人参皂苷Rg3对子宫内膜异位症组织中ID-1和NRP-1基因表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg3对子宫内膜异位症(EMs)组织中ID-1和NRP-1基因表达的影响。方法采用SuperArray功能分类基因芯片检测的方法筛选EMs血管生成相关基因,并用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行验证。结果促血管生成的ID-1和NRP-1基因在异位子宫内膜细胞中表达明显高于在位子宫内膜细胞及正常子宫内膜细胞(P<0.05);经人参皂苷Rg3作用后ID-1和NRP1基因在异位子宫内膜细胞中表达明显低于在位子宫内膜细胞及正常子宫内膜细胞(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3有抑制子宫内膜异位细胞中ID-1和NRP1基因表达的作用,ID-1和NRP1基因可能在EMs血管生成中发挥重要作用。

大肠癌组织中id-1和P53表达的意义

目的:探讨分化抑制因子-1(id-1)和P53在大肠癌发展过程中的意义及两者的相关性.方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测id-1和P53在51例大肠癌组织、14例癌旁组织和15例正常组织中的表达.结果:id-1和P53在大肠癌组织中的阳性表达率高于正常组织及癌旁组织(癌组织vs正常组织,癌旁组织P<0.05);id-1阳性表达率与大肠癌的分化程度、浸润深度、Duckes分期及局部淋巴结转移之间的差异有统计学意义(P<0.05);P53阳性表达率与癌浸润深度、Dukes分期及局部淋巴结转移之间的差异有统计学意义(P<0.05);id-1和P53在大肠癌中表达存在正相关性(r=0.440,P<0.01).结论:id-1的过表达是细胞恶性变的标志之一,P53的表达与之有关,二者在大肠癌的转移和生物学行为中发挥着重要作用.

食管细胞系和癌组织中分化抑制因子Id-1mRNA的表达

目的:探讨分化抑制因子Id-1基因在食管癌组织和食管癌细胞系中的表达状况。方法:采用RT-PCR方法检测食管癌细胞系(EC109、EC1、EC18)、食管永生化上皮细胞系(NECA6-E6E7和NECA6-E6E7-hTERT)及20例食管癌及其配对癌旁正常组织中Id-1mRNA基因的表达状况。结果:EC109、EC1、EC18、NECA6-E6E7和NECA6-E6E7-hTERT均出现Id-1mRNA的表达。正常食管上皮中未见其表达,癌旁组织中Id-1mRNA阳性表达率为35%(7/20),癌组织中为65%(13/20),有升高趋势,但差异无统计学意义(χ2=3.6,P>0.05)。结论:Id-1基因可能参与了食管癌的癌变过程。

靶向Id-1基因的RNA干扰对人矽肺癌细胞增殖的影响

目的探讨RNA干扰技术沉默Id-1基因表达后对矽肺癌细胞株增殖能力的影响。方法针对Id-1基因mRNA靶向设计合成短发夹RNA,构建重组pGFU6/neo质粒,重组质粒转染矽肺癌YTLMC-90细胞株。反转录-聚合酶链式反应检测转染后Id-1基因的转录;免疫印迹法检测Id-1,核转录因子NF-κB/p50、NF-κB/p65,Bcl-2,Bax,环氧合酶-2,c-Myc基因,血管内皮细胞生长因子,增殖细胞核抗原,β-actin基因的表达;流式细胞术检测细胞周期的变化;~3H-胸腺嘧啶核苷掺入法、四氮唑蓝法和克隆形成实验检测细胞的增殖活力。结果重组质粒经酶切和测序鉴定,证明靶基因序列正确,质粒构建成功;反转录-聚合酶链式反应和免疫印迹法检测结果表明,矽肺癌细胞转染重组质粒后Id-1基因mRNA转录和蛋白合成都明显下降,Bcl-2、环氧合酶-2、c-Myc、增殖细胞核抗原、血管内皮细胞生长因子等与增殖相关基因表达量下降;细胞周期被阻滞在G_0/G_1期,S期细胞明显减少;细胞活力降低,增殖受到抑制。结论构建的重组质粒能靶向沉默Id-1基因,并抑制YTLMC-90细胞株的增殖能力,因此Id-1基因可以作为人矽沉着病并发肺癌基因治疗的候选靶点。

子宫内膜异位症组织中Id-1基因的表达

目的 探讨DNA结合抑制蛋白-1基因在子宫内膜异位症组织中的表达.方法 选取体外培养成功的第3代培养量多的子宫内膜异位症患者的在位、异位子宫内膜细胞和对照组在位子宫内膜细胞各5例,采用Super Array功能分类基因芯片检测的方法 筛选子宫内膜异位症血管生成相关基因DNA结合抑制蛋白-1,并用逆转录-聚合酶链反应方法 进行验证.结果 基因芯片检测各组子宫内膜细胞中DNA结合抑制蛋白-1基因的表达水平差异有统计学意义（F=77.819,P=0.000）.子宫内膜异位症患者的在位、异位子宫内膜组织中DNA结合抑制蛋白-1比正常在位子宫内膜上调表达（t值分别为3.178、3.284,均P〈0.05）.各组间DNA结合抑制蛋白-1mRNA表达水平不同,其均数比较差异有统计学意义（F=126.699,P=0.000）.结论 子宫内膜异位症患者的异位内膜组织中DNA结合抑制蛋白-1水平较正常内膜组织明显上调表达,表明异位病灶血管生成可能与DNA结合抑制蛋白-1基因有关.

染色质免疫沉淀技术分析HePG2细胞TCF7L2蛋白与IDE基因转录启动子的结合

TCF7L2是一种重要的转录因子,通过Wnt信号途径,调节葡萄糖代谢.胰岛素降解酶(IDE)是细胞水平催化胰岛素降解的最关键的酶,与2型糖尿病(T2DM)高血糖、胰岛素抵抗、高胰岛素血症密切相关.为了检测HePG2细胞内转录因子TCF7L2与IDE基因启动子区的结合情况,采用染色质免疫沉淀技术结合PCR技术检测IDE基因启动子序列.结果表明,在特异性TCF7L2抗体免疫沉淀的DNA片段中扩增出IDE基因启动子序列,因此证实在HePG2细胞内,TCF7L2蛋白可与IDE基因转录启动子的特异区域结合,进而可能参与IDE基因的表达调控.

Id-1在喉癌组织中的表达

目的:证实Id-1基因在喉癌组织和喉癌细胞系中的表达。方法:通过反转录PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹杂交法(Western blot法)对30例喉癌组织,10例癌旁正常组织和一个喉癌细胞株在基因和蛋白水平上对ID-1的表达进行检测。结果:喉癌组织和喉癌细胞株中Id-1基因高表达,而正常喉组织中没有Id-1的表达;Id-1蛋白的表达与喉癌组织的、临床分期、分化程度具有相关性(均P<0.05)。结论:ID-1蛋白的表达与喉癌的发生。