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茶花鸡2号IFN-α基因克隆及生物信息学分析
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作者 刘琛 何永江 +5 位作者 豆腾飞 杨明华 潘洪彬 赵素梅 李永能 黄英 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期217-222,共6页
本研究旨在克隆茶花鸡2号α干扰素基因(IFN-α)CDS区序列并进行生物信息学分析,为后续研究IFN-α基因对茶花鸡2号免疫功能的影响提供参考。以茶花鸡2号为实验对象设计IFN-α引物,提取总RNA,反转录PCR扩增并克隆其编码区序列,进行生物信... 本研究旨在克隆茶花鸡2号α干扰素基因(IFN-α)CDS区序列并进行生物信息学分析,为后续研究IFN-α基因对茶花鸡2号免疫功能的影响提供参考。以茶花鸡2号为实验对象设计IFN-α引物,提取总RNA,反转录PCR扩增并克隆其编码区序列,进行生物信息学分析。结果显示茶花鸡2号IFN-α基因CDS序列全长582 bp,IFN-α蛋白等电点5.05,平均疏水指数-0.514,为酸性亲水蛋白,且存在信号肽和1个跨膜区,主要定位于细胞核。IFN-α蛋白被4个N糖基化位点、5个O糖基化位点和20个磷酸化位点修饰,主要由α-螺旋与无规卷曲构成。茶花鸡2号与固始鸡、海兰鸡、惠阳胡须鸡、罗曼鸡和乌骨鸡的氨基酸同源性分别为95.9%、97.9%、97.9%、97.9%和95.9%。IFN-α蛋白与IRF7、IFNAR1、IFNAR2和IFNK等蛋白存在互作关系。本研究结果可为进一步探讨IFN-α基因在茶花鸡2号病毒疾病防治中的作用提供理论依据。 展开更多
关键词 茶花鸡2号 ifn-α基因 基因克隆 生物信息学分析
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IFN-αIL-6和IL-17检测对结核病辅助诊断价值
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作者 刘战地 孙明玥 +2 位作者 田二朋 马伟立 邸红芹 《河北医学》 CAS 2024年第6期942-945,共4页
目的:评价血清免疫细胞因子对结核分枝杆菌肺病(TB)的诊断价值。方法:回顾性选取2020年11月至2022年10月于河北省胸科医院就诊的139例疑似肺结核患者作为研究对象。按照2018年最新实施的肺结核诊断标准(WS288-2017),其中确诊结核病69例... 目的:评价血清免疫细胞因子对结核分枝杆菌肺病(TB)的诊断价值。方法:回顾性选取2020年11月至2022年10月于河北省胸科医院就诊的139例疑似肺结核患者作为研究对象。按照2018年最新实施的肺结核诊断标准(WS288-2017),其中确诊结核病69例,纳入结核组,非结核病70例纳入非结核组。采用流式免疫荧光发光法检测血清中免疫相关细胞因子IL-6、IL-17和IFN-α水平,并分析三种因子检测对结核病的诊断效能。结果:结核组患者IL-6浓度和IL-17浓度显著高于非结核组,差异有统计学意义(P<0.05);结核组患者IFN-α浓度略高于非结核组,但差异无统计学意义(P>0.05);进行ROC曲线分析:IL-6检测AUC面积为0.658(P<0.001)、IL-17检测AUC面积为0.734(P<0.001)、IFN-α检测AUC面积为0.571(P<0.001)。结论:MTB感染者IL-6、IL-17水平增高,IL-6、IL-17对结核的诊断具有较好的灵敏度和特异度;IL-6、IL-17在临床辅助诊断结核病具有一定的价值。 展开更多
关键词 结核病 细胞因子 ifn-α IL-6 IL-17
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表达IFN-α的重组猪繁殖与呼吸综合病毒的构建及生物学特性分析
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作者 黄静 王玉旭 +5 位作者 王豪 陈樱 欧阳康 黄伟坚 黄稳妃 韦祖樟 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期48-53,共6页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害我国生猪业的重要疫病之一,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),是一种免疫抑制性病毒。干扰素(IFN)是一类具有免疫调节功能和抗病毒作用的细胞因子。IFN-α除更直接的抗病毒作用外,还可以调节宿主... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害我国生猪业的重要疫病之一,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),是一种免疫抑制性病毒。干扰素(IFN)是一类具有免疫调节功能和抗病毒作用的细胞因子。IFN-α除更直接的抗病毒作用外,还可以调节宿主的先天性和适应性免疫。论文构建表达IFN-α的重组PRRSV,分析重组病毒的生物学特性以及IFN-α的生物学活性。通过反向遗传操作方法将IFN-α插入到PRRSV ORF1b和ORF2a之间,重组质粒转染细胞后可以拯救出重组病毒(rGXAM-P-IFN-α)。插入到PRRSV基因组中的IFN-α可遗传稳定9代。重组病毒生长特性分析可发现rGXAM-P-IFN-α复制能力显著低于亲本病毒。rGXAM-P-IFN-α感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)可显著上调抗病毒基因(PKR,ISG15和ISG54)mRNA表达水平,为进一步研发新型PRRSV疫苗提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 感染性克隆 Α干扰素 抗病毒基因
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西藏羊和白-藏杂交羊外周血IFN-α、IgG和IL-2的研究
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作者 庞倩 曾洁 +3 位作者 杜丹 陈明华 杨平贵 周明亮 《草学》 2024年第1期69-73,共5页
为了解西藏羊和白萨福克羊与西藏羊的杂交后代羊生长发育中免疫因子的分泌特点和免疫学特征,以西藏羊和白-藏杂交羊为研究对象,应用ELISA方法检测0.5、1和1.5岁外周血中干扰素(IFN-α)、免疫球蛋白G(IgG)和白细胞介素-2(IL-2)的质量浓度... 为了解西藏羊和白萨福克羊与西藏羊的杂交后代羊生长发育中免疫因子的分泌特点和免疫学特征,以西藏羊和白-藏杂交羊为研究对象,应用ELISA方法检测0.5、1和1.5岁外周血中干扰素(IFN-α)、免疫球蛋白G(IgG)和白细胞介素-2(IL-2)的质量浓度,分析其变化规律。结果表明:随年龄的增长,藏公羊IL-2呈逐渐降低的趋势,而藏母羊呈逐渐升高的趋势(P<0.05);藏杂交公羊和藏母羊IgG含量都呈逐渐降低趋势,藏公羊下降较明显(P<0.05);藏公羊IFN-α的含量逐渐降低,0.5岁与1岁之间下降趋势明显(P<0.05),而藏母羊变化不大。随年龄的增长,白-藏杂交羊公羊和母羊IL-2含量先降低再升高;白-藏杂交羊公羊IgG含量变化不大,母羊则是先升高后下降趋势,且1岁和1.5岁之间下降明显(P<0.05);白-藏杂交羊公羊IFN-α的含量逐渐降低,而母羊是先升高后下降。 展开更多
关键词 西藏羊 白-藏杂交羊 Α干扰素 免疫球蛋白G 白细胞介素-2
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血红素加氧酶-1通过诱导抗病毒蛋白的表达增强IFN-α抗HBV效应
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作者 笪蔚 王琴 +4 位作者 魏安邦 张浩 汪任冰 刘倩 周强 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第2期324-330,共7页
目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对HBV复制的作用及HO-1联合α-干扰素(IFN-α)的抗病毒效应。方法以HepG2.2.15细胞和HBV 1.3质粒转染HepG2细胞即HepG2-HBV1.3为HBV复制细胞模型;血红素(Hemin)分别处理HepG2.2.15和HepG2-HBV1.3细胞,诱导H... 目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对HBV复制的作用及HO-1联合α-干扰素(IFN-α)的抗病毒效应。方法以HepG2.2.15细胞和HBV 1.3质粒转染HepG2细胞即HepG2-HBV1.3为HBV复制细胞模型;血红素(Hemin)分别处理HepG2.2.15和HepG2-HBV1.3细胞,诱导HO-1表达;CCK-8评估Hemin对HepG2、HepG2.2.15的毒性作用;化学发光法分析Hemin处理组及si-HO-1等实验组上清液中HBsAg、HBeAg;RT-qPCR分析HO-1、IFN-β、HBV-DNA;Western blot分析IRF-3、JAK/STAT信号通路中相关分子的表达;Hemin联合IFN-α处理HepG2.2.15,监测HO-1是否具有协同IFN-α抗病毒效应。结果Hemin剂量依赖性诱导HO-1,HO-1被诱导后发挥显著的抗HBV效应,同时IFN-β、IRF-3及JAK/STAT信号通路中IRF-9、MxA的表达均增加。沉默HO-1表达能逆转Hemin诱导组的抗病毒效应,同时I型干扰素IFN-β也呈现低表达,JAK/STAT信号通路中的IRF-9、MxA的表达也被抑制。Hemin联合IFN-α发挥更强的抗病毒作用。结论HO-1能够发挥抗HBV效应,这种效应可能是增加IRF-3的磷酸化诱导I型干扰素表达来激活JAK/STAT信号通路发挥抗病毒效应;HO-1可以协同IFN-α发挥抗病毒作用。 展开更多
关键词 血红素 血红素加氧酶-1 JAK/STAT ifn-Β
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IFN-α对山羊副流感病毒3型的抗病毒活性 被引量:1
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作者 孙敏 郝飞 +5 位作者 张纹纹 李文良 杨蕾蕾 毛立 程子龙 刘茂军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期736-743,共8页
旨在探讨原核表达纯化的山羊α干扰素(IFN-α)对山羊副流感病毒3型(CPIV3)的抗病毒活性。通过分析山羊IFN-α的序列特点,比对不同种属IFN-α的同源性,进而构建山羊IFN-α成熟蛋白编码基因(去除信号肽基因序列)的原核表达载体pET-30a-gI... 旨在探讨原核表达纯化的山羊α干扰素(IFN-α)对山羊副流感病毒3型(CPIV3)的抗病毒活性。通过分析山羊IFN-α的序列特点,比对不同种属IFN-α的同源性,进而构建山羊IFN-α成熟蛋白编码基因(去除信号肽基因序列)的原核表达载体pET-30a-gIFN-α,将其转化至感受态细胞Rosetta(DE3),IPTG诱导后镍柱及亲和纯化获得山羊IFN-α。利用RT-qPCR测定山羊IFN-α作用于牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney cell,MDBK cell)后6种干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)的相对表达水平;同时,利用TCID50及Western blot测定其对CPIV3的抗病毒活性。结果表明,原核表达的山羊IFN-α蛋白含量为0.20 mg·mL^(-1),Western blot结果表明表达产物相对分子质量约为20 ku,与预期结果相符。RT-qPCR结果显示,山羊IFN-α孵育MDBK细胞后,可显著刺激RSAD2、STAT1及ISG15等6种ISGs基因的转录上调。与对照组细胞相比,山羊IFN-α显著下调MDBK细胞中CPIV3的病毒滴度,Western blot结果显示,山羊IFN-α孵育显著下调CPIV3非结构蛋白C的表达水平。山羊IFN-α对CPIV3在MDBK细胞中的增殖具有显著抑制作用。本研究扩展了I型干扰素的研究范围,为CPIV3等反刍动物疫病的防控提供新的思路。 展开更多
关键词 山羊ifn-α 原核表达 ISGs 山羊副流感病毒3型 抗病毒活性
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HBV对IFN-α受体表达及IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性的影响 被引量:1
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作者 卢秋玉 陈英 +2 位作者 陈晓宇 申庆荣 秦威 《临床医学研究与实践》 2018年第31期7-9,共3页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对干扰素α(IFN-α)受体表达的影响,以及对IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性的影响。方法以HepG2.2.15细胞、HepG2细胞及LO2细胞为细胞模型,采用流式细胞术、Western-blot检测IFN-αR1和IFN-αR2受体的... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对干扰素α(IFN-α)受体表达的影响,以及对IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性的影响。方法以HepG2.2.15细胞、HepG2细胞及LO2细胞为细胞模型,采用流式细胞术、Western-blot检测IFN-αR1和IFN-αR2受体的表达;采用Western-blot动态分析IFN-α2b刺激肝细胞核蛋白STAT1的活化;流式细胞术检测IFN-α2b刺激肝细胞MHC-Ⅰ的水平。结果流式细胞术、Western-blot法检测结果显示,HepG2和LO2细胞中IFN-αR1和IFN-αR2受体及蛋白表达均显著高于HepG2.2.15细胞(P<0.05);3株细胞经IFN-α2b刺激后,HepG2、LO2细胞中核蛋白p-STAT1的表达显著高于HepG2.2.15细胞(P<0.05);3株细胞经IFN-α2b刺激后,MHC-Ⅰ水平在HepG2、LO2细胞中的表达较HepG2.2.15细胞更高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV的持续存在可降低IFN-αR1和IFN-αR2表达,并降低IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性,推测其可能是导致HBV对IFN-α产生耐药的部分机制。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒(HBV) 干扰素-α(ifn-α)受体 ifn-α/STAT1 ifn-α/MHC-Ⅰ Western-blot动态分析
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雾化吸入重组人IFN-α1b对病毒性肺炎患儿临床症状及免疫功能的影响
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作者 蔡尧梁 蔡忠忠 《浙江医学》 CAS 2023年第10期1071-1074,共4页
目的观察重组人IFN-α1b联合布地奈德、特布他林雾化吸入治疗病毒性肺炎患儿的临床效果。方法选取2020年10月到2021年12月湖州市中心医院收治的病毒性肺炎患儿110例。在常规治疗的基础上,其中55例(对照组)给予布地奈德、特布他林雾化吸... 目的观察重组人IFN-α1b联合布地奈德、特布他林雾化吸入治疗病毒性肺炎患儿的临床效果。方法选取2020年10月到2021年12月湖州市中心医院收治的病毒性肺炎患儿110例。在常规治疗的基础上,其中55例(对照组)给予布地奈德、特布他林雾化吸入治疗,另55例(观察组)给予重组人IFN-α1b、布地奈德、特布他林雾化吸入治疗。重组人IFN-α1b予2μg·kg^(-1)·次^(-1),上限50μg/次,布地奈德1 mg/次,特布他林2.5 mg/次,2次/d,2次雾化间隔时间6 h及以上,连续治疗5~7 d。比较两组患儿疗效及治疗后症状、体征改善情况,治疗前后免疫细胞、淋巴细胞亚群、细胞因子指标及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后,两组患儿总有效率均为100.00%;观察组咳嗽持续时间、发热持续时间、肺部啰音持续时间及气喘持续时间均低于对照组(均P<0.01);与治疗前相比,治疗后两组患儿IgA、IgG、CD3^(+)及CD4^(+)水平均升高,且观察组均高于对照组(均P<0.05),治疗后两组患儿血清IL-6及IL-10水平均降低,且观察组均低于对照组(均P<0.01);两组患儿不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组人IFN-α1b辅助布地奈德、特布他林雾化吸入治疗病毒性肺炎患儿具有一定疗效,能够缓解患儿临床症状,改善免疫功能,降低血清细胞因子水平,且安全性较高。 展开更多
关键词 布地奈德 特布他林 重组人ifn-α1b 病毒性肺炎 细胞因子
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重组人干扰素-α2a(IFN-α2a)的圆二色谱分析 被引量:5
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作者 史新昌 饶春明 +5 位作者 裴德宁 刘兰 韩春梅 赵阳 张翊 王军志 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1169-1172,共4页
目的:研究测量温度和蛋白质浓度对重组人干扰素-α 2a(rhIFN-α 2a)圆二色谱的影响,进而研究对 rhIFN-α 2a 二级结构比例的影响。方法:分别研究了测量温度和蛋白质浓度对 rhIFN-α 2a 圆二色谱的影响,另外还对不同厂家、不同批次的4批 ... 目的:研究测量温度和蛋白质浓度对重组人干扰素-α 2a(rhIFN-α 2a)圆二色谱的影响,进而研究对 rhIFN-α 2a 二级结构比例的影响。方法:分别研究了测量温度和蛋白质浓度对 rhIFN-α 2a 圆二色谱的影响,另外还对不同厂家、不同批次的4批 rhIFN-α 2a 的圆二色谱进行了比较。结果:测量温度在60~95℃之间,rhIFN-α 2a 圆二色谱的形状发生改变,三级结构遭到破坏,二级结构发生改变;在5~60℃温度区间,二级结构相对稳定。rhIFN-α2a 的各二级结构比例在1.5~0.006nag·mL^(-1)范围内相对稳定。不同厂家、不同批次的4批 rhIFN-α 2a 的圆二色谱形状基本一致,4种二级结构的比例相近。结论:在一定的温度和浓度范围内,rhIFN-α 2a 的圆二色谱相对稳定,且不同批次的测量结果具有很好的一致性。圆二色谱可用于蛋白质类药物的质量控制。 展开更多
关键词 重组人干扰素-α2a 圆二色谱 二级结构 质量控制 rhifn-α 干扰素-Α 重组人 色谱分析 ifn-α2A 测量温度
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重组Hu-IFN-α基因在草鱼中的整合和表达 被引量:2
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作者 陈开健 章怀云 +5 位作者 肖调义 张学文 苏建民 陈韬 陈立祥 王晓清 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2005年第5期3-7,共5页
采用显微注射法将人α干扰素(HuIFNα)重组基因转入草鱼Ⅰ~Ⅱ细胞期的受精卵,然后对转化培育出的草鱼个体提取血液总DNA进行PCR和Southern杂交检测及ELISA检测,以研究重组基因在受体基因组上的整合和表达情况。实验结果显示:HuIFNα重... 采用显微注射法将人α干扰素(HuIFNα)重组基因转入草鱼Ⅰ~Ⅱ细胞期的受精卵,然后对转化培育出的草鱼个体提取血液总DNA进行PCR和Southern杂交检测及ELISA检测,以研究重组基因在受体基因组上的整合和表达情况。实验结果显示:HuIFNα重组基因能整合在草鱼基因组上,但其整合是随机的,整合位点没有固定区域,而且整合在受体草鱼基因组上的HuIFNα基因的表达率较低,表达水平在个体间有很大差异。大部分转基因个体外源基因表达水平集中在39~74pg/mL之间,表达最高个体HuIFNα浓度为1450pg/mL。 展开更多
关键词 Hu-ifn-α基因 重组基因 草鱼 整合 表达 ifn-α基因 整合位点 表达率 SOUTHERN 基因表达水平
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三种IFN-α抗病毒活性新方法的比较 被引量:1
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作者 卢年芳 吴莹 +5 位作者 唐霓 郑瑞强 朱亚彬 闫歌 张秉强 黄爱龙 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第16期1964-1969,共6页
目的:体外研究不同亚型干扰素-α(IFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b)抗HBV活性和信号分子基因应答水平的差异性,以探讨用信号分子作为一种新的抗病毒评价标准的可能性.方法:0.5,1,2,4,8MU/LIFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b作用于2.2.15细胞后,用A... 目的:体外研究不同亚型干扰素-α(IFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b)抗HBV活性和信号分子基因应答水平的差异性,以探讨用信号分子作为一种新的抗病毒评价标准的可能性.方法:0.5,1,2,4,8MU/LIFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b作用于2.2.15细胞后,用Abbott诊断试剂盒分别检测上清中HBsAg,HBeAg的含量,并计算其抑制率;1MU/LIFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b作用于HepG2细胞后,利用RT-PCR及Westernblotting方法检测胞内STAT1,IFNARmRNA及蛋白表达水平的差异性.结果:IFN-α对HBsAg,HBeAg抑制率随药物浓度增加而增强,当IFN-α浓度为0.5,1MU/L时,三组不同亚型IFN-α对HBsAg,HBeAg抑制率无统计学差异.当浓度为2,4,8MU/L时,IFN-α1b组对HBsAg,HBeAg抑制率明显较IFN-α2b,IFN-α2a组高(HBsAg:F=4.51,6.23;HBeAg:F=3.11,4.72,P<0.05),而IFN-α2b,IFN-α2a组间无统计学差异.RT-PCR和Westernblotting结果1Mu/L时,IFN-α1b处理组IFNAR,STAT1mRNA及蛋白表达水平均较IFN-α2b组高,两组比较无统计学差异.IFN-α1b,IFN-α2b处理组IFNAR,STAT1mRNA及蛋白表达水平明显较IFN-α2a组高,均存在统计学差异(mRNA:F=5.26,15.6;蛋白:F=17.7,20.1,P<0.05).结论:IFN-α1b,IFN-α2b抗HBV活性较强,IFN-α2a较弱.用信号分子STAT1,IFNAR来评价IFN-α抗病毒活性则更为敏感. 展开更多
关键词 干扰素-Α 乙型肝炎病毒 信号分子 ifn-α2B 抗病毒活性 ifn-α2A BLOTTING 差异RT-PCR 蛋白表达水平 Western
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人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白制备和纯化
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作者 王燕 窦恒利 +1 位作者 陆慧琦 韩焕兴 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2005年第11期1310-1313,共4页
目的:用生物发酵方法大量制备含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌,用金属亲和层析方法纯化大肠杆菌表达产物,获得大量高纯度的人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白。方法:选取含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌单克隆... 目的:用生物发酵方法大量制备含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌,用金属亲和层析方法纯化大肠杆菌表达产物,获得大量高纯度的人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白。方法:选取含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌单克隆菌落,通过制备一级及二级种液,按比例加入5L发酵罐中进行发酵,发酵过程中在菌体起始密度、诱导剂加入时机、诱导时间以及诱导温度等条件探索成熟的基础上,采用50L大型发酵罐进行批量发酵。所获菌体蛋白通过饱和硫酸铵粗提和Ni-NTA金属螯和层析获得较纯的表达产物,比较表达量,鉴定纯化后蛋白的抗原活性及生物学活性。结果:用5L及50L发酵罐能获得较高蛋白产量的大肠杆菌,经饱和硫酸铵粗提及Ni-NTA金属螯和层析纯化后可获得抗原性及生物学活性较好的抗体片段。结论:发酵罐发酵大肠杆菌,产量高,所获蛋白含量活性较稳定,为批量生产作了准备。 展开更多
关键词 人源抗乙肝表面抗原Fab-ifn-α 融合蛋白/分离和提纯 大肠肝菌/化学 发酵/方法 色谱法 亲和/方法 ifn-α 层析纯化 融合蛋白 制备 人源
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清肺口服液黄酮类组分对呼吸道合胞病毒感染小鼠IFN-α/JAK1/STAT1信号通路的影响
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作者 赵佩佩 孙亚磊 +1 位作者 张厦 袁斌 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第6期94-99,共6页
目的基于IFN-α/JAK1/STAT1信号通路探讨清肺口服液黄酮类组分抗呼吸道合胞病毒(RSV)感染的作用机制。方法36只雌性清洁级BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组及清肺口服液黄酮类组分低、中、高剂量组(黄酮组分低、中、高剂量... 目的基于IFN-α/JAK1/STAT1信号通路探讨清肺口服液黄酮类组分抗呼吸道合胞病毒(RSV)感染的作用机制。方法36只雌性清洁级BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组及清肺口服液黄酮类组分低、中、高剂量组(黄酮组分低、中、高剂量组),每组6只。除正常组外,其余组经鼻予RSV病毒液造模,造模成功后给药,各给药组予相应药物灌胃,正常组和模型组予等体积生理盐水,共4 d。HE染色观察小鼠肺组织病理变化,ELISA检测血清α干扰素(IFN-α)含量,RT-PCR检测肺组织RSV-F、Janus酪氨酸蛋白激酶1(JAK1)和信号传导与转录激活因子1(STAT1)mRNA表达,Western blot及免疫组化染色检测肺组织JAK1和STAT1蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠肺组织明显充血,有大量炎性细胞浸润,血清IFN-α含量明显增加(P<0.001),肺组织RSV-F、JAK1和STAT1 mRNA表达明显升高(P<0.01),JAK1和STAT1蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.001)。与模型组比较,利巴韦林组及黄酮组分各剂量组小鼠肺组织病理损伤状况明显改善,肺组织RSV-F mRNA表达明显降低(P<0.05);黄酮组分高剂量组血清IFN-α含量明显增加,肺组织JAK1和STAT1 mRNA及蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论清肺口服液黄酮类组分具有抗RSV感染作用,其机制可能与上调IFN-α表达,激活JAK1/STAT1信号通路,增强机体免疫功能有关。 展开更多
关键词 清肺口服液 呼吸道合胞病毒 黄酮 Α干扰素 Janus酪氨酸蛋白激酶1 信号传导与转录激活因子1 小鼠
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EBV通过抑制IFN-α蛋白表达逃逸免疫应答促进免疫性血小板减少症发生的机制 被引量:1
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作者 张雅丽 闫雪峰 +5 位作者 冯茹清 李慧泽 姜淑娟 吕素洁 席日升 仲婷婷 《临床误诊误治》 CAS 2023年第3期139-142,152,共5页
目的 研究爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)逃逸免疫应答促进免疫性血小板减少症(ITP)发生的机制。方法 从ITP患儿和健康儿童外周血中提取并培养单核细胞,并用EBV对外周血单核细胞进行感染,然后用酶联免疫吸附试验和Western blot检测干扰素-α(I... 目的 研究爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)逃逸免疫应答促进免疫性血小板减少症(ITP)发生的机制。方法 从ITP患儿和健康儿童外周血中提取并培养单核细胞,并用EBV对外周血单核细胞进行感染,然后用酶联免疫吸附试验和Western blot检测干扰素-α(IFN-α)蛋白的表达情况。结果 与对照组比较,EBV感染后可抑制人外周血单核细胞分泌IFN-α(P<0.01)。与健康儿童比较,EBV刺激人外周血单核细胞后,IFN-α蛋白表达量显著降低,且ITP患儿外周血单核细胞IFN-α蛋白表达量也明显降低,SOCS3蛋白表达量显著增高(P<0.01)。siRNA靶向SOCS3转染实验结果中,与健康儿童比较,siSOCS3的敲除率高于70%,且敲除SOCS3后再用EBV感染,EBV抑制IFN-α蛋白分泌的作用显著减弱(P<0.01)。转染ZTA质粒后,ZTA蛋白及SOCS3蛋白表达均显著增高。结论 EBV能够通过调控ZTA蛋白表达,从而抑制IFN-α的表达,逃逸免疫应答促进ITP的发生。 展开更多
关键词 爱泼斯坦-巴尔病毒感染 免疫性血小板减少症 干扰素-Α SOCS3 免疫逃避
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连翘酯苷对IFN-α和Mx1表达的影响 被引量:16
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作者 马元元 张中文 +3 位作者 李华伟 孙健华 许承扬 吴国娟 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期3237-3243,共7页
【目的】探讨连翘酯苷作用于感染PCV2的小鼠模型后,对IFN-α和Mx1表达的影响,以评价连翘酯苷的抗病毒作用。【方法】复制PCV2感染小鼠模型。以(2、4、10mg·mL-1)连翘酯苷分为高、中、低3个剂量组,并设空白对照组和病毒对照组。给... 【目的】探讨连翘酯苷作用于感染PCV2的小鼠模型后,对IFN-α和Mx1表达的影响,以评价连翘酯苷的抗病毒作用。【方法】复制PCV2感染小鼠模型。以(2、4、10mg·mL-1)连翘酯苷分为高、中、低3个剂量组,并设空白对照组和病毒对照组。给药12、24、36h后,分别提取小鼠肺组织总RNA和总蛋白,应用实时荧光定量PCR检测IFN-α、Mx1 mRNA含量,采用Western blotting检测Mx1蛋白的表达水平。【结果】空白对照组小鼠肺组织中Mx1和IFN-α无表达,病毒对照组少量表达。随着连翘酯苷浓度的升高,IFN-α和Mx1 mRNA水平逐步升高,两者的表达量呈现平行相关;高剂量组中IFN-α和Mx1表达量最高(P<0.001);随着药物作用时间的延长表达量降低,12h时达到最高(P<0.001),其后逐渐下降。【结论】昆明小鼠适于PCV2感染模型的建立。中药连翘酯苷能显著上调IFN-α和Mx1的表达,并在给予高剂量药物后12h发挥显著的抗病毒作用。Mx1蛋白与病毒的感染密切相关,可用于病毒感染的早期诊断,及具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 连翘酯苷 ifn-α Mx1 PCV2
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黄芩苷、连翘酯苷对肺微血管内皮细胞分泌IFN-α、IFN-γ的影响 被引量:11
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作者 林红 胡格 +2 位作者 伊鹏霏 蒋小林 穆祥 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期30-34,共5页
为了研究黄芩苷、连翘酯苷对大鼠肺微血管内皮细胞(pul monary microvascular endothelial cells,PMVECs)分泌IFN-α、IFN-γ的影响,本试验以体外培养的PMVECs为模型,用ELISA法检测这2种中药成分在不同浓度、不同时间点诱导PMVECs分泌I... 为了研究黄芩苷、连翘酯苷对大鼠肺微血管内皮细胞(pul monary microvascular endothelial cells,PMVECs)分泌IFN-α、IFN-γ的影响,本试验以体外培养的PMVECs为模型,用ELISA法检测这2种中药成分在不同浓度、不同时间点诱导PMVECs分泌IFN-α和IFN-γ的量。结果表明,黄芩苷在10μg/mL,24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量均最高,连翘酯苷分别在20μg/mL、12 h时和5μg/mL、24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量最高。这一结果为体外筛选诱导PMVECs表达干扰素的中药成分提供了参考,为进一步研究中药成分的抗病毒机理奠定了基础。 展开更多
关键词 黄芩苷 连翘酯苷 肺微血管内皮细胞 ifn-α ifn-Γ
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连翘酯苷对鸡IFN-α和JAK-STAT信号通路相关因子的影响 被引量:4
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作者 李华伟 张羽璐 +3 位作者 张中文 夏楠 郭玮 吴国娟 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期3903-3908,共6页
【目的】探讨连翘酯苷作用于鸡胚肾(CEK)细胞后,IFN-α的表达变化及JAK-STAT通路相关因子mRNA的表达变化,及连翘酯苷对IFN-α和JAK-STAT信号通路的影响。【方法】将连翘酯苷设为3个浓度(100、200和400μg.mL-1),采用荧光定量RT-PCR,检测... 【目的】探讨连翘酯苷作用于鸡胚肾(CEK)细胞后,IFN-α的表达变化及JAK-STAT通路相关因子mRNA的表达变化,及连翘酯苷对IFN-α和JAK-STAT信号通路的影响。【方法】将连翘酯苷设为3个浓度(100、200和400μg.mL-1),采用荧光定量RT-PCR,检测IFN-α和JAK-STAT通路相关因子的mRNA表达变化;用western blotting检测IFN-α的蛋白表达情况。【结果】与正常组相比,连翘酯苷不仅显著提高了IFN-α的表达量(P<0.05);而且明显上调了STAT1、JAK1、IFNAR1、IFNAR2、IRF1、IRF7的表达。【结论】连翘酯苷能够在鸡胚肾细胞(chicken embryo kidney cells,CEKs)上诱导IFN-α的表达,且能够正向调节JAK-STAT信号通路传导。 展开更多
关键词 连翘酯苷 鸡胚肾细胞 ifn-α JAK-STAT real-time PCR WESTERN BLOTTING
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尖锐湿疣患者IL-2、sIL-2R、IFN-γ和IFN-α水平的检测 被引量:19
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作者 李中伟 于长平 +3 位作者 李娜 侯建玲 郑荣涛 周盛基 《中国麻风皮肤病杂志》 北大核心 2004年第5期427-429,共3页
目的 : 研究和探讨白介素 2 (IL- 2 )、可溶性白介素 2受体 (sIL - 2R)、α干扰素 (IFN -α)和γ干扰素 (IFN -γ)等细胞因子在尖锐湿疣发病中的作用。方法 : 采用双抗体夹心ELISA法对 10 6例初发尖锐湿疣 (CA)患者血浆和疣体组织中IL... 目的 : 研究和探讨白介素 2 (IL- 2 )、可溶性白介素 2受体 (sIL - 2R)、α干扰素 (IFN -α)和γ干扰素 (IFN -γ)等细胞因子在尖锐湿疣发病中的作用。方法 : 采用双抗体夹心ELISA法对 10 6例初发尖锐湿疣 (CA)患者血浆和疣体组织中IL - 2、sIL- 2R、IFN -α和IFN -γ水平进行检测。结果 : CA患者血浆和疣体组织中IL- 2、IFN -γ水平明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,sIL - 2R水平明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,但血浆和疣体组织中IFN -α水平均与对照组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 : CA患者存在全身和局部细胞免疫功能障碍 ,且病期越长越明显。 展开更多
关键词 SIL-2R ifn-Γ 患者 尖锐湿疣 对照组 疣体组织 血浆 ifn-α CA 可溶性白介素2受体
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羧甲基茯苓多糖对人外周血淋巴细胞分泌IFN-α和IFN-γ的调节作用及中间体制备 被引量:4
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作者 汤建平 杨吉成 +2 位作者 盛伟华 张云 李丽娥 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1998年第2期69-73,共5页
用羧甲基茯苓多糖(CMP)预处理人外周血淋巴细胞(HPBL),经200IU/mlIFN-α启动后,加NDV的促诱生组的α-干扰素(IFN-α)效价比无CMP的常规诱生组高1.2倍;经PHA和/或ConA促诱生组的γ-干扰素(IFN-γ)效价比无CMP的PHA和/... 用羧甲基茯苓多糖(CMP)预处理人外周血淋巴细胞(HPBL),经200IU/mlIFN-α启动后,加NDV的促诱生组的α-干扰素(IFN-α)效价比无CMP的常规诱生组高1.2倍;经PHA和/或ConA促诱生组的γ-干扰素(IFN-γ)效价比无CMP的PHA和/或ConA刺激常规诱生组高0.5倍(P<0.01),尤以CMP+PHA+ConA促诱生的IFN-γ效果最佳。说明CMP具有IFN-α和IFN-γ促诱生效应(P<0.01)。用CMP促诱生的IFN-α和IFN-γ中间体经各项指标检测不仅IFN-α和IFN-γ效价高,而且可达到生物制剂药用标准,经临床试验证明安全有效。 展开更多
关键词 羧甲基 茯苓多糖 ifn-α ifn-Γ 促诱生 中间体
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IFN-α对宫颈癌细胞MHC-I类链相关蛋白A表达的上调作用 被引量:3
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作者 牛家峰 张彩 +4 位作者 张建华 许晓群 张维东 王郡甫 高春义 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期557-559,563,共4页
目的:观察IFNα对宫颈癌细胞MHCI类链相关蛋白A(MICA)表达及功能的影响。方法:以IFNα诱导宫颈癌细胞系HeLa和Caski后,用半定量RTPCR和免疫组化染色法观察诱导前后MICAmRNA和其蛋白表达的变化,用MTT比色法检测诱导前后宫颈癌细胞对外周... 目的:观察IFNα对宫颈癌细胞MHCI类链相关蛋白A(MICA)表达及功能的影响。方法:以IFNα诱导宫颈癌细胞系HeLa和Caski后,用半定量RTPCR和免疫组化染色法观察诱导前后MICAmRNA和其蛋白表达的变化,用MTT比色法检测诱导前后宫颈癌细胞对外周血NK细胞杀伤敏感性的变化。结果:经IFNα诱导后,HeLa和Caski细胞中MICAmRNA和其表面MICA蛋白的表达水平均明显上调,并呈一定的时间和剂量依赖关系。NK细胞对MICA表达较高的HeLa细胞的杀伤活性,明显高于对MICA弱表达的Caski细胞。经1×106U/LIFNα诱导3d后,两种细胞对NK细胞杀伤的敏感性均明显增强(P<0.01)。结论:IFNα可上调MICA在肿瘤细胞表面的表达,并可增强肿瘤细胞对NK细胞杀伤的敏感性。 展开更多
关键词 宫颈癌 ifn-α MICA NK细胞 NKG2D
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