IQCE mRNA与FXR1P在酵母三杂交体系中的相互作用

脆性X相关基因1编码蛋白FXR1P是一种RNA结合蛋白,其所结合的靶RNA目前所知甚少。本研究应用酵母三杂交技术对本课题组从pRH3-cDNA人脑海马RNA表达文库中筛选到的一种可能与FXR1P存在相互作用的RNA IQCE进行研究,以验证该RNA与FXR1P的相互作用。方法为:提取利用酵母三杂交技术初步筛选得到的酵母阳性克隆的质粒,转化大肠杆菌Top10,利用其质粒不相容性分离插入了目的片段的pRH3′-cDNA质粒,将该质粒转化入含目的基因FXR1的酵母菌株L40-ura3/pHyb lex/Zeo-MS2/pYESTrp3/FXR1,进行一对一的酵母三杂交验证,最后将该片段进行测序。测序结果为IQCE的一段编码序列,而目前尚无研究报导FXR1与IQCE的相互关系。结论:提示FXR1P与IQCE mRNA存在相互作用,IQCE可能是FXR1P发育调控网络组成成员之一。

分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP—IQCE3’UTR的构建

目的构建分泌型碱性磷酸酶（secretedalkalinephosphatasereportergene。SEAP）报告基因重组载体pSEAP—IQCE3’UTR，为鉴定FXR1P是否是通过与IQCE的3’UTR发生相互作用，进一步探索FXR1P的功能奠定基础。方法首先设计目的基因片段IQCE3’UTR的PCR引物，然后通过RT—PCR扩增加CE基因3’UTR基因片段，酶切扩增的片段和报告基因空载体，并将空载体去磷酸化，去磷酸化后的空载体与目的基因片段进行连接反应，将连接产物转化人大肠埃希菌JM109，最后筛选阳性克隆，PCR鉴定插入序列的正反。结果构建了分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP—IQCE3’UTR，经酶切鉴定、正反鉴定和测序分析可知重组载体构建成功。结论成功构建了分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP—IQCE3’UTR，为进一步探索FXR1P的功能及其在脆性X综合征中的发病机理有着重要的意义。

自上而下法在评定生化测量不确定度中的应用

目的探讨自上而下法评估测量不确定度在临床生化检验中的应用。方法收集广东省人民医院检验科生化室2019年质控批号稳定至少3个月的室内质控(IQC)数据和国家卫生健康委临床检验中心2017~2019年的室间质评(EQA)回报结果,采用自上而下法评定15项临床生化指标的测量不确定度。结果采用Beckman DXI800化学发光仪检测游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、三碘甲状腺原氨酸(T_(3))、游离甲状腺素(FT_(4))、甲状腺素(T_(4))、促甲状腺激素(TSH)、皮质醇(COR)、叶酸(FA)、维生素B_(12)(VitB_(12))、前列腺特异性抗原(PSA)、癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、铁蛋白(FER)、人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、游离前列腺特异性抗原(fPSA)、肌钙蛋白-I(cTnI)15项生化指标的相对扩展标准不确定度,均满足国家卫生健康委临床检验中心室间质量评价标准的要求。其中批间不精密度与相对扩展标准不确定度呈中度相关(r=0.685,P<0.001),偏移呈强相关(r=0.827,P<0.001)。批间不精密度分量占比更大,在大部分生化指标中呈主要分量趋势。结论应用自上而下法评定测量不确定度适用于临床生化检验项目,是一种经济可行的评定方法。不同项目不同分量来源的主要占比不同,为实验室质量管理提供了改进方向。

浅谈关于IQC检验技术及抽样方案的研究与探讨

从进货物料IQC检验技术策划及抽样方案合理运用层面,结合物料采购、验收及供应商评价等业务架构增效层面,以遵从业务链条短、平、快,业务高效、增速开展的总体要求下,对进货物料检验技术及抽样方案的优化改进进行研究和探讨,从规则策划、抽样方案及AQL选定、检验风险点识别、质量数据评估、供应商再评价、质量损失率分析及影响等维度,进行全面业务流程优化研讨和整体设计。

人工尿液质控物的配制与应用

目的 自配人工尿液质控物进行室内质量控制 (IQC)。方法 取EDTA K2 抗凝血约 1 0 0ml,收集白细胞 ,加入溶血素约 1 0ml,破坏白细胞 ,释放出白细胞酯酶 ,进一步溶解难溶红细胞 ,析出血红蛋白和细胞蛋白质。加入亚硝酸钠、葡萄糖、胆红素、丙酮等制成甲、乙值多参数人工尿液质控物。结果 自配人工尿液质控物的 pH值、比重、蛋白质、潜血、葡萄糖、酮体、亚硝酸盐和白细胞结果稳定。胆红素结果有 9.3%上下波动。 结论 自配人工尿液质控物进行室内质量控制是可行的。

51家医院实验室现场考核与质控管理分析

为掌握我省基层二级医院实验室临床检验日常工作的准确性及室内质控、科室管理现状。现场考核临床化学、临床血液各二个标本,以室间质评(EQA)方法进行统计评价。结果:临床血液考核成绩较好,二个批号总及格率平均84.31％。临床化学考核成绩则较差,二个批号平均VIS139、优秀率18.30％、良好率14.64％、不及格率45.12％,差于2001年全省EQA总平均VIS78、优秀率27.78％、良好率29.29％、不及格率仅19.70％。结论:许多中小实验室设备条件太差,整体技术水平不高,科室管理不严,质控意识薄弱或重室间质评、轻室内质控等,是造成这次考核成绩较差的原因。临床检验中心的工作仍然任重而道远。

吸气式高超声速飞行器纵向机动飞行的鲁棒线性变参数控制

针对一个吸气式高超声速飞行器模型,研究了其鲁棒变增益控制问题。为处理对建模误差的鲁棒性问题,将标准的线性变参数(Linear Parameter-Varying)控制算法扩展到对参数和动态不确定性具有结构摄动的鲁棒性框架内。基于对建模不确定性的积分二次型约束(Integral Quadratic Constraint)刻画,以定标的线性矩阵不等式(Linear Matrix Inequality)形式给出了其鲁棒控制算法。考虑到描述飞行器动态数值非线性模型的复杂性,建立了其解析形式的曲线拟合模型。基于此解析模型,推导了LPV模型用于控制设计和开环分析。设计了以动压和马赫数为增益变量的飞行控制系统。控制器设计将LPV控制器和变增益比例积分补偿器组合成内外环结构,实现了姿态稳定性和精确的轨迹跟踪性能。非线性仿真结果证实了算法和应用的有效性。

四川省临床免疫学检验室间质量评价分析

目的 为了强化临床免疫学检验的质量管理。方法 四川省临床检验中心自 1989年 3季度起组织实施了全省免疫学检验室间质量评价工作。经过 10余年的努力 ,检验人员的质控意识不断加强 ,参加质评的主动性大大加强。参评单位从 4 5家医院大幅增加到 2 6 0家医院和 35家血站。结果 回报率均达到 90 %以上。乙肝标志物符合率从 1989年的 84 .6 %上升到 2 0 0 0年的 89.5 % ;免疫球蛋白结果的 cv%值从 17.31%下降到 7.71% ;血站的 HBs Ag检测符合率已接近 10 0 %。 Anti- HCV符合率从 1994年的 90 %上升到 2 0 0 0年的 99.0 % ;Anti- HIV(1/ 2 )符合率则从 1997年的95 .9%上升到 2 0 0 0年的 97.7%。结论 室间、室内质控在许多医院有了明显进步。

基层输血科自制室内质控品的方法与可行性探讨

目的探讨如何利用基层输血科现有实验室条件,选则自制质控品对ABO血型正反鉴定、Rh D血型鉴定、不规则抗体筛查和交叉配血试验进行室内质量控制。方法回顾性分析我院输血科2013年7月—2014年7月13次自制质控品的可靠性和特异性,评价自制质控品的临床应用效果。自制单独血浆与红细胞质控品,经亲和力、抗体效价检测、凝集强度和稳定性等验证后,按照自行设计的室内质控模式,进行ABO血型鉴定、Rh D血型、交叉配血试验及不规则抗体筛查等试验。结果各检测项目共有1 780个室内质控结果,其中1次(0.06%)属于"警告",2次(0.11%)属于"失控";失控中随机误差1次(50%),系统误差1次(50%)。随机误差和系统误差各占质控总数的比例为0.06%。结论本院输血科自制的室内质控品,其有效性、特异性、稳定性和可靠性,符合《ISO15189医学实验室认可准则》中对IQC的基本要求,可以有效控制输血差错事故的发生。

新类型电子射野影像装置系统-IVS影像质量测试与分析

目的:运用iQC模体对IVS(LinaTech)、iViewGT(Elekta)和aS1000(Varian)三种型号的新类型电子射野影像装置(EPID)系统影像质量进行定量分析。方法:采用EPID影像质量的图像畸变、空间分辨率和低对比度3个质量控制指标,对医院加速器进行月检。运用iQC(LinaTech)检测模体对医院Synergy(Elekta)、Unique(Varian)和600CD(Varian)加载IVS等3台加速器的EPID系统进行影像质量测试,收集15次的测试数据进行统计分析,定量分析不同类型EPID成像质量的差异。结果:三种类型的EPID图像质量均能满足临床需求,获取的EPID图像在图像畸变和低对比度两项检测指标上无统计学差异;IVS在空间分辨率上明显优于iViewGT和aS1000,差异有统计学意义。结论:IVS作为新类型EPID系统可以满足临床影像质量要求,与iViewGT和aS1000相比较,在空间分辨率上具有明显优势。

朗道血清质控品作为ELISA法检测血清可溶性ST2室内质控物的可行性探讨

目的 探讨朗道血清质控品作为酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulation expressed gene 2 protein,sST2)室内质控物的可行性。方法 连续性倍比稀释试剂盒中的sST2标准品来确定标准值和空白。使用双抗体夹心ELISA法检测sST2浓度,结果用线性回归拟合,建立标准曲线并计算相关系数(r),确定线性范围。取朗道血清质控品中值Level 2和高值Level3进行纯水复溶,分别混合均匀后用无菌EP管分装,-20℃冷冻保存。参照中国合格评定国家认可委员会发布的《CNAS-GL03能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》,首先进行均匀性验证,从分装的中值Level 2质控品中随机抽取10管,重复检测两次,用单因素方差分析比较两次测量值;然后进行稳定性验证,随机取中值Level 2质控品6管,每管重复检测两次,将所得均值作为初始均值,分别于第3,6,9和12个月随机抽取6管,同样方法获得均值并分别与初始均值进行t检验比较。高值Level 3评价方法与Level 2相同。结果 在3.125~200.0 ng/ml范围区间,按标准品sST2的结果建立标准曲线(r=0.99)。在均匀性检验中,中值Level 2和高值Level3中的F值分别为1.932,0.519,P值分别为0.181,0.481,差异均无统计学意义(均P>0.05)。在中值Level 2和高值Level 3中sST2的初始均值分别是20.03 ng/ml,22.01 ng/ml。在中值Level 2中,第3,6,9和12个月的均值分别与初始均值进行t检验(t=0.857,0.506,0.683,1.144;P=0.412,0.624,0.510,0.279),差异均无统计学意义(均P>0.05);同样在Level 3中,t值分别为0.260,0.639,0.660,1.372;P值分别为0.800,0.537,0.524,0.200,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 在朗道血清质控品中值Level 2和高值Level 3中,sST2的浓度均较低且均匀性和稳定性好,因此二者均可以作为sST2低值质控品。

浅谈OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪的质量控制

目的探讨OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪的质量控制。方法使用全自动生化分析仪对质控血清进行批内和批间测定,计算变异系数(CV),进行室内质量控制(IQC)和室间质量评价(EQA)。结果批内、批间两组数据的样本均数比较均无显著性差异。结论做好质量控制是保证全自动生化分析仪结果准确的重要保证。

血液学室内质量控制方法探讨

血液学室内质量控制（IQC）采用全血质控物作x图质控。用二个批号全血质控物做测试前、测试中、测试后测定，观察五个项目（WBC、HGB、MCV、MCH、MCHC）结果在四种质控图（x图、定值质控图、多规则she－whart图、Cusum图）中情况，以便寻找出更适合血液学IQC的方法。

凝血混合质控血浆的制备、评价和应用

目的探讨凝血混合质控血浆的制备、瓶间差和稳定性及其在室内质量控制(IQC)中的应用。方法制备凝血混合质控血浆,-20℃冰箱保存,选用体检组混合血浆进行瓶间差的测定,同时用Thrombolyzer Compact-X血凝分析仪上对体检组和患者组混合血浆进行稳定性检测以及常规室内质量控制的开展。结果混合血浆的分装引起的瓶间差很小。体检组混合血浆在-20℃冰箱保存120d内PT-s、APTT、Fib稳定性良好,患者组混合血浆的PT-s、APTT测定值有增加的趋势,Fib降低。患者组混合血浆在90d后三个检测项的偏倚(Bias%)虽然可以接受,但变异系数较大,不再适合作为室内质控物使用。结论凝血混合血浆在一定时间内能够满足临床实验室在单值水平上室内质量控制的使用要求。

奶粉中蛋白质测定的室内质量控制

奶粉中蛋白质测定的室内质量控制叶鹿鸣，沈敏敏实验室内质量控制（ＩＱＣ）是检验人员对分析质量进行自我控制的过程。通过质控，能及时发现检验的质量问题，分析发生问题的原因，从而制定解决措施，使实验误差控制在允许限度内，以保证测定数据的准确、可靠。为此我们开...

酶联免疫吸附试验室内质控的几个问题

临床实验室质量管理的第一要素是选择和执行适当的室内质量控制（Internal Quality Control，IQC）程序，例如依据测定项目的质量要求和方法特点选择统计学标准、控制规则和质控品的数目，并严格执行IQC程序以提高IQC的质量^[1]。室内质控方法很多，但酶联免疫吸附测定（ELISA）中仍主要采用Levey-Jennings质控图。

实验室可波动的误差参照标准的应用程序

针对临床实验室的不同误差条件和控制物本身的误差变异 ( CV)所致不同质控性能 (即误差检出概率和假失控概率 )的后果以及与各室存在质控水平参差不齐的矛盾 ,开发并研究和应用ΔSEc=CCV/CV的技术 ,结果不仅能建立以实验室 CV为可波动的误差参照标准 ,形成该室的控制物运用依据 ;同时又能通过 IQC的 CV与 EQA的 CCV(总体允许误差变异选定值 )的量化关系 ,提高生化控制临界系统误差 (或不精密度 )的过程能力 ( ΔSEc) 。

比值质控图的制作探讨

比值、组合、系列测定在临床诊断中应用愈加广泛。笔 者在联合质控的基础上,设计了一种比值质控图,并应用于 IQC中,收到较好的效果。1 质控图的制作及应用1.1 质控血清:采用非定值质控血清,测定x、OCV、RCV,并将浓度设置在医学决定性水平上。1.2 制图:以O为原点,建立XY座标系。

“可波动的误差参照标准”结果和意义—附Beckman CX9型生化分析仪函变质控稳定性与实用性论证

针对自动化仪器在稳定的函数变化率 (简称函变 )因素条件下 ,可因不同质量控制物的测定变异或随机差异而存在不同的可波动的误差 ,导致不同质控规则的不同质控性能特征的影响 ,提出选择标准物质来作为可波动的误差参照标准的简便、实用方法 ,既能适应临床高效检验的要求 ,达到一体化质控性能特征 ,又能为室内质控 ( IQC)