黄芩苷对干酵母致热大鼠的解热作用及血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)、cAMP和脑组织NF-κB表达的影响

目的:观察黄芩苷对干酵母致热大鼠的解热作用并探讨其作用机制。方法:采用背部皮下注射干酵母构建大鼠发热模型,SD雄性大鼠随机分为正常对照,模型组,阳性组(阿司匹林,0.1 g/kg),黄芩苷高、中、低剂量组(160、80、40 mg/kg),连续给药3 d,测定各组大鼠肛温的变化;酶联免疫法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))与环磷酸腺苷(cAMP)水平;Western Blot检测各组大鼠脑组织NF-κB p65(核转录因子-κB p65)蛋白表达。结果:黄芩苷高剂量组有显著解热效果(P<0.01),黄芩苷各剂量组均可不同程度降低大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE 2和cAMP含量;与正常组比较,模型组脑组织NF-κB p65蛋白表达增多,黄芩苷高剂量组可明显降低大鼠脑组织NF-κB p65表达(P<0.05)。结论:黄芩苷可显著性降低干酵母引起的体温升高,解热机制可能与抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)与cAMP的分泌和减少脑组织NF-κB p65蛋白表达有关。

半定量RT-PCR测定中药成分对小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平的影响

应用半定量RT-PCR方法,测定了9种中药成分对小鼠脾脏T细胞IL-2mRNA水平的影响。结果显示,体内注射黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮和黄芪皂甙能够使ConA诱导的小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平显著升高,蜂胶多糖、板兰根多糖、人参皂甙、淫羊藿黄酮不能影响细胞内IL-2mRNA丰度;中药成分体外诱导时与体内应用时的作用效应相同,但与对照相比较,蜂胶多糖在体外能够显著促进IL-2mRNA的诱生,与体内不同。

灵芝多糖体外对小鼠脾细胞IL-2,IL-3 mRNA表达的影响

目的观察灵芝多糖体外对小鼠脾细胞ＩＬ－２、ＩＬ－３ｍＲＮＡ的表达水平是否有影响。方法逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍＲＮＡ表达，凝胶图象光密度分析系统进行相对定量。结果在原代小鼠脾细胞培养开始时加入不同浓度的灵芝多糖ＧＬＢ７（５，１０，２０，４０ｍｇ·Ｌ－１），培养１２ｈ及２１ｈ后观察ＧＬＢ７与ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平之间的量效关系。发现在一定范围内，随着ＧＬＢ７浓度的升高，ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平也相应提高，对ＩＬ－２ｍＲＮＡ的提高率分别为１０．４％，２１．９％，３７．８％，４６．６％；对ＩＬ－３ｍＲＮＡ的提高率分别为１５．４％，３５．２％，５２．４％，７４．５％。１９９８－０４－０８收稿，１９９８－０７－２６修回＊国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ３９４００１６５作者简介：王庆彪，男，２６岁，硕士；雷林生，男，３８岁，医学博士，副教授培养１２ｈ和３０ｈ的上清液中ＩＬ－２样活性及ＩＬ－３样活性处理组与对照组相比亦有明显升高，且有一定的浓度依赖关系。

过敏性紫癜患者外周血单个核细胞中Tim-1,Tim-3mRNA表达和血清中IL-2和IL-4含量测定

目的研究Tim-l,Tim-3及IL-2,IL-4在过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病中的作用。方法将28例HSP患者分为单纯组和混合组,采用RT-PCR技术检测两组患者外周血单个核细胞中Tim-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达情况,ELISA法检测血清中IL-2和IL-4的含量,选取健康人20例作为对照组。结果 HSP患者Tim-1 mRNA相对表达量高于正常对照组[RQ值分别为0.974(1.108)和0.760(0.514),P<0.05],而Tim-3 mRNA相对表达量差异无统计学意义[RQ值分别为1.359(1.183)和1.604(1.177),P>0.05];Tim-1 mRNA,Tim-3 mRNA的表达在HSP单纯组和混合组之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。HSP患者血清IL-2含量(188.517±12.867)较正常对照组(202.759±20.903)降低,IL-4含量(73.046±8.750)高于正常对照组(62.301±11.232),且HSP患者混合组IL-2含量低于单纯组,IL-4含量高于单纯组,以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论Tim蛋白可能参与HSP发病,但与疾病严重程度无关;IL-2和IL-4水平可能与疾病严重程度密切相关。

大豆异黄酮对去卵巢大鼠脾脏IL-2 mRNA表达的影响

目的探讨大豆异黄酮对去卵巢大鼠脾脏IL-2mRNA表达及分布的影响。方法在成功造模60只去卵巢青年大鼠的基础上,分别皮下注射补充大豆异黄酮高、中、低剂量(1.5、1.0、0.5mg·kg-1BW)和溶媒剂,补充至第2、4和6周时每组各宰杀5只,运用原位组织杂交方法,对大鼠脾脏IL-2mRNA的表达和分布变化进行观察。结果IL-2mRNA主要分布于被膜下方的红髓区,在白髓区的脾小结外周、边缘区、动脉周围淋巴鞘外层等处也有分布。大鼠去卵巢后脾脏中IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目均显著下降,并且随着去除卵巢时间的延长更趋明显;而补充大豆异黄酮高、中、低剂量后,各组IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目随着时间的延长均呈上升趋势,表现时间依赖性。在同一时间段内,随着补充大豆异黄酮剂量的升高,IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目也均呈上升趋势,表现为剂量依赖性。结论大豆异黄酮对脾脏内IL-2mRNA的表达具有上调作用,并存在剂量和时间依赖性。

吗啡对福尔马林引起大鼠海马内IL-2RβmRNA表达的影响

本实验采用原位杂交法观察足底注射福尔马林（For）痛敏对海马内白细胞介素2受体βmRNA（IL-2RβmRNA）生成的影响及其与吗啡、促肾上腺皮质激素（ACTH）的关系。结果表明：正常大鼠海马有IL-11．2RβmRNA表达，集中分布于CA1－CA4区神经元、齿状回颗粒细胞。足底注射For后6h，双侧海马IL2RβmRNA表达均增加（P＜0．05），12h达高峰，24h仍高于正常。在6h时，腹腔注射吗啡可大幅度的提高For引起的IL-2RβmRNA表达增多效应，而腹腔注射ACTH却无此类似作用。提示海马内IL-2R可能与痛觉调制有关。

PRRS病毒感染对猪细胞因子IL-2、IL-4和IL-10mRNA转录的影响

通过构建猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的缺失cDNA竞争分子,利用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒感染过程中细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的mRNA进行转录水平变化的定量检测,研究PRRS病毒感染对猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10mRNA转录的影响。结果表明猪Th1型细胞因子IL 2的mRNA转录水平分别在PRRS病毒感染后1d、28d和56d出现3个mRNA转录高峰;而Th2型细胞因子IL 4的mRNA转录水平在病毒感染后56d内,一直处于低水平,而后才逐渐升高;IL 10的mRNA转录水平在病毒感染后6d内,一直处于低水平状态,第6d后才逐渐上升,至42d到达高峰,而后下降,恢复正常。结果显示PRRS病毒感染可导致Th2型细胞因子IL 4和IL 10基因转录的抑制。

结核特异性IL-2释放试验在结核感染中的诊断价值探讨

目的基于结核特异性白细胞介素2(IL-2)释放试验的结果,探讨IL-2在辅助诊断活动性结核(ATB)感染中的作用,以及用于监测治疗效果的价值。方法回顾性分析临床进行了结核感染排查的病例599例,其中确诊为活动性结核感染的病例128例,除外活动性结核感染的病例471例。(1)对与阴性对照共同孵育后上清中IL-2(N)检测值制作ROC工作曲线,分析失去抗原刺激后PBMCs持续释放IL-2的能力;(2)对抗原刺激后的响应值IL-2(T-N),制作ROC工作曲线,分析对活动性结核感染的诊断价值;(3)对比分析两组患者IL-2的阳性率;(4)观察响应值IL-2(T-N)阴性和阳性转化时间与疾病进程的依从性。结果IL-2(N)ROC曲线下面积为0.460,95%CI 0.402~0.516;IL-2(T-N)ROC曲线下面积为0.788,95%CI 0.745~0.832;在活动性结核感染组,IL-2(T-N)的阳性率显著高于非活动性结核感染组(χ^(2)=110.858,P<0.001);IL-2发生阴阳性转化的平均时间为3.1个月,时间区间为0.5~7个月。结论PBMCs失去抗原刺激后IL-2仅低水平分泌,对诊断ATB没有价值;结核分枝杆菌特异性抗原刺激后的响应值IL-2(T-N),用于诊断ATB具有一定准确性;IL-2(T-N)阴阳性转化的时间较短,在监测治疗效果方面存在一定价值,监测时间间隔建议为3个月。

油菜花粉多糖对荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α产生及其mRNA表达的影响

【目的】研究油菜花粉多糖(LBPP)对荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α的诱生及其mRNA表达的影响。【方法】通过动物抑制性肿瘤法制备肿瘤模型,采用双抗体夹心ELISA法检测IL-2、TNF-α含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-2、TNF-α mRNA的表达。【结果】LBPP有明显抗肿瘤作用,200mg·kg-1高剂量组抑瘤率可达51.26%,明显优于环磷酰胺46.22%;LBPP可显著促进荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α分泌(P<0.01),提高荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α mRNA的表达(P<0.01),高剂量组提高率分别达56.37%、105.24%、1364%和1289%。【结论】LBPP通过提高机体IL-2、TNF-α mRNA的表达而发挥抗肿瘤作用。

自然更年期大鼠IL-2、TNF、TGF和IL-2R mRNA变化及“逆针”关元穴对其影响的研究

目的探讨逆针关元穴对自然更年期大鼠血清、子宫的细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF)、转化生长因子(TGF)和脾脏白细胞介素-2受体mRNA(IL-2R mRNA)的影响及其机制。方法将112只已经通过阴道涂片筛查的10月龄SD雌性大鼠随机分为7组,另3.5月龄1组16只。采用放射免疫、原位杂交等方法,观察10月龄逆针关元穴(2次/周,连续8周)对随后12、14、16月龄大鼠血清、子宫的细胞因子IL-2、TNF、TGF和脾脏IL-2R mRNA的影响。结果与自然年轻组相比,模型对照各组血清和子宫IL-2、TGF及子宫TNF均下降,血清TNF水平呈先降后升的波动性变化,脾脏IL-2R mRNA表达水平下降;而预先介入逆针疗法后,与自然同月龄组相比,逆针各组血清和子宫IL-2、TGF及子宫TNF上升,其中逆针14、16月龄组血清TGF,逆针12、16月龄组子宫IL-2,逆针12月龄组子宫TNF和逆针12、16月龄组子宫TGF均明显提高(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.05)。血清TNF水平与模型对照组呈相反的波动性变化,其中逆针12、14月龄组差异显著(均P<0.05)。脾脏IL-2R mRNA上调,其中逆针14月龄差异显著(P<0.05)。结论逆针关元穴可以调节随后更年期大鼠血清和子宫的细胞因子IL-2、TNF、TGF水平和脾脏IL-2R mRNA的表达,这可能是该疗法改善更年期免疫功能的机制之一。

吸烟对肺功能和外周血T淋巴细胞IL-2mRNA的影响

目的探讨吸烟对健康人肺功能和外周血T细胞IL-2mRNA表达的影响。方法随机选择健康吸烟者和非吸烟者各24名,检测肺功能指标和外周血T淋巴细胞中IL-2mRNA表达。结果吸烟组中FEV1、FEV1/FVC%、MMEF75/25较对照组有明显下降(P<0.05);吸烟组中IL-2mRNA较对照组有显著性增高(P<0.05)。肺功能中FEV1/FVC%随IL-2mRNA的表达水平增加呈降低趋势(r=-0.758,P<0.05)。结论吸烟者在尚无临床症状时,肺功能已经受损。吸烟可能通过增加T淋巴细胞IL-2mRNA的表达促进炎症反应导致肺功能损害。

麦胚无细胞转译体系在IL-2mRNA研究中的应用

目前,国内尚无将体外转译体系应用于IL 2研究的报道。本文以长春1号小麦种制备麦胚无细胞体系,经与兔网织红细胞、腹水癌细胞两体系比较筛选,结果证明麦胚无细胞转译体系适于实验室应用。通过对ML A 144mRNA作转译活性鉴定,证明该系统可以合成具有生物活性的、完整的IL2分子。

L7212白血病小鼠IL-2活性、IL-2mRNA表达及复方中药清毒饮对其影响的研究

目的：探讨Ｌ７２１２白血病小鼠及其受体鼠──近交系６１５小鼠ＩＬ－２活性和ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达及复方中药清毒饮对其影响。方法：采用ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ－２及细胞原位杂交的方法检测了由ＣｏｎＡ诱导的脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性及脾细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达。结果：发现由ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２的白血病小鼠脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性明显低于６１５小鼠，Ｐ＜０．０５；其脾细胞中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达也明显低于６１５小鼠，Ｐ＜０．０１。清毒饮显著提高ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２白血病小鼠脾细胞培养上清中的ＩＬ－２活性，Ｐ＜０．００１，并能显著提高其ｍＲＮＡ表达水平，Ｐ＜０．００１。结论：清毒饮可以作为生物反应调节剂用于白血病的临床治疗。

芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IL-2和IFN-γ mRNA表达的影响

为了研究芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IL-2和IFN-γ mRNA表达的影响,选用90只1日龄雏鸡,随机分成5组:Ⅰ-Ⅳ组用新城疫LaSota系冻干苗进行口腔免疫,Ⅰ-Ⅲ组在免疫的同时,分别按0.125 g/mL、0.25 g/mL、0.5 g/mL 3个浓度灌服芪蓝四君子汤1 mL,连续灌服10 d。Ⅳ组和Ⅴ组灌服等量生理盐水。各组分别于20、40、60日龄时各宰杀6只,取小肠(空肠段),用半定量RT-PCR方法检测空肠中IL-2和IFN-γ的mRNA表达变化。结果表明,芪蓝四君子汤能显著促进雏鸡空肠中IL-2和IFN-γ mRNA的表达,诱导机体产生Th1免疫反应,进而增强机体局部的细胞免疫水平。

沙葱黄酮对绵羊外周血淋巴细胞增殖及IL-2、IL-4、IFN-γ mRNA表达的影响

本试验以绵羊外周血淋巴细胞为研究对象,研究沙葱黄酮对绵羊外周血淋巴细胞增殖率,IL-2、IL-4、IFN-γ基因mRNA表达量的影响,为全面揭示沙葱黄酮的免疫调节活性机制和相关产品的开发提供试验依据。试验采用MTT法研究沙葱黄酮对绵羊外周血淋巴细胞增殖率的影响,使用RT-PCR法研究沙葱黄酮对绵羊外周血淋巴细胞IL-2、IL-4、IFN-γ基因mRNA表达量的影响。结果显示,沙葱黄酮具有促进绵羊外周血淋巴细胞增殖的作用,对绵羊外周血淋巴细胞IL-2mRNA表达无明显调节作用,可上调IFN-γmRNA表达,下调IL-4mRNA表达。综上,沙葱黄酮具有促进绵羊外周血淋巴细胞增殖及免疫调节活性的作用。

妇科千金片对急性盆腔炎大鼠子宫、卵巢TNF-α、IL-2 mRNA转录水平的影响

目的观察妇科千金片(千斤拔、单面针、金樱根、穿心莲、功劳木、党参、鸡血藤、当归)对急性盆腔炎大鼠子宫、卵巢细胞因子TNF-α、IL-2 mRNA表达的影响,初步探讨该药抗炎免疫作用的分子机制。方法采用混合菌(大肠杆菌、解脲支原体和金黄色葡萄球菌)接种法建立急性盆腔炎大鼠模型。妇科千金片给药后取大鼠子宫、卵巢,提取总RNA,进行RT-PCR反应,通过光密度扫描进行半定量分析。结果与假手术组相比,模型组TNF-α、IL-2 mRNA表达均上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比,妇科千金片治疗组TNF-α、IL-2 mRNA表达均下降(P<0.05)。结论 妇科千金片的抗炎免疫作用可能是通过降低TNF-α、IL-2 mRNA表达,减轻由细胞炎症因子介导的炎症反应来实现的。

中药联合高效抗逆转录病毒疗法对艾滋病免疫重建不全患者IL-2及IL-10mRNA水平的影响

目的:观察中药免疫2号颗粒联合HAART疗法对44例艾滋病免疫重建不全患者IL-2及IL-10 mRNA水平的影响,初步探索该疗法对机体免疫调节的作用机制。方法:随机双盲安慰剂对照研究,治疗组23例采用HAART+免疫2号颗粒,对照组21例采用HAART+免疫2号颗粒模拟剂,观察时间1年。观察指标包括CD4^+T淋巴细胞计数、IL-2mRNA、IL-10mRNA。结果:试验组CD4+T淋巴细胞计数上升显著优于对照组,组间比较差异有统计学意义;试验组IL-2上升,ΔCt增加值试验组上升幅度明显优于对照组,2组疗后-疗前差值比较有统计学意义;试验组和对照组IL-10ΔCt值均上升,2组疗后-疗前差值比较无统计学意义。结论:中药免疫2号颗粒联合HAART治疗可较对照组明显上调艾滋病免疫重建不全患者IL-2的表达,还需扩大样本量进一步验证。

化痰、温阳法对慢性应激大鼠IL-1β、IL-2及下丘脑CRHmRNA、垂体ACTHmRNA基因表达的影响

目的:通过观察化痰、温阳方药对慢性心理应激大鼠白细胞介素1β(IL1β)、白细胞介素2(IL2)及下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRHmRNA)、促肾上腺皮质激素(ACTHmRNA)基因表达的影响,研究中药复方对慢性应激免疫内分泌的调节作用。方法:将大鼠分为5组:正常组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、半夏厚朴汤组、桂枝甘草龙骨牡蛎汤组,观察各组大鼠的胸腺指数、脾指数及肾上腺指数,采用放免法测定各组大鼠血清IL1β、IL2的含量,原位杂交法观察下丘脑CRHmRNA、垂体ACTHmRNA的基因表达的变化。结果:与正常组相比,慢性心理应激后胸腺指数、肾上腺指数、脾指数降低(P<0.01),大鼠血清ILlβ升高(P<0.05,P<0.01),IL2降低(P<0.05),CRHmRNA、ACTHmRNA表达有增强趋势。两中药组与模型Ⅰ组、模型Ⅱ组相比:半夏厚朴汤组显著性升高胸腺指数、肾上腺指数、脾指数(P<0.05,P<0.01),降低IL1β(P<0.05),升高IL2(P<0.05),使CRHmRNA表达降低的趋势;桂枝甘草龙骨牡蛎汤的脾指数显著升高(P<0.01),胸腺指数、肾上腺指数无显著变化(P>0.05),IL1β的含量水平降低(P<0.05),CRHmRNA、ACTHmRNA表达有降低趋势。结论:半夏厚朴汤、桂枝甘草龙骨牡蛎汤作用于慢性心理应激大鼠细胞因子及下丘脑垂体肾上腺轴的不同环节,调节应激后的内分泌免疫。

蛋氨酸对仔猪脾脏指数及脾脏IL-2 mRNA表达量的影响

试验为研究蛋氨酸水平对仔猪免疫功能以及脾脏IL-2 mRNA表达量的影响。选用体况良好,体重(23.26±0.48)kg的杜×长×大三元杂交仔猪36头,按试验要求随机分为6组,每组设3个重复,每个重复2头猪,分别饲喂不同蛋氨酸水平的日粮,饲养时间为28 d。结果表明,0.30%蛋氨酸处理组的脾脏指数显著高于对照组(P<0.05),0.42%和0.48%蛋氨酸处理组的脾脏指数极显著低于对照组(P<0.01);0.30%蛋氨酸处理组血清中IL-2的浓度极显著高于对照组(P<0.01),0.42%和0.48%蛋氨酸处理组血清中IL-2的浓度极显著低于对照组(P<0.01);0.30%蛋氨酸处理组IL-2 mRNA的表达量极显著高于对照组(P<0.01),0.18%和0.36%蛋氨酸处理组IL-2 mRNA的表达量与对照组相比无显著性差异(P>0.05);0.42%和0.48%蛋氨酸处理组IL-2 mRNA的表达量极显著低于对照组(P<0.01)。结果提示,蛋氨酸水平为0.30%时,能够提高机体的免疫力,从而增强仔猪的抗病能力。