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茶花鸡2号IFN-α基因克隆及生物信息学分析
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作者 刘琛 何永江 +5 位作者 豆腾飞 杨明华 潘洪彬 赵素梅 李永能 黄英 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期217-222,共6页
本研究旨在克隆茶花鸡2号α干扰素基因(IFN-α)CDS区序列并进行生物信息学分析,为后续研究IFN-α基因对茶花鸡2号免疫功能的影响提供参考。以茶花鸡2号为实验对象设计IFN-α引物,提取总RNA,反转录PCR扩增并克隆其编码区序列,进行生物信... 本研究旨在克隆茶花鸡2号α干扰素基因(IFN-α)CDS区序列并进行生物信息学分析,为后续研究IFN-α基因对茶花鸡2号免疫功能的影响提供参考。以茶花鸡2号为实验对象设计IFN-α引物,提取总RNA,反转录PCR扩增并克隆其编码区序列,进行生物信息学分析。结果显示茶花鸡2号IFN-α基因CDS序列全长582 bp,IFN-α蛋白等电点5.05,平均疏水指数-0.514,为酸性亲水蛋白,且存在信号肽和1个跨膜区,主要定位于细胞核。IFN-α蛋白被4个N糖基化位点、5个O糖基化位点和20个磷酸化位点修饰,主要由α-螺旋与无规卷曲构成。茶花鸡2号与固始鸡、海兰鸡、惠阳胡须鸡、罗曼鸡和乌骨鸡的氨基酸同源性分别为95.9%、97.9%、97.9%、97.9%和95.9%。IFN-α蛋白与IRF7、IFNAR1、IFNAR2和IFNK等蛋白存在互作关系。本研究结果可为进一步探讨IFN-α基因在茶花鸡2号病毒疾病防治中的作用提供理论依据。 展开更多
关键词 茶花鸡2号 ifn-α基因 基因克隆 生物信息学分析
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IFN-α抗病毒治疗118例慢性乙型肝炎并10年随访分析
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作者 龙林 吴志国 +5 位作者 周瑶 向海鸿 邱芳 罗小露 刘翠芸 孙水林 《南昌大学学报(医学版)》 2024年第3期6-10,37,共6页
目的 探讨IFN-α抗病毒治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果,为CHB的抗病毒治疗提供参考。方法选取接受普通IFN-α治疗且资料完整的CHB患者118例,通过门诊定期复诊和电话随诊收集患者的乙肝五项[乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体... 目的 探讨IFN-α抗病毒治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果,为CHB的抗病毒治疗提供参考。方法选取接受普通IFN-α治疗且资料完整的CHB患者118例,通过门诊定期复诊和电话随诊收集患者的乙肝五项[乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)]、乙肝DNA定量(HBV-DNA)和谷丙转氨酶(ALT)水平。比较治疗前后、随访期间不同时间点的HBV-DNA和HBsAg阴转率、HBeAg/HBeAb血清转换率和ALT复常率等。结果 HBV-DNA阴转率及HBsAg阴转率随治疗时间的延长而提高,HBV-DNA阴转率在治疗第24、36、48周时的阴转率明显高于第12周,HBsAg阴转率在治疗第48周明显高于第12周和24周,差异均有统计学意义(P<0.05)。停药后第24~432周各随访节点HBV-DNA阴转率及HBsAg阴转率呈先降后趋于稳定的趋势。HBeAg/HBeAb血清转换率随治疗时间的延长而升高,治疗第48周其转换率明显高于第12周(P<0.05);HBeAg/HBeAb血清转换率及SVR随停药时间的延长呈先降后趋于稳定的趋势。停药后,HBeAg/HBeAb血清转换率在各随访节点差异均无统计学意义(P>0.05)。病毒学复发率停药后先上升,在停药第144周呈现稳定趋势。ALT复常率在停药第144周呈现稳定趋势,停药第144周的ALT复常率明显高于停药第12周(P<0.05)。结论 IFN-α抗病毒治疗CHB可取得较好的疗效,在治疗及停药后各随访节点,HBV-DNA阴转率、HBsAg阴转率、ALT复常率、HBeAg/HBeAb转换率均可获得较高的应答率。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 抗病毒治疗 ifn-α 疗效
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IFN-αIL-6和IL-17检测对结核病辅助诊断价值
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作者 刘战地 孙明玥 +2 位作者 田二朋 马伟立 邸红芹 《河北医学》 CAS 2024年第6期942-945,共4页
目的:评价血清免疫细胞因子对结核分枝杆菌肺病(TB)的诊断价值。方法:回顾性选取2020年11月至2022年10月于河北省胸科医院就诊的139例疑似肺结核患者作为研究对象。按照2018年最新实施的肺结核诊断标准(WS288-2017),其中确诊结核病69例... 目的:评价血清免疫细胞因子对结核分枝杆菌肺病(TB)的诊断价值。方法:回顾性选取2020年11月至2022年10月于河北省胸科医院就诊的139例疑似肺结核患者作为研究对象。按照2018年最新实施的肺结核诊断标准(WS288-2017),其中确诊结核病69例,纳入结核组,非结核病70例纳入非结核组。采用流式免疫荧光发光法检测血清中免疫相关细胞因子IL-6、IL-17和IFN-α水平,并分析三种因子检测对结核病的诊断效能。结果:结核组患者IL-6浓度和IL-17浓度显著高于非结核组,差异有统计学意义(P<0.05);结核组患者IFN-α浓度略高于非结核组,但差异无统计学意义(P>0.05);进行ROC曲线分析:IL-6检测AUC面积为0.658(P<0.001)、IL-17检测AUC面积为0.734(P<0.001)、IFN-α检测AUC面积为0.571(P<0.001)。结论:MTB感染者IL-6、IL-17水平增高,IL-6、IL-17对结核的诊断具有较好的灵敏度和特异度;IL-6、IL-17在临床辅助诊断结核病具有一定的价值。 展开更多
关键词 结核病 细胞因子 ifn-α IL-6 IL-17
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血红素加氧酶-1通过诱导抗病毒蛋白的表达增强IFN-α抗HBV效应
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作者 笪蔚 王琴 +4 位作者 魏安邦 张浩 汪任冰 刘倩 周强 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第2期324-330,共7页
目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对HBV复制的作用及HO-1联合α-干扰素(IFN-α)的抗病毒效应。方法以HepG2.2.15细胞和HBV 1.3质粒转染HepG2细胞即HepG2-HBV1.3为HBV复制细胞模型;血红素(Hemin)分别处理HepG2.2.15和HepG2-HBV1.3细胞,诱导H... 目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对HBV复制的作用及HO-1联合α-干扰素(IFN-α)的抗病毒效应。方法以HepG2.2.15细胞和HBV 1.3质粒转染HepG2细胞即HepG2-HBV1.3为HBV复制细胞模型;血红素(Hemin)分别处理HepG2.2.15和HepG2-HBV1.3细胞,诱导HO-1表达;CCK-8评估Hemin对HepG2、HepG2.2.15的毒性作用;化学发光法分析Hemin处理组及si-HO-1等实验组上清液中HBsAg、HBeAg;RT-qPCR分析HO-1、IFN-β、HBV-DNA;Western blot分析IRF-3、JAK/STAT信号通路中相关分子的表达;Hemin联合IFN-α处理HepG2.2.15,监测HO-1是否具有协同IFN-α抗病毒效应。结果Hemin剂量依赖性诱导HO-1,HO-1被诱导后发挥显著的抗HBV效应,同时IFN-β、IRF-3及JAK/STAT信号通路中IRF-9、MxA的表达均增加。沉默HO-1表达能逆转Hemin诱导组的抗病毒效应,同时I型干扰素IFN-β也呈现低表达,JAK/STAT信号通路中的IRF-9、MxA的表达也被抑制。Hemin联合IFN-α发挥更强的抗病毒作用。结论HO-1能够发挥抗HBV效应,这种效应可能是增加IRF-3的磷酸化诱导I型干扰素表达来激活JAK/STAT信号通路发挥抗病毒效应;HO-1可以协同IFN-α发挥抗病毒作用。 展开更多
关键词 血红素 血红素加氧酶-1 JAK/STAT ifn-Β
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IFN-α对山羊副流感病毒3型的抗病毒活性 被引量:4
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作者 孙敏 郝飞 +5 位作者 张纹纹 李文良 杨蕾蕾 毛立 程子龙 刘茂军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期736-743,共8页
旨在探讨原核表达纯化的山羊α干扰素(IFN-α)对山羊副流感病毒3型(CPIV3)的抗病毒活性。通过分析山羊IFN-α的序列特点,比对不同种属IFN-α的同源性,进而构建山羊IFN-α成熟蛋白编码基因(去除信号肽基因序列)的原核表达载体pET-30a-gI... 旨在探讨原核表达纯化的山羊α干扰素(IFN-α)对山羊副流感病毒3型(CPIV3)的抗病毒活性。通过分析山羊IFN-α的序列特点,比对不同种属IFN-α的同源性,进而构建山羊IFN-α成熟蛋白编码基因(去除信号肽基因序列)的原核表达载体pET-30a-gIFN-α,将其转化至感受态细胞Rosetta(DE3),IPTG诱导后镍柱及亲和纯化获得山羊IFN-α。利用RT-qPCR测定山羊IFN-α作用于牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney cell,MDBK cell)后6种干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)的相对表达水平;同时,利用TCID50及Western blot测定其对CPIV3的抗病毒活性。结果表明,原核表达的山羊IFN-α蛋白含量为0.20 mg·mL^(-1),Western blot结果表明表达产物相对分子质量约为20 ku,与预期结果相符。RT-qPCR结果显示,山羊IFN-α孵育MDBK细胞后,可显著刺激RSAD2、STAT1及ISG15等6种ISGs基因的转录上调。与对照组细胞相比,山羊IFN-α显著下调MDBK细胞中CPIV3的病毒滴度,Western blot结果显示,山羊IFN-α孵育显著下调CPIV3非结构蛋白C的表达水平。山羊IFN-α对CPIV3在MDBK细胞中的增殖具有显著抑制作用。本研究扩展了I型干扰素的研究范围,为CPIV3等反刍动物疫病的防控提供新的思路。 展开更多
关键词 山羊ifn-α 原核表达 ISGs 山羊副流感病毒3型 抗病毒活性
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HBV对IFN-α受体表达及IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性的影响 被引量:1
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作者 卢秋玉 陈英 +2 位作者 陈晓宇 申庆荣 秦威 《临床医学研究与实践》 2018年第31期7-9,共3页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对干扰素α(IFN-α)受体表达的影响,以及对IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性的影响。方法以HepG2.2.15细胞、HepG2细胞及LO2细胞为细胞模型,采用流式细胞术、Western-blot检测IFN-αR1和IFN-αR2受体的... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对干扰素α(IFN-α)受体表达的影响,以及对IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性的影响。方法以HepG2.2.15细胞、HepG2细胞及LO2细胞为细胞模型,采用流式细胞术、Western-blot检测IFN-αR1和IFN-αR2受体的表达;采用Western-blot动态分析IFN-α2b刺激肝细胞核蛋白STAT1的活化;流式细胞术检测IFN-α2b刺激肝细胞MHC-Ⅰ的水平。结果流式细胞术、Western-blot法检测结果显示,HepG2和LO2细胞中IFN-αR1和IFN-αR2受体及蛋白表达均显著高于HepG2.2.15细胞(P<0.05);3株细胞经IFN-α2b刺激后,HepG2、LO2细胞中核蛋白p-STAT1的表达显著高于HepG2.2.15细胞(P<0.05);3株细胞经IFN-α2b刺激后,MHC-Ⅰ水平在HepG2、LO2细胞中的表达较HepG2.2.15细胞更高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV的持续存在可降低IFN-αR1和IFN-αR2表达,并降低IFN-α/STAT1和IFN-α/MHC-Ⅰ信号敏感性,推测其可能是导致HBV对IFN-α产生耐药的部分机制。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒(HBV) 干扰素-α(ifn-α)受体 ifn-α/STAT1 ifn-α/MHC-Ⅰ Western-blot动态分析
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雾化吸入重组人IFN-α1b对病毒性肺炎患儿临床症状及免疫功能的影响 被引量:1
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作者 蔡尧梁 蔡忠忠 《浙江医学》 CAS 2023年第10期1071-1074,共4页
目的观察重组人IFN-α1b联合布地奈德、特布他林雾化吸入治疗病毒性肺炎患儿的临床效果。方法选取2020年10月到2021年12月湖州市中心医院收治的病毒性肺炎患儿110例。在常规治疗的基础上,其中55例(对照组)给予布地奈德、特布他林雾化吸... 目的观察重组人IFN-α1b联合布地奈德、特布他林雾化吸入治疗病毒性肺炎患儿的临床效果。方法选取2020年10月到2021年12月湖州市中心医院收治的病毒性肺炎患儿110例。在常规治疗的基础上,其中55例(对照组)给予布地奈德、特布他林雾化吸入治疗,另55例(观察组)给予重组人IFN-α1b、布地奈德、特布他林雾化吸入治疗。重组人IFN-α1b予2μg·kg^(-1)·次^(-1),上限50μg/次,布地奈德1 mg/次,特布他林2.5 mg/次,2次/d,2次雾化间隔时间6 h及以上,连续治疗5~7 d。比较两组患儿疗效及治疗后症状、体征改善情况,治疗前后免疫细胞、淋巴细胞亚群、细胞因子指标及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后,两组患儿总有效率均为100.00%;观察组咳嗽持续时间、发热持续时间、肺部啰音持续时间及气喘持续时间均低于对照组(均P<0.01);与治疗前相比,治疗后两组患儿IgA、IgG、CD3^(+)及CD4^(+)水平均升高,且观察组均高于对照组(均P<0.05),治疗后两组患儿血清IL-6及IL-10水平均降低,且观察组均低于对照组(均P<0.01);两组患儿不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组人IFN-α1b辅助布地奈德、特布他林雾化吸入治疗病毒性肺炎患儿具有一定疗效,能够缓解患儿临床症状,改善免疫功能,降低血清细胞因子水平,且安全性较高。 展开更多
关键词 布地奈德 特布他林 重组人ifn-α1b 病毒性肺炎 细胞因子
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重组人干扰素-α2a(IFN-α2a)的圆二色谱分析 被引量:5
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作者 史新昌 饶春明 +5 位作者 裴德宁 刘兰 韩春梅 赵阳 张翊 王军志 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1169-1172,共4页
目的:研究测量温度和蛋白质浓度对重组人干扰素-α 2a(rhIFN-α 2a)圆二色谱的影响,进而研究对 rhIFN-α 2a 二级结构比例的影响。方法:分别研究了测量温度和蛋白质浓度对 rhIFN-α 2a 圆二色谱的影响,另外还对不同厂家、不同批次的4批 ... 目的:研究测量温度和蛋白质浓度对重组人干扰素-α 2a(rhIFN-α 2a)圆二色谱的影响,进而研究对 rhIFN-α 2a 二级结构比例的影响。方法:分别研究了测量温度和蛋白质浓度对 rhIFN-α 2a 圆二色谱的影响,另外还对不同厂家、不同批次的4批 rhIFN-α 2a 的圆二色谱进行了比较。结果:测量温度在60~95℃之间,rhIFN-α 2a 圆二色谱的形状发生改变,三级结构遭到破坏,二级结构发生改变;在5~60℃温度区间,二级结构相对稳定。rhIFN-α2a 的各二级结构比例在1.5~0.006nag·mL^(-1)范围内相对稳定。不同厂家、不同批次的4批 rhIFN-α 2a 的圆二色谱形状基本一致,4种二级结构的比例相近。结论:在一定的温度和浓度范围内,rhIFN-α 2a 的圆二色谱相对稳定,且不同批次的测量结果具有很好的一致性。圆二色谱可用于蛋白质类药物的质量控制。 展开更多
关键词 重组人干扰素-α2a 圆二色谱 二级结构 质量控制 rhifn-α 干扰素-Α 重组人 色谱分析 ifn-α2A 测量温度
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重组Hu-IFN-α基因在草鱼中的整合和表达 被引量:2
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作者 陈开健 章怀云 +5 位作者 肖调义 张学文 苏建民 陈韬 陈立祥 王晓清 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2005年第5期3-7,共5页
采用显微注射法将人α干扰素(HuIFNα)重组基因转入草鱼Ⅰ~Ⅱ细胞期的受精卵,然后对转化培育出的草鱼个体提取血液总DNA进行PCR和Southern杂交检测及ELISA检测,以研究重组基因在受体基因组上的整合和表达情况。实验结果显示:HuIFNα重... 采用显微注射法将人α干扰素(HuIFNα)重组基因转入草鱼Ⅰ~Ⅱ细胞期的受精卵,然后对转化培育出的草鱼个体提取血液总DNA进行PCR和Southern杂交检测及ELISA检测,以研究重组基因在受体基因组上的整合和表达情况。实验结果显示:HuIFNα重组基因能整合在草鱼基因组上,但其整合是随机的,整合位点没有固定区域,而且整合在受体草鱼基因组上的HuIFNα基因的表达率较低,表达水平在个体间有很大差异。大部分转基因个体外源基因表达水平集中在39~74pg/mL之间,表达最高个体HuIFNα浓度为1450pg/mL。 展开更多
关键词 Hu-ifn-α基因 重组基因 草鱼 整合 表达 ifn-α基因 整合位点 表达率 SOUTHERN 基因表达水平
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三种IFN-α抗病毒活性新方法的比较 被引量:1
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作者 卢年芳 吴莹 +5 位作者 唐霓 郑瑞强 朱亚彬 闫歌 张秉强 黄爱龙 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第16期1964-1969,共6页
目的:体外研究不同亚型干扰素-α(IFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b)抗HBV活性和信号分子基因应答水平的差异性,以探讨用信号分子作为一种新的抗病毒评价标准的可能性.方法:0.5,1,2,4,8MU/LIFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b作用于2.2.15细胞后,用A... 目的:体外研究不同亚型干扰素-α(IFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b)抗HBV活性和信号分子基因应答水平的差异性,以探讨用信号分子作为一种新的抗病毒评价标准的可能性.方法:0.5,1,2,4,8MU/LIFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b作用于2.2.15细胞后,用Abbott诊断试剂盒分别检测上清中HBsAg,HBeAg的含量,并计算其抑制率;1MU/LIFN-α2b,IFN-α2a,IFN-α1b作用于HepG2细胞后,利用RT-PCR及Westernblotting方法检测胞内STAT1,IFNARmRNA及蛋白表达水平的差异性.结果:IFN-α对HBsAg,HBeAg抑制率随药物浓度增加而增强,当IFN-α浓度为0.5,1MU/L时,三组不同亚型IFN-α对HBsAg,HBeAg抑制率无统计学差异.当浓度为2,4,8MU/L时,IFN-α1b组对HBsAg,HBeAg抑制率明显较IFN-α2b,IFN-α2a组高(HBsAg:F=4.51,6.23;HBeAg:F=3.11,4.72,P<0.05),而IFN-α2b,IFN-α2a组间无统计学差异.RT-PCR和Westernblotting结果1Mu/L时,IFN-α1b处理组IFNAR,STAT1mRNA及蛋白表达水平均较IFN-α2b组高,两组比较无统计学差异.IFN-α1b,IFN-α2b处理组IFNAR,STAT1mRNA及蛋白表达水平明显较IFN-α2a组高,均存在统计学差异(mRNA:F=5.26,15.6;蛋白:F=17.7,20.1,P<0.05).结论:IFN-α1b,IFN-α2b抗HBV活性较强,IFN-α2a较弱.用信号分子STAT1,IFNAR来评价IFN-α抗病毒活性则更为敏感. 展开更多
关键词 干扰素-Α 乙型肝炎病毒 信号分子 ifn-α2B 抗病毒活性 ifn-α2A BLOTTING 差异RT-PCR 蛋白表达水平 Western
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人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白制备和纯化
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作者 王燕 窦恒利 +1 位作者 陆慧琦 韩焕兴 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2005年第11期1310-1313,共4页
目的:用生物发酵方法大量制备含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌,用金属亲和层析方法纯化大肠杆菌表达产物,获得大量高纯度的人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白。方法:选取含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌单克隆... 目的:用生物发酵方法大量制备含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌,用金属亲和层析方法纯化大肠杆菌表达产物,获得大量高纯度的人源抗HBS-Fab-IFN-α融合蛋白。方法:选取含重组质粒pBAD/HBs-Fab-IFN-α的Topl0大肠杆菌单克隆菌落,通过制备一级及二级种液,按比例加入5L发酵罐中进行发酵,发酵过程中在菌体起始密度、诱导剂加入时机、诱导时间以及诱导温度等条件探索成熟的基础上,采用50L大型发酵罐进行批量发酵。所获菌体蛋白通过饱和硫酸铵粗提和Ni-NTA金属螯和层析获得较纯的表达产物,比较表达量,鉴定纯化后蛋白的抗原活性及生物学活性。结果:用5L及50L发酵罐能获得较高蛋白产量的大肠杆菌,经饱和硫酸铵粗提及Ni-NTA金属螯和层析纯化后可获得抗原性及生物学活性较好的抗体片段。结论:发酵罐发酵大肠杆菌,产量高,所获蛋白含量活性较稳定,为批量生产作了准备。 展开更多
关键词 人源抗乙肝表面抗原Fab-ifn-α 融合蛋白/分离和提纯 大肠肝菌/化学 发酵/方法 色谱法 亲和/方法 ifn-α 层析纯化 融合蛋白 制备 人源
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连翘酯苷对IFN-α和Mx1表达的影响 被引量:16
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作者 马元元 张中文 +3 位作者 李华伟 孙健华 许承扬 吴国娟 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期3237-3243,共7页
【目的】探讨连翘酯苷作用于感染PCV2的小鼠模型后,对IFN-α和Mx1表达的影响,以评价连翘酯苷的抗病毒作用。【方法】复制PCV2感染小鼠模型。以(2、4、10mg·mL-1)连翘酯苷分为高、中、低3个剂量组,并设空白对照组和病毒对照组。给... 【目的】探讨连翘酯苷作用于感染PCV2的小鼠模型后,对IFN-α和Mx1表达的影响,以评价连翘酯苷的抗病毒作用。【方法】复制PCV2感染小鼠模型。以(2、4、10mg·mL-1)连翘酯苷分为高、中、低3个剂量组,并设空白对照组和病毒对照组。给药12、24、36h后,分别提取小鼠肺组织总RNA和总蛋白,应用实时荧光定量PCR检测IFN-α、Mx1 mRNA含量,采用Western blotting检测Mx1蛋白的表达水平。【结果】空白对照组小鼠肺组织中Mx1和IFN-α无表达,病毒对照组少量表达。随着连翘酯苷浓度的升高,IFN-α和Mx1 mRNA水平逐步升高,两者的表达量呈现平行相关;高剂量组中IFN-α和Mx1表达量最高(P<0.001);随着药物作用时间的延长表达量降低,12h时达到最高(P<0.001),其后逐渐下降。【结论】昆明小鼠适于PCV2感染模型的建立。中药连翘酯苷能显著上调IFN-α和Mx1的表达,并在给予高剂量药物后12h发挥显著的抗病毒作用。Mx1蛋白与病毒的感染密切相关,可用于病毒感染的早期诊断,及具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 连翘酯苷 ifn-α Mx1 PCV2
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尖锐湿疣患者IL-2、sIL-2R、IFN-γ和IFN-α水平的检测 被引量:19
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作者 李中伟 于长平 +3 位作者 李娜 侯建玲 郑荣涛 周盛基 《中国麻风皮肤病杂志》 北大核心 2004年第5期427-429,共3页
目的 : 研究和探讨白介素 2 (IL- 2 )、可溶性白介素 2受体 (sIL - 2R)、α干扰素 (IFN -α)和γ干扰素 (IFN -γ)等细胞因子在尖锐湿疣发病中的作用。方法 : 采用双抗体夹心ELISA法对 10 6例初发尖锐湿疣 (CA)患者血浆和疣体组织中IL... 目的 : 研究和探讨白介素 2 (IL- 2 )、可溶性白介素 2受体 (sIL - 2R)、α干扰素 (IFN -α)和γ干扰素 (IFN -γ)等细胞因子在尖锐湿疣发病中的作用。方法 : 采用双抗体夹心ELISA法对 10 6例初发尖锐湿疣 (CA)患者血浆和疣体组织中IL - 2、sIL- 2R、IFN -α和IFN -γ水平进行检测。结果 : CA患者血浆和疣体组织中IL- 2、IFN -γ水平明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,sIL - 2R水平明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,但血浆和疣体组织中IFN -α水平均与对照组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 : CA患者存在全身和局部细胞免疫功能障碍 ,且病期越长越明显。 展开更多
关键词 SIL-2R ifn-γ 患者 尖锐湿疣 对照组 疣体组织 血浆 ifn-α CA 可溶性白介素2受体
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黄芩苷、连翘酯苷对肺微血管内皮细胞分泌IFN-α、IFN-γ的影响 被引量:11
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作者 林红 胡格 +2 位作者 伊鹏霏 蒋小林 穆祥 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第6期30-34,共5页
为了研究黄芩苷、连翘酯苷对大鼠肺微血管内皮细胞(pul monary microvascular endothelial cells,PMVECs)分泌IFN-α、IFN-γ的影响,本试验以体外培养的PMVECs为模型,用ELISA法检测这2种中药成分在不同浓度、不同时间点诱导PMVECs分泌I... 为了研究黄芩苷、连翘酯苷对大鼠肺微血管内皮细胞(pul monary microvascular endothelial cells,PMVECs)分泌IFN-α、IFN-γ的影响,本试验以体外培养的PMVECs为模型,用ELISA法检测这2种中药成分在不同浓度、不同时间点诱导PMVECs分泌IFN-α和IFN-γ的量。结果表明,黄芩苷在10μg/mL,24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量均最高,连翘酯苷分别在20μg/mL、12 h时和5μg/mL、24 h时诱导PMVECs分泌的IFN-α和IFN-γ的量最高。这一结果为体外筛选诱导PMVECs表达干扰素的中药成分提供了参考,为进一步研究中药成分的抗病毒机理奠定了基础。 展开更多
关键词 黄芩苷 连翘酯苷 肺微血管内皮细胞 ifn-α ifn-γ
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羧甲基茯苓多糖对人外周血淋巴细胞分泌IFN-α和IFN-γ的调节作用及中间体制备 被引量:5
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作者 汤建平 杨吉成 +2 位作者 盛伟华 张云 李丽娥 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1998年第2期69-73,共5页
用羧甲基茯苓多糖(CMP)预处理人外周血淋巴细胞(HPBL),经200IU/mlIFN-α启动后,加NDV的促诱生组的α-干扰素(IFN-α)效价比无CMP的常规诱生组高1.2倍;经PHA和/或ConA促诱生组的γ-干扰素(IFN-γ)效价比无CMP的PHA和/... 用羧甲基茯苓多糖(CMP)预处理人外周血淋巴细胞(HPBL),经200IU/mlIFN-α启动后,加NDV的促诱生组的α-干扰素(IFN-α)效价比无CMP的常规诱生组高1.2倍;经PHA和/或ConA促诱生组的γ-干扰素(IFN-γ)效价比无CMP的PHA和/或ConA刺激常规诱生组高0.5倍(P<0.01),尤以CMP+PHA+ConA促诱生的IFN-γ效果最佳。说明CMP具有IFN-α和IFN-γ促诱生效应(P<0.01)。用CMP促诱生的IFN-α和IFN-γ中间体经各项指标检测不仅IFN-α和IFN-γ效价高,而且可达到生物制剂药用标准,经临床试验证明安全有效。 展开更多
关键词 羧甲基 茯苓多糖 ifn-α ifn-γ 促诱生 中间体
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猪IFN-α_1基因的原核表达及其蛋白质结构的预测 被引量:5
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作者 陈国华 景志忠 +3 位作者 房永祥 蒙学莲 窦永喜 罗启慧 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期707-711,共5页
利用RT-PCR技术,从被诱导的猪外周血单核细胞中克隆出了猪α1干扰素(IFN-α1)基因。序列分析表明,克隆的猪IFN-α1基因序列与GenBank上登录的猪IFN-α1基因的同源性为97.8%。用克隆的猪IFN-α1基因构建了重组表达质粒pGEX-4T-1-IFN-α1... 利用RT-PCR技术,从被诱导的猪外周血单核细胞中克隆出了猪α1干扰素(IFN-α1)基因。序列分析表明,克隆的猪IFN-α1基因序列与GenBank上登录的猪IFN-α1基因的同源性为97.8%。用克隆的猪IFN-α1基因构建了重组表达质粒pGEX-4T-1-IFN-α1。探讨了猪IFN-α1基因表达的最佳条件,并在大肠杆菌中对此基因进行了表达。结果表明,IPTG的最佳诱导浓度为0.5 mmol/L,最适诱导温度为42℃,诱导9h表达量最大,表达产物约占菌体总蛋白的30%。SDS-PAGE分析表明,表达产物的分子质量为45 ku,且目的蛋白主要以包涵体的形式存在。经预测,猪IFN-α蛋白为一结构松散的球状蛋白。 展开更多
关键词 ifn-α1基因 克隆 原核表达 结构预测
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连翘酯苷对鸡IFN-α和JAK-STAT信号通路相关因子的影响 被引量:4
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作者 李华伟 张羽璐 +3 位作者 张中文 夏楠 郭玮 吴国娟 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期3903-3908,共6页
【目的】探讨连翘酯苷作用于鸡胚肾(CEK)细胞后,IFN-α的表达变化及JAK-STAT通路相关因子mRNA的表达变化,及连翘酯苷对IFN-α和JAK-STAT信号通路的影响。【方法】将连翘酯苷设为3个浓度(100、200和400μg.mL-1),采用荧光定量RT-PCR,检测... 【目的】探讨连翘酯苷作用于鸡胚肾(CEK)细胞后,IFN-α的表达变化及JAK-STAT通路相关因子mRNA的表达变化,及连翘酯苷对IFN-α和JAK-STAT信号通路的影响。【方法】将连翘酯苷设为3个浓度(100、200和400μg.mL-1),采用荧光定量RT-PCR,检测IFN-α和JAK-STAT通路相关因子的mRNA表达变化;用western blotting检测IFN-α的蛋白表达情况。【结果】与正常组相比,连翘酯苷不仅显著提高了IFN-α的表达量(P<0.05);而且明显上调了STAT1、JAK1、IFNAR1、IFNAR2、IRF1、IRF7的表达。【结论】连翘酯苷能够在鸡胚肾细胞(chicken embryo kidney cells,CEKs)上诱导IFN-α的表达,且能够正向调节JAK-STAT信号通路传导。 展开更多
关键词 连翘酯苷 鸡胚肾细胞 ifn-α JAK-STAT real-time PCR WESTERN BLOTTING
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siRNA沉默SOCS1表达增强IFN-α2a-NGR的抗肿瘤效应 被引量:5
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作者 黄启超 雷小英 +4 位作者 刘艳 隋文君 李慎 张英起 颜真 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期412-415,共4页
目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性... 目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)、Western blot检测IFN-α2a-NGR处理前后STAT1、p-STAT1、p53、OAS与SOCS1的表达变化,合成siRNA靶向干涉SOCS1。结果:IFN-α2a-NGR刺激后,A549中,p-STAT1、p53、OAS与SOCS1表达上调;MKN-45中P53、OAS无显著变化,SOCS1显著上调。靶向干涉SOCS1后,MKN-45对IFN-α2a-NGR的敏感性增加[抑制率从(14.69±1.05)%提高到(36.97±2.05)%]。结论:IFN-α2a-NGR与IFN-α2a在细胞和分子水平的效应基本一致,p-STAT1、p53与SOCS1可影响细胞对干扰素的敏感性,通过siRNA沉默技术可提高耐药细胞株敏感性,为IFN-α2a-NGR的进一步研发奠定了基础。 展开更多
关键词 干扰素 ifn-α2a-NGR 肿瘤 信号转导
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IFN-α和IFN-γ逆转MR2细胞维甲酸耐药的实验研究 被引量:3
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作者 贺鹏程 张梅 +3 位作者 李静 曹云新 蔡瑞波 刘亚琳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期205-208,共4页
目的:探讨IFN-α和IFN-γ与全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)联合逆转MR2细胞对ATRA耐药的可能性及其机制。方法:IFN-α、IFN-γ及ATRA单独或两种IFN分别与ATRA联合作用于对ATRA耐药的细胞株MR2后,采用MTT比色法检测细胞的增... 目的:探讨IFN-α和IFN-γ与全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)联合逆转MR2细胞对ATRA耐药的可能性及其机制。方法:IFN-α、IFN-γ及ATRA单独或两种IFN分别与ATRA联合作用于对ATRA耐药的细胞株MR2后,采用MTT比色法检测细胞的增殖,用光镜观察、NBT还原实验及流式细胞仪检测细胞的分化,用间接免疫荧光法检测早幼粒细胞白血病(promyelocytic leukemia,PML)蛋白的表达。结果:两种IFN均能抑制MR2细胞的增殖;IFN与ATRA联合应用时抑制作用更加显著;但两种IFN无论是单独应用还是与ATRA联合应用,二者之间均无统计学意义(P>0.05)。两种IFN也能诱导MR2细胞发生一定程度的分化;二者分别与ATRA联合应用时作用更加显著,但IFN-γ+ATRA组诱导MR2细胞分化的作用明显强于IFN-α+ATRA组(P<0.05)。两种IFN都能诱导PML蛋白的表达。结论:IFN-γ与ATRA联合应用逆转MR2细胞对ATRA耐药的作用强于IFN-α与ATRA的联合,可能与IFN-α和IFN-γ信号传导途径的不同有关。 展开更多
关键词 ifn-α ifn-γ 全反式维甲酸 维甲酸耐药
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监测SARS病人IFN-γ、IFN-α、NO和iNOS水平及其意义 被引量:3
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作者 吴新忠 庄俊华 +3 位作者 陈林 黄宪章 林琳 邹国林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期133-136,共4页
目的 :通过监测严重急性呼吸综合征 (SARS)病人血清干扰素γ(IFN -γ)、干扰素α(IFN -α)、一氧化氮 (NO)和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)浓度的变化 ,探讨干扰素和NO在SARS发病过程中的意义。方法 :采用硝酸还原酶法测定血清NO2- /NO3- ... 目的 :通过监测严重急性呼吸综合征 (SARS)病人血清干扰素γ(IFN -γ)、干扰素α(IFN -α)、一氧化氮 (NO)和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)浓度的变化 ,探讨干扰素和NO在SARS发病过程中的意义。方法 :采用硝酸还原酶法测定血清NO2- /NO3- 、酶联免疫吸附法定量测定IFN -γ、IFN -α、iNOS含量检测早期、恢复期SARS病人以及出院后SARS随访者 ,同时测定急诊等一线未患SARS医护人员和健康体检者作对照。结果 :SARS病人早期组血清IFN -α均值显著高于其他各组 (P <0 0 1) ,SARS恢复期组与急诊等一线未患SARS组比较有明显差异 (P <0 0 5)。SARS早期组血清IFN -γ均值显著高于其他各组 (P <0 0 1) ,SARS恢复期组、SARS随访组与急诊等一线未患SARS组比较均有明显差异 (P <0 0 1)。SARS早期组NO2 - /NO3- 均值高于其他各组 (P <0 0 5) ,SARS恢复期组、SARS随访组均值均与急诊等一线未患SARS组和健康对照组比较差异显著 (P <0 0 1)。SARS早期组iNOS均值高于其他各组 (P <0 0 1) ,SARS恢复期组与急诊等一线未患SARS组有明显差异 (P <0 0 5)。 4项指标均值其它组间两两比较差异均无显著 (P >0 0 5)。结论 :SARS病人的病理损伤与NO自由基类分子的增高有关 。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 干扰素类 一氧化氮 一氧化氮合酶 SARS ifn-γ ifn-α NO INOS 非典型肺炎
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