脓毒症患儿血液中IL-17、IL-10、IL-12p70和TNF-α水平及其预后价值

目的探究脓毒症患儿血液中IL-17、IL-10、IL-12p70和TNF-α水平及其预后价值。方法分析2020年5月至2023年5月期间中山市博爱医院儿科重症监护室收治的124例脓毒症患儿临床相关资料,依据病情严重度分为脓毒性休克组(n=28)、严重脓毒症组(n=34)以及一般脓毒症组(n=62),另选取同期58名体检健康儿童作为健康组。比较四组血清白细胞介素(IL)-17、IL-10、IL-12p70以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。另根据脓毒症患儿预后情况,分为预后良好组(n=92)与预后不良组(n=32)。比较两组一般临床资料及实验室指标,以单、多因素Logistic分析影响脓毒症患儿预后的相关因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IL-17、IL-10、IL-12p70和TNF-α对脓毒症患儿预后不良的评估价值。结果IL-17、IL-10、IL-12p70及TNF-α水平比较,脓毒性休克组均>严重脓毒症组>一般脓毒症组>健康组,差异有统计学意义(F=1343.04、667.91、1155.44、1358.00,均P<0.05);预后良好组与预后不良组在儿童重症监护室时间、机械通气时间以及血清IL-17、IL-10、IL-12p70、TNF-α水平上的比较,差异有统计学意义(χ^(2)/t=6.978、6.511、5.417、6.321、7.227、6.723,均P<0.05);多因素分析结果表明,儿童重症监护室时间以及机械通气时间长,IL-17、IL-10、IL-12p70及TNF-α水平升高均为脓毒症患儿预后不良的独立危险因素(P<0.05);血清IL-17、IL-10、IL-12p70、TNF-α以及4者联合检测的ROC曲线面积分别为0.785、0.818、0.827、0.804以及0.971(P<0.05)。结论血清IL-17、IL-10、IL-12p70以及TNF-α水平均与脓毒症患儿病情严重程度及预后联系紧密,且四者联合检测对脓毒症患儿预后评估具备较高应用价值。

血清白介素-12p70、淀粉样蛋白A水平变化与慢性阻塞性肺疾病患者并发冠心病的关系

目的分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清白介素-12p70(IL-12p70)、淀粉样蛋白A(SAA)水平变化及其与并发冠心病(CHD)的关系。方法选取2019年5月—2023年5月山西医科大学附属汾阳医院呼吸与危重症医学科诊治COPD患者150例,其中并发CHD患者58例纳入COPD-CHD组,未并发CHD患者92例纳入COPD组。检测血清IL-12p70、SAA水平;比较不同血清IL-12p70、SAA水平COPD患者并发CHD发生率;Logistic回归模型分析血清IL-12p70、SAA与COPD患者并发CHD的独立关系,受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清IL-12p70、SAA预测COPD患者并发CHD的价值。结果COPD-CHD组吸烟史比例、糖尿病比例、纤维蛋白原及血清IL-12p70、SAA水平高于COPD组[χ^(2)(t)/P=4.696/0.030、4.801/0.029、2.629/0.010、6.111/<0.001、5.744/<0.001];随着血清IL-12p70、SAA水平升高,COPD患者并发CHD发生率呈升高趋势(χ^(2)/P=27.864/<0.001、31.346/<0.001);血清IL-12p70、SAA升高均是COPD患者并发CHD的独立危险因素[OR(95%CI)=3.350(2.002~5.607),3.658(2.268~5.899)];ROC曲线分析显示,血清IL-12p70、SAA联合预测COPD患者并发CHD的AUC为0.835,优于各自单独预测效能(Z/P=2.180/0.029,2.244/0.025)。结论COPD患者血清IL-12p70、SAA水平升高,尤其是并发CHD时升高更显著,二者均为COPD患者并发CHD的独立危险因素,临床可通过检测两指标水平判断COPD患者并发CHD风险。

IL-12、IL-27和P53与卵巢上皮性肿瘤临床病理特征及预后的相关性研究

目的:观察IL-12、IL-27、P53在卵巢癌组织、卵巢上皮性良性肿瘤组织、正常卵巢组织中的表达,探究其与卵巢上皮性肿瘤临床病理特征及预后的相关性。方法:免疫组化法检测IL-12、IL-27和P53在50例上皮性卵巢癌(上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer, EOC))、40例卵巢上皮性良性肿瘤及18例正常卵巢组织中的表达情况,探讨IL-12、IL-27和P53表达与EOC临床病理特征及预后的关系。结果:EOC中IL-12、IL-27和P53表达与FIGO分期、病理类型、组织分化程度有关(P 0.05)。IL-12、IL-27和P53在EOC中表达呈正相关(r = 0.364)。EOC中IL-12、IL-27和P53高表达与患者不良预后密切相关,IL-12、IL-27和P53高表达者的总生存期明显缩短(P < 0.05)。结论:IL-12、IL-27和P53可能参与EOC的发生、发展,有望作为EOC临床预后预测指标。

IL-17、IL-12p70在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨白细胞介素-17(IL-17)、IL-12p70在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法 选取2015年1月至2017年12月于安徽省庐江县人民医院接受根治术的宫颈癌患者106例作为研究对象,收集患者宫颈癌组织与癌旁组织,检测宫颈癌组织与癌旁组织中的IL-17、IL-12p70表达;分析宫颈癌组织中IL-17、IL-12p70表达与患者临床病理特征与预后的关系。结果与癌旁组织中IL-17、IL-12p70表达比较,宫颈癌组织中IL-17、IL-12p70表达阳性率显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(t=14.840、4.255,P<0.05);Ⅲ期与有淋巴结转移患者的IL-17表达阳性率高于TNM分期Ⅰ、Ⅱ期、无淋巴结转移患者(χ^(2)=8.664、6.569,P<0.05),Ⅲ期与有淋巴结转移患者的IL-12p70表达阳性率低于TNM分期Ⅰ、Ⅱ期、无淋巴结转移患者(χ^(2)=10.424、8.880,P<0.05);IL-17表达阳性、阴性宫颈癌患者5年生存率分别为50.00%、83.33%,差异具有统计学意义(χ^(2)=11.137,P<0.05);IL-12p70表达阳性、阴性宫颈癌患者5年生存率分别为77.78%、37.21%,差异具有统计学意义(χ^(2)=17.734,P<0.05)。结论宫颈癌组织中IL-17、IL-12p70表达水平均升高,两项指标均与病理分期、淋巴结转移以及预后有关。

AECOPD合并肺炎患者外周血CD16^(+)/56^(+)NK细胞及IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ表达水平及意义分析

目的探究慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并肺炎患者外周血CD16^(+)/56^(+)自然杀伤(NK)细胞、白介素-12p70(IL-12p70)、白介素-10(IL-10)、白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)表达及临床意义。方法选取274例AECOPD患者,根据是否合并肺炎分为单纯AECOPD组89例、AECOPD合并肺炎组185例(根据肺炎严重程度分为重症组85例、非重症组100例),检测患者入院时外周血CD16^(+)/56^(+)NK细胞及IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ表达水平。结果AECOPD合并肺炎组血清IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ水平均高于单纯AECOPD组,且重症组均高于非重症组(P<0.05),但不同组外周血CD16^(+)/56^(+)NK细胞比较均差异无统计学意义(P>0.05);Spearman秩相关显示,AECOPD患者血清IL-12p70与IL-10、IL-4、IFN-γ表达呈正相关(P<0.05),但外周血CD16^(+)/56^(+)NK细胞与血清IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ表达均无显著相关性(P>0.05);血清IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ及四者联合预测AECOPD合并肺炎的AUC分别为0.677、0.778、0.618、0.717、0.789,预测AECOPD合并重症肺炎的AUC分别为0.600、0.682、0.611、0.598、0.687。结论AECOPD合并肺炎患者血清IL-12p70、IL-10、IL-4、IFN-γ表达均明显升高,且在重症肺炎中表达更高,其中以IL-10、IFN-γ对AECOPD合并肺炎预测价值较高,而联合检测预测价值更高。

原发性急性闭角型青光眼患者房水中IL-8和IL-12p70的表达及其临床意义

目的:对原发性急性闭角型青光眼(AACG)和年龄相关性白内障(ARC)患者房水中IL-8及IL-12p70浓度进行检测,并探讨其临床意义。方法:选取2019-10/2020-12于我院治疗的原发性AACG急性发作期患者29例29眼作为研究组,同期于我院行手术治疗的ARC患者17例17眼作为对照组,通过流式液相蛋白定量技术检测患者房水中IL-8及IL-12p70水平,同时收集患者的一般资料进行相关性分析。结果:与ARC患者相比,AACG患者房水中IL-8浓度显著升高(Z=-5.384,P<0.05),但两组患者房水中IL-12p70水平无差异(Z=-1.587,P=0.112)。AACG患者房水中IL-8水平与急性发作持续时间呈正相关(r_(s)=0.387,P=0.038),其中滤过性手术患者房水中细胞因子IL-8、IL-12p70浓度均显著高于非滤过性手术患者(P<0.05)。结论:AACG患者房水中炎症相关因子IL-8浓度明显升高,免疫相关因子IL-12p70浓度随着疾病的进展出现差异性表达增加,提示炎症和免疫可能参与AACG的病理过程。

人细胞因子IL-12p70与结核分枝杆菌特异性抗原Ag85A融合基因重组卡介苗的构建及鉴定

目的:构建可表达融合蛋白IL-12p70-Ag85A的重组卡介苗,为结核病新疫苗的研制奠定基础。方法:以穿梭表达质粒pMV361为载体,构建重组质粒rpMV361-IL-12p70-Ag85A。将成功构建的重组质粒以电转化方式导入BCG基因组构建重组卡介苗rBCG-IL-12p70-Ag85A。通过抗生素筛选、重组卡介苗基因组PCR扩增及测序,以及western-blotting对重组卡介苗进行鉴定。结果:经鉴定,重组卡介苗成功构建,并可表达融合蛋白IL-12p70-Ag85A。结论:重组卡介苗rBCG-12p70-Ag85A构建成功,并可高效表达目的蛋白。

重组结核病疫苗rBCG-IL-12p70-MPT64免疫原性研究

目的构建可表达人细胞因子IL-12p70及结核分枝杆菌免疫显性抗原MPT64融合蛋白重组卡介苗,研究其免疫效应,为获取较卡介苗(BCG)更具保护作用的结核病新疫苗奠定基础。方法采用基因重组技术构建重组卡介苗rBCG-IL-12p70-MPT64(rBCG-IM),将其免疫BALB/c小鼠,分别于免疫后15、30、60及90 d,iELISA检测特异性抗体滴度水平,评价疫苗诱导的体液免疫。XTT检测受特异性抗原刺激后脾淋巴细胞增殖反应,流式细胞术观察CD4+T、CD8+T细胞比例变化,细胞因子检测试剂盒检测IFN-γ的诱生量,评价疫苗诱导的细胞免疫。结果与BCG相比,重组疫苗rBCG-IM可诱导更强的脾细胞增殖反应、更高的IFN-γ诱生量,以及更高比例的CD4+T、CD8+T细胞。同时,rBCG-IM可诱导产生较BCG更高水平的IgG、IgG1和IgG2a抗体滴度,IgG2a/IgG1比值变化趋势提示该疫苗可诱导Th1型免疫应答。结论重组卡介苗rBCG-IM可诱导产生较BCG更强、持续时间更长的细胞免疫及体液免疫反应,具有较强的深入研究价值。

IL-12P70及IFN-γ在预测肾移植术后急性排斥反应中的应用

【目的】探讨血清IL-12P70、IL-4、IFN-γ在预测肾移植受者早期免疫状态的作用。【方法】选取中山大学附属第三医院肾移植科行同种异体尸肾移植患者52例,其中男28例,女24例,平均年龄42.3岁,将患者分为正常组(n=30)、急排组(n=12)和感染组(n=10)。分别于术前,术后第1、5天检测其血清IL-12P70、IL-4、IFN-γ这3种细胞因子浓度。数据统计使用SPSS15.0,P<0.05被认为有统计学意义,使用方差分析并加行LSD-t和SNK-q检验以检验3组患者3种细胞因子浓度的组间差异,作ROC曲线、计算机处理ROC曲线下面积(Az),以评价这3种细胞因子对急性排斥反应的诊断价值。【结果】三组患者术前及术后第1天血清IL-12P70、IFN-γ、IL-4浓度和IFN-γ/IL-4均无统计学差异;术后第5天各组患者血清IL-4浓度无统计学差异;急排组血清IL-12P70、IFN-γ浓度和IFN-γ/IL-4均显著高于正常组和感染组;急排组术后第5天血清IL-12P70、IFN-γ水平较术前和术后第1天明显上升(9.012±0.736vs6.613±0.598;40.402±13.414vs31.539±13.323,P<0.05);IL-12P70、IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4在术后第5天的ROC曲线下面积分别为0.975,0.808,0.492,0.708;当IL-12P70浓度取值7.40pg/mL时或IL-γ取值31.48pg/mL时,对急性排斥反应预测的敏感度和特异度分别达到100%、85%或83.3%、85%。【结论】血清IL-12P70、IFN-γ水平对肾移植受者移植术后早期的免疫状态有较好的预测价值;当血清IL-P70浓度高于7.40pg/mL或IFN-γ浓度高于31.48pg/mL时须高度怀疑急性排斥反应发生的可能性。

不同细菌所致小鼠血流感染模型中MIP-1β、MIP-2和IL-12p70的表达及变化规律

目的探讨4种血流感染常见细菌致小鼠血流感染后MIP-1β、MIP-2和IL-12p70的表达及变化规律。方法建立金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CD-1(ICR)小鼠血流感染模型,采用Luminex液相芯片系统检测各实验组和PBS对照组小鼠感染后0.5、1、3、6、12、24和48 h MIP-1β、MIP-2和IL-12p70的含量。结果 MIP-1β的浓度在细菌入血后1 h时明显升高,金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌组和对照组浓度分别为(134.5±18.3)、(61.5±15.4)、(3 354.0±809.0)、(6 888.4±1 100.2)和(28.9±4.6)pg/mL;IL-12p70达峰值时的浓度分别为(389.3±118.1)、(127.6±10.0)、(42.2±3.5)、(62.8±8.4)和(4.8±0.3)pg/mL。MIP-1β、MIP-2的浓度在大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组高于其他实验组和对照组(均P<0.01),而IL-12p70的浓度在金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组中高于大肠埃希菌组、肺炎克雷伯菌组和对照组(均P<0.01)。结论大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组MIP-1β和MIP-2的浓度高于金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组,而金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组IL-12p70的浓度高于大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组。联合检测多种细胞因子或趋化因子在预测革兰阳性或革兰阴性菌感染方面有一定价值,且可能为感染早期指导治疗提供依据。

胸腺五肽对复发性外阴阴道念珠菌病患者IL-12p70和IL-23p19水平的影响及疗效分析

目的研究观察胸腺五肽对复发性外阴阴道念珠菌病患者阴道分泌物IL-12p70和IL-23p19水平的影响及疗效。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)双抗体夹心法检测复发性外阴阴道念珠菌病患者治疗组、对照组治疗前后及正常人阴道分泌物IL-12p70和IL-23p19水平。结果两组治疗前复发性外阴阴道念珠菌病患者IL-12p70和IL-23p19水平均低于正常人(P<0.01),两组患者间IL-12p70和IL-23p19水平相近(P>0.05)。治疗后胸腺五肽组IL-12p70和IL-23p19水平升高,对照组治疗前后水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组的疗效(总有效率80.00%)明显高于对照组的43.33%(P<0.05)。结论复发性外阴阴道念珠菌病患者存在着Th1/Th2型细胞因子失衡,胸腺五肽可通过纠正两型细胞因子失衡而改善患者免疫功能,提高治疗效果。

IL-12p40、IL-12p70在经典型霍奇金淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨白细胞介素-12p40(IL-12p40)、白细胞介素-12p70(IL-12p70)在经典型霍奇金淋巴瘤(CHL)组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学法检测IL-12p40、IL-12p70在41例CHL组织、92例弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织及20例反应性淋巴组织增生(RLH)中的表达。结果 IL-12p40、IL-12p70在41例CHL及92例DLBCL中的阳性表达率分别是51.22%、70.73%及0.00%、4.35%,20例RLH中未见IL-12p40及IL-12p70表达。IL-12p40、IL-12p70在CHL中及各亚型中的表达均明显高于DLBCL及RLH(P<0.05)。IL-12p40及IL-12p70的表达与患者性别、年龄、肿块大小、B症状、临床分期、血清乳酸脱氢酶水平、国际预后评分等临床病理因素均无关。IL-12p40与IL-12p70在CHL中的表达有相关性(P<0.05)。结论 IL-12p40、IL-12p70在CHL发病中有重要作用。

消炎痛对外阴阴道假丝酵母菌病小鼠阴道组织中IL-10和IL-12p70的影响

目的研究消炎痛对外阴阴道假丝酵母菌病小鼠阴道组织中细胞因子IL-10和IL-12p70的影响,进一步探索消炎痛治疗外阴阴道假丝酵母菌病的可能机制。方法 37只昆明系小白鼠随机分成3组,雌激素诱导的外阴阴道假丝酵母菌病组(EI组,n=15),消炎痛治疗EI组(Indo组,n=15),空白对照组(C组,n=7)。分别在白假丝酵母菌接种后的第4、7、14天每组随机选取5只小鼠经阴道灌洗后处死,取阴道组织。用PAS染色进行阴道组织病理学观察,并用ELISA方法检测小鼠阴道组织中IL-10和IL-12p70水平。结果 PAS染色结果显示消炎痛可抑制白假丝酵母菌菌丝的生长。与C组相比,EI组阴道组织中的IL-10水平明显增高,但IL-12p70水平没有明显差异。与EI组相比,Indo组每个时点的IL-10水平明显下降,相反IL-12p70的水平明显增加。结论消炎痛不仅可抑制菌丝的生长,同时可通过降低阴道组织中IL-10的水平和增加阴道组织中IL-12p70的水平,影响阴道局部免疫力,从而抑制假丝酵母菌阴道炎的发生发展。

IL-34、IL-12P70在慢加急性肝衰竭患者血清中的表达及临床意义

目的探讨慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者血清中IL-34、IL-12P70的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验检测55例ACLF患者(肝衰竭组)及40名健康体检者(对照组)血清中IL-34、IL-12P70水平。随访12周肝衰竭患者的生存情况并分为好转组(n=35)、死亡组(n=20),检测并比较两组IL-34、IL-12P70水平。进一步采用Pearson相关性检验分析ACLF患者血清中IL-34、IL-12P70水平与PTA、MEID评分相关性。结果ACLF患者血清中IL-34水平(14.81±2.83)pg/ml、IL-12P70水平(19.57±3.53)pg/ml均高于对照组IL-34水平(9.77±1.49)pg/ml、IL-12P70水平(17.42±2.47)pg/ml(P<0.05);死亡组IL-34水平(17.60±2.28)pg/ml、IL-12P70水平(22.80±3.23)pg/ml均高于好转组IL-34水平(13.21±1.62)pg/ml、IL-12P70水平(17.73±2.08)pg/ml(P<0.001);Pearson相关分析结果显示,在肝衰竭患者血清中IL-34、IL-12P70水平与PTA呈负相关(r^(2)=0.2420,P=0.0001;r^(2)=0.3077,P<0.0001),但与MELD评分呈正相关(r^(2)=0.1760,P=0.0014;r^(2)=0.3211,P<0.0001)。结论ACLF患者血清中IL-34、IL-12P70水平异常升高,同时与预后相关,提示其可能参与了ACLF的发生发展。

重组结核病疫苗rBCG-IL-12p70-TB10.4的免疫效应

目的将成功构建的重组卡介苗rBCG-IL-12p70-TB10.4免疫BALB/c小鼠,研究其免疫效应,为结核病新疫苗的研发提供依据。方法将融合基因IL-12p70-TB10.4克隆入pMV361构建重组质粒,以电转化方式将重组质粒导入卡介苗基因组,构建重组结核病疫苗rBCG-12p70-TB10.4（rBCG-IT）。将此重组卡介苗免疫BALB/c小鼠,分别于免疫后3、6、9和12周,用间接ELISA检测特异性抗体滴度水平,XTT检测脾细胞增值反应,流式细胞仪检测脾CD4＋T、CD8＋T细胞亚型的比例,ELISA试剂盒检测细胞因子的诱生。结果在免疫后3-12周,rBCG-IT组脾细胞增殖反应均明显强于其他各组（P〈0.01）,该组IFN-γ诱生量及CD4＋T细胞比例均显著高于rBCG-I组、rBCG-T组及BCG组（P〈0.01）。IgG2a/IgG1比值在免疫后各时间点的变化趋势提示rBCG-IT可诱导Th1型细胞免疫应答。结论重组疫苗rBCG-IT可诱导产生较BCG更强、持续时间更长的特异性细胞免疫应答,可对其免疫保护作用进行深入研究。

IL-17及IL-12p70与高脂血症性急性胰腺炎患者的病情及预后的关系

目的探讨白细胞介素(IL)-17、IL-12p70与高脂血症性急性胰腺炎患者病情严重程度及预后的关系。方法选取60例高脂血症性急性胰腺炎患者,根据病情严重程度分为轻度组(19例)、中度组(27例)和重度组(14例),比较3组患者血清IL-17、IL-12p70水平,分析血清IL-17、IL-12p70水平与病情严重程度的关系。随访28 d,统计患者预后情况,分析高脂血症性急性胰腺炎患者死亡的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IL-17、IL-12p70水平对高脂血症性急性胰腺炎患者死亡的预测价值。结果轻、中、重度组患者血清IL-17、IL-12p70水平依次增高(均P<0.05)。相关性分析显示血清IL-17、IL-12p70与病情严重程度均呈正相关(rs分别为0.429、0.384,均P<0.01)。单因素分析显示,死亡患者的性别,合并糖尿病、高血压、冠心病比例及年龄、血清降钙素原(PCT)、空腹血糖(Glu)、总胆固醇(TC)、血淀粉酶(AMY)水平与生存患者比较差异均无统计学意义(P>0.05),死亡患者的重度比例及血清C反应蛋白(CRP)、三酰甘油(TG)、IL-17、IL-12p70水平均高于生存患者(P<0.05)。多因素分析显示IL-17和IL-12p70水平升高是影响高脂血症性急性胰腺炎患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。ROC分析显示,血清IL-17、IL-12p70水平预测高脂血症性急性胰腺炎患者死亡的最佳截断值分别为331.17 ng/L和24.60 ng/L,敏感度分别为85.71%和78.57%,特异度分别为71.74%和76.09%,曲线下面积(AUC)分别为0.798和0.783,两者联合的敏感度、特异度和AUC分别为92.86%、63.04%和0.823。结论血清IL-17、IL-12p70水平与高脂血症性急性胰腺炎病情严重程度及预后有关,检测其水平对预测患者死亡具有一定的临床价值。

结肠癌患者细胞因子IFN-γ、IL-12P40、IL-12P70、IL-6、IL-8和TNF-α的表达分析

目的:探究结肠癌患者细胞因子IFN-γ、IL-12P40、IL-12P70、IL-6、IL-8和TNF-α的表达。方法:选取2017年1月~2017年6月某院治疗的100例结肠癌患者作为实验组,同期选取100例健康体检者作为对照组。采用人细胞因子96孔免疫磁珠法对患者的细胞因子IFN-γ、IL-12P40、IL-12P70、IL-6、IL-8和TNF-α的水平进行分析,分析两组的细胞因子IFN-γ、IL-12P40、IL-12P70、IL-6、IL-8和TNF-α水平和实验组患者TNM分期,分化程度及病理类型间的细胞因子表达水平。结果:对比对照组,实验组患者的细胞因子IFN-γ、IL-12P40、IL-12P70、IL-6、IL-8和TNF-α水平明显升高;TNM III/IV期患者的IL-8水平高于对照组TNM I/II期水平,P<0.05,其余细胞因子无差异,P>0.05;高分化/中分化结肠癌患者血浆中的IL-12P70及IL-8水平低于低分化组,P<0.05,其余细胞因子无差异,P>0.05;粘液腺癌患者血浆中的IL-1β、IL-8及IL-10水平高于腺癌,P<0.05;其余细胞因子无差异,P>0.05。结论:细胞因子表达图谱表明结肠癌患者和健康人具有明显的差异;相关的特定细胞因子可在一定程度上表明结肠癌的某种生物学特征,细胞因子可直接评估结肠癌患者的免疫功能,值得临床深究。

IL-12以及IL-12P40对子宫内异症患者NK细胞功能的免疫调节

目的 :通过观察正常人及子宫内膜异位症 (EM)患者外周血及腹腔液中IL 1 2、IL 1 2P40含量变化 ,分析其分子诱导NK细胞对子宫内膜细胞的细胞毒效应的影响 ,探讨IL 1 2、IL 1 2P40分子与EM患者NK细胞功能低下的相关性。方法 :ELISA酶联免疫检测IL 1 2、IL 1 2P40含量以及MTT释放法检测NK细胞毒活性。结果 :①EM患者腹腔上清液可使正常人外周血NK细胞杀伤活性 ( 1 6 80 %± 3 6 % )明显下降 ( 8 37%± 4 5% ) (P <0 0 5)。②EM患者IL 1 2含量血清为 6 6 38± 1 2 6pg ml,低于对照组 84 97± 1 3 7pg ml( P <0 0 5) ;腹腔液中为 77 76± 1 4 6pg ml ,低于对照组 1 0 6 92± 1 0 7pg ml( P <0 0 5)。③EM患者IL 1 2P40含量血清为 35 6 4± 1 0 6pg ml,与对照组无明显差异 ;腹腔液含量为 79 76± 1 2 6pg ml ,高于对照组 40 54±1 0 0pg ml(P <0 0 5) ,并与疾病的程度呈负相关。④IL 1 2能增强NK细胞对子宫内膜细胞的杀伤 ,并呈剂量依赖。在 1 0ng ml浓度诱导后杀伤率为 31 90 % ,高于对照组的 1 6 80 %。⑤IL 1 2P40能拮抗IL 1 2对NK细胞活性的诱导 ,当加入IL 1 2P40后 ,使IL 1 2诱导的活性 ( 2 9 3% )下降为 1 9 36 %。结论 :子宫内膜异位症患者腹腔液中IL 1

寻常性银屑病皮损及非皮损中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达

目的检测寻常性银屑病患者皮损及非皮损处IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA表达,探讨其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测寻常性银屑病患者皮损、非皮损处及正常人皮肤中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达水平。结果寻常性银屑病患者皮损中IL-23p19及p40(IL-23/IL-12)mRNA的表达均高于非皮损组织和正常皮肤组织(P<0.05),且非皮损处高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05);IL-12p35mRNA在银屑病皮损处、非皮损处和正常对照中表达水平差异无显著性(P>0.05)。结论在寻常性银屑病发病过程中,IL-23可能发挥较IL-12更重要的作用。

CRISPR/Cas9建立IL-12p35基因敲除大鼠C6细胞系表达研究

目的:运用CRISPR/Cas9技术敲除大鼠C6细胞系的IL-12p35基因,构建IL-12p35基因稳定敲除细胞株。方法:构建Lenti-sgRNA-EGFP质粒CRISPR/Cas9系统的Cas9核酸内切酶基因,慢病毒感染C6细胞后进行MTT[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide]检测及PI-FACS(Facial Action Coding System)细胞周期检测。结果:针对IL-12p35基因的KO1、KO2、KO3三个靶点,进行慢病毒转染,转染效率均大于80%。酶切前后靶点活性均下调,免疫印迹验证C6细胞中靶点有效性。MTT检测结果IL-12p35基因敲除后于第5天细胞增殖倍数明显降低。IL-12p35基因敲除后显著影响细胞周期G1期,G2/M期。结论:本研究构建IL-12p35基因的CRISPR/Cas9敲除系统,获得稳定的IL-12p35基因敲除细胞株,为后期IL-12p35与胶质瘤细胞的发生、发展机制方面研究提供基础。