内毒素预处理对大鼠全脑缺血后海马内生性IL-1Rα的影响

目的 探讨内毒素预处理对大鼠全脑缺血 再灌注后海马内生性白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Rα)的影响及意义。方法 采用大鼠全脑 缺血再灌注模型 ,动态观察内毒素预处理后海马组织IL 1Rα的表达、含量及CA1区神经元计数的变化。结果 内毒素预处理后脑组织内生性IL 1Rα表达及含量显著增加 ,海马CA1区神经元计数下降幅度减少。结论 内毒素预处理对全脑缺血 再灌注后神经元的损伤有明显保护作用 ;其机制可能与诱导了中枢神经系统内生性抗损伤蛋白IL 1Rα的合成有关。

HSV-1型载体介导IL-1Rα关节腔内注射治疗兔膝关节炎

目的:探讨单纯疱疹病毒1(HSV-1)型载体介导白细胞介素1受体拮抗基因(IL-1Rα)局部治疗兔膝关节炎的作用。方法:采用改良Hulth法构建兔负重膝关节炎模型;造模成功后利用基因重组技术构建IL-1Rα基因单纯疱疹病毒1型表达载体(pHSV-IL-1Rα-LacZ),行兔膝关节腔内注射4周;手术造模和基因治疗后,抽取关节腔灌注液,采用ELISA分析IL-1Rα和IL-1的表达;采用HE染色和甲苯胺蓝染色方法观察局部治疗效果,pHSV-LacZ空白载体设为对照组。结果:手术造模治疗组注射pHSV-IL-1Rα-LacZ后能明显持续抑制IL-1表达水平,且对膝关节软骨炎进展显著性抑制,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:pHSV-LacZ是关节腔内局部基因治疗兔膝关节炎模型的理想基因运输体。关节腔内持续表达的IL-1Rα可能通过拮抗IL-1的作用治疗兔膝关节炎。

IRAK-4:TLR/IL-1R家族共同信号转导系统中的关键因子

最近发现的一种新的白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin1receptorassociatedkinase4,IRAK4)不仅可促使白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)磷酸化,还是IRAK1募集于TLR/IL1R复合物的必要条件,从而成为调控IRAK1生物活性以及内毒素胞内信号转导的最关键分子。充分认识IRAK4的作用机制,将有助于设计出新的针对感染性疾病的治疗策略。

大黄丹参对急性胰腺炎重症化过程中TLR-IL-1R信号系统影响

目的:探讨生大黄和丹参治疗重症急性胰腺炎对机体炎症反应和免疫应答关键信号系统TLR-IL-1R信号通路的调控作用。方法:建立SD大鼠实验性重症急性胰腺炎模型,分正常对照组(SO)、实验对照组(SAP)、大黄丹参干预组(DD);检测脾脏组织中β-arrestin mRNA的表达、肝脏组织TRAF6蛋白含量水平、胰腺组织中NF-κBp65蛋白表达的水平、血清炎性细胞因子TNF-α、IL-6的活性水平。结果:SAP组β-arrestin mRNA、TRAF6蛋白表达均受到显著抑制,NF-κBp65蛋白、TNF-α、IL-6活性水平表达增强,DD组β-arrestin mRNA下降有抑制,TRAF6蛋白表达进一步下降,NF-κBp65蛋白、TNF-α、IL-6活性水平增强有阻抑。结论:生大黄联合丹参有上调TLR-IL-1R信号系统负调控因子β-arrestin mRNA表达的作用;可以阻止急性胰腺炎重症化进程,其机理与调控制TLR-IL-1R信号系统具有相关性。

Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制由IL-23诱导PBMCIFN-γ的产生

目的:探讨重组人白介素23(IL-23)诱导正常人PBMC IFN-γ的产生,细胞亚群和调节因素。方法:正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪,分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的细胞亚群。结果:IL-23呈剂量依赖性诱导PBMC IFN-γ产生,并可与IL-2协同诱导IFN-γ的产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导高表达CD56+NK细胞产生IFN-γ,对CD4+和CD8+T细胞无明显作用。Th2细胞因子和抗IL-12受体β1mAb(IL-12Rβ1)抑制IL-23诱导IFN-γ产生。结论:IL-23可直接作用于CD3-CD56+NK细胞,诱导产生IFN-γ。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制IL-23诱导IFN-γ产生,提示可以用于由IL-23引起自身免疫病的治疗。

IL-22在支气管哮喘患者血清中的表达及其受体IL-22R1在人气道细胞中的表达

目的检测IL-22在支气管哮喘患者血清中的表达,检测IL-22R1在人气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、肺成纤维细胞中的表达,寻找IL-22作用的靶细胞。方法应用ELISA法检测36例支气管哮喘患者及20例正常对照者血清IL-22及IL-17的表达,同时检测36例患者肺通气功能,根据1秒率(FEV1/FVC)及FEV1占预计值的百分比将支气管哮喘患者分为支气管激发试验阳性组(17例)和支气管舒张试验阳性组(19例)。应用实时定量PCR检测人气道平滑肌细胞、人肺成纤维细胞、人气道上皮细胞IL-22R1 mRNA的表达,用免疫荧光以及蛋白质印迹法检测IL-22R1蛋白在上述3种细胞中的表达。结果支气管哮喘患者血清IL-22及IL-17水平与正常对照组相比差异无统计学意义,但支气管舒张试验阳性组患者血清IL-22和IL-17水平高于支气管激发试验阳性组(P<0.05)。IL-22R1mRNA及蛋白在上述3种细胞均有表达。结论 IL-22可能涉及支气管哮喘的发生发展过程,气道平滑肌细胞、肺成纤维细胞、人气道上皮细胞可能均是IL-22发挥作用的靶细胞。

人IL-1RⅡ基因腺病毒载体的构建及在子宫内膜异位症细胞中的表达

目的:利用AdEasy XL系统,构建并鉴定IL-1RII基因重组腺病毒载体,并在子宫内膜异位症(EM)细胞中表达。方法:PCR扩增含有IL-1RII全长cDNA的片段,亚克隆到pShuttle-CMV穿梭质粒,经酶切和测序验证无误后,再经电转化与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒。经过抗性筛选、酶切鉴定以及再次测序验证无误后得到阳性的重组质粒,经PacI酶切线性化再在293细胞中进行包装扩增,用ELISA检测IL-1RII蛋白的表达。利用Adeasy XL系统的对照载体pShuttle-CMV-LacZ同上操作作为对照。收集的重组腺病毒感染原代培养的EM基质细胞,并以免疫组化法鉴定IL-1RII表达。结果:测序证实连接后IL-1RII序列完全正确;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;pShuttle-CMV-LacZ转染293细胞3d后X-gal染色阳性,回收病毒可以重复感染293细胞,ELISA鉴定表达IL-1RII可溶性蛋白,证明病毒包装成功。重组的腺病毒感染EM基质细胞后,免疫组化法证实IL-1RII表达。结论:成功地构建了IL-1RII基因重组腺病毒载体,并且在EM基质细胞中表达,为进一步研究IL-1RII基因在EM中的作用乃至生物治疗都奠定了基础。

IRAK-4在白介素-1受体/Toll样受体(IL-1R/TLRs)介导的炎症信号通路中的关键作用

白介素-1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase 4;IRAK-4)是近年来发现的参与机体先天性免疫反应过程中的关键分子。它与另外3个成员IRAK-1、IRAK-2、IRAK-M同属于IRAK家族,目前经过对IRAK-4分子的激酶活性以及其对炎症反应的正向和负向的调控作用的研究表明,IRAK-4分子联系着上下游的信号转导,在TLRs/IL-1R介导的炎症信号通路中的作用更为关键。本文就IRAK-4分子的活性、以及IRAK-4分子在TLRs/IL-1R介导的炎症信号转导通路中的作用作一综述。以期设计出针对IRAK-4特异性的药物,或者通过基因治疗手段干预IRAK-4表达,为感染控制提供新的思路,开发出新的抗炎药物。

肾复康颗粒对人工诱发鸡肾肿病理模型的炎性细胞因子及IL-1R/NF-κB信号通路的影响

旨在探讨肾复康颗粒对鸡肾肿的抗炎机制。将90只健康雏鸡分为空白组(15只)和试验组(75只),试验组通过饲喂自制高钙高蛋白饲料人工复制鸡肾肿模型,造模成功后,随机分为模型组、阳性药物组、肾复康颗粒高、中、低剂量组,每组15只,肾复康颗粒高、中、低剂量组分别饮水给药肾复康颗粒2.0、1.0、0.5 g·L^(-1),阳性药物组饮水给药苍蓝口服液1.0 mL·L^(-1),模型组饮水给予生理盐水1.0 mL·L^(-1),2次·d-1,连用5 d。分别于造模前、后以及末次给药后2 d进行翅下静脉采血,分离血清,采用ELISA法检测血清IL^(-1)、TNF-α、MCP-1、TGF-β1的含量变化;采用RT-PCR法检测肾IL^(-1)R、IκBα、NF-κBp65 mRNA的转录。结果显示:与空白组相比,模型组雏鸡血清IL^(-1)、TNF-α、MCP-1、TGF-β1含量显著升高(P<0.05),肾中IL^(-1)R、NF-κBp65 mRNA转录量极显著升高(P<0.01),肾中IκBαmRNA转录量极显著降低(P<0.01)。饮水给药治疗后,肾复康颗粒高、低剂量组和阳性药物组雏鸡血清IL^(-1)、TNF-α、MCP-1、TGF-β1含量显著降低(P<0.05);肾复康颗粒中剂量组肾中IL^(-1)R、NF-κBp65 mRNA转录量极显著降低(P<0.01),肾中IκBαmRNA转录量极显著增加(P<0.01)。肾复康颗粒通过降低肾肿鸡血清中IL^(-1)、TNF-α、MCP-1、TGF-β1中含量,抑制IL^(-1)R/NF-κB信号通路,从而发挥抗炎作用。

24例霍奇金淋巴瘤中IL-13Rα1的表达及意义

目的探讨白细胞介素13α1受体(IL-13Rα1)在霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma,HL)中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测IL-13Rα1在24例HL和15例间变性大细胞性淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL)中的表达水平。结果 15例ALCL缺乏IL-13Rα1的表达,而24例HL中有20例(阳性率83.3%)存在IL-13Rα1的表达,两者差异有显著性(P<0.05)。结论 HL中存在IL-13Rα1的高表达,且IL-13Rα1检测可作为HL和ALCL鉴别诊断的依据。

IL-1β对神经元样PC12细胞IL-1RⅠ蛋白表达的影响

目的:探讨IL-1β对神经元样PC12细胞IL-1RⅠ蛋白表达的影响。方法:将PC12细胞传代后以一定的密度种植于培养皿后,NGF诱导其分化成神经元样细胞后,随机分为空白对照组(A组)I、L-1β1ng/mL刺激组(B组)I、L-1β5ng/mL刺激组(C组)、IL-1β10ng/mL刺激组(D组)。24h后分别以MTT法测定各组细胞存活率,Western Blotting方法检测神经元样PC12细胞内IL-1RⅠ蛋白表达。结果:MTT法显示,与A组相比,不同剂量组的IL-1β均可导致神经元样PC12细胞存活率的下降(P<0.01);WesternBlotting方法显示,与A组相比,不同剂量组的IL-1β刺激均可引起神经元样PC12的IL-1RⅠ蛋白表达上调(P<0.05)。结论:IL-1β可引起神经元样PC12细胞的IL-1RⅠ蛋白高表达,这可能与其所致神经元样PC12细胞细胞存活率的下降相关。

IL-17调控IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路影响喉癌细胞的侵袭和转移

目的研究白介素(IL)-17通过IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路调控人源性高分化喉癌细胞(Hep-2)侵袭、转移。方法以Hep-2细胞为研究对象,设IL-17刺激剂0、1、50、100 ng/ml浓度组,Western blot法检测不同分组在IL-17的刺激下,Hep-2细胞中IL-6、IL-6R、JAK1、p-JAK1、STAT3、p-STAT3的表达变化。迁移、侵袭实验观察IL-17的刺激对Hep-2细胞侵袭、迁移的影响。结果 Western blot实验中,在IL-17刺激下,1、50、100 ng/ml浓度组较0 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P<0.01),50、100 ng/ml浓度组较1 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P<0.01),100 ng/ml浓度组较50 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P<0.01);各组间JAK1、STAT3的表达无明显变化。侵袭与迁移实验显示IL-17可以促进Hep-2细胞的侵袭和迁移。结论 IL-17可能通过IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路促进Hep-2细胞的侵袭和转移。

天然免疫中Toll/IL-1R的作用

天然免疫是生物最基本的防御机制,可以迅速清除感染源,控制感染,天然免疫早期阶段出现的一些分子对建立获得性免疫有重要影响。通过对果蝇和大鼠进行遗传学研究,发现Toll/IL-1R家族蛋白质在天然免疫反应中起重要作用。

IL-1β和IL-1RⅠ型在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中的表达

目的研究白介素-1β(IL-1β)和白介素-1受体Ⅰ型(IL-1RⅠ型)在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中的表达变化。方法 20只雄性Wistar大鼠随机分成两组:对照组(10只)和抑郁组(10只)。抑郁组大鼠连续接受35 d不同的应激,对照组不予任何刺激。整个实验过程中,于实验第0 d和第35 d测量各组大鼠体质量。用旷场试验和液体消耗实验测定大鼠行为。采用RT-PCR方法测定各组大鼠结肠组织IL-1β的表达量,免疫组织化学方法测定各组大鼠结肠组织中IL-1RⅠ型表达量。结果经过35d慢性应激后,抑郁组大鼠质量明显低于对照组(P<0.01);旷场实验显示,抑郁组大鼠总行程、运动平均速度及直立次数较正常对照组明显减少(P<0.05);液体消耗试验显示,造模前两组大鼠糖水消耗无明显差异(P>0.05),35 d应激后抑郁组大鼠糖水消耗显著低于对照组(P<0.01),而纯水消耗显著高于对照组(P<0.01);免疫组织化学显示,抑郁组大鼠结肠平滑肌中IL-1RⅠ型的含量高于对照组(P<0.05);RT-PCR显示,抑郁组大鼠结肠组织中IL-1β的表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-1β和IL-1RⅠ型在慢性综合应激致抑郁大鼠结肠组织中呈高表达,提示IL-1β和IL-1RⅠ型可能在抑郁致结肠动力障碍的发生发展过程中起着重要作用。

火针对膝骨性关节炎的IL-1信号转导通路影响的研究

目的:研究火针对膝骨性关节炎的白细胞介素-1(IL-1)信号转导通路中炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-1Rα(IL-1Rα)含量及IL-1Rα/IL-1β比值的影响。方法:临床收集符合标准的膝骨性关节炎患者68例,抽签法随机分为火针组32例和毫针组36例,分别予以火针和毫针疗法,治疗前,治疗后2周和4周抽取关节腔滑液,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β和IL-1Rα含量,计算IL-1Rα/IL-1β比值,并进行严重性指数(ISOA)评分。结果:火针疗法能明显降低患者关节滑液中IL-1β含量,升高IL-1Rα及IL-1Rα/IL-1β比值,同时能显著降低ISOA评分,其中以治疗后4周较为明显。结论:火针疗法能明显减轻炎症刺激、减轻关节损伤、缓解患者临床症状,其机制可能与调节IL-l信号转导通路中炎性细胞因子IL-1β和IL-1Rα含量及IL-1Rα/IL-1β比值有关,从而达到调整关节软骨合成和分解平衡的作用。

芍药苷通过IL-13/STAT6信号转导通路抑制成纤维细胞产生胶原

目的观察芍药苷通过白细胞介素13(IL-13)信号转导通路调控3T3成纤维细胞的细胞激活、增殖和胶原产生。方法分别用不同浓度的芍药苷(200、400、600、800和1 000 mg/L)或重组白介素13(rIL-13,6.25、12.5、50、100和200μg/L),在体外刺激经无血清培养基培养12 h的3T3细胞,同时设空白对照组。培养24 h后,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测rIL-13和芍药苷对细胞增殖的影响,并根据其结果选择1个适宜的rIL-13刺激浓度。用该浓度rIL-13(100μg/L)刺激无血清培养基培养12 h的3T3细胞12 h后,再分别加入不同浓度的芍药苷(200、400、600、800和1 000 mg/L),继续培养24 h,同时设空白对照组。用CCK-8法检测细胞增殖情况,碱裂解法测定培养上清羟脯氨酸含量。蛋白质印迹(Western blotting)分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白介素13受体α1(IL-13Rα1)和信号转导和转录激活因子6(STAT6)的表达情况。RT-PCR检测细胞Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、IL-13Rα1和STAT6的mRNA水平。结果芍药苷能浓度依赖性地抑制3T3细胞增殖(r=-0.980,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=198.599,P<0.01)。rIL-13能明显促进3T3细胞增殖(r=0.538,P<0.05)。芍药苷(200、400、600、800和1 000mg/L)能浓度依赖性地抑制rIL-13刺激的3T3细胞增殖(1.780±0.177、1.636±0.073、0.965±0.066、0.623±0.037和0.337±0.022,r=-0.971,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=198.537,P<0.01)。芍药苷还能浓度依赖性地抑制rIL-13刺激的3T3细胞分泌羟脯氨酸(3.030±0.094、2.976±0.047、2.814±0.047、2.652±0.124和2.408±0.124,r=-0.916,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=13.642,P<0.01)。Western blotting分析结果显示,芍药苷能抑制rIL-13刺激的3T3细胞α-SMA、IL-13Rα1和STAT6蛋白的表达。RT-PCR结果显示,芍药苷能抑制rIL-13刺激的3T3细胞Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、IL-13Rα1和STAT6 mRNA的转录水平。结论芍药苷通过IL-13/STAT6信号转导通路抑制成纤维细胞增殖、激活和胶原的产生,可能是芍药苷抗日本血吸虫病肝纤维化的机制之一。

IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞IFN-γ产生

目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFNγ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL23诱导PBMCIFNγ表达的T细胞亚群。结果在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFNγ。IL23呈剂量依赖方式促进由antiCD3活化的PBMCIFNγ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL23诱导记忆CD4+和CD8+T细胞表达IFNγ,对活化的CD4+T细胞作用较为明显。Th2细胞因子(IL4、IL10)和抗IL12受体β1mAb(IL12Rβ1)抑制IL23诱导T细胞IFNγ产生。结论IL23促进活化的记忆CD4+和CD8+T细胞IFNγ的产生。Th2细胞因子和抗IL12Rβ1mAb抑制由IL23诱导IFNγ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL23引起的自身免疫病具有拮抗作用。

IL-1β及其Ⅰ型受体在大鼠肺纤维化发生过程中的动态表达

目的:观察大鼠肺纤维化发生中IL-1β及其Ⅰ型受体(IL-1RⅠ)的动态表达。方法:采用气管内注入博莱霉素制备肺纤维化模型,设正常组、模型组和甲强龙组,于第1、3、7、14、28天分批处死大鼠,观察各组大鼠各期病理切片,检测肺泡灌洗液及血清中IL-1β和其Ⅰ型受体的含量。结果:模型组早期肺泡炎症明显,后期肺组织实变。灌洗液及血清中IL-1β于7d时达峰值,14d时显著下降,28d时回到正常水平,Ⅰ型受体的表达规律与IL-1β相同。结论:IL-1β及其Ⅰ型受体在肺纤维化早期呈现短暂的表达高峰,提示其可能在肺纤维化发生的早期起关键作用。

IL-13和乙醇促进人肺成纤维细胞胶原的表达

目的:研究乙醇和/或白细胞介素13(IL-13)对人肺成纤维细胞(HFL-1)Ⅰ、Ⅲ型胶原α1链基因(COL1A1、COL3A1)以及Ⅰ型胶原蛋白(CoⅠ)表达的影响,探讨肺纤维化的机制。方法:培养HFL-1,通过实时定量荧光RT-PCR检测乙醇和/或IL-13对HFL-1细胞IL-13受体(IL-13Rα1、IL-13Rα2、IL-4Rα)mRNA、COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA表达的影响,ELISA的方法检测乙醇和/或IL-13对HFL-1分泌CoⅠ的影响。结果:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)作用HFL-1后,与对照组相比IL-13Rα1 mRNA与IL-4Rα mRNA水平比对照组显著增高(P<0.05),而IL-13Rα2 mRNA水平比对照组显著降低(P<0.05)。单独低浓度乙醇(25、50、100、200 mmol/L)对HFL-1的COL1A1 mR-NA和COL3A1 mRNA表达无影响(P>0.05)。IL-13(10、20、50μg/L)可以促进HFL-1的COL1A1 mRNA和COL3A1 mR-NA的表达(P<0.05),且存在浓度依赖性。乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同作用刺激HFL-1促进COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA的表达比IL-13(10、20、50μg/L)单独作用强(P<0.05)。IL-13组(10、20、50μg/L)和乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同刺激组HFL-1均有CoⅠ的分泌,但共同刺激组HFL-1分泌CoⅠ量显著增加(P<0.05)。结论:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)不影响HFL-1细胞的COL1A1和COL3A1表达,但可以影响HFL-1细胞IL-4Rα、IL-13Rα1和IL-13Rα2的表达,而乙醇与IL-13共同刺激与单独IL-13刺激相比对HFL-1的COL1A1和COL3A1以及CoⅠ的表达有显著的促进作用。

具有人鼠交叉结合活性的抗IL-1R3抗体的筛选与鉴定

目的:IL-1受体辅助蛋白(IL-1R3)是炎症调控的潜在新靶点。筛选获得具有人鼠交叉结合活性的抗IL-1R3抗体,为炎症干预机制探究与新药开发奠定基础。方法:基于对人源和鼠源IL-1R3氨基酸序列与结构的比对,采用交替包被人源和鼠源IL-1R3的策略对噬菌体抗体库进行筛选;将获得的抗体可变区基因克隆到真核表达载体,制备抗体样品;在分子和细胞水平对候选抗体的结合活性与功能活性进行评价;采用重新配对抗体轻链与重链的策略获得新抗体,尝试改善其特性。结果:筛选获得5个具有人鼠交叉结合活性的抗IL-1R3抗体,其中4个对人源和鼠源IL-1R3的亲和力相当,均在10^(-7)mol/L水平;2个溶解度较好的抗体在细胞水平上具有阻断活性;重新配对候选抗体的轻链与重链,获得1个溶解度明显提升且结合活性有所改善的新抗体。结论:优选获得2个具有人鼠交叉结合活性的抗IL-1R3抗体AET1907和4H6L,为后续深入探索奠定了物质基础。