脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜IL-3 mRNA的活性表达

目的观察脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织白细胞介素-3(IL-3)mRNA的表达,探讨脾气虚与变应性鼻炎的病理相关性。方法以卵清蛋白法和卵清蛋白加饮食不节法分别建立大鼠变应性鼻炎模型(AR组)和脾气虚变应性鼻炎模型(脾气虚AR组),分别取鼻黏膜组织,RT-PCR检测IL-3mRNA表达水平,进行组间比较。结果AR组鼻黏膜IL-3mRNA表达水平11.85±0.82,显著高于健康对照组的6.85±0.49(P<0.01);脾气虚AR组鼻黏膜IL-3mRNA表达水平14.21±2.10,显著高于AR组(P<0.01)。结论变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织IL-3mRNA的表达增加,脾气虚型变应性鼻炎大鼠者IL-3mRNA表达活性进一步升高,IL-3活性表达水平可能是脾气虚型变应性鼻炎病情加重的一个重要因素。

过敏性紫癜患者外周血单个核细胞中Tim-1,Tim-3mRNA表达和血清中IL-2和IL-4含量测定

目的研究Tim-l,Tim-3及IL-2,IL-4在过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病中的作用。方法将28例HSP患者分为单纯组和混合组,采用RT-PCR技术检测两组患者外周血单个核细胞中Tim-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达情况,ELISA法检测血清中IL-2和IL-4的含量,选取健康人20例作为对照组。结果 HSP患者Tim-1 mRNA相对表达量高于正常对照组[RQ值分别为0.974(1.108)和0.760(0.514),P<0.05],而Tim-3 mRNA相对表达量差异无统计学意义[RQ值分别为1.359(1.183)和1.604(1.177),P>0.05];Tim-1 mRNA,Tim-3 mRNA的表达在HSP单纯组和混合组之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。HSP患者血清IL-2含量(188.517±12.867)较正常对照组(202.759±20.903)降低,IL-4含量(73.046±8.750)高于正常对照组(62.301±11.232),且HSP患者混合组IL-2含量低于单纯组,IL-4含量高于单纯组,以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论Tim蛋白可能参与HSP发病,但与疾病严重程度无关;IL-2和IL-4水平可能与疾病严重程度密切相关。

泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA表达水平的研究

目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月,分别在感染2天、8天、1月、3月、6月和10月处死小鼠,收集肝脏组织。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肝脏组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA的表达水平。结果:T-bet mRNA的表达水平在感染早期开始增高,1月时达高峰后又开始缓缓下降至感染前水平;GATA-3 mRNA的表达水平在感染1月时明显升高,随后一直保持较高的表达水平;ROR-γt mRNA的表达水平在感染早期开始增高,感染1月时达到高峰,随后缓慢下降。IL-17 mRNA表达水平自感染早期开始持续性增高,到感染3月时达高峰,之后又逐渐降低至感染前水平。各组小鼠肝组织ROR-γt mRNA表达水平与T-bet mRNA表达水平呈正相关(r=0.67),IL-17 mRNA表达水平与ROR-γt mRNA表达水平有相关性(r=0.35),P值均<0.05。结论:泡球蚴感染宿主早期,主要以Th1型和Th17型细胞免疫为主,感染中后期出现Th1向Th2转化,机体呈现出以Th2细胞为主的优势应答。

四君子汤体外对ConA诱导的小鼠脾细胞表达IL-3mRNA的影响

用斑点杂交法分析了四君子汤体外对 Con A诱导的小鼠脾细胞表达 IL - 3m RNA的影响 ,结果四君子汤使鼠脾细胞表达 IL- 3m RNA在 2 0 h左右达高峰 ,有效剂量范围较大 (2 5 mg/ ml～ 40 0 mg/ ml) ,尤以 10 0 mg/ ml浓度效果为佳 ,提示四君子汤促进造血的作用与其提高 T细胞表达 IL- 3m

老化对小鼠激活淋巴细胞分泌白细胞介素3及其mRNA表达的影响

本实验测定老化对小鼠激活淋巴细胞分泌白细胞介素3(Interleukin 3,IL-3)和其基因表达的影响。结果5月龄与37月龄小鼠相比较,后者IL-3活性下降79.3％,IL-3mRNA水平下降74％,二者IL-3mRNA水平高峰均位于Con A刺激培养后20h。Northern印迹分析证明,4月龄与27月龄小鼠IL-3mRNA的位置均无移动。用ConA刺激4组不同年龄小鼠的脾淋巴细胞,比较其IL-2和IL-3活性及其mRNA水平,证明二淋巴因子随着年龄增加而逐渐下降的水平具有平行性。

商陆皂甙辛对小鼠脾脏细胞产生IL-3和IL-6的影响

利用MTT法测定了商陆皂甙辛 (EH )对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞IL 3和IL 6活性的影响 ,采用地高辛标记斑点杂交法测定了IL 3mRNA和IL 6mRNA的表达水平。结果显示EH在 1 0～ 1 0 0 μg/ml浓度范围内能增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞IL 3和IL 6活性 ,伴随mRNA水平的上升。提示EH通过提高IL 3和IL 6基因转录水平 ,从而使其产物活性增强 。

生血宁片对环磷酰胺致贫血小鼠的作用及机制

目的考察生血宁片(铁叶绿酸钠和叶绿素衍生物)对环磷酰胺致骨髓抑制性贫血小鼠的作用及其分子机制。方法体外实验培养正常小鼠及腹腔注射环磷酰胺小鼠的骨髓有核细胞(BMC),不同剂量的生血宁片处理这些BMC,采用ATP生物发光法测定生血宁片对其BMC增殖。体内实验,采用腹腔注射环磷酰胺复制贫血模型,以低、中、高剂量的生血宁片进行治疗,给药后第7、10、13天测定外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)水平,第10天收集小鼠骨髓细胞,检测其白介素(Il3)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Gm-csf)、干细胞因子(Scf)mRNA表达水平。结果体外实验显示,生血宁片显著提高两类BMC的增殖率(P<0.05,P<0.01);体内实验显示,生血宁片500、353 mg/kg组可显著升高小鼠外周血WBC、RBC、HGB、HCT水平(P<0.05,P<0.01),生血宁片500、353、250 mg/kg组可显著升高骨髓细胞Il3、Scf mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论生血宁片促进Scf和Il3 mRNA的表达,从而缓解环磷酰胺引起的骨髓抑制。

去势更年期雌性大鼠瘦素抵抗的机制研究

目的探讨去势后更年期雌性大鼠发生肥胖的瘦素抵抗机制。方法健康成年雌性未孕SD大鼠20只,10周龄,体质量180-220 g,适应环境1周后随机分成两组:去势组与假手术组(每组10只)。取出双侧卵巢制备去势(ovariectomized,OVX)更年期大鼠模型,造模后检测其雌二醇(estradiol,E2)水平的变化,确定造模是否成功。另10只健康大鼠取出卵巢附近同等大小的脂肪组织后作为假手术组(sham)。常规喂养30 d,每天称重一次。采用放射免疫分析法RIA测定血清瘦素(LEP)的含量,酶联免疫吸附试验ELISA测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的水平,逆转录聚合酶链反应RT-PCR测定细胞因子信号转导抑制因子-3(suppressor of cytokine sighting-3,SOCS-3)的基因表达。结果与sham组比较,OVX组大鼠血清E2和孕酮的含量均显著降低(P<0.05),血清瘦素、TNF-α和IL-6的水平则明显升高(P<0.05)。同时,OVX组大鼠脂肪组织SOCS-3基因表达显著升高(P<0.05)。结论去势后更年期雌性大鼠发生肥胖的瘦素抵抗机制可能与TNF-α、IL-6水平升高,从而进一步诱导脂肪组织SOCS-3基因表达升高有关。