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上皮性卵巢癌组织中IMP1的表达 被引量:2
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作者 李留霞 李冰熠 +3 位作者 李秀芳 张兰兰 王凯娟 张建营 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第3期374-377,共4页
目的:探讨上皮性卵巢癌组织中IMP1蛋白及mRNA的表达情况。方法:采用免疫组化方法和RT-PCR技术检测47例上皮性卵巢癌、28例卵巢上皮性良性肿瘤及20例正常卵巢上皮组织中IMP1蛋白和mRNA的表达情况。结果:IMP1蛋白在上皮性卵巢癌、卵巢上... 目的:探讨上皮性卵巢癌组织中IMP1蛋白及mRNA的表达情况。方法:采用免疫组化方法和RT-PCR技术检测47例上皮性卵巢癌、28例卵巢上皮性良性肿瘤及20例正常卵巢上皮组织中IMP1蛋白和mRNA的表达情况。结果:IMP1蛋白在上皮性卵巢癌、卵巢上皮性良性肿瘤及正常卵巢上皮组织中的阳性表达率分别为85.1%、32.1%及10.0%,IMP1 mRNA在上述3种组织中的相对表达量分别为(0.652±0.067)、(0.120±0.013)、(0.085±0.011)(χ2=39.239,F=990.674,P均<0.001);且上皮性卵巢癌组织中IMP1蛋白阳性表达率、mRNA相对表达量均高于其他2种组织(P均<0.001)。不同FIGO分期和组织学分级的上皮性卵巢组织中IMP1蛋白的阳性表达率比较,差异有统计意义(χ2校正=5.645、4.365,P均<0.05)。上皮性卵巢癌组织中IMP1蛋白与mRNA表达呈正相关(rS=0.869,P<0.001)。结论:IMP1可能参与卵巢癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 imp1
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IMP1在上皮性卵巢癌中的表达及意义
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作者 李留霞 李冰熠 +3 位作者 李秀芳 张兰兰 王凯娟 张建营 《现代妇产科进展》 CSCD 2014年第2期102-104,共3页
目的:探讨上皮性卵巢癌组织中胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白1(IMP1)蛋白及mRNA的表达与上皮性卵巢癌发生发展的关系。方法:采用免疫组化法和RT-PCR技术检测47例上皮性卵巢癌(恶性组)、28例上皮性卵巢良性肿瘤(良性组)及20例正常卵巢... 目的:探讨上皮性卵巢癌组织中胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白1(IMP1)蛋白及mRNA的表达与上皮性卵巢癌发生发展的关系。方法:采用免疫组化法和RT-PCR技术检测47例上皮性卵巢癌(恶性组)、28例上皮性卵巢良性肿瘤(良性组)及20例正常卵巢上皮组织(正常组)中IMP1蛋白和mRNA的表达情况,并分析IMP1蛋白表达与上皮性卵巢癌的临床病理特征的相关性。结果:上皮性卵巢癌、上皮性卵巢良性肿瘤及正常卵巢上皮组织中IMP1蛋白的阳性表达率分别为85.1%、32.1%和10%,IMP1mRNA相对表达量分别为0.652±0.067、0.120±0.014和0.085±0.011。卵巢癌组织中IMP1蛋白及mRNA表达量均显著高于正常组和良性组(P<0.05),而后两组则无显著差异(P>0.05)。上皮性卵巢癌组织中IMP1蛋白表达与FIGO分期和病理组织学分级有关(P<0.05),而与有无腹水、淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:IMP1可能参与上皮性卵巢癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 imp1 免疫组织化学 RT-PCR
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牛源犬新孢子虫IMP1基因的克隆与序列分析
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作者 张蕾 贾立军 鲁承 《安徽农业科学》 CAS 2014年第15期4566-4568,共3页
[目的]为了解牛源犬新孢子虫IMP1基因生物学特性,分析牛源犬新孢子虫IMP1基因的克隆与序列。[方法]应用PCR技术扩增IMP1基因,将纯化的PCR产物和pMD18-T Simple Vector连接,构建pMD18-IMP1重组克隆质粒,进行PCR鉴定和酶切鉴定,将鉴定为... [目的]为了解牛源犬新孢子虫IMP1基因生物学特性,分析牛源犬新孢子虫IMP1基因的克隆与序列。[方法]应用PCR技术扩增IMP1基因,将纯化的PCR产物和pMD18-T Simple Vector连接,构建pMD18-IMP1重组克隆质粒,进行PCR鉴定和酶切鉴定,将鉴定为阳性的质粒进行测序分析。[结果]PCR扩增犬新孢子虫IMP1基因大小为762 bp,克隆质粒经测序分析与GenBank(XM_003879531.1)中IMP1基因的同源性为99.9%。[结论]该试验为犬新孢子虫IMP1基因的表达及后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬新孢子虫 imp1基因 克隆 序列分析
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巨型艾美耳球虫IMP1基因的原核表达及多克隆抗体的制备
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作者 林倩 黄驹辉 +3 位作者 唐牧之 江和基 黄志坚 殷光文 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第3期290-295,共6页
免疫映射蛋白1(IMP1)是一种从巨型艾美耳球虫中发现的蛋白,具有良好的免疫原性和免疫保护性.本试验通过Em IMP1基因的克隆、原核表达以及多克隆抗体的制备,为后续深入研究该蛋白的生物学及免疫学功能奠定基础.首先,从未孢子化的巨型艾... 免疫映射蛋白1(IMP1)是一种从巨型艾美耳球虫中发现的蛋白,具有良好的免疫原性和免疫保护性.本试验通过Em IMP1基因的克隆、原核表达以及多克隆抗体的制备,为后续深入研究该蛋白的生物学及免疫学功能奠定基础.首先,从未孢子化的巨型艾美耳球虫新疆株卵囊中提取总RNA,反转录合成c DNA,PCR扩增Em IMP1基因片段.其次,将Em IMP1基因扩增片段连接到原核表达载体p ET-28a构建表达质粒p ET-28a-Em IMP1,转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株并进行表达;将纯化后的蛋白与等量弗氏佐剂乳化后皮下注射至2只新西兰大白兔体内,每隔2周免疫一次,一共免疫4次后取得的兔血清即为多克隆抗体.最后,用所获得的多克隆抗体,对纯化后的Em IMP1进行免疫印迹试验鉴定,用酶联免疫吸附测定法检测多克隆抗体的效价.结果表明,克隆出的Em IMP1基因的全长为1 140 bp,诱导出的蛋白大小为70 ku,且该蛋白在上清液和包涵体中均有存在.免疫印迹试验检测结果显示,用上述方法制备的多克隆抗体具有良好的特异性,酶联免疫吸附测定法检测结果表明该多克隆抗体具有高效价.因此,可通过原核表达蛋白Em IMP1免疫兔子制备特异性好且效价高的多克隆抗体. 展开更多
关键词 巨型艾美耳球虫 imp1基因 原核表达 多克隆抗体
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SIRT6招募mRNA结合蛋白IMP1调控IGF2在293T细胞表达
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作者 王婷婷 吴洁 +2 位作者 董海涛 徐徕 肖毅 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第6期776-779,共4页
目的探讨SIRT6对肿瘤重要调节分子胰岛素样生长因子2(IGF2)的转录后调控机制。方法在工具细胞系293T细胞中过表达SIRT6以及应用免疫共沉淀(IP)方法富集所有可能与SIRT6相互作用的蛋白,行质谱实验鉴定,并进一步通过IP/Western blot方法,... 目的探讨SIRT6对肿瘤重要调节分子胰岛素样生长因子2(IGF2)的转录后调控机制。方法在工具细胞系293T细胞中过表达SIRT6以及应用免疫共沉淀(IP)方法富集所有可能与SIRT6相互作用的蛋白,行质谱实验鉴定,并进一步通过IP/Western blot方法,检测SIRT6和IGF2 mRNA结合蛋白(IMP1)的相互作用,以及SIRT6对IMP1的乙酰化/磷酸化修饰水平的影响。结果质谱结果证明SIRT6和IMP1存在相互作用,并通过构建SIRT6和IMP1的过表达载体,进一步验证了SIRT6与IMP1的直接相互作用。检测乙酰化和磷酸化水平发现,SIRT6并未直接影响IMP1的乙酰化水平,而是促进其磷酸化修饰。结论 SIRT6可能通过促进对IMP1的磷酸化而起到在转录后水平抑制细胞中IGF2 mRNA的作用。 展开更多
关键词 SIRT6 IGF2 imp1 肿瘤调控分子
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抗IMP1自身抗体IgG在肝癌患者血清中的表达及其与临床病理参数的关系
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作者 阮瑞杨 陈修荣 赵世元 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第9期1165-1166,1171,共3页
目的探讨肝癌患者血清中抗胰岛素样生长因子Ⅱ在mRNA结合蛋白1(IMP1)自身抗体IgG的表达及其与临床病理参数的关系。方法采用ELISA法检测120例肝癌患者(肝癌组)血清抗IMP1自身抗体IgG抗体,并与115例健康者(对照组)检测数据进行比较,分析... 目的探讨肝癌患者血清中抗胰岛素样生长因子Ⅱ在mRNA结合蛋白1(IMP1)自身抗体IgG的表达及其与临床病理参数的关系。方法采用ELISA法检测120例肝癌患者(肝癌组)血清抗IMP1自身抗体IgG抗体,并与115例健康者(对照组)检测数据进行比较,分析血清抗IMP1自身抗体IgG抗体水平与肝癌患者临床病理参数的关系。结果肝癌组和对照组的血清抗IMP1自身抗体IgG水平分别为(1.512±0.685)、(1.080±0.301)μg/mL,肝癌组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。肝癌患者血清抗IMP1自身抗体IgG的表达水平与肿瘤大小、肿瘤分化程度、TNM分级、肝内转移有关(P<0.001);与年龄、性别、饮酒、是否感染HBV等无明显关系(P>0.05)。结论肝癌患者血清抗IMP1自身抗体IgG表达升高,检测肝癌血清抗IMP1自身抗体IgG有利于判断肝癌的恶性程度。 展开更多
关键词 肝癌 imp1 自身抗体 IGG 转移
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弓形虫表面抗原IMP1的克隆原核表达及免疫学鉴定 被引量:2
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作者 寇景轩 赵桂华 +3 位作者 魏庆宽 徐超 朱嵩 尹昆 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期285-289,共5页
目的克隆刚地弓形虫强毒RH株的表面抗原免疫作图蛋白1(Immune mapped protein-1,IMP1),并对其进行原核表达纯化、鉴定。方法采用逆转录法合成刚地弓形虫RH株的第一链c DNA,以此为模板,用PCR法扩增野生型IMP1基因的最大开放阅读框(ORF)序... 目的克隆刚地弓形虫强毒RH株的表面抗原免疫作图蛋白1(Immune mapped protein-1,IMP1),并对其进行原核表达纯化、鉴定。方法采用逆转录法合成刚地弓形虫RH株的第一链c DNA,以此为模板,用PCR法扩增野生型IMP1基因的最大开放阅读框(ORF)序列,TA克隆测序鉴定后,插入原核表达载体p ET28b中,构建重组表达载体p ET28bIMP1,经双酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达携带6×组氨酸标签的IMP1融合蛋白,改变温度、诱导时间和IPTG浓度以优化诱导表达条件并测定蛋白可溶性,通过镍离子螯合(Ni2+-NTA)亲和层析纯化IMP1融合蛋白,经Western blotting验证重组蛋白的特异性。结果在弓形虫RH株速殖子c DNA中成功调取了IMP1基因的ORF序列,并通过TA克隆和测序鉴定了IMP1基因的正确性,在此基础上构建了原核表达重组质粒p ET28b-IMP1,经双酶切和测序验证了重组载体的正确性,并通过条件筛选确定了IMP1的最佳表达条件为20℃下0.3 mmol/L IPTG诱导9 h。经镍柱亲和层析纯化后,IMP1全蛋白表达量和可溶性均较好,与镍柱填料有较高的亲和力,能实现高效纯化。经SDS-PAGE及Western blotting鉴定,IMP1具有良好的免疫活性。结论新型强毒弓形虫RH株的表面抗原IMP1可在大肠杆菌原核表达系统中高效表达,全长蛋白可溶,性状稳定。本研究为进一步制备IMP1多克隆抗体,进行后续的体内表达研究以及抗弓形虫感染亚单位疫苗的构建和IMP1晶体结构研究奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫 免疫作图蛋白1基因 表面抗原 原核表达 纯化
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Neospora caninum immune mapped protein 1(NcIMP1) is a novel vaccine candidate against neosporosis
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作者 Xia CUI Daoyu YANG +3 位作者 Tao LEI Hui WANG Pan HAO Qun LIU 《Frontiers of Agricultural Science and Engineering》 2015年第1期66-72,共7页
The Neospora caninum immune mapped protein 1(Nc IMP1) was identified as a membrane protein,and a previous study indicated that Nc IMP1 could be a promising vaccine candidate against neosporosis. In this study, the imm... The Neospora caninum immune mapped protein 1(Nc IMP1) was identified as a membrane protein,and a previous study indicated that Nc IMP1 could be a promising vaccine candidate against neosporosis. In this study, the immune response and protection efficacy of Nc IMP1 were evaluated. The coding sequence of Nc IMP1 was inserted into the eukaryotic expression vector pc DNA3.1(+), resulting in the recombination plasmid pc DNAIMP1, which was used for the intramuscular immunization of BALB/c mice. After immunization, the immune response was evaluated using a lymphoproliferative assay and cytokine and antibody measurements. Quantification of the cerebral parasite burden of mice challenged with 2106 N. caninum was performed 14 days after the last immunization. The results showed that the mice immunized with pc DNA-IMP1 developed a high level of specific antibody responses against recombinant Nc IMP1,with a mixed Ig G1/Ig G2 a response and a predominance of Ig G2 a production. The cellular immune response was associated with the production of IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-10 cytokines. The experiment was terminated 30 days p.i.,and the cerebral parasite burden in each mouse was assessed by quantitative PCR. The parasite burden was significantly reduced in the pc DNA-IMP1-vaccinated mice. These data suggest that IMP1 is a promising vaccine candidate against neosporosis. 展开更多
关键词 Neospora caninum immune mapped protein 1(imp1) vaccine candidate BALB/c mice
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水稻抗倒伏候选基因的鉴定与功能分析
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作者 西若曲宗 向登豪 +3 位作者 郭子龙 姚义龙 董发明 熊立仲 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期75-84,共10页
为进一步挖掘控制水稻抗倒伏的基因,以524份水稻种质资源为材料,采用GWAS(genome-wide association analysis)鉴定与抗倒伏性状显著关联的位点qRLG7,通过基因表达水平分析和候选基因关联分析确定调控水稻抗倒伏性的候选基因,在分析候选... 为进一步挖掘控制水稻抗倒伏的基因,以524份水稻种质资源为材料,采用GWAS(genome-wide association analysis)鉴定与抗倒伏性状显著关联的位点qRLG7,通过基因表达水平分析和候选基因关联分析确定调控水稻抗倒伏性的候选基因,在分析候选基因的表达特征和启动子区自然变异基础上利用CRISPR-Cas9技术构建2个候选基因的突变体家系,考察转基因材料的抗倒伏性状。结果显示,编码肌醇-1-单磷酸酶的2个串联排列基因LOC_Os07g37220和LOC_Os07g37230在离茎秆基部5 cm节间中的表达量显著高于其余候选基因,而且这2个候选基因的表达量在极端抗倒伏和易倒伏2组材料中存在极显著差异;通过候选基因关联分析发现这2个基因启动子区的SNP与离基部5 cm茎秆直径(CD5)的表型值显著关联,且基于显著关联SNP的2种单倍型的CD5表型值存在显著差异,这2个候选基因的2种单倍型启动子活性检测结果也表明2种单倍型之间存在极显著差异;2个基因的功能缺失突变体植株在基部节间抗折力、茎秆厚度、茎秆直径以及株高和穗质量等性状方面与野生型对照存在显著差异。结果表明,候选基因LOC_Os07g37220和LOC_Os07g37230具有一定的抗倒伏功能。 展开更多
关键词 水稻 抗倒伏 关联分析 候选基因 肌醇-1-单磷酸酶(IMP)
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The role of wildlife (wild birds)in the global transmission of antimicrobial resistance genes 被引量:11
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作者 Jing Wang Zhen-Bao Ma +3 位作者 Zhen-Ling Zeng Xue-Wen Yang Ying Huang Jian-Hua Liu 《Zoological Research》 CAS CSCD 2017年第2期55-80,共26页
Antimicrobial resistance is an urgent global health challenge in human and veterinary medicine. Wild animals are not directly exposed to clinically relevant antibiotics; however, antibacterial resistance in wild anima... Antimicrobial resistance is an urgent global health challenge in human and veterinary medicine. Wild animals are not directly exposed to clinically relevant antibiotics; however, antibacterial resistance in wild animals has been increasingly reported worldwide in parallel to the situation in human and veterinary medicine. This underlies the complexity of bacterial resistance in wild animals and the possible interspecies transmission between humans, domestic animals, the environment, and wildlife. This review summarizes the current data on expanded- spectrum 13-1actamase (ESBL), AmpC IB-lactamase, carbapenemase, and colistin resistance genes in Enterobacteriaceae isolates of wildlife origin. The aim of this review is to better understand the important role of wild animals as reservoirs and vectors in the global dissemination of crucial clinical antibacterial resistance. In this regard, continued surveillance is urgently needed worldwide. 展开更多
关键词 AMPC ESBLS IMP mcr-1 NDM Wild birds
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分子佐剂chFc对巨型艾美耳球虫DNA疫苗在鸡上的免疫效果的影响 被引量:1
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作者 陈志 丁可欣 +3 位作者 李元凯 陈欢 黄志坚 殷光文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1529-1535,共7页
将鸡免疫球蛋白Ig G的Fc片段(chFc基因)和Em IMP1基因连接,构建真核表达载体pVAX1-Em IMP1-chFc和p VAX1-Em IMP1,对chFc作为Em IMP1的分子佐剂的功能进行研究。结果显示:在ELISA检测中,chFc佐剂组效价的D450值最高,其抗体效价为3 20... 将鸡免疫球蛋白Ig G的Fc片段(chFc基因)和Em IMP1基因连接,构建真核表达载体pVAX1-Em IMP1-chFc和p VAX1-Em IMP1,对chFc作为Em IMP1的分子佐剂的功能进行研究。结果显示:在ELISA检测中,chFc佐剂组效价的D450值最高,其抗体效价为3 200;chFc佐剂组的第3次免疫血清中IL-4质量浓度显著提高(P〈0.05),chFc佐剂组的IFN-γ质量浓度最高;流式细胞仪检测结果显示,chFc组的CD4+和CD8+T淋巴细胞的比例都是最高的;chFc佐剂组卵囊排出量显著低于其他实验组;chFc佐剂组对肠道的保护效果显著优于其他实验组(P〈0.05);chFc佐剂组增重显著高于其他实验组(P〈0.05)。结果表明,chFc佐剂组有明显的优势,Em IMP1组次之,说明chFc能增强Em IMP1的免疫原性。 展开更多
关键词 巨型艾美耳球虫 chFc EM imp1 分子佐剂
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弓形虫免疫作图蛋白1互作因子的筛选与鉴定
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作者 姚营营 张丽新 +9 位作者 赵桂华 徐超 孙慧 刘功振 肖婷 朱嵩 魏庆宽 黄炳成 闫歌 尹昆 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第3期306-310,316,共6页
目的采用酵母双杂交技术筛选弓形虫免疫作图蛋白1(TgIMP1)在人类宿主胞内的相互作用因子并鉴定其相互作用。方法以刚地弓形虫RH株基因组为模板,PCR扩增TgIMP1全长编码序列,扩增产物经双酶切后插入诱饵表达质粒pGBKT7中。重组质粒转化入... 目的采用酵母双杂交技术筛选弓形虫免疫作图蛋白1(TgIMP1)在人类宿主胞内的相互作用因子并鉴定其相互作用。方法以刚地弓形虫RH株基因组为模板,PCR扩增TgIMP1全长编码序列,扩增产物经双酶切后插入诱饵表达质粒pGBKT7中。重组质粒转化入酵母Y2H Gold细胞中,采用酵母细胞融合方法与人胎脑cDNA酵母文库菌双杂交筛选互作因子。筛选的阳性质粒经测序和共转化验证TgIMP1体内相互作用。结果成功构建了不具备细胞毒性和自激活活性的pGBKT7-IMP1重组诱饵表达质粒,该诱饵在人胎脑cDNA文库中共计筛选得到Ringfinger protein2(RNF2)、Murine retroviru sinte grationsite1homolog(MRVI1)、Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A3(HNRNPA3)等6种相互作用因子。结论筛选得到6种人类宿主能够与弓形虫TgIMP1发生相互作用的蛋白因子,其中RNF2体内可与TgIMP1直接互作。 展开更多
关键词 酵母双杂交 互作因子 免疫作图蛋白1 弓形虫
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