靛玉红标准品与升血小板胶囊对ITP模型小鼠外周血小板数影响的比较

目的:比较靛玉红标准品与升血小板胶囊对免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠外周血小板的提升效果。方法:以被动免疫造模法建立ITP小鼠模型,以靛玉红标准品与升血小板胶囊为干预药物,通过观测小鼠出血改善率、外周血象(血小板、血红蛋白、白细胞)、骨髓巨核细胞总数及其分类以及凝血功能等指标,比较两种药物提升ITP小鼠外周血小板计数的效果。结果:靛玉红标准品出血改善率分别为小剂量30%,中剂量50%,大剂量60%;升血小板胶囊出血改善率分别为小剂量40%,中剂量60%,大剂量80%;两组出血均有改善,但两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。与模型对照组比较,药物干预后d 4-8各组PLT数及Hb检测值明显升高(P<0.05,P<0.01);但靛玉红标准品、升血小板胶囊各剂量两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。药物干预后d 4-8各组WBC检测值明显降低(P<0.05,0.01);靛玉红标准品、升血小板胶囊各剂量2组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型对照组比较,药物干预各组巨核细胞总数均降低(P<0.05,0.01)。其中,靛玉红标准品、升血小板胶囊大、中剂量组原始巨核细胞均下降(P<0.05,0.01);大剂量组幼稚巨核细胞数明显下降(P<0.05);各组颗粒巨核细胞数明显下降(P<0.05,0.01);靛玉红标准品、升血小板胶囊大、中剂量组产板巨核细胞数明显上升(P<0.01)。靛玉红标准品、升血小板胶囊大、中剂量组凝血酶原时间明显缩短(P<0.05);升血小板胶囊大、中剂量组纤维蛋白原含量接近正常对照组。结论:靛玉红标准品、升血小板胶囊均有良好止血效应。靛玉红具有升高ITP模型小鼠外周血小板、血红蛋白值,降低骨髓巨核细胞总数、提升产板巨核细胞,增加凝血功能等综合效应。

健脾益气摄血方对ITP模型小鼠外周血象的影响

目的:研究健脾益气摄血治则对ITP小鼠外周血象的影响。方法:制备豚鼠抗小鼠血小板血清(APS),注射于BALB/c小鼠体内造成ITP小鼠模型,模型稳定后给予强的松和健脾益气摄血颗粒干预,检测小鼠外周血象的变化情况。结果:注射APS造模后,小鼠外周血血小板计数减少,白细胞计数升高,血红蛋白含量降低,血小板分布宽度基本无影响;给药干预后,血小板计数回升,白细胞计数降低,但与药物作用不相关,血红蛋白含量回升,血小板分布宽度无影响。结论:健脾益气摄血治则能够有效提升ITP小鼠血小板数量及血红蛋白含量。

金薯叶止血合剂对ITP模型动物的治疗作用

目的:观察金薯叶止血合剂对特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠外周血血小板(PLT)数、骨髓巨核细胞数和巨核细胞数分类、外周血T淋巴细胞亚群变化的影响。方法:用豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)连续注射小鼠,造成ITP小鼠模型,分别给金薯叶止血合剂(大、中、小剂量即5g生药.kg-1.d-1、2.5g生药.kg-1.d-1、1.25g生药.kg-1.d-1),正常对照组、模型对照组给予生理盐水,连续给药10d;血细胞分析仪测定PLT,显微镜法观察巨核细胞形态分类,塑料包埋法计数小鼠股骨巨核细胞数,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群。结果:模型小鼠外周血PLT数持续明显减低、骨髓巨核细胞数增多,其中原幼巨核细胞比例明显增高,产板巨核细胞比例明显减低,外周血CD4+CD8-细胞减低,CD8+CD4-和CD4+CD8+细胞明显增高,CD4+/CD8+比值明显降低。给予金薯叶止血合剂后PLT明显增高、巨核细胞数减少、产板巨核细胞比例明显增高,CD8+CD4-和CD4+CD8+细胞比例明显降低,CD4+/CD8+比值升高。结论:金薯叶止血合剂能提升ITP模型小鼠PLT数,提高产板巨核细胞比例,改善T淋巴细胞的失衡,达到治疗ITP的作用。

加味小柴胡颗粒及其组方对ITP模型小鼠免疫功能的影响

目的:观察加味小柴胡颗粒及其组方对ITP模型小鼠免疫器官和免疫功能的影响。方法:建立ITP模型小鼠,将之分为5组:(1)正常组;(2)模型组;(3)加味小柴胡颗粒组;(4)小柴胡颗粒组;(5)丹参三七颗粒组。于造模后第7天开始分组给药,给药体积为30ml/kg体重,每日给药一次,共14天。造模21天眼球取血,流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群,双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测外周血血小板抗体,放射免疫法(RIA)测定外周血淋巴细胞因子IL-2、IL-10;处死后,取出胸腺、脾脏称重,计算免疫器官指数。结果:ITP模型小鼠免疫器官脾脏肿大,指数上升;外周血血小板抗体水平增高;T淋巴细胞亚群失调,CD8升高,CD3、CD4下降,CD4/CD8下降;Th1类细胞因子IL-2亢进,Th2类细胞因子IL-10受抑;与正常组比较有显著差异(P<0.05)。加味小柴胡颗粒组与小柴胡颗粒组脾脏指数下降,血小板抗体水平下降,CD3、CD4、CD4/CD8上升,CD8下降,下调IL-2,上调IL-10,与模型组相比有显著差异(P<0.05),而丹参三七颗粒组无差异(P>0.05)。结论:ITP模型小鼠免疫器官及功能异常,加味小柴胡颗粒及小柴胡颗粒有调节作用,丹参三七颗粒则无影响。

加味小柴胡颗粒及其组方对ITP模型小鼠造血系统的影响

目的:观察加味小柴胡颗粒及其组方对免疫性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠血小板计数及骨髓巨核细胞的影响。方法:建立ITP模型小鼠,将之分为7组:正常组、模型组、维血宁组、强的松组、加味小柴胡颗粒组、小柴胡颗粒组、丹参三七颗粒组,于造模后第14天开始分组给药,给药体积为30mL/kg体重,每日给药1次,共14天,分别于给药前后称重;给药前、给药后4天、7天及14天检测血小板计数;实验结束剥离股骨取骨髓测巨核细胞计数和分类。结果:ITP模型小鼠体重增长率下降,血小板计数持续下降,骨髓巨核细胞增加,产板巨减少、成熟度下降,有统计学意义(P<0.05)。加味小柴胡颗粒组能提高ITP模型小鼠体重增长率(P<0.05);各给药组均使血小板计数上增,其中加味小柴胡颗粒组对血小板提升作用高于维血宁组及其组方小柴胡颗粒组和丹参三七组,有统计学意义(P<0.05),与强的松组无差别(P>0.05);强的松组、加味小柴胡颗粒、小柴胡颗粒组使巨核细胞数减少,产板巨增高,其中加味小柴胡颗粒组优于小柴胡颗粒组,有统计学意义(P<0.05),与强的松组无差别(P>0.05)。结论:加味小柴胡颗粒能提高ITP模型小鼠体重增长率,并明显提升血小板计数,促使骨髓巨核成熟,效果优于维血宁组,且优于其组方小柴胡颗粒和丹参三七颗粒,与强的松组疗效相似。

调节性T细胞在小鼠ITP发病中的作用

目的:探讨Treg细胞在ITP发病中的作用。方法:构建ITP小鼠模型,应用流式细胞术检测外周血及脾脏中的Treg细胞比例,应用免疫磁珠法分选出脾脏CD4+CD25+T细胞,采用RT-PCR方法测定Treg细胞相关转录因子(Foxp3,Smad7,STAT5和Akt-1)和细胞因子(IL-10,TGF-β)的mRNA表达水平。结果:与对照组相比,ITP小鼠外周血及脾脏的Treg细胞比例均显著下降(P<0.01);同时,Foxp3、IL-10,TGF-βmRNA表达水平降低(P<0.05);而Smad 7的mRNA表达水平升高。结论:Treg细胞数量及其功能下降可能是ITP免疫功能紊乱的直接原因之一,而Foxp3 mRNA低表达及Smad 7 mRNA高表达可能抑制Treg的增殖和分化,参与ITP的发生。

紫癜颗粒对ITP模型小鼠骨髓细胞因子IL-3 TPO的影响

目的:通过观察ITP模型小鼠骨髓细胞白介素-3(IL-3)、血小板生成素(TPO)含量的变化,探讨IL-3、TPO含量变化与免疫性血小板减少性紫癜(ITP)发病之间的内在联系。方法:采用酶联免疫方法检测ITP模型小鼠骨髓细胞IL-3、TPO含量变化。结果:模型组小鼠骨髓细胞IL-3明显降低、TPO含量明显升高,均有统计学意义(P<0.05)。结论:调节巨核细胞的正性作用因IL-3与正性作用因子TPO参与了ITP的发病过程并发挥重要作用,紫癜颗粒通过调控骨髓细胞IL-3、TPO的含量变化而达到有效治疗ITP的目的。

补肾活血方对原发性免疫性血小板减少症小鼠肠道免疫及淋巴细胞周期的影响

目的:通过研究补肾活血方对原发性免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠免疫系统的影响,探讨补肾活血方治疗ITP的效果及作用机制。方法:建立ITP小鼠模型,ELISA法检测小鼠肠黏液中免疫球蛋白的含量及小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞P53蛋白表达的变化;流式细胞仪检测小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞周期及淋巴细胞凋亡率的变化。结果:补肾活血方能够显著下调小鼠肠黏液中免疫球蛋白含量(P<0.05);下调P53蛋白表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);显著升高G0/G1期淋巴细胞比例(P<0.05),降低S期淋巴细胞比例(P<0.05),降低淋巴细胞凋亡率(P<0.05),对淋巴细胞周期异常分布及异常凋亡有一定的改善作用。结论:补肾活血方对ITP小鼠有明显的治疗作用,其作用机制主要表现为下调ITP小鼠IgG、SIgA含量及淋巴细胞P53蛋白表达、改善ITP小鼠淋巴细胞周期异常分布、降低淋巴细胞凋亡率等,其具体机制有待进一步的研究探索。

中药在免疫性血小板减少性紫癜中应用进展

Chinese traditional Drugs has played an important role in curing ITP,More and more animal experiments about ITP are made,Animal experimental research about Chinese traditional Drugs in use of ITP are summarized as

棘球蚴感染极化巨噬细胞调控免疫性血小板减少症(ITP)的机制研究

目的探讨细粒棘球蚴感染早期和晚期巨噬细胞极化对免疫性血小板减少症(ITP)的调节作用。方法将BALB/c小鼠分为ITP组和空白对照组。ITP组经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立BALB/c小鼠早期和晚期感染模型,并根据感染剂量和时间分为低剂量感染4周/ITP组(Eg-L-4w/ITP),高剂量感染4周/ITP组(Eg-H-4w/ITP),高剂量感染4周/con组(Eg-H-4w/con)和高剂量感染12周/ITP组(Eg-H-12w/ITP)。分别于感染第4周和12周腹腔注射Anti-CD41抗体,对照组腹腔注射PBS。同时尾静脉连续采血5 d。将小鼠处死,取肝组织,HE染色后观察病理变化;通过流式细胞术检测小鼠脾脏、外周血F4/80^(+)CD11c^(+)M1和F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞以及T、B淋巴细胞及其亚型细胞比例。结果感染组小鼠肝组织出现棘球蚴感染寄生灶,感染灶周围炎症细胞浸润。ITP组小鼠注射致病抗体后血小板数显著减少,ITP模型建立成功。血常规结果显示,细粒棘球蚴感染小鼠4周ITP模型小鼠外周血血小板未明显增多,感染12周ITP模型小鼠血小板数增多。提示细粒棘球蚴感染小鼠晚期状态对ITP小鼠模型具有调节保护作用。流式细胞术检测低、高剂量感染4周组小鼠脾脏和外周血F4/80^(+)CD11c^(+)M1型巨噬细胞比例分别为(11.12±1.24)%、(12.54±1.73)%和(6.11±0.66)%、(6.34±0.79)%,与ITP组、对照组的(6.90±1.48)%、(7.30±1.20)%和(4.40±0.49)%、(2.78±0.56)%比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。低、高剂量感染4周组脾脏和外周血F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞以及B、T淋巴细胞比例均高于ITP组和对照组(均P<0.05)。结论细粒棘球蚴感染早期的F4/80^(+)CD11c^(+)M1型巨噬细胞和感染晚期的F4/80^(+)CD206^(+)M2型巨噬细胞均对免疫性血小板减少症(ITP)有调节作用。