自然更年期大鼠IL-2、TNF、TGF和IL-2R mRNA变化及“逆针”关元穴对其影响的研究

目的探讨逆针关元穴对自然更年期大鼠血清、子宫的细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF)、转化生长因子(TGF)和脾脏白细胞介素-2受体mRNA(IL-2R mRNA)的影响及其机制。方法将112只已经通过阴道涂片筛查的10月龄SD雌性大鼠随机分为7组,另3.5月龄1组16只。采用放射免疫、原位杂交等方法,观察10月龄逆针关元穴(2次/周,连续8周)对随后12、14、16月龄大鼠血清、子宫的细胞因子IL-2、TNF、TGF和脾脏IL-2R mRNA的影响。结果与自然年轻组相比,模型对照各组血清和子宫IL-2、TGF及子宫TNF均下降,血清TNF水平呈先降后升的波动性变化,脾脏IL-2R mRNA表达水平下降;而预先介入逆针疗法后,与自然同月龄组相比,逆针各组血清和子宫IL-2、TGF及子宫TNF上升,其中逆针14、16月龄组血清TGF,逆针12、16月龄组子宫IL-2,逆针12月龄组子宫TNF和逆针12、16月龄组子宫TGF均明显提高(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.05)。血清TNF水平与模型对照组呈相反的波动性变化,其中逆针12、14月龄组差异显著(均P<0.05)。脾脏IL-2R mRNA上调,其中逆针14月龄差异显著(P<0.05)。结论逆针关元穴可以调节随后更年期大鼠血清和子宫的细胞因子IL-2、TNF、TGF水平和脾脏IL-2R mRNA的表达,这可能是该疗法改善更年期免疫功能的机制之一。

检测血清sIL-2R和HBME-1 mRNA的表达在鉴别诊断甲状腺结节性质中的应用价值

目的:探讨检测血清中溶性白介素-2受体(SIL-2R)mRNA和人骨髓内皮细胞标记物-1(HBME-1)mRNA的表达在鉴别诊断甲状腺结节性质中的应用价值。方法:选取2019年6月至2021年1月期间广东省东莞市人民医院收治的136例甲状腺结节患者及同期在该医院接受体检的50例健康人作为研究对象。根据病理检查的结果,将136例甲状腺结节患者分为恶性组(50例)和良性组(86例)。将50例健康人作为对照组。使用qPT-PCR法检测三组研究对象血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA的表达情况,然后使用荧光侧流免疫分析法检测136例甲状腺结节患者白细胞介素-35(IL-35)和白细胞介素-17(IL-17)的水平。比较三组研究对象血清中sIL-2R mRNA和HBME-1 mRNA的表达情况,采用Pearson法检验恶性甲状腺结节患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA的表达与IL-17、IL-35等指标的相关性,采用logistics回归模型检测血清sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA等指标与恶性甲状腺结节患者病情严重程度的相关性。结果:恶性组患者血清中sIL-2R mRNA和HBME-1 mRNA的表达显著高于良性组患者和对照组健康人,P<0.05。良性组患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA的表达显著高于对照组健康人,P<0.05。恶性甲状腺结节患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA的表达与其血清中IL-17的水平、IL-35的水平、甲状腺结节病灶的个数、癌细胞发生淋巴结转移的情况和病情的分期呈正相关性。血清sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA呈高表达状态是导致恶性甲状腺结节患者病情加重的独立危险因素。结论:恶性甲状腺结节患者血清中HBME-1 mRNA和SIL-2R mRNA的表达可明显高于良性甲状腺结节患者和正常人,而且血清sIL-2R mRNA和HBME-1 mRNA呈高表达状态是导致恶性甲状腺结节患者病情加重的独立危险因素。因此,血清sIL-2R mRNA和HBME-1 mRNA可作为临床上鉴别诊断甲状腺结节性质的重要指标。

吗啡对福尔马林引起大鼠海马内IL-2RβmRNA表达的影响

本实验采用原位杂交法观察足底注射福尔马林（For）痛敏对海马内白细胞介素2受体βmRNA（IL-2RβmRNA）生成的影响及其与吗啡、促肾上腺皮质激素（ACTH）的关系。结果表明：正常大鼠海马有IL-11．2RβmRNA表达，集中分布于CA1－CA4区神经元、齿状回颗粒细胞。足底注射For后6h，双侧海马IL2RβmRNA表达均增加（P＜0．05），12h达高峰，24h仍高于正常。在6h时，腹腔注射吗啡可大幅度的提高For引起的IL-2RβmRNA表达增多效应，而腹腔注射ACTH却无此类似作用。提示海马内IL-2R可能与痛觉调制有关。

灵芝多糖体外对小鼠脾细胞IL-2,IL-3 mRNA表达的影响

目的观察灵芝多糖体外对小鼠脾细胞ＩＬ－２、ＩＬ－３ｍＲＮＡ的表达水平是否有影响。方法逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍＲＮＡ表达，凝胶图象光密度分析系统进行相对定量。结果在原代小鼠脾细胞培养开始时加入不同浓度的灵芝多糖ＧＬＢ７（５，１０，２０，４０ｍｇ·Ｌ－１），培养１２ｈ及２１ｈ后观察ＧＬＢ７与ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平之间的量效关系。发现在一定范围内，随着ＧＬＢ７浓度的升高，ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平也相应提高，对ＩＬ－２ｍＲＮＡ的提高率分别为１０．４％，２１．９％，３７．８％，４６．６％；对ＩＬ－３ｍＲＮＡ的提高率分别为１５．４％，３５．２％，５２．４％，７４．５％。１９９８－０４－０８收稿，１９９８－０７－２６修回＊国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ３９４００１６５作者简介：王庆彪，男，２６岁，硕士；雷林生，男，３８岁，医学博士，副教授培养１２ｈ和３０ｈ的上清液中ＩＬ－２样活性及ＩＬ－３样活性处理组与对照组相比亦有明显升高，且有一定的浓度依赖关系。

PRRS病毒感染对猪细胞因子IL-2、IL-4和IL-10mRNA转录的影响

通过构建猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的缺失cDNA竞争分子,利用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒感染过程中细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的mRNA进行转录水平变化的定量检测,研究PRRS病毒感染对猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10mRNA转录的影响。结果表明猪Th1型细胞因子IL 2的mRNA转录水平分别在PRRS病毒感染后1d、28d和56d出现3个mRNA转录高峰;而Th2型细胞因子IL 4的mRNA转录水平在病毒感染后56d内,一直处于低水平,而后才逐渐升高;IL 10的mRNA转录水平在病毒感染后6d内,一直处于低水平状态,第6d后才逐渐上升,至42d到达高峰,而后下降,恢复正常。结果显示PRRS病毒感染可导致Th2型细胞因子IL 4和IL 10基因转录的抑制。

半定量RT-PCR测定中药成分对小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平的影响

应用半定量RT-PCR方法,测定了9种中药成分对小鼠脾脏T细胞IL-2mRNA水平的影响。结果显示,体内注射黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮和黄芪皂甙能够使ConA诱导的小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平显著升高,蜂胶多糖、板兰根多糖、人参皂甙、淫羊藿黄酮不能影响细胞内IL-2mRNA丰度;中药成分体外诱导时与体内应用时的作用效应相同,但与对照相比较,蜂胶多糖在体外能够显著促进IL-2mRNA的诱生,与体内不同。

过敏性紫癜患者外周血单个核细胞中Tim-1,Tim-3mRNA表达和血清中IL-2和IL-4含量测定

目的研究Tim-l,Tim-3及IL-2,IL-4在过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病中的作用。方法将28例HSP患者分为单纯组和混合组,采用RT-PCR技术检测两组患者外周血单个核细胞中Tim-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达情况,ELISA法检测血清中IL-2和IL-4的含量,选取健康人20例作为对照组。结果 HSP患者Tim-1 mRNA相对表达量高于正常对照组[RQ值分别为0.974(1.108)和0.760(0.514),P<0.05],而Tim-3 mRNA相对表达量差异无统计学意义[RQ值分别为1.359(1.183)和1.604(1.177),P>0.05];Tim-1 mRNA,Tim-3 mRNA的表达在HSP单纯组和混合组之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。HSP患者血清IL-2含量(188.517±12.867)较正常对照组(202.759±20.903)降低,IL-4含量(73.046±8.750)高于正常对照组(62.301±11.232),且HSP患者混合组IL-2含量低于单纯组,IL-4含量高于单纯组,以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论Tim蛋白可能参与HSP发病,但与疾病严重程度无关;IL-2和IL-4水平可能与疾病严重程度密切相关。

L7212白血病小鼠IL-2活性、IL-2mRNA表达及复方中药清毒饮对其影响的研究

目的：探讨Ｌ７２１２白血病小鼠及其受体鼠──近交系６１５小鼠ＩＬ－２活性和ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达及复方中药清毒饮对其影响。方法：采用ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ－２及细胞原位杂交的方法检测了由ＣｏｎＡ诱导的脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性及脾细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达。结果：发现由ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２的白血病小鼠脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性明显低于６１５小鼠，Ｐ＜０．０５；其脾细胞中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达也明显低于６１５小鼠，Ｐ＜０．０１。清毒饮显著提高ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２白血病小鼠脾细胞培养上清中的ＩＬ－２活性，Ｐ＜０．００１，并能显著提高其ｍＲＮＡ表达水平，Ｐ＜０．００１。结论：清毒饮可以作为生物反应调节剂用于白血病的临床治疗。

大豆异黄酮对去卵巢大鼠脾脏IL-2 mRNA表达的影响

目的探讨大豆异黄酮对去卵巢大鼠脾脏IL-2mRNA表达及分布的影响。方法在成功造模60只去卵巢青年大鼠的基础上,分别皮下注射补充大豆异黄酮高、中、低剂量(1.5、1.0、0.5mg·kg-1BW)和溶媒剂,补充至第2、4和6周时每组各宰杀5只,运用原位组织杂交方法,对大鼠脾脏IL-2mRNA的表达和分布变化进行观察。结果IL-2mRNA主要分布于被膜下方的红髓区,在白髓区的脾小结外周、边缘区、动脉周围淋巴鞘外层等处也有分布。大鼠去卵巢后脾脏中IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目均显著下降,并且随着去除卵巢时间的延长更趋明显;而补充大豆异黄酮高、中、低剂量后,各组IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目随着时间的延长均呈上升趋势,表现时间依赖性。在同一时间段内,随着补充大豆异黄酮剂量的升高,IL-2mRNA的表达强度和阳性细胞数目也均呈上升趋势,表现为剂量依赖性。结论大豆异黄酮对脾脏内IL-2mRNA的表达具有上调作用,并存在剂量和时间依赖性。

蛋氨酸对仔猪脾脏指数及脾脏IL-2 mRNA表达量的影响

试验为研究蛋氨酸水平对仔猪免疫功能以及脾脏IL-2 mRNA表达量的影响。选用体况良好,体重(23.26±0.48)kg的杜×长×大三元杂交仔猪36头,按试验要求随机分为6组,每组设3个重复,每个重复2头猪,分别饲喂不同蛋氨酸水平的日粮,饲养时间为28 d。结果表明,0.30%蛋氨酸处理组的脾脏指数显著高于对照组(P<0.05),0.42%和0.48%蛋氨酸处理组的脾脏指数极显著低于对照组(P<0.01);0.30%蛋氨酸处理组血清中IL-2的浓度极显著高于对照组(P<0.01),0.42%和0.48%蛋氨酸处理组血清中IL-2的浓度极显著低于对照组(P<0.01);0.30%蛋氨酸处理组IL-2 mRNA的表达量极显著高于对照组(P<0.01),0.18%和0.36%蛋氨酸处理组IL-2 mRNA的表达量与对照组相比无显著性差异(P>0.05);0.42%和0.48%蛋氨酸处理组IL-2 mRNA的表达量极显著低于对照组(P<0.01)。结果提示,蛋氨酸水平为0.30%时,能够提高机体的免疫力,从而增强仔猪的抗病能力。

芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IL-2和IFN-γ mRNA表达的影响

为了研究芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IL-2和IFN-γ mRNA表达的影响,选用90只1日龄雏鸡,随机分成5组:Ⅰ-Ⅳ组用新城疫LaSota系冻干苗进行口腔免疫,Ⅰ-Ⅲ组在免疫的同时,分别按0.125 g/mL、0.25 g/mL、0.5 g/mL 3个浓度灌服芪蓝四君子汤1 mL,连续灌服10 d。Ⅳ组和Ⅴ组灌服等量生理盐水。各组分别于20、40、60日龄时各宰杀6只,取小肠(空肠段),用半定量RT-PCR方法检测空肠中IL-2和IFN-γ的mRNA表达变化。结果表明,芪蓝四君子汤能显著促进雏鸡空肠中IL-2和IFN-γ mRNA的表达,诱导机体产生Th1免疫反应,进而增强机体局部的细胞免疫水平。

中华大蟾蜍卵母细胞系统IL-2受体mRNA体外翻译的研究

本文采用中华大蟾蜍卵母细胞(BBO)体外翻译系统研究了不同来源细胞IL—2RαmRNA的翻译活性。显微注射mRNA的BBO用Barths液经20℃培养可获得最高翻译效率。与非州爪蟾卵母细胞的比较表明,两系统的体外翻译效率相近。对PHA刺激的人、脾淋巴细胞IL—2RαmRNA的合成动力学的观察表明,IL—2RαmRNA刺激后6小时即出现,9小时高达高峰,随后逐渐下降。放射受体分析显示,注射IL—2RαmRNA后,IL—2Rα也可表达于BBO膜表面。

麦胚无细胞转译体系在IL-2mRNA研究中的应用

目前,国内尚无将体外转译体系应用于IL 2研究的报道。本文以长春1号小麦种制备麦胚无细胞体系,经与兔网织红细胞、腹水癌细胞两体系比较筛选,结果证明麦胚无细胞转译体系适于实验室应用。通过对ML A 144mRNA作转译活性鉴定,证明该系统可以合成具有生物活性的、完整的IL2分子。

清下活血方对重症急性胰腺炎大鼠小肠黏膜IL-6mRNA、IL-10mRNA及MUC2表达的影响

目的观察清下活血方对重症急性胰腺炎大鼠小肠黏膜中IL-6mRNA、IL-10mRNA及黏蛋白MUC2表达水平的影响,探讨清下活血方对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障损伤的保护作用机制。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和中药组,每组24只。模型组和中药组大鼠采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠方法建立重症急性胰腺炎模型,建模后2 h中药组给予清下活血方灌胃,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,均每12 h 1次,灌胃3次。分别于灌胃后24,48,72 h取血检测3组血清淀粉酶水平,观察小肠黏膜病理改变,检测小肠黏膜组织中IL-6mRNA、IL-10mRNA和MUC2表达水平。结果模型组、中药组各时间点血清淀粉酶水平和小肠黏膜组织中IL-6mRNA、IL-10mRNA表达水平均明显高于假手术组(P均<0. 05);中药组各时间点血清淀粉酶水平和小肠黏膜组织中IL-6mRNA水平均明显低于模型组(P均<0. 05),而IL-10mRNA表达水平均明显高于模型组(P均<0. 05);中药组各时间点小肠黏膜损伤指数评分均明显低于模型组(P均<0. 05);模型组各时间点小肠黏膜组织中MUC2表达水平均明显低于假手术组(P均<0. 05),而中药组各时间点MUC2表达水平均明显高于模型组(P均<0. 05)。结论清下活血方通过重建促炎和抗炎细胞因子的平衡,增加MUC2分泌量,减轻肠道组织损伤而起到对肠黏膜屏障的保护作用。

IL-1β、IFN-γ对灌流大鼠卵巢中基质金属蛋白酶-2,-9mRNA基因表达的影响

目的 探讨IL 1β、IFN γ对基质金属蛋白酶 - 2 ,- 9(MMP - 2 ,- 9)mRNA基因表达的影响。 方法 采用体外灌流卵巢系统、原位杂交 (insituhybridization)等方法检测IL 1β、IFN γ对大鼠卵泡发育过程中MMP - 2 ,- 9mRNA基因表达变化 ,并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果 IL 1β对MMP - 2mRNA的表达无明显的刺激或抑制作用 ,但可显著增加卵泡膜细胞的MMP - 9mRNA的表达 ;IFN -γ可显著降低MMP - 2 ,- 9mRNA的表达。结论 IL 1β、IFN γ可通过调节卵泡发育过程中MMP - 2 ,-

资生肾气丸对痛风模型大鼠IL-6、NALP2 mRNA表达水平的影响

目的:研究资生肾气丸对痛风模型大鼠血清中白介素6(IL-6)及大鼠滑膜组织中含有NACHT结构域、LRR结构域、PYRIN决定域的蛋白-2(NALP2)mRNA表达水平的影响,探讨资生肾气丸防治痛风的作用机制。方法:将105只SD大鼠随机分为空白组(BG)、模型组(MG)、中药对照组(CMCG)、西药对照组(WMCG)及资生肾气丸中药复方低、中、高剂量组(ZSD-L/M/HG)7组,每组15只。采用尿酸钠(MSU)联合氧嗪酸钾(OXO)注射建立大鼠痛风模型,检测各组大鼠血清中IL-6含量,检测大鼠滑膜组织中NALP2 mRNA含量。结果:ZSD-HG、ZSD-MG、ZSD-LG、WMCG与MG相比,尿酸值降低,差异有显著性(P<0.01);与CMCG相比,ZSD-MG与WMCG含量下降,具有显著性差异(P<0.01);MG和BG血清中的IL-6含量比较,差异有统计学意义(P<0.05);ZSD-HG、ZSD-MG、ZSD-LG血清中IL-6表达量与MG比较,差异有统计学意义(P<0.05),并且WMCG和ZSD-MG血清中IL-6表达量更低;CMCG、ZSD-MG与WMCG血清中IL-6表达量相比,差异有统计学意义(P<0.05);与ZSD-LG相比,ZSD-HG、ZSD-MG血清中IL-6表达量相对更低。就NALP2 mRNA的平均密度而言,MG相对于BG明显增高,各对照组均降低,但以WMCG与ZSD-MG明显降低,且二者的NALP2 mRNA的平均密度下降差异不显著。结论:资生肾气丸可调控痛风模型大鼠IL-6、NALP2 mRNA的表达,对痛风具有防治作用。

非霍奇金淋巴瘤患者血清IL-2R、IL-6、IL-8、 IL-10及TNF-α的表达变化及临床意义

目的:探究血清IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α在非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)治疗中的表达变化及其临床意义。方法:收集解放军总医院第一医学中心收治的非霍奇金淋巴瘤患者63例,回顾性分析其治疗前后IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α的含量变化。结果:IL-2R、IL-6及TNF-α含量在Ann Arbor分期Ⅲ-Ⅳ期、IPI评分≥3分的NHL患者中显著升高(P<0.05);IL-8含量在Hans分型non-GCB亚型和病期小于5年的患者中显著升高(P<0.05);IL-10含量在IPI评分≥3分的患者中显著升高(P<0.05)。NHL正规治疗过程中IL-2R、IL-10、TNF-α含量在CAR-T免疫疗法持续6个月完全缓解、化疗和靶向治疗的NHL患者中显著高于正常对照组(P<0.05)。与NHL标准经典一线治疗方案R-CHOP相比较,IL-2R、TNF-α含量在CDP和MOAP治疗方案中显著升高,IL-6、IL-8含量仅在CDP治疗中显著升高(P<0.05)。NHL患者CAR-T免疫疗法治疗后IL-2R含量>387 U/mL(P=0.006 7)、IL-8>12 pg/mL(P=0.047)与患者CAR-T免疫疗法复发显著相关。结论:细胞因子IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10及TNF-α与NHL疾病的发生、发展、治疗及预后相关,或许是NHL有效的血清标志物。

IL-8对心肌缺血再灌注组织中P53 mRNA和Bcl-2 mRNA的影响

目的探讨IL-8对心肌缺血再灌注(M IR)组织中P53、Bc l-2基因的影响。方法建立大鼠心肌缺血再灌注模型,分为对照组和实验组,缺血30m in后,再灌注2、4、8、12、24、48h,各时间点分别处死动物,取血备用。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),原位杂交法,原位末端标记染色等,检测IL-8,P53 mRNA,Bc l-2 mRNA和细胞凋亡。结果从M IR的时间窗来看,IL-8在IR 2h即开始升高,12h达高峰。P53在4h开始升高,24h达高峰。Bc l-2在8h开始升高一直持续到48h达高峰。IL-8早于P53表达,Bc l-2晚于P53表达,心肌细胞凋亡和P53 mRNA表达时间相一致。结论IL-8介导心肌凋亡在继发的心肌局部功能的损害中扮演了一个重要角色,并可作为早期诊断心肌缺血再灌注损伤新的标记物。

食道癌患者IL-2RαmRNA表达的初步研究

癌症患者的免疫功能与肿瘤的发生发展密切相关，IL-2通过和细胞膜上的IL-2R结合，调节T、B淋巴细胞、NK、LAK细胞的增殖和功能．发挥其抗瘤作用。IL2R的正常或异常表达与机体的生理、病理过程密切相关。本文重点探讨食道癌患者IL-2R mRNA表达与肿瘤转移的关系。