.15）、（0.87±0.41）和（0.75±0.09） ng/ml;第6天：（1.64±0.57）、（2.07±0.12）和（1.75±0.17） ng/ml;第8天：（6.31±0.17）、（8.81±0.34）和（7.19±0.11） ng/ml;第10天：（32.30±17.55）、（50.74±17.55）和（39.74±0.56） ng/ml]均高于（8）组[第4、6、8、10天分别为（0.60±0.01）、（1.16±0.07）、（3.84±0.45）、（17.55±0.86） ng/ml],差异有统计学意义（第4天：t值分别为7.27、11.06和3.02,P均〈0.05;第6天：t值分别为8.93、11.3和5.45,P均〈0.01;第8天：t值分别为8.83、15.11和12.42,P均〈0.01;第10天：t值分别为13.65、17.84和36.69,P均〈0.01）.3个浓度的吗啡处理的（5）组的p24抗原表达比（8）组增加的倍数,随HIV-1感染时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义（F=135.58,P〈0.01）.结论 吗啡能够促进HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞内的复制,并且随着感染时间的延长而增加;吗啡促进HIV-1复制的作用可被纳洛酮阻断.