一次不明原因发热疫情中病人血清的Q热抗体检测

目的:从不明原因发热病人血清中筛查Q热抗体。方法:用间接免疫荧光法对一次不明原因发热疫情中的9位病人共15份血清进行Q热IgG检测。结果:9例患者的血清中共检出6例Q热抗体阳性,阳性率达66.7%。结论:Q热在过去的疫区可能仍有较频繁的发生,各地相关部门应加强对Q热的调查和应急储备。

三种试验方法检测莱姆病抗体比较

本文采用IFA、ELISA、CF诊断技术,对分别采自云南、辽宁的271份林业工人血清进行莱姆病抗体检测,对其敏感性、特异性等指标进行比较。结果是IFA呈现(≥1:128)阳性41份;ELISA超过OD值X+3SD(OD≥0.83)56份;CF呈现(≥1:128)阳性38份。三种试验方法阳性率(％)之比为100.00:136.55:92.66。CF虽操作复杂,但选择性极强,相对低的敏感性有助于识别真正的莱姆病。

猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较

在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明，ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应；分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应；而分离株与ＨＣＶ、ＰｒＶ、ＰＰＶ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原。以上试验证明，我们已成功地分离到２株地方性ＰＲＲＳＶ。进一步用六种ＰＲＲＳＶ单抗（Ａ～Ｆ）进行ＩＦＡ试验，结果２个分离株与ＶＲ－２３３２的荧光反应谱相同。说明它们之间在抗原结构上具有同源性。

卫氏並殖吸虫各发育阶段抗原间接荧光抗体试验诊断肺吸虫病

用两型卫氏并殖吸虫的成虫、童虫及后尾蚴抗原进行肺吸虫病患者及其他吸虫病患者血清的间接荧光抗体试验检测。各种抗原检测同型抗体血清的阳性率为90.9％～100％;检测同种异型抗体血清的阳性率为88.9％～100％。后尾蚴抗原检测同型及异型抗体血清的反应强度更高。

一起鼠型斑疹伤寒爆发疫情中患者血清恙虫病抗体检测

目的筛查一起鼠型斑疹伤寒爆发疫情患者血清中恙虫病抗体。方法用间接免疫荧光法对20份爆发疫情病人血清进行鼠型斑疹伤寒和恙虫病IgG抗体检测。结果 20例患者中,鼠型斑疹伤寒抗体阳性13例,阳性率65%;恙虫病抗体阳性2例(同时鼠型斑疹伤寒抗体阳性),阳性率10%。结论该起鼠型斑疹伤寒爆发疫情患者中存在恙虫病感染,临床上应加强对鼠型斑疹伤寒与恙虫病的诊断与鉴别诊断。

间接免疫荧光法与外斐氏反应诊断恙虫病的比较

采用外斐氏反应(WF-OX_K)和间接免疫荧光法(IFA),对选取的87例恙虫病患者、53名其它立克次氏体抗体(R-Ab)携带者和60名健康人检测了恙虫病抗体,并用6项指标评价所获结果。结果IFA法明显优于WF-OX_K法,对发病1周以上的患者其敏感度为96.1％,特异度为97.3％。其它几项指标也优于WF-OX_K法。作者认为:长期以来用于恙虫病血清学诊断的WF-OX_K法不应作为诊断的唯一依据,应结合临床和流行病学综合分析。而IFA法的真实性和可靠程度已基本达到辅助临床诊断的要求,也能满足流行病学调查的需要,应予以推广。

鸭瘟病毒对SPF鸭的致病性研究

【目的】探讨鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)对SPF鸭的致病性。【方法】将DPV分别通过点眼滴鼻和皮下注射接种途径人工感染SPF鸭,以未攻毒健康SPF鸭为对照,观察各组鸭的发病情况及症状,于感染后不同时间随机剖杀试验组和对照组SPF鸭,采集肝脏、脾脏、肾脏、肺、心脏、气管、食道、肠道、胸腺、法氏囊、脑和泄殖腔等组织,常规方法制备石蜡切片,HE染色,观察各器官病理组织学变化,同时利用间接免疫荧光染色法(IFA)对DPV抗原在鸭体内的分布进行检测,并进行血常规和血液生化指标检测,分析了DPV对SPF鸭淋巴细胞转化率的影响。【结果】DPV接种后,引起鸭高热、下痢,组织器官出血、坏死,食道、泄殖腔黏膜出血、溃疡并有灰黄色假膜覆盖;病理组织学变化以血管壁损伤为主,肝、脾细胞变性、坏死,消化道黏膜上皮细胞坏死脱落。DPV感染后,在鸭的脾脏、胸腺、法氏囊、肝脏、食道、泄殖腔、肠道、肾脏、肺及气管中均检测到DPV抗原,且以肝脏、脾脏等组织中荧光最强;在脑和心脏中均未检测到DPV抗原。DPV感染组鸭血清中白细胞总数(WBC)、红细胞总数(RBC)、血小板总数(PLT)和总蛋白(TP)、血红蛋白(HGB)含量及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、淋巴细胞转化率与对照组差异大多达显著或极显著水平。【结论】DPV感染主要引起SPF鸭各组织器官广泛性出血;脾脏、胸腺、法氏囊等免疫器官首先受到攻击和损害,并造成免疫抑制;皮下注射接种DPV比点眼滴鼻接种对SPF鸭的致病性强。

一种猪瘟兔化弱毒活疫苗效力检验方法的研究

为克服兔体定型热反应法(RID)检验猪瘟活疫苗效力的过程中存在的缺陷,建立了一种快速、准确、稳定检测猪瘟病毒含量及疫苗效力的间接免疫荧光法(IFA).该方法以出现特异性荧光作为检测标准,通过添加促细胞感染剂聚乙二醇10000(PB)增加特异性荧光数量,可以在4 d内检测出猪瘟活疫苗成品或半成品效力.该方法检验周期短、结果准确、重复性好,为猪瘟活疫苗效力检验方法的完善提供了数据支持.

单克隆抗体鉴别溶组织内阿米巴的致病性

用由溶组织内阿米巴致病株（ＨＭ－１：ＩＭＳＳ）为免疫原诱导产生的特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）４Ｇ６，与从急性阿米巴痢疾患者或包囊携带者分离的溶组织内阿米巴（Ｅｈ）滋养体进行间接荧光抗体反应和淀粉凝胶电泳同工酶分析。显示，从有发热、腹泻、脓血便患者体内分离的虫株与ＭｃＡｂ４Ｇ６出现阳性反应，滴度达１：５１２０；同工酶分析也属于致病性酶株群Ⅱ。而有发热、腹泻、无脓血便患者体内分离的虫体与ＭｃＡｂ４Ｇ６均为阴性反应，且为非致病性酶株群Ⅰ。提示，致病性虫株与非致病性虫株的免疫原性不同，应用本法可准确鉴别致病性虫株，且简便、价廉、快速，还可用于流行病学调查。

评价基于致密颗粒蛋白GRA1为抗原检测猫弓形虫感染的血清学诊断方法

为了研究以弓形虫致密颗粒蛋白GRA1为抗原检测猫弓形虫感染的血清学诊断及评价,试验采用标准弓形虫抗体阳性、阴性猫血清建立ELISA方法,最终确定重组GRA1最佳蛋白包被浓度为5μg/m L、血清最佳稀释度为1∶64,用此方法对已通过MAT/IFA法共同确定的185份猫弓形虫抗体血清进行检测并评价。结果表明:应用MAT/IFA法检出阳性血清39份、阴性血清146份,而通过重组GRA1-ELISA法检出阳性血清37份、阴性血清148份,二者共同检出阳性血清33份、阴性血清142份,GRA1假阳性率为10.8%,假阴性率为4.1%。比较重组GRA1-ELISA与MAT/IFA的结果,二者不一致部分无显著性差异(P>0.05);一致性部分经Kappa检验(K=0.83),一致率为94.6%。说明以重组GRA1作为包被抗原建立的ELISA方法检测效果没有弓形虫体裂解蛋白TLA好。因此,重组GRA1不是用于检测猫弓形虫感染的流行病学调查的最佳诊断抗原。

弓形虫脑炎的实验诊断探讨

对临床表现有明显脑部症状的37例成人进行了弓形虫病实验诊断。采用患者血清和脑脊液进行IgG及IgM的检测或脑脊液小鼠腹腔接种。结果发现5例在两种以上检测方法中为阳性,阳性率为13.5％。提出加强实验诊断弓形虫脑炎的必要性。

猪繁殖和呼吸系统综合征的血清学检测及病毒的分离和鉴定(初报)

用间接免疫荧光抗体试验(IFA)检测279头从加拿大进口种猪血清中的猪繁殖和呼吸系统综合征(PRRS)病毒抗体,结果有3头为美洲株阳性,隔离期问,有45头发病,其中13头死亡,症状都相似,符合PRRS的特征。从病死猪E88.8的肺组织中分离到1株能使Marc 145 HS2H产生细胞病变的病毒。将该分离物接种Marc 145和HS2H细胞,48小时后甩乙醇固定,分别以美洲株和欧洲株的标准阳性血清作IFA试验,可见到特异性的胞浆荧光。美洲株的血清效价达1∶640;欧洲株的血清效价为1∶160。可以判定该分离物为荚洲株的PRRS病毒。

非洲猪瘟病毒特异性抗体检测研究进展

非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)会引发猪的急性、烈性、高度传染性疾病,因其病程短、传播迅速、死亡率高,严重影响中国养猪业健康发展。目前市场上仍缺乏有效的疫苗,因此ASFV抗体检测技术也可以作为ASFV诊断的参考方法。开发快速简便的抗体检测技术,对于大规模的流行病学调查和无症状感染/康复猪的筛查尤为重要。本文系统总结了现有ASFV抗体检测技术和最新研究进展,阐述ASFV特异性抗体检测意义和ASFV特异性抗体检测样本类型,重点考察了ASFV特异性抗体检测常用的靶标以及检测靶标的筛选及其应用,比较了ASFV抗体检测的主要检测方法,明确了ASFV抗体检测的改进方向,并指出即时、即地、精准、快速以及自动化将是未来ASFV抗体检测技术的发展趋势。

间接免疫荧光法与被动凝集法对儿童肺炎支原体感染的诊断价值比较

目的：探讨间接免疫荧光法（Indirect immunofluorescent assav，IFA）与被动凝集法（Particle Agglutination Test，PAT）对初诊儿童肺炎支原体（myco—plasma pneumonia，MP）感染的诊断价值差异。方法：选取2016年3月-8月佛山市南海经济开发区人民医院儿科初诊患者，通过病史、症状和体征拟诊为疑似MP感染患者，采用诊断金标准将疑似患者（研究对象）确诊分为MP感染组（9（3例）和非MP感染组（121例）。所有研究对象均采用IFA法检测抗MP—IgM抗体，用PAT法检测抗MP总抗体，采用循证检验医学的方法统计两种方法的诊断价值性能指标。结果：IFA法和PAT法诊断儿童MP感染灵敏度分别为77．8％和66．7％，采用独立标本四格表xz检验（χ^2=1．91），表明两种方法的诊断灵敏度差异没有统计学意义（P〉0．05）。IFA和PAT诊断特异性分别为94．2％和66．9％，采用校正χ2检验（χ^2=6．95），表明两种方法的诊断特异性存在非常显著性差异（P〈0．01）。结论：诊断初诊儿童肺炎支原体感染，IFA法与PAT法比较诊断灵敏度无显著差异，诊断特异性优于PAT法．

弓形虫直接凝集试验改良法的研究

用弓形虫直接凝集试验改良法（ＭＤＡＴ）、染色试验（ＤＴ）和两种间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）平行检测了国内外的７１份人血清，结果表明ＭＤＡＴ与其它试验符合率达９１．８～９６．０％；同时显示有较高的敏感性和特异性。用ＷＨＯ国际生物标准化实验室的标准血清定量测得ＭＤＡＴ的灵敏度为０．０９ＩＵ／ｍｌ，接近于改良前方法和ＤＴ的灵敏度，高于国外同类试剂盒的灵敏度。作者认为本ＭＤＡＴ具有在基层单位推广和应用的潜在价值。

基于萤火虫-免疫算法的CVIS测试序列优化方法

为了对车路协同系统的功能进行有效测试,提高测试效果,对测试序列优化方法进行了研究。通过对车路协同系统进行功能需求分析,构建包含多交叉路口、多路段、多车的车路协同系统典型应用仿真场景,并对典型场景利用故障树分析的方法进行功能特征分析,建立基于系统功能特征的系统测试用例,研究车路协同的功能特征,生成的测试用例进行带端口标记的时间输入/输出自动机建模,并用建模工具UPPAAL完成建模实现,利用UPPAAL建模工具的测试序列生成模块,完成基于带端口标记的时间输入/输出自动机的测试序列的自动生成,得到针对车路协同系统仿真测试的测试序列。着重设计运用萤火虫算法和免疫算法对已经生成的测试序列进行优化,并且从序列覆盖度、冗余度、快速性方面对测试效果做出了评估。研究结果表明:当示例场景状态数较多时,优化算法能保证测试序列的覆盖度为100%,且能降低测试冗余82%,缩短测试时间约为10s;基于萤火虫-免疫算法的测试序列优化方法在测试冗余的降低上卓有成效,且优化算法较时间自动机而言能够更快更有效地降低测试冗余,优化算法的测试效果明显优于时间自动机生成的原始序列;通过对测试冗余的降低实现测试效率的提高具有可行性。