小檗碱抗流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性损伤的实验研究

目的观察小檗碱对流感病毒性肺炎小鼠肺组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达及炎性细胞渗出的影响,探讨其抗炎性损伤作用。方法 BALB/c小鼠108只随机分为正常组、模型组、小檗碱组。模型组和小檗碱组予25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒感染的小鼠肺炎模型,感染后1 h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,小檗碱组每日予药物0.005 g/kg腹腔注射,各组均给药2次/d,连续给药5 d。感染后第2、4、6日分别取材,免疫组化法检测肺组织中ICAM-1、VCAM-1的表达,对肺泡灌洗液(BALF)中白细胞进行分类计数。结果病毒感染后第2、4、6日,模型组肺组织中ICAM-1、VCAM-1的表达明显增强,小檗碱降低了ICAM-1、VCAM-1的表达水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);模型组BALF中白细胞总数、单个核细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数均明显升高,小檗碱组第6日BALF中白细胞总数、中性粒细胞数明显降低(P<0.01),第4日时BALF中单个核细胞数降低(P<0.01)。结论小檗碱能够抑制流感病毒性肺炎小鼠肺组织中ICAM-1、VCAM-1表达,减轻了炎性细胞渗出,对小鼠流感病毒性肺炎肺组织炎性损伤具有保护作用。

金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠心肌损伤中炎症细胞因子表达的影响

目的研究金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠心肌组织损伤的保护作用机制。方法随机将♂SD大鼠分成正常对照组、模型组、金荞麦(6、3、1.5g生药/kg)3个剂量组、左氧氟沙星(25mg/kg)组。计数外周血中白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN),观察肺和心肌组织的病理改变,免疫组化检测大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及细胞黏附因子-1(ICAM-1)蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠外周血中的WBC和PMN明显升高,肺脏和心肌组织损伤明显,并且模型组大鼠心肌组织中TNF-α和ICAM-1蛋白表达显著增强(P<0.01)。与模型组比较,金荞麦组和左氧氟沙星组大鼠外周血中的WBC和PMN明显降低,心肌组织损伤明显改善,大鼠心肌组织中TNF-α和ICAM-1蛋白表达明显减弱(P<0.05或P<0.01)。结论 TNF-α和ICAM-1蛋白表达上调参与了肺炎大鼠心肌组织的损伤,金荞麦可通过下调其表达来保护肺炎大鼠心肌组织的损伤作用。

黄精多糖对心脏重塑小鼠心脏组织中ICAM-1、VCAM-1蛋白表达的影响

目的观察黄精多糖对心脏重塑小鼠心脏组织中ICAM-1、VCAM-1蛋白表达的影响。方法皮下注射异丙肾上腺素,连续5天建立心脏重塑模型。灌胃给予黄精多糖治疗20天,实验结束后,取小鼠心脏检测心脏重量指数、观察心肌病理形态学变化,western blot测定心肌组织中ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达。取血分离血清,生物化学法检测血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;ELISA测定血清白细胞介素-6(interleukin6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的水平。结果与正常对照组相比,模型组心脏重量指数增加,血清中的IL-6、TNF-α含量增加,同时血清中MDA含量增加、SOD活性下降,心肌组织中ICAM-1、VCAM-1蛋白表达增加(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比较,黄精多糖中、大剂量可显著降低心脏重量指数;降低血清中炎症因子IL-6、TNF-α的含量;增加血清中SOD活性,降低MDA含量;下调心肌组织中ICAM-1、VCAM-1蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论黄精多糖可能通过抗氧化抗炎,降低心肌组织中ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达保护异丙肾上腺素导致的小鼠心脏重塑。

生肌象皮膏对糖尿病大鼠溃疡愈合中VCAM-1与ICAM-1的影响

[目的]探讨生肌象皮膏促进糖尿病大鼠溃疡创面愈合的免疫—炎症反应机制。[方法]将Wistar大鼠随机分为4组,1组为正常对照组,其余3组采用STZ尾静脉注射制备糖尿病模型,4组动物均于背部打孔,造成溃疡模型。3组糖尿病溃疡大鼠按照血糖和体质量分层随机分为糖尿病对照组、凡士林组、生肌象皮膏组。生肌象皮膏组外用生肌象皮膏纱条外敷,凡士林组用凡士林纱条外敷,正常对照组、糖尿病对照组均以生理盐水纱条外敷,观察创面组织血管细胞黏附分子(VCAM-1)与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达水平的变化。[结果]生肌象皮膏组大鼠糖尿病溃疡创面的愈合速度加快,与糖尿病对照组比较于第7、14、21、30天有统计学差异;生肌象皮膏组大鼠溃疡创面中VCAM-1表达水平与糖尿病对照组比较于第14、21、30天降低,有统计学差异(P<0.05),与凡士林组比较第14、21、30天降低,有统计学差异(P<0.05);糖尿病对照组大鼠溃疡创面中VCAM-1表达水平与正常对照组比较于第21、30天升高,有统计学差异(P<0.05);生肌象皮膏组大鼠创面组织ICAM-1表达水平与糖尿病对照组比较于第14、21、30天降低,有统计学差异(P<0.01),与凡士林组比较第21、30天降低,有统计学差异(P<0.05);与正常对照组比较,糖尿病对照组大鼠创面组织ICAM-1表达水平于第14、21、30天升高,有统计学差异(P<0.05)。[结论]生肌象皮膏促进糖尿病大鼠溃疡创面的愈合与其调节免疫—炎症反应有密切联系。

二苯乙烯苷对H_2O_2诱导血管内皮细胞黏附分子表达的影响

目的研究二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞P-selectin、E-selectin、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为空白对照组、H2O2组、辛伐他汀组、TSG组,运用逆转录聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验分别检测P-selectin、E-selectin、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1 mRNA与蛋白的表达。结果 200μmol·L-1的H2O2作用内皮细胞24 h后,P-selectin、E-selectin、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的mRNA和蛋白表达水平均明显上调;经TSG预处理内皮细胞4 h后,再加200μmol·L-1的H2O2作用内皮细胞24 h,结果显示:TSG能抑制H2O2诱导的内皮细胞P-selnecti、E-se-lectin、ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的mRNA和蛋白的表达。结论 TSG可抑制H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞黏附分子的表达。

银杏黄酮苷对氧化损伤内皮细胞产生NO、eNOS和ICAM-1的影响

目的观察银杏黄酮苷对氧化损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)产生NO、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和人可溶性细胞间黏附分子(ICAM-1)的影响。方法体外培养HUVEC,传至3代后,以不同浓度的银杏黄酮苷分别作用于HUVEC,然后进行氧化损伤处理。以硝酸还原酶法测定培养液上清中的NO水平,免疫细胞化学法检测内皮细胞eNOS的表达,ELISA法测定细胞培养液中ICAM-1的含量。结果HUVEC在氧化损伤(H2O2100μmol/L,2h)后产生NO的量显著减少(P<0.01),eNOS表达下调,ICAM-1表达上调;银杏黄酮苷可以剂量依赖性的增加内皮细胞NO生成量,上调eNOS的表达,下调ICAM-1表达。结论银杏黄酮苷可能通过增加HUVEC eNOS的表达增加N0的释放、抑制ICAM-1的表达等机制对内皮细胞起保护作用。

健脾益肠散对溃疡性结肠炎大鼠ICAM-1的影响

目的:探讨健脾益肠散对实验性溃疡性结肠炎(UC)大鼠细胞间黏附分子1(ICAM-1)的影响。方法:将健康SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为正常组和造模组;造模组采用TNBS/乙醇法复制UC大鼠模型;待复制模型成功后将造模组随机分为5组,分别为模型组、西药组及中药高、中、低剂量组,每组10只;灌胃相应药物3周后,HE染色检测各组大鼠结肠黏膜组织损伤情况,同时采用ELISA法检测血清中ICAM-1的水平,免疫组化法检测结肠组织中ICAM-1的表达。结果:模型组与正常组相比,大鼠结肠黏膜损伤评分、血清ICAM-1水平及结肠组织中ICAM-1表达均明显升高(P<0.01)。中药高、中剂量组血清ICAM-1水平和高、中、低剂量组结肠黏膜损伤评分、ICAM-1表达均较模型组下降(P<0.05或P<0.01)。中药中剂量组对ICAM-1的影响与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾益肠散可能通过调节ICAM-1而达到对UC大鼠肠黏膜的免疫保护,从而发挥治疗作用。

大肠癌中ICAM-1基因的表达及其对预后的影响

目的研究大肠癌中ICAM-1基因的表达,旨在探讨其在大肠癌局部进展中的作用。方法应用流式细胞术(flowcytometrytechniqueFCM)测定60例大肠癌和15例正常对照组结肠标本的ICAM-1蛋白表达量,蛋白表达量以荧光指数(fluorescentindexFI)表示,并将大肠癌根据临床病理分期、癌细胞分化程度、细胞学类型分组比较。其结果用统计软件包SPSS11.5进行统计学处理。结果大肠癌组ICAM-1基因蛋白的表达量明显高于正常对照组,P<0.01;转移组大肠癌ICAM-1基因蛋白的表达量明显高于未转移组,P<0.01;大肠癌中高分化腺癌与低分化腺癌ICAM-1基因蛋白FI值比较差异有显著性,P<0.01。结论ICAM-1基因的表达与大肠癌的发生和进展关系密切,值得临床注意。

EXPRESSION OF ICAM-1 AND LFA-1 MOLECULES IN RELATION TO RENAL ALLOGRAFT REJECTION IN RATS

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＩｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ，ｓｏｍｅｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓｈａｖｅｓｔｕｄｉｅｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｉｏｎｏｆＩＣＡＭ１ｍｏｌｅｃｕｌｅａｎｄｒｅｎａｌｇｒａｆｔｒｅｊｅｃｔｉｏｎｂｏ...

肝硬化患者血清载脂蛋白ApoA_1和细胞因子水平与肝功能损伤的相关性探讨

目的探讨了肝硬化患者血清载脂蛋白ApoA_1、可溶性L-Selection(L-选择素)和SICAM-I(细胞黏附分子-I)在肝硬化时造成肝功能损害过程中的作用。方法应用免疫比浊法和酶联免疫吸附法(ELISA法)对63例肝硬化患者进行了血清中载脂蛋白ApoA_1、L-选择素和SICAM-I水平检测及相关的肝功能生化指标进行相关分析,并与30例健康对照组比较。结果血清中载脂蛋白ApoA_1水平非常显著地低于健康对照组(P<0.01),而L-选择素、SICAM-I水平则显著高于健康对照组(P<0.01),且载脂蛋白ApoA_1水平与ALT(谷丙转氨酶)、TBIL(总胆红素)呈明显负相关,L-选择素、SICAM-I水平与ALT、TBIL呈明显正相关。结论检测肝硬化患者血清载脂蛋白ApoA_1、L-选择素和SICAM-I水平在一定程度上反映了机体的免疫功能状态和肝细胞损伤的程度,具有临床应用价值。

血管黏附分子及血栓调节蛋白在乙型肝炎病毒相关性肾炎中表达及其意义

目的:观察细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和血栓调节蛋白(TM)在HBV-GN不同临床病理类型中的表达特点,研究它们在HBV-GN进展中的作用。方法:回顾性分析68例HBV-GN患者的临床病理资料,采用免疫组化方法检测肾活检组织中ICAM-1、VCAM-1和TM的表达情况,分析其变化与临床病理指标的关系。结果:ICAM-l在HBV-GN肾小球和肾小管周围毛细血管有较强的表达,与正常对照组相比无明显差异。而ICAM-l和VCAM-1在肾小管上的表达均明显高于正常对照组。且不同病理类型中ICAM-l和VCAM-1在肾小管上的表达有明显差异。TM在增生硬化型(SGN)组肾小管周围毛细血管的表达较正常对照组及其他各种病理类型表达下调。随着肾小管间质病变程度的加重,ICAM-1和VCAM-1的表达则逐渐增加,则在重度病变组表达最多(P<0.05),TM则相反。肾小管上ICAM-1和VCAM-1的表达与肾小管间质病变评分呈正相关。TM的表达与肾小管间质病变评分呈负相关。结论:ICAM-1和VCAM-1在HBV-GN患者肾小管的表达增加,诱导单核巨噬细胞浸润,可能是导致肾小管免疫病理损伤而促进疾病进展的重要发病机制。肾组织中TM表达不能完全反映血管内皮细胞受损的程度。

鼠全脑缺血再灌注损伤时ICAM-1mRNA的表达及PMNL、Mφ的浸润情况

目的 :评估不同缺血再灌注时间鼠细胞间粘附分子 - 1 (ICAM- 1 ) m RNA的表达及多形核白细胞 (PMNL)、单核巨噬细胞 (Mφ)的浸润。 方法 :建立全脑四血管夹闭缺血再灌注 (I/ R)模型。40只 SD大鼠随机分五组 :第 组为非缺血非再灌注组 ;第 、 、 、 组缺血 30 m in后分别再灌注 2 h、4h、1 2 h、2 4h。处死大鼠取脑组织 ,逆转录PCR(RT- PCR)检测 ICAM- 1 m RNA表达 ,光镜下检查 PMNL、Mφ在损伤组织中的浸润情况。 结果 :PMNL在再灌注 2 h时开始聚集浸润 ,第 、 、 、 组与第 组比较 ,PMNL明显增加 (P<0 .0 1 )。而 Mφ在再灌注 4h才增加 ,与组 比较 ,Mφ的浸润数量也明显增多 (P<0 .0 1 )。RT- PCR表明 ,第 、 组与第 组比较 ,ICAM- 1 m RNA表达显著增加 (P<0 .0 1 ) ;其表达于 4h达高峰 ,1 2 h后逐渐下降 ,但仍高于正常对照组。 结论 :I/ R损伤后 ,在早期 PMNL 浸润较少 ,晚期逐渐增多 ,而且 PMNL 浸润时间较早 (2 h以后 ) ,Mφ聚集浸润较晚 (4h以后 )。ICAM- 1m RNA在正常大鼠脑组织有少量表达 ,I/ R损伤可明显诱导 ICAM- 1 m RNA表达 (P<0 .0 1 ) ,在再灌注 4h后达峰值。

冠心病患者细胞间粘附分子-1变化的研究

目的:观察心绞痛、急性心肌梗死时血清细胞问粘附分子-1(ICAM-1)水平的变化,以探讨其与冠心病的关系及意义。方法:选择健康体检者(正常对照组)30例、稳定性心绞痛(SAP)患者(SAP组)20例、不稳定性心绞痛(UAP)患者(UAP组)25例和急性心肌梗死(AMI)患者(AMI组)30例,采用酶联免疫吸附分析法(ELISA法)检测血清中ICAM-1浓度的变化。结果:(1)SAP组、UAP组、AMI组与正常对照组比较;血清中ICAM-1水平显著升高(P<0.01);(2)与SAP组比较,UAP组、AMI组血清ICAM-1水平显著升高(P均<0.01);(3)与UAP组比较,AMI组血清ICAM-1水平显著升高(P<0.05)。结论:血清中ICAM-1水平的高低与冠心病的严重程度有关,具有判断病情和预后的价值。

MHCⅠ类分子及ICAM-1在IL-2、IL-4、IL-6基因转染的瘤苗在诱导CTL中的作用

本文研究了IL-2、IL-4、IL-6基因转染后B16黑色素瘤细胞表面MHCⅠ类抗原及ICAM-1的表达水平,并探讨了其在CTL诱导过程中的作用.结果表明,IL-2、IL-4、IL-6基因转染的B16黑色素瘤细胞表面MHCⅠ类抗原及ICAM-1表达均高于野生型B16黑色素瘤细胞及转染对照质粒的B16黑色素瘤细胞.体内接种后,小鼠脾脏CTL活性明显增强,CTL培养体系中IFN-γ、TNF-α的分泌水平也增高.在CTL诱导体系中加入抗ICAM-1单抗可以抑制CTL的活化,加入抗MHCⅠ类分子单抗后可使CTL的活化完全阻断.这提示细胞因子基因转染可能通过使肿瘤细胞表面MHCⅠ类抗原、ICAM-1的表达增加,从而增强瘤苗的免疫原性.

NF-кBp65和ICAM-1在急性心肌缺血和再灌注损伤中表达的意义

目的 观察急性心肌缺血再灌注后NF-кBp65和ICAM-1在心肌组织中表达的规律,探讨急性心性猝死的诊断指标。方法 用免疫组织化学方法观察兔心肌缺血再灌注后NF-кBp65和ICAM-1蛋白在不同实验组中的表达规律,以正常组作为对照。结果(1)正常对照组:NF-кBp65蛋白未见表达,ICAM-1蛋白在心肌组织中有低水平表达;(2)心肌缺血组:心肌组织中均可观察到NF-кBp65和ICAM-1蛋白的表达;(3)心肌缺血再灌注组:心肌缺血再灌注0.5h,即可发现NF-кBp65和ICAM-1蛋白的表达;心肌缺血再灌注1h,心肌组织中NF-кBp65的表达至高峰,ICAM-1蛋白的表达逐渐增加;心肌缺血再灌注2h,心肌组织中NF-кBp65的表达下降,ICAM-1蛋白的表达至高峰;心肌缺血再灌注4h,心肌组织中NF-кBp65和ICAM-1蛋白的表达均逐渐下降。结论 在心肌缺血再灌注时,心肌组织中有NF-кBp65和ICAM-1的表达,并随时间呈一定规律性变化。

缺氧诱导因子-1对大鼠缺血再灌注损伤后急性炎症应答的影响

目的观察缺氧诱导因子-1对大鼠心肌缺血再灌注损伤后急性炎症应答的影响。方法健康清洁级大鼠24只,随机分为3组:二甲基乙二酰基甘氨酸(TMOG)组、对照组、假手术组,每组8只。TMOG组,在缺血与再灌注损伤模型建立前24h进行腹腔内注射20ug/gTMOG;对照组,在缺血与再灌注损伤模型建立前24h进行腹腔内注射生理盐水0.5mL;除假手术组,其余2组通过结扎冠状动脉左前降支60min,然后松开180min建立心肌缺血再灌注损伤动物模型;假手术组不结扎冠状动脉左前降支。3组大鼠均在实验终点采右心房血,分离血清,测定血清中的细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)的表达水平;处死动物取出心脏,测定大鼠心肌组织的缺氧诱导因子-1的mRNA表达。结果TMOG组缺氧诱导因子-1的mRNA表达比对照组明显增多(P<0.05);TMOG组血清中的ICAM-1及IL-8的表达水平明显降低(P<0.05)。结论缺氧诱导因子-1能通过抑制ICAM、IL-8的合成,减少中性粒细胞的浸润,从而改善心肌缺血再灌注损伤,对心肌缺血再灌注损伤具有重要保护作用,为防治心肌缺血再灌注损伤提供了新的治疗思路。

转染CD80(B7-1)基因前后人肿瘤细胞系表面标志表达

动物实验证实协同刺激分子CD80(B7-1)是促进抗肿瘤免疫应答的重要分子.本文应用RT-PCR,FACS技术检测了人肿瘤细胞系及EBV转化的B细胞CD80的表达,结果表明除Raji细胞、EBV转化的B细胞CD80阳性外,3AO、MCF-7、MDA-453、MKN-45、Hela细胞均为阴性.用我室建立的CD80逆转录病毒载体转染包装细胞PA317,筛选高滴度病毒上情感染人肿瘤细胞,得到CD80阳性表达的肿瘤细胞克隆.利用转染前后的人乳腺癌细胞系MDA-453作ICAM-I、HLA class Ⅰ、classⅡ分子表达的分析,结果表明转染有CD80基因的MDA-453细胞ICAM-Ⅰ、HLA classⅠ分子表达上调,class Ⅱ分子的表达未见改变.

Grave患者^(131)I治疗前后血清细胞间粘附分子-1水平的研究

目的 :探讨ICAM - 1在Grave(GD)病发病中的作用。方法 :应用ELISA法测定GD患者131I治疗后不同时期血液ICAM的水平 ,并与正常对照组比较。结果 :Grave病 1周后 ,ICAM - 1明显升高 ,并与FT3、FT4 成正相关 ,6个月后ICAM - 1显著低于治疗前组 ,但仍高于正常组。Grave眼病 (GO)患者血清ICAM - 1水平明显高于GD病人 ,而有甲亢患者ICAM - 1明显高于无甲亢患者。结论 :ICAM - 1能动态反映GD的情况。在GO早期 。

脉复生通过核因子-κB通路对脂多糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

【目的】观察脉复生(主要由牛大力、熟地黄、白花蛇舌草等组成)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(ECV304)内核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达的影响。【方法】体外培养ECV304细胞,实验分为正常对照组,LPS诱导组(终浓度为1μg/m L),LPS诱导+脉复生高、中、低剂量组(终浓度分别为10、1、0.1μg/m L),采用Western-blot法检测各组细胞中NF-κB p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮合酶(i NOS)、环加氧酶-2(COX-2)、血管细胞黏附因子-1(ICAM-1)及细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的蛋白表达水平。【结果】与正常对照组比较,LPS诱导组细胞上清液中NF-κB p65、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达均显著增加(P<0.01);脉复生各剂量组能不同程度地减少LPS诱导细胞中NF-κB p65、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达水平,其中中、高剂量组作用显著(P<0.05或P<0.01)。【结论】脉复生可通过抑制LPS诱导的ECV304细胞中NF-κB、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达,调节NF-κB信号通路,从而发挥保护血管内皮细胞的作用。