肛周脓肿组织中Foxp3、IL-15表达情况及其与疾病复发的关联性研究

目的探讨肛周脓肿组织中叉头样转录因子3(Foxp3)和白细胞介素-15(IL-15)的表达情况,分析其与疾病复发的关联性。方法选取2019年1月至2020年7月于北京中医医院顺义医院进行手术治疗的肛周脓肿患者98例,收集患者术中的脓肿壁组织以及脓肿壁周围的正常组织。采用免疫组织化学染色法检测组织中Foxp3和IL-15的表达情况。分析肛周脓肿组织Foxp3及IL-15表达与患者临床病理特征和疾病复发的关联性。结果Foxp3蛋白主要表达于细胞核区域,IL-15蛋白主要表达于胞质和胞膜。脓肿壁组织中Foxp3、IL-15蛋白的阳性表达率高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。脓肿壁组织中Foxp3、IL-15表达情况与脓肿直径、愈合时间和术前肛瘘形成情况具有显著关联性(P<0.05),与性别、年龄、脓肿位置和病程无显著关联(P>0.05)。Cox回归分析结果显示,术前肛瘘、Foxp3阳性、IL-15阳性是促进肛周脓肿患者疾病复发的独立危险因素(P<0.05)。结论肛周脓肿组织中Foxp3和IL-15表达升高,与患者临床病理特征及疾病复发密切相关。

兔抗鼠IL-12p35多克隆抗体的制备及应用

利用分子克隆方法构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化后,获得重组融合蛋白GST-IL-12p35。以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体。采用ELISA法评估抗体效价,Western blot检测抗体特异性。LPS刺激小鼠脾细胞,ELISA法检测IL-12抗体阻断后细胞培养上清中的IFN-γ的分泌量。结果:成功构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,并获得重组融合蛋白GST-IL-12p35(约48kDa)。抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体,ELISA法测得IL-12p35多克隆抗体效价为1256 000,Western blot证实制备的多克隆抗体能够识别结合重组蛋白。IL-12p35多克隆抗体能够有效地抑制LPS诱导的脾细胞IFN-γ的表达。

结直肠癌组织STAT3、Foxp3、IL-6表达与临床病理特征的相关性

目的 检测结直肠癌组织中信号转导及转录因子3(STAT3)、叉头盒p3(Foxp3)及白细胞介素6(IL-6)蛋白的表达,分析其与结直肠癌临床病理特征间的关联。方法 选择44例结直肠癌患者的肿瘤组织作为实验组,记录患者的性别、年龄、分化程度、肿瘤类型及淋巴结转移等病理临床参数,同时选择20例患者结直肠癌旁组织作为对照组;应用免疫组织化学法分析实验组和对照组中STAT3、Foxp3及IL-6的表达,分析3种蛋白的表达与临床病理特征的相关性及3种蛋白之前的相互关系。结果 实验组STAT3、Foxp3、IL-6蛋白的表达明显高于对照组,STAT3蛋白的表达与肿瘤分化程度有关,差异有统计学意义(P<0.05);Foxp3蛋白的表达与淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05);IL-6蛋白的表达与肿瘤分化程度有关,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌肿瘤组织中STAT3、Foxp3和IL-6蛋白的表达无相关性,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论结直肠癌组织中STAT3、Foxp3和IL-6蛋白过量表达提示患者恶性程度高,转移可能性大,可以作为判断结直肠癌预后效果的重要参考指标之一。

基于FPGA的高速CCD驱动电路的设计与实现

高速CCD驱动电路的设计是CCD相机在图像采集中成功应用的关键技术之一。以DALSA公司近年来推出的高性能CCD图像传感器IL-P3为例,在分析其驱动时序关系的基础上,结合FPGA和Verilog硬件描述语言,设计一个积分时间可调的高速CCD驱动电路,在quartusⅡ开发环境下进行功能仿真。选用ALTERA公司的cyclone器件EP1C12Q240C8作为硬件设计平台。仿真和实验表明,设计的驱动电路能满足驱动时序的要求。

TGF⁃β1对炎症状态下人牙周膜成纤维细胞的调控作用

目的探讨转化生长因子⁃β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖(lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg⁃LPS)刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs)的调控作用。方法获取hPDLFs并进行免疫组化鉴定,通过qRT⁃PCR与CCK⁃8确定Pg⁃LPS的刺激浓度。将hPDLFs分成4组:空白对照组,单纯100μg/mL Pg⁃LPS;低浓度组,1 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;中浓度组,10 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;高浓度组100 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS。CCK⁃8检测细胞增殖情况;划痕实验与Transwell小室实验检测hPDLFs细胞迁移能力;流式细胞术检测hPDLFs的细胞周期;qRT⁃PCR检测hPDLFs的转录因子叉头盒p3(forkhead/winged helix transcription⁃al factor p3,Foxp3)、白细胞介素6(interleukin⁃6,IL⁃6)及EB病毒诱导基因3(Epstein⁃Barrvirus⁃induced gene 3,EBI3)mRNA表达;Western blot检测hPDLFs的Foxp3、IL⁃6及EBI3蛋白表达。结果免疫组化鉴定显示抗波形丝蛋白阳性及抗角蛋白阴性;Pg⁃LPS浓度为100μg/mL时,hPDLFs中IL⁃6 mRNA表达相比空白对照组显著上升(P<0.0001)且细胞增殖能力下降(P<0.0001),所以选择100μg/mL Pg⁃LPS用于模拟炎症状态。10、100 ng/mL TGF⁃β1能提高炎症状态下hPDLFs的增殖能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1能促进炎症状态下hPDLFs的迁移能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可加快炎症状态下hPDLFs的细胞周期(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可抑制炎症状态下hPDLFs的IL⁃6基因和蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的EBI3基因及蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的Foxp3基因表达量,10 ng/mL TGF⁃β1可提高Foxp3蛋白表达量(P<0.05)。结论TGF⁃β1可促进炎症状态下hPDLFs的增殖及迁移能力、上调EBI3表达,可能与转录因子Foxp3表达有关。

高速CCD数据采集系统的驱动电路设计

以CCD图像传感器IL-P3为例,设计一种可调节曝光时间的CCD驱动电路.CCD作为光电转换式图像传感器,以其灵敏度高、动态范围大、光谱响应宽、功耗低、分辨率高和采样速度快等一系列特点成为现代电子学和现代测试技术中最活跃的传感器.在CCD应用技术中,用于产生CCD驱动时序的设计,是CCD数据采集电路设计的关键之一.

一种CCD驱动电路的设计方法

以CCD图像传感器IL-P3为例,在分析其驱动时序的基础上,结合CPLD软件和VHDL语言,设计一种可调节曝光时间的CCD驱动电路。仿真和实验表明,设计的驱动电路能满足驱动时序的要求。

胸腺增龄性萎缩与胸腺TECs内基因信使RNA表达相关性研究

目的探讨胸腺增龄性萎缩与胸腺上皮细胞(thymus epithelial cells,TECs)内参与胸腺发育KGF、Foxp3、Foxn1和IL-6等基因表达的相关性。方法将18只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)小鼠按月龄分组,每组6只。无菌取胸腺,应用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测TECs细胞中KGF、Foxp3、Foxn1和IL-6等基因的表达。结果小鼠TECs细胞中KGF、Foxp3、Foxn1和IL-6基因表达在随着年龄增加而变化,3、10、16月龄的小鼠KGF表达量分别为(0.90±0.06),(0.58±0.07)和(0.18±0.07),差异具有统计学意义(P值分别为0.030,0.020,<0.001);Foxp3表达量分别为(0.93±0.10),(0.60±0.08)和(0.20±0.06),差异具有统计学意义(P值分别为0.020,0.020,<0.001);Foxn1表达量分别为(0.92±0.09),(0.63±0.09)和(0.16±0.08),差异具有统计学意义(P值分别为0.020,0.010,<0.001);IL-6表达量分别为(0.33±0.11),(0.46±0.06),(0.88±0.09),差异具有统计学意义(P值分别为0.052,0.001,<0.001)。同时,胸腺质量的增龄性减少与TECs细胞KGF、Foxp3、Foxn1和IL-6等表达相关性结果显示,小鼠TECs细胞KGF、Foxp3和Foxn1在mRNA水平表达与胸腺增龄性萎缩(胸腺质量)情况呈正相关(KGF:r=0.941,R^(2)=0.886,P<0.001。Foxp3:r=0.939,R^(2)=0.881,P<0.001。Foxn1:r=0.918,R^(2)=0.842,P<0.001),而IL-6的mRNA表达与胸腺增龄性萎缩(胸腺质量)情况呈负相关(r=-0.866,R^(2)=0.749,P<0.001)。结论胸腺基质微环境增龄性变化和胸腺发育关键基因表达增龄性改变是导致小鼠胸腺增龄性萎缩的主要原因,提示KGF、Foxp3和Foxn1等基因的时序性表达调节胸腺增龄性萎缩的进程。