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ANTITUMOR EFFECTS OF HUMAN IL-15 GENE MODIFIED LUNG CANCER CELL LINE 被引量:2
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作者 沈永泉 崔莲仙 +2 位作者 何维 薛莉 巴德年 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1997年第4期8-12,共5页
Human IL15 cDNA fragment, which contains all codons encoding the human IL15 mature protein and signal peptide was transducted into the human lung squmouse cancer cells(PG cells) and murine lung adenocarcinoma cells(LA... Human IL15 cDNA fragment, which contains all codons encoding the human IL15 mature protein and signal peptide was transducted into the human lung squmouse cancer cells(PG cells) and murine lung adenocarcinoma cells(LA795 cell lines). Two IL15 highly expressed cell clones PG1 and LA795A were used to inoculate the nude mice and the T739 syngeneic mice respectively. PG1 cell express higher level of class ⅠMHC molecule on their surface than PG cells. It was shown that the modified LA795A tumor cells grew slowly in T739 mice and induced high levels of CTL/NK/LAK activity in vivo as well, compared with the case of inoculation with LA795 or LA795neo. No significant difference in the tumor growth was observed in groups of the nude mice inoculated by PG1, PG and PGneo cells respectively, except the gene modified cells could not show the lung metastasis of tumors. The supernatants derived from the LA795A cell culture could promote CTL/NK/LAK activity from the whole splenocytes and the CD4/CD8deleted splenic cells in vitro. The results indicated that the IL15 gene transfected tumor cells play important roles in the process of antitumor or antitumor metastasis. 展开更多
关键词 INTERLEUKIN-15 gene therapy TUMOR gene transduction CYTOTOXICITY
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IL-15的免疫调节功能及其相关疾病研究进展
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作者 聂亚丹 贺毅 +4 位作者 孙作厘 杨健 罗燕婷 刘明霞 王海霞 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2024年第3期240-247,共8页
IL-15作为免疫调控的关键分子,主要由髓系细胞分泌产生。IL-15在T细胞、自然杀伤细胞和记忆CD8+T细胞稳态和功能方面发挥重要作用,因其具有广泛表达、严格分泌的特性在多种免疫相关疾病中体现出良好的治疗潜能。IL-15与IL-15受体特异性... IL-15作为免疫调控的关键分子,主要由髓系细胞分泌产生。IL-15在T细胞、自然杀伤细胞和记忆CD8+T细胞稳态和功能方面发挥重要作用,因其具有广泛表达、严格分泌的特性在多种免疫相关疾病中体现出良好的治疗潜能。IL-15与IL-15受体特异性结合后,激活下游JAK/STAT、Ras/Raf/MAPK及PI3K/AKT等多种信号通路,通过诱导细胞增殖、分化和凋亡,从而发挥抗肿瘤、抗感染等生物学效应。本文主要综述了IL-15在肿瘤、自身免疫疾病和神经精神疾病等中的作用与相关机制,并总结了以IL-15为潜在治疗靶点的小分子激动剂和抑制剂,以期为深入探究IL-15在免疫系统疾病中的发病机制和药物研究提供科学依据。 展开更多
关键词 il-15 il-15受体 肿瘤 自身免疫疾病 神经精神疾病 激动剂 抑制剂
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IL-12、IL-15在急性髓系白血病患者骨髓来源CD34+白血病细胞转化为NK细胞中的作用机制研究
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作者 薛春娥 赵娟娟 张义亮 《每周文摘·养老周刊》 2024年第4期41-43,共3页
分析IL-12、IL-15在急性髓系白血病患者骨髓来源CD34+白血病细胞转化为NK细胞中的作用机制。方法:选取本院2021年12月~2022年12月期间收治的30例急性髓系白血病患者,提取患者BM-MNC,构建NK细胞诱导体系,A组加入SCF、IL-7、IL-12、IL-15,... 分析IL-12、IL-15在急性髓系白血病患者骨髓来源CD34+白血病细胞转化为NK细胞中的作用机制。方法:选取本院2021年12月~2022年12月期间收治的30例急性髓系白血病患者,提取患者BM-MNC,构建NK细胞诱导体系,A组加入SCF、IL-7、IL-12、IL-15,B组加SCF、IL-7、IL-2、IL-15。5周诱导分化结束后,对NK细胞活化情况进行检测。对NK细胞相关基因表达水平进行实时定量PCR检测,取K562细胞和患者来源原代白血病细胞分别作为靶细胞,取培养第5周的A、B组的NK细胞作为效应细胞,对NK细胞杀伤活性进行检测。结果:诱导分化前,BM-MNC中NK细胞和CD34+细胞所占比例分别为(0.46±0.11)%、(80.35±5.12)%。诱导分化后,A组NK细胞所占比例明显高于B组(P<0.05);但两组CD34 细胞所占比例组间差异不明显(P>0.05)。A组CD69+、Kp46+、NKG2D+表达比例均明显高于B组(P<0.05)。经组间差异检验,B组GranzymeB、TNF-α和IFN-y基因相对表达水平均显著低于A组(P<0.05)。对两组NK细胞对不同效靶比K562细胞与患者来源细胞的杀伤率进行统计和比较,结果显示,在不同的效靶比下,NK细胞对本组K562细胞以及骨髓血来源白血病细胞的杀伤率均存在一定的差异。其中,均呈现出效靶比越大,相应的杀伤率越高的特点。对两组NK细胞在同一效靶比下对不同细胞的杀伤情况进行比较,可知,对患者来源细胞的杀伤率均明显高于K562细胞(P<0.05)。开展组间比较,结果显示在同一效靶比下,A组细胞组合对K562细胞以及患者来源细胞的杀伤率均显著高于B组(P<0.05)。结论:IL-12、IL-15细胞因子组合可体外诱导分化CD34+白血病细胞为NK细胞,且具有一定的杀伤活性。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 CD34+ NK细胞 il-12 il-15
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斯氏艾美耳球虫MIC-5与兔IL-15基因在真核细胞中的共表达 被引量:7
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作者 孟庆玲 乔军 +3 位作者 才学鹏 田广孚 闫鸿斌 骆学农 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期4096-4101,共6页
【目的】构建能在真核细胞中共表达斯氏艾美耳球虫微线蛋白5(MIC-5)和兔IL-15重组载体,为进一步研究抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗奠定基础。【方法】将斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因,克隆到真核双表达载体pBudce4.1中,应用... 【目的】构建能在真核细胞中共表达斯氏艾美耳球虫微线蛋白5(MIC-5)和兔IL-15重组载体,为进一步研究抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗奠定基础。【方法】将斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因,克隆到真核双表达载体pBudce4.1中,应用脂质体介导法将构建的重组质粒pB-MIC-5-IL-15转染BHK-21细胞。在转染后,用RT-PCR法和间接免疫荧光试验(IFA)分别检测MIC-5和IL-15基因在BHK-21细胞中的转录和表达情况。【结果】在重组质粒pB-MIC-5-IL-15转染BHK-21细胞24 h后即可检测到MIC-5、IL-15基因进行了转录;在转染36、48、72h后,MIC-5和IL-15基因可同时在BHK-21细胞中表达。【结论】成功构建了含有斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因的重组载体,实现了两种基因在真核细胞中的共表达,为抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗研制奠定了基础。 展开更多
关键词 斯氏艾美耳球虫 MIC-5 il-15 共表达
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猪IL-15与PRRS病毒GP5基因核酸疫苗免疫效力 被引量:16
5
作者 石娜 尹杰超 +2 位作者 Dante Zarlenga 李广兴 任晓峰 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期97-102,共6页
通过分子克隆技术构建了表达猪白细胞介素(IL)-15及猪繁殖呼吸综合症(PRRSV)病毒GP5基因重组核酸疫苗。以小鼠为试验模型,利用猪IL-15作为分子佐剂并检测其对表达PRRS病毒GP5基因核酸疫苗的免疫增强作用。结果表明,猪IL-15与GP5试验组... 通过分子克隆技术构建了表达猪白细胞介素(IL)-15及猪繁殖呼吸综合症(PRRSV)病毒GP5基因重组核酸疫苗。以小鼠为试验模型,利用猪IL-15作为分子佐剂并检测其对表达PRRS病毒GP5基因核酸疫苗的免疫增强作用。结果表明,猪IL-15与GP5试验组小鼠抗体水平和T淋巴细胞亚群数量均高于PBS对照组及GP5基因单独免疫组,表明猪IL-15对核酸疫苗可有效增强PRRS病毒GP5基因的免疫效果,证实了其佐剂效应。 展开更多
关键词 il-15 PRRSV GP5基因 疫苗
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鸡IL-15基因的分子克隆及其有关特性的研究 被引量:5
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作者 刘胜旺 孔宪刚 +1 位作者 马云燕 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期255-258,共4页
实验应用聚合酶链式反应技术从鸡脾淋巴细胞中克隆得到了白细胞介素_15基因 ,序列分析表明与已发表的鸡白细胞介素_15基因完全一致。核苷酸序列和推导的氨基酸序列与牛的最接近 ,同源性分别为 46 %和 31%。与哺乳动物白细胞介素_15序列... 实验应用聚合酶链式反应技术从鸡脾淋巴细胞中克隆得到了白细胞介素_15基因 ,序列分析表明与已发表的鸡白细胞介素_15基因完全一致。核苷酸序列和推导的氨基酸序列与牛的最接近 ,同源性分别为 46 %和 31%。与哺乳动物白细胞介素_15序列类似 ,有 4个高度保守的半胱氨酸残基。同时本研究也用此方法对鸡脾脏、法氏囊、胸腺、哈德氏腺和盲肠扁桃体等淋巴器官的淋巴细胞中鸡白细胞介素_15mRNA的表达进行了研究 ,结果表明这些器官的淋巴细胞均表达mRNA。本实验还用有丝分裂原ConA对鸡脾淋巴细胞进行活化 ,观察活化的淋巴细胞表达白细胞介素_15mRNA的情况 。 展开更多
关键词 白细胞介素-15 基因克隆 生物学活性
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猪霍乱沙门菌SC500运载TGEVS与猪IL-15融合基因疫苗的稳定性及免疫安全性 被引量:4
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作者 韩国全 郭万柱 +3 位作者 孙志勇 王印 王小玉 林华 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期871-877,共7页
为研究猪霍乱沙门菌SC500作为TGEV S与IL-15融合基因疫苗pCC-S-IL-15、pCI-S-IL-15运载体的稳定性与免疫安全性,将外源表达质粒pCC-S-IL-15、pCI-S-IL-15及空载体质粒pCC-neo、pCI-neo转化SC500,采用体外增殖试验研究不同质粒在SC500中... 为研究猪霍乱沙门菌SC500作为TGEV S与IL-15融合基因疫苗pCC-S-IL-15、pCI-S-IL-15运载体的稳定性与免疫安全性,将外源表达质粒pCC-S-IL-15、pCI-S-IL-15及空载体质粒pCC-neo、pCI-neo转化SC500,采用体外增殖试验研究不同质粒在SC500中的稳定性,携带质粒的SC500对ST细胞的黏附率、侵袭力和增殖能力的影响;采用BALB/c小鼠口服免疫试验研究表达质粒在体内的稳定性及SC500对小鼠的安全性。结果显示:外源目的基因影响表达载体在运载体内的稳定性,就载体类型而言,对pCI-neo的影响大于对pCC-neo的影响;携带目的基因的外源质粒影响SC500对ST细胞的黏附率和侵袭率,pCC-neo影响大于pCI-neo;外源质粒影响SC500在小鼠体内的增殖能力,pCC-neo影响大于pCI-neo;SC500在体内的增殖中,其所运载的质粒具有一定的稳定性。结果表明,利用SC500运载基因疫苗pCC-S-IL-15、pCI-S-IL-15免疫小鼠具有相对的稳定性和免疫安全性。 展开更多
关键词 猪霍乱沙门菌 TGEV—S基因 猪白细胞介素15基因 稳定性 免疫安全性
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不同IL-15转染对NCI-H446HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ表达及NK敏感性的影响 被引量:3
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作者 丁军颖 王润田 +5 位作者 张征峥 杨志强 韩志鹏 李铁民 邓郁青 王平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期468-470,共3页
目的探讨不同形式IL15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCIH446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型(转染IL15成熟肽基因的NCIH446/IL15mp细胞、转染原型IL15基因的NCIH446/IL15细胞和转染以... 目的探讨不同形式IL15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCIH446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型(转染IL15成熟肽基因的NCIH446/IL15mp细胞、转染原型IL15基因的NCIH446/IL15细胞和转染以IL2信号肽替代IL15信号肽的改型IL15基因的NCIH446/IL2spIL15mp细胞)基础上[1],以野生株细胞为对照,流式细胞分析仪(Fluorescenceactivatedcellsorter,FACS)分析这3种细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定它们对NK杀伤的敏感性。结果野生株NCIH446细胞表面阳性表达HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子;转染IL15成熟肽基因或改型IL15基因后,这两种分子的表达均被抑制为阴性;转染原型IL15基因后,这两种分子的表达均被显著上调。5名不同健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC)对野生株NCIH446细胞的平均NK杀伤率最低,对NCIH446/IL15、NCIH446/IL15mp和NCIH446/IL2spIL15mp细胞的平均NK杀伤率依次升高。结论转染不同形式IL15基因对NCIH446细胞的免疫生物学特性影响不同。转染IL15成熟肽基因或改型IL15基因,抑制NCIH446细胞表面HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达;转染原型IL15基因,上调这两种分子的表达;转染不同形式IL15基因均可增强NCIH446细胞对NK杀伤的敏感性,但程度不同:以改型IL15者最高,IL15成熟肽者次之,原型IL15者最低。 展开更多
关键词 il-15 基因转染 NCI-H446 HLA-Ⅰ HLA-Ⅱ NK杀伤敏感性
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不同IL-15基因转染对NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响 被引量:2
9
作者 王智华 王润田 +3 位作者 丁军颖 张征峥 邓郁青 王平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期639-641,共3页
目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖的影响。方法用本室已构建的3种转染不同IL-15基因(原型、成熟肽及以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因)的NCI-H446细胞模型:CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-... 目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖的影响。方法用本室已构建的3种转染不同IL-15基因(原型、成熟肽及以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因)的NCI-H446细胞模型:CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-15mp,以野生株NCI-H446细胞(CW)为对照,台盼蓝拒染计数法测定细胞生长曲线、MTT法检测细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期的变化、RT-PCR法检测cyclinD1和cyclinE的表达。结果与CW相比,CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-15mp增殖速率依次减慢、G0/G1期细胞比例依次增加、S期细胞和细胞周期蛋白cyclinE表达依次减少、cyclinD1表达无变化。结论3种IL-15基因转染均有使NCI-H446细胞增殖明显减慢的作用,强度依次为改型>成熟肽>原型;这种作用与降低NCI-H446细胞cyclinE的表达有关(r=0.953,P<0.05),与cyclinD1的表达无关(r=0.155,P>0.05)。 展开更多
关键词 il-15 基因转染 NCI-H446 细胞增殖 细胞周期
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潞党参对光老化小鼠皮肤中IL-6、TNF-α、IL-15含量及IL-15、IL-15R共表达的影响 被引量:10
10
作者 王明月 刘春艳 +3 位作者 张宇 张小卿 马贤德 吴景东 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第6期143-146,I0023,共5页
目的研究潞党参对光老化小鼠皮肤组织中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-15及IL-15与IL-15R共表达的影响。方法将40只小鼠随机分成4组,分别是空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药剂量组。对空白对照组采取正常饲养,对阳性对照组(V... 目的研究潞党参对光老化小鼠皮肤组织中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-15及IL-15与IL-15R共表达的影响。方法将40只小鼠随机分成4组,分别是空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药剂量组。对空白对照组采取正常饲养,对阳性对照组(VE组)、中药剂量组和模型对照组制备光老化模型。模型对照组和空白对照组给生理盐水,中药剂量组给相应剂量药液,阳性对照组(VE组)给予维生素E滴剂,于造模前30 min灌胃。造模完成后,采用酶联免疫吸附法(Elisa法)检测组织中IL-6、TNF-α、IL-15含量的表达水平,采用免疫荧光双标记法检测IL-15与IL-15R共表达的水平。结果酶联免疫吸附法中,比照空白对照组,模型对照组皮肤组织中IL-6、TNF-α、IL-15含量的表达水平显著上升(P<0.01);比照模型对照组,中药剂量组皮肤组织中IL-6、TNF-α、IL-15含量的表达水平显著下降(P<0.01)。免疫荧光双标记法中,IL-15和IL-15R在各个组中均有阳性表达,其中在模型组中的表达水平最高,在中药剂量组的表达水平较模型对照组中表达水平低。结论潞党参在皮肤光老化过程中具有保护作用。 展开更多
关键词 潞党参 光老化 il-6 TNF-α il-15 il-15R
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细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ及TGF-β在慢性乙型肝炎病毒感染者外周血中的表达及临床意义的研究 被引量:13
11
作者 李彩东 林静 +3 位作者 陈锡莲 杨勇卫 靳克俭 吴斌 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第1期3-5,共3页
目的探讨HBV感染者外周血细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β的表达水平变化的及临床意义。方法选择肝癌患者60例(HCC组)、肝硬化患者60例(LC组)、慢性乙型肝炎患者60例(CHB组)、慢性乙型肝炎病毒携带者60例(ASC组)和健康对照者40例... 目的探讨HBV感染者外周血细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β的表达水平变化的及临床意义。方法选择肝癌患者60例(HCC组)、肝硬化患者60例(LC组)、慢性乙型肝炎患者60例(CHB组)、慢性乙型肝炎病毒携带者60例(ASC组)和健康对照者40例(健康对照组),采用酶联免疫法检测细胞因子表达水平,运用聚合酶链反应检测HBV DNA载量,同时检测各项生化指标。结果随着患者病情加重,细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β表达水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值。与健康对照组相比,不同临床类型HBV感染者细胞因子表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β在CHB患者外周血HBV DNA高载量组表达水平最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程,且其表达水平与病毒量具有一定相关性。 展开更多
关键词 乙型肝炎 il-15 il-16 IFN-Γ TGF-Β 临床意义
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IL-2、IL-15对NK细胞亚群表型和功能的调节作用 被引量:9
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作者 张赟 韩卫宁 +2 位作者 贾卫 曹云新 金伯泉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期6-9,共4页
目的 探讨IL 2和IL 15对NK细胞亚群表型和功能的调节作用。方法 采用双色免疫荧光染色和流式细胞仪分析 ,比较IL 2和IL 15对新鲜分离外周血单个核细胞 (PBMC)中NK细胞及经混合淋巴细胞培养 (MLC)活化的NK细胞表型的调节作用 ;用 4h51... 目的 探讨IL 2和IL 15对NK细胞亚群表型和功能的调节作用。方法 采用双色免疫荧光染色和流式细胞仪分析 ,比较IL 2和IL 15对新鲜分离外周血单个核细胞 (PBMC)中NK细胞及经混合淋巴细胞培养 (MLC)活化的NK细胞表型的调节作用 ;用 4h51 Cr释放实验检测IL 2和IL 15对NK细胞杀伤水平的影响。结果 在PBMC培养中 ,当IL 2或IL 15最终为5 0U mL时 ,能明显上调PBMC中CD5 6 +NK细胞的比例 ,且IL 15对CD5 6 bright亚群增殖的促进作用强于IL 2 ;在MLC中 ,当IL 2或IL 15为 5 0U mL时 ,能够促进MLC活化的NK细胞比率的增加 ,NK细胞亚群由CD5 6 dim为主转变成CD5 6 bright为主 ,此诱导作用IL 2强于IL 15。IL 2和IL 15都能上调PBMC和MLC中NK细胞杀伤水平 ,并呈剂量依赖关系 ,在PBMC中 ,当IL 15为5 0U mL时 ,IL 15对NK细胞杀伤水平的促进作用强于IL 2 ;而在MLC中当IL 2为 5 0U mL时 ,对NK细胞杀伤水平的促进作用高于IL 15。在PBMC中 ,同时加入 5 0U mL的IL 15和IL 2 ,NK细胞杀伤率高于单独加入IL 15或IL 2。结论 IL 15促进PBMC中NK细胞向CD5 6 bright亚群分化和杀伤水平强于IL 2 ,而IL 2促进同种异体抗原诱导的活化NK细胞向CD5 6 bright亚群分化和杀伤水平则高于IL 15。这种反应格局的差别 。 展开更多
关键词 il-2 il-15 NK细胞 表型 细胞毒
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IL-2+IL-15组合培养方案对乳腺癌患者外周血中NK细胞体外扩增的效果 被引量:9
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作者 王晓梦 于津浦 +3 位作者 李慧 于文文 任秀宝 曹水 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期654-660,共7页
目的:观察IL-2+IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外... 目的:观察IL-2+IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用IL-2+IL-15联合培养方案进行培养,观察培养15 d后细胞的扩增倍数和淋巴细胞亚群比例变化,流式细胞术检测细胞免疫表型、细胞表面受体的表达,LDH释放法和CD107a释放法检测不同细胞亚群对于HLA匹配或不匹配的靶肿瘤细胞系的杀伤活性,活细胞工作站检测总扩增产物对于不同靶肿瘤细胞系的黏附作用。结果:与扩增前相比,IL-2+IL-15培养方案扩增15 d后,NK细胞[(36.74±17.10)%vs(16.34±3.12)%,P<0.05]、NKT细胞[(24.88±12.34)%vs(4.06±2.05)%,P<0.05]比例显著增加,CD4+T细胞和Treg细胞比例显著降低(P<0.05),CD8+T细胞比例显著升高(P<0.05);NK细胞表面活化受体NKp30[(92.38±7.19)%vs(32.14±17.64)%,P<0.05]、NKp44[(74.26±16.28)%vs(1.94±1.60)%,P<0.05]、NKG2D[(98.58±1.28)%vs(66.50±24.84)%,P<0.05]的表达率均显著升高,CD16表达率显著降低[(85.12±7.66)%vs(95.60±2.53)%,P<0.05];NKT细胞、T细胞表面活化受体DNAM-1和NKG2D明显升高(P<0.05)。总扩增产物、NK细胞和NKT细胞对HLA不匹配的靶肿瘤细胞的杀伤率均显著高于HLA匹配靶细胞系的杀伤(P<0.05);在共孵育至84 min时,与HLA匹配的靶肿瘤细胞系相比,总扩增产物细胞与HLA不匹配的靶细胞系黏附结合数目显著增多[(4.80±0.53)vs(2.25±0.35)个,P<0.05]。结论:IL-2+IL-15组合方案在扩增NK细胞的同时,也能够有效扩增NKT细胞,即可以扩增CD56+细胞群。并且,扩增产物主要以不受HLA限制的NK细胞杀伤活性为主来杀伤肿瘤细胞。 展开更多
关键词 il-2 il-15 NK细胞 扩增 乳腺癌
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IL-2和IL-15协同调节T细胞的增殖和LAK细胞的杀伤活性 被引量:10
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作者 党娜娜 范桂香 +5 位作者 朱勇 刘雪松 贾卫 王薇 袁育康 金伯泉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期175-177,182,共4页
目的 探讨IL 2和IL 1 5在免疫调控和应答中的协同作用。方法 IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组刺激CTLL细胞的增殖 ,3 H TdR掺入法测cpm值 ;IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组诱导PBMC中NK和LAK细胞的发育 ,4h51 Cr释放实验检测对K5 6 2和LiB... 目的 探讨IL 2和IL 1 5在免疫调控和应答中的协同作用。方法 IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组刺激CTLL细胞的增殖 ,3 H TdR掺入法测cpm值 ;IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组诱导PBMC中NK和LAK细胞的发育 ,4h51 Cr释放实验检测对K5 6 2和LiBr细胞的杀伤活性。结果 IL 2和IL 1 5都能诱导CTLL细胞的增殖和NK、LAK细胞的杀伤活性 ,IL 2和IL 1 5可明显协同上调CTLL的增殖和LAK细胞的杀伤活性。结论 IL 2和IL 1 5在免疫调控和应答中有一定的协同作用 。 展开更多
关键词 il-2 il-15 协同调节 T细胞 增殖 LAK细胞 杀伤活性
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IL-15基因修饰的NK细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤作用 被引量:1
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作者 马杰 赵卫东 +6 位作者 马娟 金夏 张丽娜 丁玉兰 周虎 宣恒华 桂云 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期409-413,共5页
目的:探讨γ射线照射后的IL-15基因修饰的NK细胞(简称NK-ustc细胞)对原代卵巢癌细胞的体内外杀伤活性。方法:分离卵巢癌患者腹水原代卵巢癌细胞。不同剂量γ射线(0、1、2、4、8、16 Gy)照射NK-ustc细胞,3H-TdR掺入法检测照射后NK-ustc... 目的:探讨γ射线照射后的IL-15基因修饰的NK细胞(简称NK-ustc细胞)对原代卵巢癌细胞的体内外杀伤活性。方法:分离卵巢癌患者腹水原代卵巢癌细胞。不同剂量γ射线(0、1、2、4、8、16 Gy)照射NK-ustc细胞,3H-TdR掺入法检测照射后NK-ustc细胞的增殖情况,51Cr释放法检测NK-ustc细胞对K562和原代卵巢癌细胞的杀伤活性。建立人裸鼠荷卵巢癌模型,随机分为NK-ustc治疗组(模型鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞)和培养基对照组,同时设空白对照组(正常裸鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞),观察各组裸鼠体重、腹围及生存期。结果:1、2、4、8、16 Gy辐照后NK-ustc细胞的增殖率分别为(62.1±9.8)%、(41.3±8.7)%、(14.6±4.1)%、(0.1±0.03)%和(0.2±0.04)%。当效靶比为10∶1时,0、8 Gy辐照后NK-ustc细胞对K562的杀伤率分别为(45.4±8.9)%和(43.1±6.4)%,对原代卵巢癌细胞的杀伤率分别为(54.6±6.4)%和(48.3±5.8)%,说明辐照不影响NK-ustc细胞的杀伤活性(P>0.05)。辐照后NK-ustc细胞治疗组荷瘤小鼠的中位生存期为75 d,对照组为39 d(P<0.05),空白对照组小鼠全部存活。结论:γ射线照射可有效抑制NK-ustc细胞增殖,但保留该细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤活性。 展开更多
关键词 自然杀伤细胞 il-15基因 卵巢癌 免疫治疗
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Diversity of Bmp15 and Gdf9 Genes in White Goat of Guizhou Province and Evolution of the Encoded Proteins 被引量:6
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作者 冉雪琴 林尖兵 +2 位作者 杜智勇 覃成 王嘉福 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期593-602,共10页
Members of the transforming growth factor-beta superfamily, growth differentiation factor 9 (GDF9) and bone morphogenetic protein 15 (BMP 15), have crucial roles in fecundity of sheep. Our previous investigation c... Members of the transforming growth factor-beta superfamily, growth differentiation factor 9 (GDF9) and bone morphogenetic protein 15 (BMP 15), have crucial roles in fecundity of sheep. Our previous investigation confirmed that the fecundity mutations of sheep presented in highly prolific White goat individuals of Guizhou province. To illuminate other polymorphisms in Bmpl5 and Gdfl) genes and the relationship of these mutations with function, we cloned and characterized the coding region of Bmp15 and Gdfl). Molecular models of BMP15 and GDF9 mature peptide of White goat were constructed based on the homology of human BMP7 experimental tertiary structure. Two exons encoded prepropeptide of 394 amino acids in BMPI5 and 453 residues in GDF9, respectively. Apart from the FecXs mutation (S99I) in BMP15 and V791 mutation in GDF9 confirmed in White goat previously, other seven and three polymorphism sites were detected from BMP15 and GDF9 mature peptides, respectively. S32G, N66H, S99I/P99I and G107R in BMP15 could be important for the binding of dimer to receptors. Changes of P78Q and V79I in GDF9 might affect the binding of dimer to receptor type t. Comparing the length of BMP 15 and GDF9 prepropeptide in vertebrates, an increase in length of BMP 15 presented along with the protein evolution from fish to mammal and the divergence of the N-terminus residues in matured BMP15 peptide might contribute to the sensitive control on the fertility of animal species with low ovulation rate. These findings gave a valuable explanation for the correlation of mutations in Bmpl5 and Gdfl) genes with the control on fecundity of White goat and supported the notion that they were the pivotal factors in female fertility of White goat in Guizhou province. 展开更多
关键词 BMP15 GDF9 gene EVOLUTION White goat
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不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞诱导PBMC增殖和杀伤肿瘤细胞的影响 被引量:1
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作者 丁军颖 王润田 +5 位作者 王智华 崔瀓 韩志鹏 李铁民 张征峥 邓郁青 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期645-648,共4页
目的研究不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞诱导外周血单个核细胞(PBMC)增殖和杀伤肿瘤细胞的影响。方法野生型NCI-H446细胞(Cw)和被3种IL-15基因分别转染的3种NCI-H446细胞(Cmp:被IL-15成熟肽基因转染;Cp:被原型IL-15基因转染;Csp:被信... 目的研究不同IL-15基因转染对NCI-H446细胞诱导外周血单个核细胞(PBMC)增殖和杀伤肿瘤细胞的影响。方法野生型NCI-H446细胞(Cw)和被3种IL-15基因分别转染的3种NCI-H446细胞(Cmp:被IL-15成熟肽基因转染;Cp:被原型IL-15基因转染;Csp:被信号肽换为IL-2信号肽的改型IL-15基因转染),用丝裂霉素(M)处理后(分别名为MCw、MCmp、MCp和MCsp)作为刺激细胞刺激健康志愿者的PBMC。对这些被刺激的PBMC,分别名为MCw-PBMC、MCmp-PBMC、MCp-PBMC和MC-sp-PBMC。台盼蓝拒染法计数细胞数,流式细胞术测定CD4+细胞和CD8+细胞百分率。在MCmp-PBMC,MCp-PBMC和MCsp-PBMC中,选择其细胞数和CD4+细胞和/或CD8+细胞百分率统计学上明显高于MCw-PBMC的作为效应细胞,MTT法测定它们对Cw的杀伤。结果与MCw-PBMC相比,MCp-PBMC在细胞数、CD4+细胞和CD8+细胞百分率及对Cw的杀伤上,均显著提高(P<0.05)。结论原型IL-15基因转染能提高NCI-H446细胞诱导PBMC增殖和杀伤野生型NCI-H446细胞的能力。 展开更多
关键词 白细胞介素15 基因转染 NCI-H446 外周血单个核细胞 杀伤肿瘤细胞
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慢性HBV感染者血清IL-15和IL-16水平与HBV DNA载量的关系及临床意义探讨 被引量:8
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作者 李彩东 陈锡莲 +2 位作者 李惠军 田鹏飞 吴斌 《实用肝脏病杂志》 CAS 2015年第6期663-664,共2页
目的探讨HBV感染者外周血IL-15和IL-16水平变化及其与HBV DNA载量的相关性。方法选择肝癌(HCC组)60例,肝硬化(LC组)60例,慢性乙型肝炎(CHB组)60例,乙型肝炎病毒携带者(ASC组)60例和健康人40例,采用酶联免疫法检测IL-15和IL-16水平,采用... 目的探讨HBV感染者外周血IL-15和IL-16水平变化及其与HBV DNA载量的相关性。方法选择肝癌(HCC组)60例,肝硬化(LC组)60例,慢性乙型肝炎(CHB组)60例,乙型肝炎病毒携带者(ASC组)60例和健康人40例,采用酶联免疫法检测IL-15和IL-16水平,采用聚合酶链反应法检测HBV DNA载量。结果随着患者病情加重,血清IL-15和IL-16水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值,分别是(222.89±96.95)ng/ml和(109.77±11.96)ng/ml,显著高于其他各组(P<0.01);与健康人比,各种HBV感染者血清细胞因子水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在CHB患者,外周血HBV DNA高载量组IL-15和IL-16水平最高,分别是(86.67±15.92)ng/ml和(41.64±7.30)ng/ml,显著高于低载量组(P<0.05)。结论 IL-15和IL-16可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 il-15 il-16 HBV DNA
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应用CRISPR/Cas9技术构建IL-15敲除的MGC-803胃癌细胞株 被引量:2
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作者 俞静 孙丽 +4 位作者 孙晓仙 陈志红 钱晖 许文荣 朱伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期140-143,共4页
目的 :运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,建立IL-15基因敲除的MGC-803胃癌细胞株。方法 :针对IL-15基因作用的功能域,设计了靶向IL-15基因Exon2的gRNA。构建PX458-gRNA重组质粒并转化感受态细胞Stbl3,筛选出重组子后进行测序,通过测序确认... 目的 :运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,建立IL-15基因敲除的MGC-803胃癌细胞株。方法 :针对IL-15基因作用的功能域,设计了靶向IL-15基因Exon2的gRNA。构建PX458-gRNA重组质粒并转化感受态细胞Stbl3,筛选出重组子后进行测序,通过测序确认了所设计的gRNA的有效性。并进一步通过流式细胞分选以及ELISA法检测筛选出的MGC-803胃癌细胞株IL-15基因的表达水平。结果 :测序结果显示敲除质粒构建成功,与阴性对照组相比,转染PX458-IL-15-g RNA质粒组IL-15的表达水平明显低于阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:利用CRISPR-Cas9系统成功构建了IL-15基因敲除的MGC-803细胞,为后续研究IL-15在肿瘤中的作用机制和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 il-15 CRISPR/Cas9系统 基因敲除
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IL-2、IL-7和IL-15联合对T细胞的体外扩增效应 被引量:5
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作者 董隽 杨素霞 +2 位作者 李煜 高江平 张旭 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期1590-1594,共5页
为了建立一种快速有效的体外T细胞扩增方法,本研究比较了不同培养条件对T细胞增殖及其功能和特性的影响。取外周血T细胞,用自体的树突状细胞(DC)和EB病毒转化的B细胞进行周期性刺激,用细胞增殖试验、PI和AnnexinV双标记流式细胞术、Cr... 为了建立一种快速有效的体外T细胞扩增方法,本研究比较了不同培养条件对T细胞增殖及其功能和特性的影响。取外周血T细胞,用自体的树突状细胞(DC)和EB病毒转化的B细胞进行周期性刺激,用细胞增殖试验、PI和AnnexinV双标记流式细胞术、Cr释放测定及ELISPOT试验分别测定不同培养条件下细胞的增殖程度、IFN-γ分泌细胞的频率、抗原特异性T细胞的杀伤活力、细胞的凋亡状态和分化能力。结果显示:T细胞在周期性刺激后,用CD3/28微珠的短期扩增效应最好,但多轮刺激后联合应用IL-2,IL-7和IL-15对细胞的扩增最强。Cr释放试验表明,CD3/28微珠扩增的T细胞不具有杀伤活力,高浓度IL-2诱导的T细胞杀伤活性最强,其次为联合应用IL-2,IL-7和IL-15。ELISPOT显示不同培养条件诱导出的分泌IFN-γ的T细胞频率从高到低依此为高浓度IL-2>联合应用IL-2,IL-7和Il-15>低浓度的IL-2>CD3/28微珠。细胞表型分析显示高浓度IL-2和联合应用IL-2,IL-7和Il-15扩增的细胞含有较高比例的CD3+CD8+T细胞。对细胞的凋亡测定表明联合应用IL-2,IL-7和IL-15获得的T细胞的存活率最高,处于凋亡早期的细胞比例最低。细胞增殖试验显示联合应用IL-2,IL-7和IL-15扩增的细胞分化能力最强。结论:本研究建立了一种快速有效地体外扩增T细胞的方法,其中联合应用IL-2,IL-7和IL-15对T细胞的扩增最显著,获得的T细胞存活率最高,分化能力最强,该细胞同时也含有较高频率的IFN-γ分泌细胞且表现出较强的杀伤活力。 展开更多
关键词 过继性免疫治疗 il-2 il-7 il-15 T细胞 体外扩增
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