Waddles小鼠遗传性小脑性共济失调分子机制的研究

目的:探讨引起Waddles(Wdl)小鼠遗传性小脑性共济失调的分子机制。方法:采用成年2～4个月的Wdl小鼠30只和同等数量同胎生的正常小鼠进行试验。对从Wdl小鼠和正常小鼠提取的mRNA进行Northern杂交;使用亲和法提纯的家兔的CAR8蛋白多克隆抗体进行Westernblot分析;应用免疫组织化学方法研究Wdl小鼠CAR8蛋白是否缺乏。结果:Wdl小鼠的Car8基因转录水平明显降低,而+/Wdl小鼠Car8基因的转录水平介于正常和Wdl小鼠之间。在正常和+/Wdl小鼠的小脑细胞中可见CAR8蛋白的表达且表达量相似,而在Wdl小鼠的小脑细胞中则不能探查到CAR8蛋白的表达。在正常、杂合子及Wdl小鼠,1,4,5-三磷酸肌酸受体1(IP3R1)蛋白表达无明显差别。正常小鼠的CAR8和IP3R1蛋白在小脑细胞中的位置相同,而在Wdl小鼠的小脑细胞中,仅IP3R1蛋白的位置与正常小鼠相同,但检测不到CAR8蛋白。结论:Wdl小鼠Car8基因突变可改变其基因表达,并导致转录水平下调及蛋白质翻译障碍。

Waddles小鼠遗传性小脑性共济失调的CAR8蛋白表达

目的探讨Waddles（Wdl）小鼠遗传性小脑性共济失调的CAR8蛋白表达的分子机制。方法采用成年2—4个月的Wdl小鼠30只和同等数量同胎生的正常小鼠进行试验。使用亲和法提纯的家兔的CAR8蛋白多克隆抗体进行Western blot分析。结果在正常和＋／Wdl小鼠的小脑细胞中可见CAR8蛋白的表达且表达量相似，而在Wdl小鼠的小脑细胞中不能探查到CAR8蛋白的表达。在正常、杂合子及Wdl小鼠，IP3R1蛋白表达无明显差别。结论Wdl小鼠CAR8基因突变改变其基因的蛋白表达，出现蛋白质翻译障碍。