聚乙二醇干扰素α-2a联合胸腺肽α1治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的探讨聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)联合胸腺肽α1治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。方法将83例CHB患者随机分为A、B两组,A组PEG-IFNα-2a联合胸腺肽α1治疗,B组单独使用PEG-IFNα-2a,对治疗前后肝组织学、血清HBsAg、HBeAg、HBVDNA等指标的变化进行观察。结果治疗组患者6个月时的血清ALT、AST复常率显著高于对照组,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者治疗6、9、12个月时HBsAg、HBeAg及HBVDNA转阴率与对照组比较均降低,两组比较HBsAg、HBVDNA转阴率差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者肝组织病理肝细胞炎症及纤维化程度较治疗前明显减轻,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PEG-IFNα-2a联合胸腺肽α1治疗CHB疗效优于单一使用PEG-IFNα-2a。

芪胶升白胶囊预防和改善聚乙二醇干扰素所致骨髓抑制的临床研究

目的观察应用芪胶升白胶囊预防和改善聚乙二醇干扰素α-2a注射液治疗慢性丙型肝炎所致骨髓抑制的临床疗效。方法 86例慢性丙型肝炎患者随机分为试验组46例,对照组40例。两组患者均应用聚乙二醇干扰素α-2a(180μg),皮下注射,1次/周,同时加服利巴韦林500 mg/次,2次/d抗病毒治疗。试验组在对照组的基础上加用芪胶升白胶囊4粒/次,3次/d。治疗前及治疗后每周检查血常规、HCV-RNA、肝肾功能等,观察8周。同时观察芪胶升白胶囊的不良反应。结果治疗8周结束后,试验组白细胞中性粒细胞绝对值在正常范围内,并无明显下降,对照组有轻度下降;且试验组骨髓抑制发生率为34.8%(16/46),对照组为77.5%(34/40),两组差异有显著性(P=0.001)。其中轻度骨髓抑制发生率试验组为26.1%(12/46),对照组为47.5%;中度骨髓抑制发生率试验组为6.5%(3/46),对照组为20.0%(8/40);需要停止聚乙二醇干扰素α-2a治疗的重度骨髓抑制发生率试验组为2.2%(1/46),对照组为10%(4/40)。结论芪胶升白胶囊可预防并改善干扰素治疗慢性丙型肝炎所致的骨髓抑制,且安全无不良反应,值得推广使用。

番鸭IFN-α基因的克隆与序列分析

采用RT-PCR方法从番鸭肺脏器官中扩增IFN-α基因片段,将扩增产物经胶回收后克隆到pMD18-T载体上,经PCR和双酶切鉴定为阳性后进行序列测定,并用Lasergene v7.1DNAStar软件对测序结果进行分析。结果表明,所扩增的IFN-α基因编码完整的开放阅读框,基因长度为576bp,为国内外首次报道。并与GenBank中登录的各品种鸭、鹅IFN-α基因核苷酸序列进行同源性比较分析,其同源性分别在97.0%～97.7%和95.5%～97.7%;遗传进化分析表明,鸭和鹅IFN-α基因在遗传进化上呈各自独立的分支,推测IFN-α基因在不同动物中有严格的种属特异性。

慢性粒细胞性白血病骨髓单个核细胞的体外诱导分化

背景与目的:干扰素(interferon,IFN)作为体内一种重要的免疫调节因子,已广泛应用于治疗病毒性肝炎、淋巴瘤及慢性粒细胞性白血病(chronicmyeloidleukemia,CML)等,并取得良效,但其机理尚未完全明了。树突状细胞(dendriticcell,DC)作为体内专职抗原提呈细胞,在激活初始型T细胞和维持细胞免疫反应中发挥重要作用,IFN对CML患者的有效性是否也与诱导活化DC有关以及DC在IFN治疗CML中起何种作用,目前报道较少。本研究应用含IFN的因子组合,体外培养CML骨髓单个核细胞,观察有无DC产生,进而探讨IFN治疗CML新的可能机制。方法:Ficoll密度梯度离心法分离CML患者骨髓单个核细胞(bonemarrowmononuclearcell,BMMNC),体外添加不同细胞因子诱导培养7天,相差显微镜及光镜观察细胞形态,流式细胞仪检测诱导前后细胞表面特异性标志,MTT法测其混合淋巴细胞反应能力。结果:诱导7天后的BMMNC具有典型的树突状突起且表达较高的CD1a、CD83、CD86、HLA鄄ABC、HLA鄄DR、CD54;与IL鄄4/GM鄄CSF培养组相比,含IFN鄄α培养组表达较高的HLA鄄ABC、DR(P<0.05),而CD86表达率及MLR在IFN鄄α/GM鄄CSF/IL鄄4组最高(P<0.05)。干扰素耐药组细胞表面分子表达率及MLR较新诊断组和干扰素治疗有效组均明显减低(P<0.05),但3组CD86表达率及MLR在IFN鄄α/

聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林治疗基因1型慢性丙型肝炎

目的:观察聚乙二醇干扰素α-2α联合利巴韦林胶囊治疗基因1型慢性丙型肝炎的疗效和安全性。方法:10例基因1型慢性丙型肝炎患者用聚乙二醇干扰素α-2α180μg／周,皮下注射,共48周,并联合使用利巴韦林胶囊口服,450mg,每日2次。停药观察24周,治疗前及治疗后24周、48周、72周,各检测HCV-RNA、抗HCV、血常规、肝功能、肾功能、尿常规、心电图,并观察不良反应。结果:10例完成48周治疗,ALT复常率70％,HCVRNA转阴率60％,应答率为80％。10例完成24周随访, ALT复常率80％,HCVRNA转阴率50％,应答率为60％,复发率10％。结论:180μg聚乙二醇干扰素α-2α联合利巴韦林胶囊治疗慢性丙型肝炎,效果显著,值得推广。

人血清白蛋白和干扰素α2b融合蛋白在毕赤酵母中表达及质量控制

筛选获得毕赤酵母工程菌GS115/pPIC9K/hsa-ifnα2b,胞外分泌表达rHSA-IFNα2b药物蛋白。经摇瓶及5 L发酵罐条件优化,确定最佳发酵条件。经50 L发酵罐工艺放大,发酵产量稳定,可达到350 mg/L。离心获得发酵上清液,超滤浓缩10倍,再依次通过Blue Sepharose 6FF亲和层析、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析及Q Sepharose 6FF离子柱纯化。纯化产品进行SDS-PAGE纯度检测、SEC-HPLC检测、相对分子质量测定、N端测序、内毒素检测和生物活性检测。筛选获得一株高产菌,优化获得最佳的发酵条件。纯化产品检测(SEC-HPLC)纯度大于95%,相对分子质量为85 821,氨基酸的N端测序为DAHKSEVAHRFKDLG,与预期的相符。内毒素含量小于5EU/mg,符合国家药典的要求。体外生物细胞活性高达1.6×106IU/mg。具有良好的工业应用价值。

干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效预测因素的研究进展

对于慢性乙型肝炎患者,干扰素-α常作为首选抗乙肝病毒的药物之一,具有疗程有限、疗效持久的优点,但因其毒副作用多且抗病毒效率低等缺点限制了干扰素的临床应用。因此如何在抗病毒前预测干扰素-α抗病毒疗效至关重要。本文就影响干扰素-α疗效的各种因素进行简要综述,为临床医生选择干扰素-α治疗慢性乙型肝炎患者提供参考。

窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者外周血干扰素诱导的T细胞α趋化因子表达的影响

目的探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对寻常性银屑病患者外周血干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)表达的影响。方法采用夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测正常人和寻常性银屑病患者NB-UVB治疗前后外周血I-TAC水平变化。结果寻常性银屑病患者血清I-TAC水平明显高于正常对照组(t=21.37,P<0.05)。经NB-UVB治疗36次后,银屑病患者I-TAC水平较治疗前明显下降(t=18.23,P<0.05),且治疗前后银屑病患者银屑病皮损面积严重度指数(PASI)评分与血清I-TAC水平呈正相关(r=0.293,P<0.05)。结论 NB-UVB可降低寻常性银屑病患者外周血I-TAC水平,在银屑病的发病过程中I-TAC可能发挥重要作用。

巨细胞病毒肝炎患儿血清细胞因子水平测定及其临床意义

目的 研究巨细胞病毒 (CMV)肝炎患儿血清干扰素 α(IFN α)、白细胞介素 8(IL 8)和肿瘤坏死因子 α(TNF α)水平的变化及其临床意义。方法 应用ELISA法检测 35例CMV肝炎患儿血清中上述三种细胞因子的含量 ,并对其两两之间进行了相关性分析。结果 CMV肝炎组患儿IFN α、IL 8、TNF α的含量分别为 (770 .3± 2 0 5 .4 )ng/L、(41.9± 2 2 .5 )ng/L和 (10 33.2± 388.5 )ng/L ,非常显著高于正常对照组 (P <0 .0 1)。相关性研究发现IFN α与TNF α呈显著正相关 (r =0 .35 6 ,P <0 .0 5 )。

干扰素α-1b联合替比夫定序贯治疗慢性乙型肝炎的疗效及其对患者sPD-1和sICOS水平的影响

目的观察干扰素α-1b(IFNα-1b)联合替比夫定序贯治疗乙型肝炎的疗效,并探讨其对患者血清中可溶性程序性死亡蛋白1(s PD-1)和可溶性可诱导共刺激分子(s ICOS)水平的影响。方法选取我院2012年1月至2013年5月符合条件的患者80例,按随机数表法随机分为观察组和对照组,每组40例。两组患者均给予IFNα-1b治疗,50 g/次,隔日1次,肌内注射。对照组继续给予IFNα-1b巩固治疗,用量同前,疗程12个月。观察组口服替比夫定序贯治疗,600 mg/次,1次/d,疗程12个月。比较两组患者治疗后的应答有效率以及治疗前后的血清s PD-1和s ICOS水平,检测两组患者的门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及γ-谷氨酸酰基转移酶(GGT),并参照慢性肝病量表(CLDQ)评价生活质量。结果观察组患者的完全应答率和部分应答率分别为50.0%(20/40)和37.5%(15/40),均高于对照组的40.0%(16/40)和25.0%(10/40),差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后的CLDQ量表各项评分均明显高于对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.01);观察组治疗后AST[(26.56±2.85)U/L]、ALT[(30.28±3.23)U/L]和GGT[(34.26±3.58)U/L]水平均显著低于对照组(P<0.01);观察组治疗后血清中s PD-1和s ICOS水平分别为(404.27±41.26)pg/m L和(35.78±3.91)pg/m L,均明显低于对照组的(517.91±52.55)pg/m L和(44.36±4.56)pg/m L,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论 IFNα-1b联合替比夫定序贯治疗乙型肝炎可明显改善患者生活质量,提高应答总有效率,其抑制患者血清中s PD-1和s ICOS水平表达可能在治疗中发挥重要作用。

聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗静脉药瘾者慢性丙型肝炎38例疗效观察

目的评价聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗静脉药瘾者慢性丙型肝炎的病毒学应答。方法38例静脉药瘾者慢性丙型肝炎患者为治疗组,设同期就诊输血后慢性丙型肝炎患者37例为对照组,均予聚乙二醇干扰素α-2b(80μg/w)联合利巴韦林[10.6mg/(kg.d)]治疗48周,检测基线及治疗12周、48周时的血浆HCVRNA水平,治疗后随访24周,比较两组早期病毒学应答(EVR)率、治疗终点病毒学应答(ETVR)率和持续病毒学应答(SVR)率。结果治疗组和对照组EVR率、ETVR率、SVR率分别为44.74%、76.32%、63.16%和48.65%、75.68%、64.86%,组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论静脉药瘾者慢性丙型肝炎用聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗的病毒学应答与输血后慢性丙型肝炎人群相当,聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林是静脉药瘾者慢性丙型肝炎的有效治疗选择。

口腔扁平苔藓和冠心病患者血清中IFN-γ和TNF-α的表达及其相关研究

目的:通过比较伴有口腔扁平苔藓的冠心病患者和口腔扁平苔藓患者血清中IFN-γ和TNF-α的含量,探讨口腔扁平苔藓和冠心病之间的关系.方法:选取30例经冠状动脉造影确诊并伴口腔扁平苔藓的冠心病患者、同样数量的口腔扁平苔藓患者及健康志愿者,采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测IFN-γ和TNF-α的含量.结果:冠心病并发口腔扁平苔藓组和口腔扁平苔藓组血清中IFN-γ和TNF-α的含量分别高于健康对照组,并具有统计学差异(P<0.01),冠心病并发口腔扁平苔藓组与口腔扁平苔藓组之间IFN-γ和TNF-α的含量也存在显著性差异(P<0.01).结论:IFN-γ和TNF-α可能与冠心病和口腔扁平苔藓病理机制密切相关,口腔扁平苔藓和冠心病之间可能存在一定的关联.

探讨慢性HBV感染者外周血iNKT细胞水平变化

目的探讨慢性HBV感染者外周血i NKT细胞水平变化。方法选取2015年1月—2018年9月我院收治的确诊为慢性HBV感染者48例,分别处于免疫耐受期(13例)和免疫清除期(35例),另选取同期在我院的正常体检人群39例,采用流式细胞术检测iNKT细胞占T细胞的比例,经过PAM、BFA等处理后,检测i NKT分泌的TNF-γ和TNF-α水平。结果耐受期组和清除期组患者i NKT细胞占CD3^+T细胞的比例低于正常体检组,耐受期组患者的iNKT细胞占CD3+^+细胞的比例高于正常体检组(P> 0.05),清除期组患者iNKT细胞占CD3^+T细胞的比例低于耐受期组和正常体检组;耐受期组患者比例高于清除期组和正常体检组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论慢性HBV感染患者机体可通过iNKT细胞分泌的IFN-γ和TNF-α来抑制HBV的复制过程,感染过程中外周血i NKT细胞有所数量减少。

犬IFN-α优化基因的真核表达及抗病毒活性的研究

本研究根据酵母系统密码子的偏嗜性,对成熟蛋白基因核苷酸序列进行密码子偏嗜性改造,利用毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC来表达犬IFN-α成熟蛋白基因。并采用非洲绿猴肾细胞(Vero)-水疱性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法为基础来测定重组犬α干扰素的效价,同样方法测定了表达产物对PRV和CDV的抑制作用。本试验实现了犬α干扰素在酵母中的高表达,表达量高达58 mg/L,SDS-PAGE检测大小约为24 ku,比预测分子质量大,推测发生了糖基化。表达产物具有较强的种属特异性,在Vero细胞上对PRV具有较高的抗病毒活性,达到了3.6×107U/L,对CDV也有很好的抑制作用。本研究为犬IFN-α以后的临床应用研究奠定基础。

干扰素α-2b治疗真性红细胞增多症及其继发骨髓纤维化患者分子生物学反应的研究

本研究探讨干扰素-alpha-2b(IFN-α-2b)治疗真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)及PV后骨髓纤维化(post-PV MF)患者的有效性和安全性。对30例伴有JAK2V617F突变阳性的PV患者应用IFN-α-2b治疗,通过实时定量PCR的方法检测IFN-α-2b治疗前后JAK2V617F突变负荷的变化,并研究其与临床指标的相关性。结果表明,29例可评价的患者中位随访时间为24(12-42)个月。在IFN-α-2b治疗后6、12、24及36个月分别有10%、48%、72%及78%患者发生血液学完全缓解。监测JAK2V617F突变负荷的变化显示,IFNα2b治疗后6、12、24及36个月发生分子水平缓解率分别为41%、76%、89%及89%。4例患者经IFN-α-2b治疗后JAK2V617F突变基因转阴,停药6-12个月未复发。7例post-PV MF患者应用IFN-α-2b治疗后12月JAK2V617F突变负荷减低程度[(53±18)%]较非骨髓纤维化PV患者[(32±22)%]有显著性差异(p=0.031)。结论:IFN-α-2b可选择作用于PV恶性克隆,降低JAK2V617F突变负荷,使PV患者发生分子水平缓解,尤其对post-PV MF的作用较明显。

中药补肾调冲方对卵巢早衰大鼠性激素水平的影响

目的研究中药补肾调冲方对雷公藤多苷片(GTW)所致卵巢早衰(POF)雌性大鼠性激素水平和卵巢中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)/γ-干扰素(IFN-γ)mRNA表达的影响。方法将42只SD雌性大鼠,分为空白组,模型组,结合雌激素组(对照组),中药补肾调冲方高、中、低剂量组。运用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒管激素(AMH)水平;RT-PCR法检测卵巢组织中TNF-α/IFN-γmRNA的表达水平。结果模型组E2、AMH水平显著低于空白组(P<0.05);中药补肾调冲方各给药组和对照组E2、AMH水平均高于模型组(P<0.01);其中中药补肾调冲方中、高剂量组和对照组E2、AMH水平与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组FSH水平显著高于空白组(P<0.05);中药补肾调冲方各给药组和对照组FSH水平均低于模型组(P<0.01);其中中药补肾调冲方中、高剂量组和对照组FSH水平与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组TNF-α、IFN-γmRNA水平高于空白组(P<0.05);中药补肾调冲方各给药组和对照组TNF-α、IFN-γmRNA水平均低于模型组(P<0.01);其中补肾调冲方中、高剂量组TNF-α、IFN-γmRNA水平与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论中药补肾调冲方对卵巢具有调节作用,可以预防卵巢早衰的发生。

干扰素α用于椎旁神经阻滞治疗带状疱疹后神经痛的临床疗效

目的:探讨重组人干扰素α(interferon alpha,IFN-α)用于椎旁神经阻滞治疗带状疱疹后神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)的临床疗效。方法:选取PHN病人80例,分为实验组(A组)和对照组(B组)。A组在椎旁神经阻滞药物配方中加用IFN-α,B组除在椎旁神经阻滞药物配方中未加用IFN-α外,其余治疗与A组相同。于治疗前及治疗后1、2、3月进行视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评分、匹兹堡睡眠质量指数(pittsburgh sleep quality index,PSQI)评分,并统计椎旁神经阻滞治疗次数。结果:A组病人治疗后1、2、3月VAS评分及PSQI评分均低于B组(P<0.05),治疗次数少于B组(P<0.05);A组病人的总有效率高于B组(P<0.05)。结论:IFN-α用于椎旁神经阻滞治疗PHN病人的临床疗效确切,可以减轻病人的疼痛,提高病人的睡眠质量。

猪α-干扰素临床促仔猪生长及疾病预防试验

选择广东四会某猪场40只断奶仔猪为观察对象,开展重组猪α-干扰素在促进生长作用和预防病毒性疾病方面的临床试验。试验1、2组与对照组相比较料重比分别降低6.3%和17.23%,平均每日增重率分别改变了-3.69%和24.85%,成活率分别提高了6.6%和14.3%,腹泻率分别降低了11.5%和26.9%,疾病总防治率分别提高了40.1%和55.49%;试验观察期间,对照组诊断为蓝耳病的4例,死亡1例,试验组则没有发生蓝耳病例。表明猪α-干扰素对仔猪的生长有良好的促进作用,具有显著的紧急预防病毒性疾病效果。

病毒靶向人Ⅰ型干扰素受体1的负调控机制

人Ⅰ型干扰素(type Ⅰ interferon,IFN-Ⅰ)的诱生和应答在机体抗病毒固有免疫中发挥重要作用。但病毒多可逃逸宿主此类抗病毒免疫,导致感染和致病。Ⅰ型干扰素受体(interferon alpha receptor,IFNAR)是识别及结合IFN-I的一种跨细胞膜蛋白受体,其IFNAR1亚型在干扰素发挥抗病毒效应的启动阶段发挥关键作用;本文从IFNAR1蛋白质的表达、降解及其功能等方面,概述病毒以IFNAR1为靶点负调控IFN-I的抗病毒机制,以期为该领域基础研究和临床抗病毒策略提供有益的参考依据。

Protein-loosing enteropathy associated with rotavirus infection in an infant

Rotavirus is an acute enteric pathogen in infants and children. We reported a rare case of a 6-mo-old infant with protein-loosing enteropathy (PLE) caused by rotavirus gastroenteritis, and evaluated the immunological profile in peripheral blood lymphocytes. Laboratory examinations showed lymphopenia, hypoproteinemia, hypoalbuminemia, hypogammaglobulinemia, and elevation of alpha-1-antitrypsin (α1-AT) clearance. Lymphocytes subpopulation study revealed the reversal of CD4+/CD8+ ratio with the selective decrease of CD4- positive lymphocytes. Moreover, the excessive increase of T cells producing IFN-gamma (IFN-γ) was found, which plays an important role in the protection against viral infection. The primary or secondary activation of immune system by rotavirus may influence structural integrity and vascular permeability, which may play a triggering role in protein-loosing enteropathy.