清肠化瘀方治疗溃疡性结肠炎疗效及对IDO、Treg/Th17平衡的影响

【目的】观察清肠化瘀方治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的临床疗效,并探讨其治疗机制。【方法】将96例大肠湿热型活动期UC患者随机分为研究组和对照组,每组各48例。2组患者均给予美沙拉嗪肠溶片口服,研究组同时给予口服中药清肠化瘀方治疗,对照组同时给予口服清肠化瘀方低剂量配方颗粒(安慰剂,药物含量为试验药品的2.5%)治疗,2组疗程均为12周。观察2组患者治疗前后中医证候评分、改良Mayo评分、Baron内镜评分、血清吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)、白细胞介素(IL)-10、转化生长因子β(TGF-β)、IL-17、IL-21水平和外周血调节性T淋巴细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)含量的变化情况,并比较2组患者的临床疗效(包括有效率和缓解率)及肠镜疗效(包括内镜应答率和黏膜愈合率)。【结果】(1)治疗12周后,研究组的临床有效率、临床缓解率、内镜应答率、黏膜愈合率分别为95.83%(46/48)、83.33%(40/48)、97.92%(47/48)、91.67%(44/48),对照组分别为75.00%(36/48)、60.42%(29/48)、79.17%(38/48)、70.83%(33/48),组间比较,研究组的临床有效率、临床缓解率、内镜应答率、黏膜愈合率均高于对照组(P<0.05或P<0.01)。(2)治疗后,2组患者的腹痛、腹泻、脓血便、里急后重等各项中医证候评分以及改良Mayo评分和Baron内镜评分均较治疗前明显降低(P<0.01),且研究组的降低作用均明显优于对照组(P<0.01)。(3)治疗后,2组患者的血清IDO、IL-17、IL-21水平和外周血Th17含量均较治疗前明显降低(P<0.01),血清IL-10、TGF-β水平和外周血Treg含量均较治疗前明显升高(P<0.01),且研究组对血清IDO、IL-17、IL-21水平和外周血Th17含量的降低作用以及对血清IL-10、TGF-β水平和外周血Treg含量的升高作用均明显优于对照组(P<0.01)。【结论】清肠化瘀方应用于大肠湿热型活动期UC的治疗,可有效改善患者中医证候,促进肠黏膜的修复和愈合,临床疗效和肠镜疗效更优,其机制可能与通过抑制IDO的高表达而调节Treg/Th17平衡有关。

和厚朴酚抑制IDO1表达改善老年小鼠术后认知功能障碍的实验研究

目的探讨和厚朴酚对术后认知功能障碍防治作用的机制。方法将18月龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:Control组(溶剂预处理7 d,不进行手术)、HNK组(10 mg/kg和厚朴酚预处理7 d,不进行手术)、Surgery组(溶剂预处理7 d,脾切除术建模)和Surgery+HNK组(10 mg/kg和厚朴酚预处理7 d,脾切除术建模)。运用Morris水迷宫评估空间记忆功能,免疫荧光染色观察海马凋亡神经元比例,检测海马Bcl-2、Bax、活化Caspase-3以及吲哚胺2,3双加氧酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)表达水平,高效液相色谱检测色氨酸毒性代谢产物含量。结果与Surgery组相比,Surgery+HNK组水迷宫测试期第1、3、7天目标象限停留时间和平台穿越次数增加;术后第7天海马凋亡神经元比例降低;术后第1天Bcl-2表达增高、Bax表达水平降低、活化Caspase-3水平降低,IDO1表达降低;色氨酸毒性代谢物降低。结论和厚朴酚可通过抑制IDO1表达,调控色氨酸代谢,减轻海马神经元损伤,改善小鼠术后认知功能障碍。

IDO1抑制剂对肺癌细胞增殖和迁移的影响

目的研究吲哚胺2,3-双加氧酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)抑制剂对肺癌细胞增殖、迁移的影响及其相关机制。方法使用不同浓度梯度的IDO1抑制剂处理肺癌细胞A549和H460细胞系,通过细胞毒性和克隆形成实验检测细胞的增殖情况;通过Transwell和划痕愈合实验检测细胞的迁移情况;通过Western blot实验检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和铁死亡相关蛋白表达变化情况。结果与对照组对比,IDO1抑制剂组A549和H460细胞增殖和迁移能力明显受到抑制(P均<0.05);在EMT相关蛋白中,Snail、Slug、N-cadherin、Vimentin和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)蛋白表达量显著下调,而E-cadherin蛋白表达显著上调(P均<0.05);在铁死亡相关蛋白中,血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)和转铁蛋白(transferrin,Tf)的蛋白表达显著上调,而铁死亡负调控蛋白(SLC40A1、SLCTA11、GLS、GPX4)表达显著下调(P均<0.05)。结论IDO1抑制剂通过抑制EMT及诱导铁死亡,从而抑制肺癌细胞的增殖和迁移。

食管鳞状细胞癌患者血清HMGB1和IDO水平的变化及其临床意义

目的:检测食管鳞状细胞癌(ESCC)患者血清中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)的表达水平并探讨两者与临床病理特征及淋巴细胞亚群的相关性。方法:选取2021年3月至2022年8月在河北医科大学第四医院初次住院治疗的95例ESCC患者作为ESCC组,另选取40例健康体检人群作为对照组。ELISA法检测全部研究对象的血清HMGB1和IDO水平及不同组ESCC细胞培养上清中HMGB1、IDO和p65水平,流式细胞术检测全部研究对象外周血淋巴细胞亚群水平。WB法检测仅敲低HMGB1基因表达或敲低HMGB1后再加入NF-κB信号通路激活剂对ESCC细胞HMGB1、IDO和p65表达的影响。结果:ESCC组患者血清HMGB1和IDO水平明显高于对照组(均P<0.01);血清HMGB1和IDO表达水平升高是ESCC临床进展的独立危险因素(均P<0.01),二者联合检测对ESCC临床进展预测价值更高(P<0.01);血清HMGB1和IDO与ESCC患者的T分期、N分期和临床分期有明显关联(均P<0.05);ESCC组患者血清HMGB1与外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、B细胞和NK细胞绝对计数值呈显著负相关,而与Treg细胞百分率呈显著正相关(均P<0.05),血清IDO与外周血CD3+T细胞百分率和绝对计数值、CD4+T细胞百分率和绝对计数值、CD8+T细胞和B细胞绝对计数值呈显著负相关,而与Treg细胞百分率呈显著正相关(均P<0.05);血清HMGB1和IDO表达水平呈显著正相关(P<0.01)。si-HMGB1组KYSE30和ECA109细胞及其培养上清液中IDO和p65表达水平明显低于si-NC组和si-HMGB1+PMA组(均P<0.05)。结论:血清HMGB1和IDO与ESCC临床进展和机体免疫功能密切相关,具有成为ESCC肿瘤标志物和免疫治疗新靶点的潜力。HMGB1可能通过NF-κB信号通路促进IDO表达,进行双靶点联合治疗可能会取得更好的疗效。

IDO与卡铂诱导卵巢癌耐药的免疫学研究

目的:通过卡铂诱导卵巢癌耐药的细胞系对免疫细胞功能影响的研究,从免疫学角度探讨耐药卵巢癌转移或复发的机制。方法:建立卵巢癌SKOV3细胞对卡铂耐药的细胞系SKOV3/CBP,ELISA法检测SKOV3和SKOV3/CBP细胞吲哚2,3双加氧酶(IDO)表达;将两组细胞分别与淋巴细胞、NK细胞及C8^+T细胞培养,MTT法检测淋巴细胞的增殖能力、LDH检测NK细胞的杀伤能力及ELISPOT检测C8^+T细胞的杀伤能力。结果:与SKOV3细胞株相比,耐药细胞株SKOV3/CBP内IDO表达明显增强(P<0.05),且与其共培养的淋巴细胞的增殖能力、NK细胞的杀伤能力及CD8+T细胞的杀伤能力较SKOV3组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卡铂耐药SKOV3细胞内IDO表达增加,其可通过降低免疫细胞作用的敏感性而发生免疫逃逸促进耐药肿瘤的转移和复发,IDO可作为卵巢癌卡铂耐药治疗新的靶点。

IDO在卵巢恶性肿瘤中的研究进展

癌症现已成为我国常见疾病之一,妇科肿瘤是威胁女性健康的重要疾病。卵巢癌由于早期发现难度较大,为其预后及治疗带来了巨大的挑战。因此,卵巢癌的治疗至今困难重重。有学者就吲哚胺2,3-二氧酶与卵巢癌的关系进行研究,发现吲哚胺2,3-二氧酶的表达与卵巢癌的耐药和预后不良有关。本文将对吲哚胺2,3-二氧酶与卵巢恶性肿瘤的关系进行综述。

补肾益气方通过上调滋养细胞IDO的表达促进母胎界面NK细胞的表型转化

目的:研究补肾益气方诱导母胎界面耐受状态的机制及吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)对蜕膜NK细胞表型转化的影响。方法:用免疫组织化学方法测定正常绒毛组织和复发性流产患者绒毛组织内IDO的表达。体外培养人滋养细胞HTR-8/SVneo,用流式细胞术检测含药血清对HTR-8/SVneo IDO表达的影响。用含对照大鼠血清、含药大鼠血清及含药血清联合IDO阻断剂1-甲基色氨酸(1-MT)的培养液分别处理HTR-8/SVneo后与人外周NK细胞共培养,测定其对NK细胞的调节作用。结果:正常绒毛组织中IDO的表达较流产绒毛组织明显增加。含药血清可增强HTR-8/SVneo IDO的表达。外周NK细胞与含药血清处理过的HTR-8/SVneo共培养后,NK细胞表面CD16表达减低,CD56表达增加,且CD16的改变可被1-MT抑制。结论:补肾益气方可以通过上调滋养细胞IDO的表达诱导外周NK细胞向耐受型转变。

逍遥散对肝郁脾虚证模型大鼠海马TPH2与IDO1的调节作用

目的:观察肝郁脾虚证模型大鼠海马色氨酸羟化酶2(TPH2)与吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)表达的变化并探讨逍遥散的调节作用。方法:雄性SD大鼠随机分成4组,分别是正常组、模型组、逍遥散组、氟西汀组,每组6只。采用慢性束缚应激的方法制备大鼠肝郁脾虚证模型,造模持续21 d。通过荧光定量PCR与Western-blot方法检测各组大鼠海马TPH2与IDO1的表达情况。结果:模型组大鼠海马TPH2 mRNA的表达水平低于其余3组大鼠(P<0.05),逍遥散与氟西汀对TPH2 mRNA的表达有一定的上调作用;模型组大鼠海马IDO1 mRNA的表达显著增加(P<0.01),逍遥散与氟西汀对IDO1 mRNA表达的下调作用明显(P<0.01),且逍遥散对IDO1 mRNA的下调作用更明显。模型组、逍遥散组、氟西汀组大鼠海马TPH2的蛋白的表达低于正常组(P<0.01),逍遥散组TPH2蛋白表达高于模型组(P<0.05);模型组大鼠海马IDO1的蛋白表达显著高于其余3组(P<0.01)。结论:肝郁脾虚证模型大鼠海马TPH2的表达减少,IDO1的表达增多,逍遥散可能通过调节海马TPH2与IDO1的表达水平进而影响5-HT的含量,起到治疗作用。

基于虚拟筛选发现4-羟基喹啉类新型IDO1抑制剂

目的采用药效团模型和分子对接方法对ZINC、Chembridge数据库进行虚拟筛选,并通过酶活性测试进行验证,以发现新骨架结构的IDO1抑制剂。方法通过分子对接方法靶向IDO1酶活性位点,对ZINC数据库进行虚拟筛选,得到苗头化合物,进行酶活性测试,发现酶活性较好的先导化合物;随后用已进入临床研究的3个IDO1抑制剂构建药效团模型,以此模型对先导化合物类似物进行虚拟筛选,并测定化合物的抑酶活性;通过分子动力学模拟探究化合物与IDO1的结合模式。结果通过分子对接方法对超过200万个虚拟化合物进行筛选得到11个先导化合物并测酶活性,其中ZINC91657208抑酶活性较好,IC50约为77.15μmol/L,活性骨架为4-羟基喹啉。亚结构检索4-羟基喹啉的结构得到31个类似物,利用药效团虚拟筛选出10个化合物,并测酶活性,其中3个4-羟基喹啉类化合物均具有明显的抑酶活性,而Chembridge29374490为酶活性最好的IDO1抑制剂,其IC50约为37.78μmol/L。经分子动力学模拟平衡后,其骨架原子均方差偏根(root mean square deviation, RMSD)分别为1?和2.4?。结论从ZINC和Chembridge数据库中发现了新型4-羟基喹啉类IDO1抑制剂。

IDO基因转染小鼠Lewis肺癌细胞体外诱导Treg细胞增殖的研究

目的调节性T细胞(regulatory T cell,Treg cell)在肿瘤局部免疫耐受中发挥了重要作用,但其产生机制尚不清楚。本实验通过将吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)基因转染小鼠Lewis肺癌细胞,体外研究对Treg细胞的诱导增殖作用,为肺癌免疫耐受产生机制研究提供新的依据。方法采用阳离子脂质体Lipofectmine2000,将含人全长IDO基因的pEGFP-IDO真核表达质粒转染到小鼠Lewis肺癌细胞,G418筛选获得Lewis-IDO细胞,同时设置空白对照组(Lewis细胞)及空质粒转染组(Lewis-EGFP细胞),将3种细胞分别与小鼠T淋巴细胞混合培养,利用流式细胞技术分析3种细胞对Treg细胞的诱导增殖作用。结果IDO基因成功转染到小鼠Lewis细胞,与小鼠T淋巴细胞共培养后,Treg细胞增殖明显,和Lewis-EG-FP细胞(6.2%:4.9%,P<0.05)及Lewis细胞(6.2%:5.0%,P<0.05)相比差异有统计学意义。结论IDO基因转染小鼠Lew-is肺癌细胞在体外能明显增强Treg细胞的增殖,为肺癌局部免疫耐受机制研究提供了新的实验依据。

过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞改善异位移植心脏存活

目的:探讨过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)改善大鼠腹腔异位移植心脏的存活机制。方法:通过慢病毒载体GV308携带IDO基因转染大鼠骨髓间充质干细胞构建过表达IDO大鼠骨髓间充质干细胞。建立大鼠腹腔异位移植心脏模型,经尾静脉给予相应细胞处理:(1)利用超声心动图检测移植心脏心功能变化。(2)采用小动物活体成像系统评估移植心脏局部荧光强度。(3)再取各组受体大鼠的脾脏,采用流式细胞技术检测CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD274、CD45RA、CD45RA+CD45RB、Treg细胞的表达情况。(4)取各组移植心脏,采用HE染色评估炎性细胞浸润情况。(5)利用液相芯片检测各组血清IL-1ɑ、IL-4、IL-1β、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-18、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3因子的变化情况。结果:(1)给予相应细胞处理,可见过表达IDO-BMSCs处理后2 d移植心脏的EF、FS较其余各组有提高。(2)采用小动物活体评估可见过表达IDO-BMSCs组移植心脏局部荧光强度最强。(3)给予干预措施后2 d可见过表达IDO-BMSCs组脾脏细胞CD40、CD86、CD80、MHCⅡ、CD45RA、CD45RA+CD45RB表达降低,而CD274、Treg细胞的表达增高。(4)采用液相芯片检测各组提取血清可见在2 d时,过表达IDOBMSCs组血清中IL-1α、IL-4、IL-1β、IL-2、IFN-γ、IL-18是降低的;IL-10、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3表达量是升高的。HE染色证实过表达IDO-BMSCs组炎性细胞浸润少于其他组。结论:过表达IDO的BMSCs可以通过有效调节免疫DC、T细胞及细胞因子,从多个免疫层面改善移植心脏存活。

IDO1和IL-10在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系研究

目的探讨喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)和白细胞介素-10(IL-10)的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2015年7月—2017年7月邯郸市中心医院行喉部肿瘤切除术治疗,且术中病理确诊为LSCC的患者89例,留取LSCC组织及癌旁组织标本各89份。比较LSCC组织及癌旁组织中IDO1、IL-10的表达情况,以及LSCC患者不同临床病理特征间IDO1、IL-10表达的差异。绘制Kaplan-Meier生存曲线,比较生存时间和生存率。采用Cox多因素风险回归模型分析LSCC患者预后的影响因素。结果LSCC组织中IDO1、IL-10表达阳性率与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P<0.05),LSCC组织高于癌旁组织。不同TNM分期、分化程度、淋巴结转移、远处转移的LSCC患者IDO1、IL-10表达阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤位置的LSCC患者IDO1、IL-10表达阳性率,差异无统计学意义(P>0.05)。IDO1、IL-10阳性患者的生存时间短于IDO1、IL-10阴性患者(P<0.05)。Cox多因素风险回归模型分析结果显示,TNM分期较高[R^R=1.351(95%CI:1.055,1.730)]、分化程度较低[R^R=0.734(95%CI:0.562,0.959)]、淋巴结转移[R^R=1.448(95%CI:1.095,1.915)]、远处转移[R^R=1.246(95%CI:1.035,1.500)]、IDO1阳性表达[R^R=1.575(95%CI:1.156,2.146)]、IL-10阳性表达[R^R=1.771(95%CI:1.250,2.508)]是LSCC患者预后的影响因素(P<0.05)。结论LSCC组织中IDO1、IL-10阳性表达率异常升高,且与患者的临床病理特征及预后密切相关,可能是导致LSCC病情加重、预后不佳的重要分子机制之一。

IDO基因转染对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭和转移的影响研究

目的探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)基因转染对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭和转移能力的影响,并对其机制进行初步探讨。方法通过基因转染技术,利用阳离子脂质体将含有人全长IDO基因序列的真核表达质粒pEGFP-IDO转染到小鼠Lewis细胞,G418筛选获得Lewis-IDO细胞,设置空白对照组(Lewis细胞)及空质粒转染组(Lewis-EGFP细胞),观察细胞形态学改变,利用transwell侵袭小室检测3种细胞侵袭能力,将3种细胞分别种植到C57/LB小鼠,检测不同细胞种植瘤和转移灶的形成、小鼠外周血中调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的增殖。结果与Lewis-EGFP细胞和Lewis细胞相比,Lewis-IDO细胞贴壁比例增加,形态变为长梭形,伪足明显增多延长,前二者形态相似;Lewis-IDO细胞侵袭能力增强,破坏matrigel基质蛋白胶层进入下室内的细胞数明显增多,Lewis-IDO细胞、Lewis-EGFP细胞及Lewis细胞分别为237.4±22.1、166.0±14.2和185.6±19.5,前者与后二者比较差异具有统计学意义(P<0.05);种植Lewis-IDO、Lewis-EGFP及Lewis细胞的小鼠发生肝肺转移的小鼠数量及转移灶分别为12只44处、5只7处及4只7处,前者与后二者比较具有统计学意义(P=0.01);流式细胞术分析,种植Lewis-IDO细胞的小鼠外周血中Treg细胞比例明显高于Lewis-EGFP细胞组和Lewis细胞组,其比例分别为(13.7±4.5)%、(8.9±3.3)%和(9.2±3.4)%,前者与后二者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论IDO基因转染能改变Lewis细胞的培养形态,可以明显增强Lewis细胞的侵袭能力和转移能力,其机制可能与IDO对Lewis细胞形态学改变及诱导Treg细胞的增殖有关。

IDO基因稳定转染HepG_2细胞系的建立

目的建立稳定转染IDO基因的HepG2细胞系,为进一步研究IDO基因在肝癌免疫逃逸中的作用奠定基础。方法应用脂质体将真核细胞表达质粒pcDNA3.1-IDO和空载质粒pcDNA3.1转染入HepG2细胞,经G418进行筛选后,挑取单克隆进行培养,用反转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法验证获得的表达细胞株。结果经RT-PCR和Western blotting检测证实空质粒转染组和空白对照组HepG2细胞无IDO基因及蛋白的表达,而重组质粒组的HepG2细胞表达IDO基因和蛋白。结论 pcDNA3.1-IDO质粒体外稳定转染人肝癌细胞HepG2,可以有效地使IDO基因在RNA水平和蛋白水平均表达,成功建立了稳定转染基因IDO的HepG2细胞系,为进一步探讨该基因的功能奠定了一定基础。

IDO在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨弥漫大B细胞淋巴瘤组织中吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)的表达及意义。方法:收集2007年1月至2012年12月四川省肿瘤医院存档蜡块63例,其中弥漫大B细胞淋巴瘤组织41例,炎症反应性增生组22例,采用免疫组织化学技术检测IDO的表达,并分析与临床病理资料的关系及其临床意义。结果:弥漫大B细胞淋巴瘤组织中IDO阳性率为56.1%,明显高于反应性增生炎症组织22.7%,差异有统计学意义,P=0.011;IDO表达水平与Hans分型、B症状具有相关性,P=0.000、0.035;IDO的表达与患者的年龄、性别、分期、结外受侵数目、IPI、ECOG、LDH无明显相关,P>0.05;IDO与弥漫大B细胞淋巴瘤的近期疗效具有相关性,P=0.001;Log-rank单因素生存分析显示IDO的表达水平、Hans分型、B症状及IPI评分差异有统计学意义,P=0.009、0.003、0.000、0.030;Cox多因素生存分析,仅IDO表达水平具有显著性差异,P=0.024。结论:IDO的高表达,可能参与弥漫大B细胞淋巴瘤的免疫逃逸相关。IDO高表达与弥漫大B细胞淋巴瘤疾病进展、疗效及预后不良相关,提示IDO可能成为弥漫大B细胞淋巴瘤患者的独立预后因子及新的治疗靶点。

PD-1/PD-L1与IDO抑制剂在原发性肝细胞肝癌免疫治疗中的研究进展

原发性肝细胞癌(HCC)目前的治疗手段多样,除了根治性手术切除外,还包括新型多靶点抗肿瘤药物Sorafinib、联合化疗(如XELOX、FOLFOX4)、经动脉化疗栓塞术、射频消融、无水酒精注射等,但各种治疗手段都有其局限性,疗效不甚满意。随着对HCC病理机制的深入研究和分子生物学技术的发展,免疫检查点抑制剂已成为近年来的热门研究领域,其中,PD-1/PD-L1通路阻断剂和IDO抑制剂作为免疫检查点的代表,已成为争相研究的焦点。二者通过不同机制来阻断肿瘤细胞的免疫逃逸,最终杀灭肿瘤细胞,具有抗多种类型肿瘤的潜力,有望实质性延长患者总生存期。本文结合国内外近期相关研究和临床试验报道,对PD-1/PD-L1和IDO抑制剂在HCC治疗中的研究进展作一简要综述。

前房相关免疫偏离形成中IDO的表达及意义

目的探讨吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)在前房相关免疫偏离(ACAID)形成中的作用。方法分别将卯白蛋白(OVA)及其与完全弗氏佐剂的混合液注入BALB/C小鼠前房及后足垫内,皮内注射OVA观察迟发型超敏反应,评价ACAID的形成。分别于小鼠前房注射OVA后第3、7、10和14d处死动物,取其脾脏,采用免疫组织化学和Westernblot法检测小鼠脾脏组织中IDO的表达及其动态变化。结果正常小鼠脾脏组织中有少量IDO表达;前房注射OVA后第7、10和14dIDO表达量明显增加(P<0.05)。免疫组织化学显示的阳性细胞数量变化与Western-blot检测的蛋白动态变化相一致。结论在ACAID形成过程中IDO表达显著性增加,提示它可能参与了ACAID的形成。

Foxp3,IDO在小鼠角膜移植免疫排斥反应的表达

背景:移植免疫反应是导致角膜移植术后失败的主要原因,但其具体发病机制不明确。有研究报道,Foxp3和吲哚胺2,3-二氧化酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)与移植免疫有关。目的:研究Foxp3,IDO在小鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法:以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体建立角膜移植实验模型。将30只BALB/c小鼠随机分为3组,正常组6只;角膜移植组12只;地塞米松治疗组12只。角膜移植组:给予生理盐水;地塞米松治疗组:给予地塞米松注射液10 mg/kg,分别于角膜移植术后0,2,4,6,8,10 d经腹腔注射给药。用裂隙灯观察移植排斥情况,免疫组织化学检测植片γ-干扰素表达,Real-time PCR检测植片内Foxp3 mRNA,IDO mRNA的表达。结果与结论:(1)地塞米松治疗组发生排斥反应时间(20.667±1.033)d,较角膜移植组(14.833±1.472)d明显延迟(P<0.05);(2)角膜移植组术后第14天角膜植片内γ-干扰素及Foxp3 mRNA,IDO mRNA的表达较地塞米松治疗组明显增强(P<0.05);(3)结果提示,γ-干扰素及Foxp3,IDO在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的作用,降低角膜植片γ-干扰素及Foxp3,IDO表达可能有助于诱导耐受。

IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径在免疫性血小板减少症患者发病及治疗中的作用探讨

目的探讨IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径在免疫性血小板减少症患者发病及治疗中的作用。方法选取2016年9月～2017年9月来我院就诊的30例免疫性血小板减少症患者(观察组)和同期来我院体检的30例健康者(对照组)为研究对象,观察组患者给予地塞米松进行治疗,采集治疗前后血液样本,比较分析血浆中Kyn、Trp、Kyn/Trp的水平,以及CD4^+、CD8^+T淋巴细胞中TTS、IDO的表达。结果治疗前,观察组Kyn、Trp以及Kyn/Trp水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,有效组患者血浆中Trp水平降低,Kyn、Kyn/Trp水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,观察组CD4^+、CD8^+T淋巴细胞中IDO水平显著高于对照组,TTS水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,有效组患者CD4^+、CD8^+T淋巴细胞中IDO水平水平升高,TTS水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗无效组患者治疗前后各项指标无显著差异(P>0.05)。结论 IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径与免疫性血小板减少症患者的发病相关,也可通过IDO/TTS评价患者的临床疗效,具有指导意义。