IL-16及其前体对T细胞的调节作用

成熟的IL-16最初被称为淋巴细胞趋化因子,它是一种多效的细胞因子,能引发T淋巴细胞增殖,对于免疫反应和炎症具有调节作用。IL-16前体在胞质和胞核内均表达,是T细胞的生长阻遏剂。当抗原刺激时,胱天蛋白酶-3水解IL-16前体,大量的活性IL-16释放出来。该文主要介绍近年来IL-16及其前体对T细胞的调节作用的研究概况。

细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ及TGF-β在慢性乙型肝炎病毒感染者外周血中的表达及临床意义的研究

目的探讨HBV感染者外周血细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β的表达水平变化的及临床意义。方法选择肝癌患者60例(HCC组)、肝硬化患者60例(LC组)、慢性乙型肝炎患者60例(CHB组)、慢性乙型肝炎病毒携带者60例(ASC组)和健康对照者40例(健康对照组),采用酶联免疫法检测细胞因子表达水平,运用聚合酶链反应检测HBV DNA载量,同时检测各项生化指标。结果随着患者病情加重,细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β表达水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值。与健康对照组相比,不同临床类型HBV感染者细胞因子表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β在CHB患者外周血HBV DNA高载量组表达水平最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程,且其表达水平与病毒量具有一定相关性。

慢性HBV感染者血清IL-15和IL-16水平与HBV DNA载量的关系及临床意义探讨

目的探讨HBV感染者外周血IL-15和IL-16水平变化及其与HBV DNA载量的相关性。方法选择肝癌(HCC组)60例,肝硬化(LC组)60例,慢性乙型肝炎(CHB组)60例,乙型肝炎病毒携带者(ASC组)60例和健康人40例,采用酶联免疫法检测IL-15和IL-16水平,采用聚合酶链反应法检测HBV DNA载量。结果随着患者病情加重,血清IL-15和IL-16水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值,分别是(222.89±96.95)ng/ml和(109.77±11.96)ng/ml,显著高于其他各组(P<0.01);与健康人比,各种HBV感染者血清细胞因子水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在CHB患者,外周血HBV DNA高载量组IL-15和IL-16水平最高,分别是(86.67±15.92)ng/ml和(41.64±7.30)ng/ml,显著高于低载量组(P<0.05)。结论 IL-15和IL-16可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程。

茵栀清肝汤对急性肝损伤大鼠细胞因子IL-16和IL-19的影响

目的 :研究茵栀清肝汤对四氯化碳诱导急性肝损伤大鼠的细胞因子IL 19、IL 18、IL 16和IL 10影响 ,以及该方对急性肝损伤的保护作用。方法 :RT PCR检测肝组织IL 16和IL 19,ELISA法检测血清IL 6、IL 10、IL 18;生化方法检测血清肝功能。结果 :茵栀清肝汤保护急性肝损伤大鼠呈剂量依赖模式 ,服用 12g kg剂量大鼠疗效最佳。中药治疗组大鼠血清AST、ALT水平较模型组显著降低 ,而肝组织病理表现显著改善。结论 :细胞因子IL 16、IL 19、IL 18和IL 6具有促进大鼠急性肝损伤 ,而IL 10可抑制肝损伤进展。茵栀清肝汤具有保护大鼠急性肝损伤作用 ,其机制可能与抑制炎症细胞浸润及IL 19、IL 18和IL 6等炎性细胞因子 ,促进IL 10等保护性细胞因子表达有关。

哮喘患儿血IL-16 IL-18免疫球蛋白的动态变化及相关分析

目的探讨哮喘患儿IL16,IL18,免疫球蛋白的动态变化及IL16,IL18与免疫球蛋白之间的关系,为哮喘的发病机制及抗变态反应性炎症治疗提供理论依据。方法对34例哮喘儿童及21例健康体检儿童(对照组)运用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定IL16,IL18,IgE,运用免疫比浊法测定IgG,IgM,IgA。结果哮喘发作期、缓解期IL18与对照组比较差异有显著性(P<0.01);发作期IL16,IgE,IgG均显著高于对照组(P<0.01或P<0.05),IgA显著低于对照组(P<0.01);缓解期IL16,IgE均显著高于对照组(P<0.01)。发作期及缓解期IL16,IL18呈正相关(r=0.70,P<0.01;r=0.70,P<0.05),发作期IL16与IgE呈正相关(r=0.624,P<0.01)。结论哮喘患儿发作期与缓解期均存在免疫失衡状态,IL16,IL18及IgE与哮喘发病机制有关,哮喘患儿在缓解期也应继续抗变态反应性炎症治疗,针对这些细胞因子的治疗具有潜在的价值。

转染IL-16基因对T淋巴瘤细胞的增殖抑制作用

目的 构建 IL-1 6真核表达载体 ,研究其对 T淋巴瘤细胞的增殖抑制作用。 方法 应用 RT-PCR技术从人外周血单个核细胞中获取 IL-1 6c DNA,构建并鉴定真核表达载体 Pc DNA3 -IL-1 6转染 Karpas T淋巴瘤细胞 ,采用 MTT法和流式细胞术分析 IL-1 6对 Karpas T淋巴瘤细胞的增殖抑制。 结果 PT-PCR显示转染 Pc DNA3 -IL-1 6的 Karpas T淋巴瘤细胞高表达 IL-1 6m RNA,MTT法检测显示其对 Karpas T淋巴瘤细胞具有抑制作用 ,流式细胞术检测转染 Pc DNA3 -IL-1 6的 Karpas T淋巴瘤细胞高表达 CD95分子。 结论 成功构建了真核表达载体 Pc DNA3 -IL-1 6,转染 Karpas T淋巴瘤细胞能使其生长受到明显抑制 ,并且 CD95分子表达增高 ,可能与诱导细胞凋亡有关 ,说明向肿瘤细胞转染 IL-1 6是一种有用的肿瘤生物治疗方法。

IL-16基因23核苷酸插入/缺失在广西人群中的分布

目的研究IL-16基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs150605585 I/D在广西人群中的分布,并对比不同种族间IL-16插入/缺失频率分布的差别。方法采用单碱基延伸的聚合酶链反应(PCR)技术和DNA测序法检测303例广西人IL-16基因多态性,分析广西人群这个位点的基因型和等位基因的分布频率,并与人类基因组计划(HapMap)公布的欧洲人、中国北京汉族人、日本人和非洲人的基因多态性分型数据比较,分析这5类人群rs150605585插入/缺失的分布频率。结果在我国广西人群中存在IL-16基因rs150605585 I/D多态性,分别有I/I、I/D、D/D 3种基因型。与人类基因组计划(HapMap)公布的4类人群的SNP分型数据进行比较,IL-16基因rs150605585I/D与北京、日本人群的分布差异不具有统计学意义(P均>0.05);rs150605585I/D与非洲人、欧洲人相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在广西地区人群中存在着IL-16基因多态性。广西人群IL-16基因多态性的分布与其他种族人群比较存在有差异,这种差异也许是与IL-16相关的疾病在不同地区人群间发病率不同的原因之一,这为我们研究基因与疾病的关系提供遗传数据支持。

人IL-16基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

目的：构建并鉴定人白细胞介素16（IL-16）的重组腺病毒pad—IL-16表达载体，为进一步研究IL-16功能奠定基础。方法：分离正常人外周血单个核细胞（PBMC），组胺刺激后提取总RNA，RT-PCR扩增IL—16基因，将其克隆到含有绿色荧光蛋白（GFP）标记的腺病毒穿梭质粒pAdTrack—CMV后，再与腺病毒骨架质粒pAdEasy—1共转化BJ5183细菌，获得重组腺病毒载体pAd—IL-16，转染HEK293T细胞包装病毒。荧光显微镜下观察细胞内绿色荧光，测定病毒效价，RT—PCR和Western blot分别分析细胞内IL-16 mRNA和蛋白质的表达。结果：经双酶切及基因鉴定，重组穿梭质粒和重组腺病毒质粒均见约400bp插入片段，测序结果和GenBank中的基因序列一致；重组病毒效价为2．8×10^8pfu／mL；重组病毒感染后，HEK293T细胞中IL-16 mRNA和蛋白质均有表达。结论：成功构建IL-16重组腺病毒载体，并可在HEK293T细胞中表达，为进一步研究IL-16的功能奠定了基础。

IL-16对人白血病细胞系MT2细胞增殖抑制和凋亡的影响

目的:研究IL-16对人白血病细胞系MT2细胞增殖抑制和凋亡的影响,为进一步研究IL-16功能奠定基础。方法:IL-16腺病毒载体转染MT2细胞后,不同时间收获细胞,通过MTT、流式细胞术(FCM)、测定线粒体膜电位和单细胞凝胶电泳等方法,证实MT2细胞增殖抑制和凋亡。结果:用MTT法绘制生长曲线,观察到IL-16腺病毒载体转染的MT2细胞增殖受到明显抑制;DNA片段分析在转染6h后出现凋亡片段;进一步用FCM检测细胞周期停滞于G1期,并且出现细胞凋亡;单细胞凝胶电泳发现细胞12h后有明显凋亡DNA拖尾形成;IL-16对细胞线粒体膜电位的影响24h内逐渐增强,预示细胞凋亡;免疫荧光发现12h自噬相关蛋白LC3,即可在细胞膜上表达,自噬已经开始出现。结论:重组人IL-16腺病毒载体转染MT2细胞,24h内即可诱导MT2细胞发生细胞增殖抑制并且出现凋亡,为进一步研究IL-16的功能奠定了基础。

妊娠中期检测羊水中IL-6和IL-16水平预测早产的临床应用

目的 :探讨妊娠中期羊水中白介素(interleukin,IL)-6和IL-16水平与妊娠结局的相关性,了解其预测早产的准确性,寻求新的预测早产的方法。方法:采集2012年9月—2013年9月在南京医科大学第一附属医院产前诊断中心行羊膜腔穿刺染色体核型分析的孕妇羊水,采用ELISA法检测其IL-6和IL-16水平。同时对孕妇妊娠结局进行随防,观察流产、早产、足月产的发生情况。随访410例羊膜腔穿刺孕妇的妊娠结局:312例足月产,25例自发性早产,3例治疗性早产,44例孕中期引产,26例失访。选择自发性早产者作为研究组,选择同期足月分娩者25例为对照组,分析羊水中IL-6和IL-16的水平。结果:羊水IL-6水平与分娩孕周呈负相关(r=-0.707,P<0.05);IL-16水平与分娩孕周呈负相关(r=-0.767,P<0.05);IL-6和IL-16水平呈正相关(r=0.581,P<0.05)。研究组IL-6和IL-16水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-6的最佳界定值为133.88 pg/m L,IL-16的最佳界定值为181.02 pg/m L;IL-6、IL-16预测早产的敏感度分别为92.00%、96.00%,特异度92.00%、80.00%,阳性预测值92.00%、82.80%,阴性预测值为92.00%、95.20%;联合检测IL-6和IL-16预测早产的并联敏感度78.1%、并联特异度100.0%,串联敏感度100.0%、串联特异度89.3%。结论:妊娠中期羊水中IL-6和IL-16的水平与分娩孕周呈负相关,随着它们水平的增加,分娩间隔缩短,发生早产的可能性增加;IL-6和IL-16呈正相关,二者均是敏感炎症标志物。IL-6和IL-16均是预测早产较为敏感的指标,联合检测两项指标能提高早产预测能力。

支气管哮喘儿童血清IL-16、IL-35、MCP-1的水平变化及临床意义

目的探讨支气管哮喘儿童血清中IL-16、IL-35、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平变化及临床意义。方法选择2012年1月至2014年6月60例哮喘急性发作期患儿为研究对象。选择36例哮喘缓解期患儿为疾病对照组。选择2012年1月至2014年6月期间健康儿童40例为健康对照组。统计受试者血清IL-16、IL-35、MCP-1水平,并对血清IL-16、IL-35、MCP-1水平与年龄、病程、性别、哮喘严重程度、病情进行相关性分析。结果哮喘急性发作期血清IL-16、MCP-1水平均高于哮喘缓解期、健康对照组(p<0.01);缓解期患儿血清IL-16、MCP-1水平高于健康对照组(p<0.01);哮喘急性发作期血清IL-35水平均低于哮喘缓解期、健康对照组(p<0.01);缓解期患儿血清IL-35水平低于健康对照组(p<0.01);哮喘中重度组血清IL-16、MCP-1水平均高于轻度组、对照组(p<0.01);轻度组患儿血清IL-16、MCP-1水平高于对照组(p<0.01);哮喘中重度组血清IL-35水平均低于轻度组、对照组(p<0.01);轻度组患儿血清IL-35水平低于对照组(p<0.01);治疗后哮喘急性发作期患儿血清IL-16、MCP-1水平低于治疗前(p<0.001),治疗后哮喘急性发作期患儿血清IL-35水平高于治疗前(p<0.001);血清IL-16、MCP-1水平与哮喘严重程度、病情呈正相关(p<0.05);血清IL-35水平与哮喘严重程度、病情呈负相关(p<0.05)。血清IL-16水平与血清MCP-1水平呈正相关(p<0.05),与血清IL-35水平呈负相关(p<0.05),血清MCP-1水平与血清IL-35水平呈负相关(p<0.05)。结论 IL-16、MCP-1在哮喘患儿血中高表达,IL-35在哮喘患儿血中低表达;IL-16、IL-35、MCP-1与哮喘发病及进展密切相关。

过敏性紫癜患儿外周血IL-16、IL-18水平的研究

目的探讨IL-16、IL-18在过敏性紫癜患儿中的应用价值。方法采用固相酶联免疫分析法检测69例过敏性紫癜患儿血清IL-16、IL-18水平。结果过敏性紫癜急性期患儿血清IL-16、IL-18较健康对照组明显升高(P<0.01),而过敏性紫癜缓解期患儿与健康对照组间无显著差异(P>0.05),过敏性紫癜患儿IL-16与IL-18呈正相关。结论 IL-16、IL-18可能参与过敏性紫癜血管炎的发病,IL-16、IL-18的检测与过敏性紫癜病情发展有一定关系。

狼疮肾炎外周血单个核细胞IL-16活化的初步观察

目的:目的:观察狼疮肾炎(LN)外周血单个核细胞(PBMCs)白细胞介素16(IL-16)的分泌及IL-16mRNA的表达。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PBMCs IL-16分泌的水平;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测PBMCs IL-16mRNA的表达。结果:①LN患者PBMCs自发分泌IL-16,活动组较静止组、正常对照组增高,存在显著性差异(265.6±102.2vs.120.5±84.1;265.6±102.0 vs.50.9±32.4,P<0.05);②LN活动组与静止组PBMCs IL-16mRNA表达增强,较正常对照组存在显著性差异(5.090±1.815 vs.1.030 ±0.426;3.910±1.430 vs.1.030±0.426,P<0.05),但LN活动组与静止组之间IL-16-mRNA的表达差异没有显著性(5.090 ±1.815 vs.3.910±1.430)。结论:LN患者PBMCs存在IL-16mRNA的高表达和自发的IL-16过度分泌。IL-16可能参与介导LN的发病机制。

血清IL-16、IFN-r在慢性阻塞性肺疾病患者中的检测价值

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清及痰中白介素-16、IFN-r水平相关性及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测COPD急性加重期、稳定期及健康对照组血清及痰中IL-16、IFN-r水平。结果:血清及痰液中COPD急性加重期患者IL-16、IFN-r水平均明显高于稳定期及健康对照组,且稳定期血清IL-16水平明显高于健康对照组,差异具有统计学意义((P<0.05)。在血清和痰液中IL-16与IFN-r水平呈正相关性(r=0.630、0.594,P<0.01)。结论:在COPD气道炎症中,IL-16、IFN-r共同参与了炎症发病过程,二者联合检测对COPD患者病情程度判断有一定意义。

DC-CIK生物免疫疗法用于甲状腺癌术后的疗效及对患者IL-16、TNF水平的影响

目的研究DC-CIK生物免疫疗法用于甲状腺癌术后的疗效及对患者IL-16、TNF水平的影响。方法随机选取甲状腺癌患者60例,随机分为2组:化疗组采用CMF化疗方案辅助治疗,DC-CIK生物免疫疗法组(30例)在CMF化疗方案辅助治疗基础上进行DC-CIK生物免疫治疗,统计分析2组患者的临床疗效、T细胞水平、血清VEGF、TNF-α、IL-1、IL-6水平。结果DC-CIK生物免疫疗法组患者的总缓解率为86.7%(26/30),显著高于CMF化疗方案辅助治疗组的60.0%(18/30)(P<0.05);CD4+Th17均显著低于CMF化疗方案辅助治疗组(P<0.05),Th17/Treg、CD4+CD25+Treg均显著高于CMF化疗方案辅助治疗组(P<0.05),血清VEGF、TNF-α、IL-1、IL-6水平均显著低于CMF化疗方案辅助治疗组(P<0.05)。结论DC-CIK生物免疫疗法能够有效降低甲状腺癌患者术后IL-16、TNF水平,提升临床疗效。

乙型肝炎肝硬化患者血清IL-15、IL-16、IL-18、IFN-γ的水平及临床意义

目的:探讨乙型肝炎肝硬化患者血清白细胞介素-15(IL-15)、白细胞介素-16(IL-16)、白细胞介素-18(IL-18)、干扰素(IFN-γ)的水平变化及临床意义。方法:酶联免疫吸附法(ELISA)测定乙型肝炎病毒携带者(ASC,45例)、乙型肝炎肝硬化患者(LC,45例)和健康对照者(40例)血清中IL-15、IL-16、IL-18、IFN-γ的水平,比较分析各组间的差异。结果:LC组IL-15、IL-16、IL-18、IFN-γ血清水平高于ASC组(P<0.05)和健康对照组(P<0.05),ASC组者高于健康对照组(P<0.05)。结论:乙型肝炎肝硬化患者血清IL-15、IL-16、IL-18、IFN-γ的均明显升高,四种细胞因子均参与了乙型肝炎肝硬化的病理损伤过程,对监测病情演变具有重要的参考意义。

人IL-16重组腺病毒抑制MT-4细胞增殖和促进细胞凋亡

目的探讨人IL-16重组腺病毒对MT-4细胞增殖和凋亡的影响。方法用IL-16重组腺病毒感染MT-4细胞后,不同时间收获细胞。MTT法检测细胞增殖,藻红蛋白标记的annexin V和7-氨基放线菌素D联合染色(annexin V-PE/7-AAD)结合流式细胞术检测感染后MT-4细胞的凋亡、Western blot法检测MT-4细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 MTT法结果证明IL-16腺病毒感染的MT-4细胞增殖受到明显抑制;流式细胞术检测结果表明细胞凋亡增加,Western blot法证实Bax蛋白表达量增强,而Bcl-2蛋白表达量减弱。且呈现一定程度的时间依赖性。结论人IL-16重组腺病毒可通过下调Bcl-2蛋白的表达、上调Bax蛋白的表达上调诱导MT-4细胞凋亡。

人IL-16重组腺病毒对Hela细胞中HPV18病毒蛋白表达的影响及凋亡机制的研究

目的探讨人IL-16重组腺病毒对Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法用IL-16重组腺病毒感染Hela细胞后,不同时间收获细胞。MTT法检测细胞增殖,藻红蛋白标记的annexin V和7-氨基放线菌素D联合染色(annexin V-PE/7-AAD)结合流式细胞术检测感染后Hela细胞的凋亡、Western blot法检测Hela细胞中HPV病毒相关蛋白p16、E7以及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果 MTT法结果证明IL-16腺病毒感染的Hela细胞增殖受到明显抑制;流式细胞术检测结果表明细胞凋亡增加,Western blot法证实HPV病毒相关蛋白P16、E7表达降低,Bax蛋白表达量增强,而Bcl-2蛋白表达量减弱,且呈现一定程度的时间依赖性。结论人IL-16重组腺病毒可通过下调Bcl-2蛋白的表达和上调Bax蛋白的表达诱导Hela细胞凋亡。

鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究

为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接构建了pDNAIL-1β和pDNAIL-16。分别将两种重组质粒与IBVDNA联合免疫SPF雏鸡并进行攻毒试验。结果表明,pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(p<0.05),增强IBV DNA疫苗对同型强毒的保护率15%～25%,pDNAIL-1β提升DNA疫苗的抗体水平的时间比pDNAIL-16多7d。试验表明,鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。