rhIL-lra对大鼠实验性肝纤维化的影响

目的 :探讨rhIL -lra对实验性肝纤维化的作用。方法 :rhIL -lra为基因工程产物 ,模型采用CCL4 复合因素制备 ,rhIL -lra组同时肌肉注射rhIL -lra ,另设阳性对照组。结果 :免疫组化证明rhIL -lra可抑制I、Ⅲ型胶原和LN的合成及沉积 ;rhIL -lra治疗组血清纤维化指标PcⅢ、CⅣ、LN及HA含量明显下降。结论 :rhIL -lra具有抗肝纤维化作用。

正畸修复非综合征型唇腭裂患者牙周患病率及严重程度与患牙龈沟液IL-lβ和IL-lra的相关性

目的:探究正畸修复非综合征型唇腭裂患者牙周患病率及严重程度与患牙龈沟液IL-lβ和IL-lra的相关性。方法:选取笔者医院2018年1月-2020年2月收治的100例非综合征型唇腭裂患者为实验组,并选取同期无唇腭裂的101例正畸患者为对照组。对比两组患者治疗期间的牙周发病率,对比两组患者治疗前后3个月菌斑情况,对比两组患者治疗前后3个月牙周指数以及牙龈沟液内IL-lβ和IL-lra水平。结果:实验组发病率81.00%,显著高于对照组的49.50%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗3个月后,两组患者IL-lβ升高,IL-lra水平降低,且实验组IL-lβ显著低于对照组,IL-lra水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗3个月后,两组出血指数、牙周探诊指数均升高,且实验组出血指数、牙周探诊指数均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:正畸修复非综合征型唇腭裂患者发生牙周病几率较高,同时,当牙周病越严重时,牙龈沟液IL-lβ水平越低,IL-lra水平越高。

利用植物生物反应器表达药用蛋白FC-IL-1ra

目的:构建植物双元表达载体pMCP0-FC-IL-1ra转化根癌农杆菌GV3101并侵染胡萝卜悬浮细胞,筛选得到的阳性细胞24孔板培养1周后,检测上清中FC-IL-1ra蛋白的表达。方法:用PCR的方法扩增得到含组织型纤溶酶原激活物(tPA)分泌型信号肽的FC-IL-1ra片段,并将其连接至测序载体pGEM-T Easy中,测序正确后将FC-IL-1ra片段酶切连接至植物表达载体pMCP0中,经PCR及酶切验证插入片段的正确性。重组质粒经农杆菌GV3101介导转染胡萝卜悬浮细胞,经潮霉素筛选得到阳性克隆,24孔板培养后取上清检测蛋白表达,dot blotting检测及Western blotting验证分泌蛋白FC-IL-1ra。结果:成功构建了植物双元表达载体pMCP0-FC-IL-1ra,转化胡萝卜悬浮细胞后筛选得到阳性克隆,经dot blotting检测获得6个表达较高的细胞克隆,经Western blotting确认获得能分泌FC-IL-1ra蛋白的胡萝卜悬浮细胞株系,但分泌表达的FC-IL-1ra在IL-1ra中间某一位置有断裂。结论:成功构建了植物双元表达载体pMCP0-FC-IL-1ra,并在植物悬浮细胞体外实现了Fc-IL-1ra融合蛋白的分泌表达,证明了利用植物细胞大规模表达药用蛋白的可行性。

不明原因不孕患者子宫内膜种植窗口期IL-1β、IL-1ra mRNA的表达

目的检测IL-1β及IL-1ra mRNA在不明原因不孕患者子宫内膜种植窗口期的表达,探讨其与不明原因不孕症的相关性。方法采用逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR),对50例不明原因不孕患者及正常女性子宫内膜种植窗内IL-1β、IL-1ra mRNA的表达进行半定量检测。结果在参与试验的病例子宫内膜种植窗口期几乎均存在IL-1β及IL-1ra mRNA表达;与正常女性相比,不明原因不孕患者子宫内膜种植窗口期IL-1β表达下降,而IL-1ra mRNA表达则明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);且不明原因不孕患者IL-1ra与IL-1β表达比平均值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-1β及IL-1ra mRNA表达失调可能是导致不明原因不孕的重要分子机制。

薄盖灵芝对反复热性惊厥大鼠海马IL-1和caspase-3表达的影响

目的探讨薄盖灵芝对反复热性惊厥（FS）大鼠海马白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1ra）与caspase-3表达的影响。方法21日龄雄性SD大鼠随机均分为热性惊厥组（FS组），盐水对照组（NS组）及薄盖灵芝干预组（G组）。采用热水浴诱导大鼠FS，隔日诱导1次，共诱导10次。G组于每次水浴前2h腹腔注射薄盖灵芝；而NS组腹腔注射相同体积的0．9％氯化钠溶液。末次热水浴后12h处死动物，用ELISA方法测海马IL-1β和IL-1ra的含量；RT-PCR法测海马IL-1β、IL-1ra及caspase-3 mRNA的表达水平。结果、G组大鼠海马IL-1β水平和IL-1β mRNA水平均明显低于NS组和FS组；G组大鼠海马IL-1ra水平及IL-1ra mRNA水平亦明显低于FS组和NS组；各组大鼠海马IL-1ra／IL-1β蛋白比值差别无统计学意义。G组大鼠海马caspase-3 mRNA水平均明显低于NS组和FS组。结论薄盖灵芝能降低反复热性惊厥大鼠海马IL-18和oaspase-3表达水平，通过调节免疫及抑制凋亡发挥保护反复FS大鼠海马神经元的作用，而IL-1ra与该作用无关。

白细胞介素lra基因多态性与2型糖尿病关系的研究

目的 探讨白细胞介素1受体拮抗剂(IL-lra)基因多态性与2型糖尿病的关系。方法 应用聚合酶链反应技术对109例2型糖尿病患者和201例正常人的白细胞介素1受体拮抗剂基因(IL一1RN)数目可变的串联重复多态性进行分析。结果 2型糖尿病患者和正常人IL-1RN Ⅰ／Ⅰ、Ⅰ／Ⅱ、Ⅱ／Ⅱ和Ⅰ／Ⅳ4种基因型频率分别为80.7％和81.1％,14.7％和16.9％,1.8％和0.5％,2.8％和1.5 9％;IL-1RN*Ⅰ等位基因频率分别为89.5％和90.3％,IL-1RN*Ⅱ等位基因频率分别为9.1％和9.0％。携带IL-1RN*Ⅱ等位基因的2型糖尿病组患者血糖和甘油三酯水平明显升高。结论 IL-1RN内含子2基因多态性与2型糖尿病易感性无关,但IL-1RN(Ⅱ)等位基因可能与2型糖尿病病情的危险性有关。

白细胞介素-1β对水通道蛋白4表达的影响及其在癫痫发作中的作用

目的:观察白细胞介素-1β(IL-1β)和戊四氮致急性癫痫大鼠大脑海马水通道蛋白4(AQP4)表达变化,探讨IL-1β调节AQP4表达参与癫痫发病的作用机制。方法:将大鼠随机分为5组,对照组、IL-1β组、戊四氮组、IL-1ra(IL-1受体拮抗剂)+戊四氮组、地塞米松+戊四氮组。记录60 min内各组大鼠痫性发作级别。免疫组织化学、RT-q PCR检测6、12、24、36 h海马AQP4的表达。结果:IL-1β组和戊四氮组重度癫痫发作;地塞米松+戊四氮组和对照组无明显发作;IL-1ra+戊四氮组较戊四氮组发作减轻(P<0.05)。免疫组化和荧光定量PCR显示:戊四氮组与对照组相比12 h后AQP4表达明显升高(P<0.05),发作后24 h达到高峰(P<0.001),IL-1ra+戊四氮组12～36 h的AQP4表达都低于戊四氮组同时间点(P<0.05),地塞米松+戊四氮组与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。结论:促炎因子IL-1β可能通过上调海马AQP4表达,影响脑内局部水平衡,增加细胞外兴奋性氨基酸或离子的浓度,促进神经元放电。

不同麻醉方法对子宫颈癌根治术病人细胞因子的影响

目的 探讨子宫颈癌根治术围术期细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10和IL-lra的变化,并对三种麻醉方法进行对比观察。方法 选择30例子宫颈癌根治术病人(ASAⅠ～Ⅱ级)随机分为三组(每组10例),即异氟醚+芬太尼麻醉(IH组),全凭静脉异丙酚+芬太尼麻醉(Ⅳ组),异氟醚+硬膜外麻醉(IE组)。麻醉前、切皮后90min、术后第4h和24h采集静脉血样。细胞因子均采用放射酶联免疫吸附法(ELISA)测量。结果 子宫颈癌病人麻醉前细胞因子TNF-α、IL-6和IL-10均显著增高,而IL-lra无显著改变。同麻醉前比较,切皮后90min、术后4h和24h,IL-6和IL-lra均显著增高,而TNF-α和IL-10均无显著差异。与麻醉前比较,切皮后90min,IH组IL-6显著增高;术后4h和24h三组IL-6均显著增高。与麻醉前比较,切皮后90min、术后4h和术后24h,三组IL-lra均显著增高。结论 围术期细胞因子的变化取决于大的手术损伤和恶性疾病,而麻醉方法对其影响较小。

重组融合蛋白TNFR2-Fc-IL-1ra抑制血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠心肌肥厚

目的探讨新型重组融合蛋白TNFR2-Fc-IL-1ra(TFI)对高血压心肌肥厚的抑制作用及可能机制。方法8周龄雄性C57BL/6J健康小鼠24只随机分为3组:对照组(生理盐水)、模型组[血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1500ng/(kg·min),灌注7d]、治疗组[AngⅡ1500ng/(kg·min)+TFI 5mg/(kg·2d)],每组8只。第7天时采用鼠尾套法检测尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能;即刻处死并取其心脏进行组织切片,行苏木素-伊红(HE)染色观察大体形态;麦胚凝集素(WGA)染色观察心肌细胞肥大;免疫组化染色检测各组心肌中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β);实时定量PCR检测TNF-α、IL-1β和心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA水平。结果与对照组相比,模型组1、3、7d的血压明显升高;左心室舒张、收缩末期前壁厚度增厚;心肌细胞横截面面积[(322.2±11.6)比(199.7±12.4)μm2]明显升高;TNF-α[(1.33±0.26)%比(0.03±0.01)%]和IL-1β[(1.84±0.33)%比(0.08±0.03)%]阳性面积增加;TNF-α、IL-1β、ANP和β-MHC mRNA表达升高(均P<0.05)。与模型组相比,治疗组小鼠血压无明显变化;心室壁厚度减轻;心肌细胞横截面面积减小;TNF-α、IL-1β表达降低;ANP和β-MHC mRNA表达降低(均P<0.05)。结论 TFI通过抑制炎症反应改善心肌肥厚。

IL-1及其受体拮抗剂与支气管哮喘

白细胞介素-1(IL-1)是炎症反应中的重要因子,介导多种慢性炎症性疾病,近年来发现其在呼吸系统变态性疾病(如哮喘)中起重要作用。IL-1ra与IL-1α、IL-1β共为IL-1的家族成员。IL-1和IL-1ra之间浓度的失衡是变应性哮喘炎症发生的重要原因之一,且以此可以作为治疗哮喘的重要靶点。主要对IL-1及IL-1ra与支气管哮喘的关系及治疗中的研究进展进行概述。

rhIL-1ra蛋白质的HPLC法测定

建立了分子排阻色谱-高效液相色谱法测定重组人白介素-1受体拮抗剂(rhIL-1ra)蛋白。使用凝胶色谱柱,流动相为0.01 mol/L枸橼酸缓冲液-0.1 mol/L氯化钠溶液,检测波长280 nm。rhIL-1ra蛋白在0.018～2.4 mg/mm浓度范围内线性关系良好。回收率为99.1%,RSD为1.09%。