IU1抑制USP14对人卵巢癌细胞缝隙连接及顺铂毒性影响的研究

目的探究1-[1-(4-氟苯基)-2,5-二甲基-1H-吡咯-3-基]-2-(1-吡咯烷基)乙酮(IU1)抑制泛素特异性蛋白酶14(USP14)对人卵巢癌细胞HO9810、OVCRA3的顺铂毒性的影响及其机制。方法采用CCK-8法测定不同浓度IU1对HO9810、OVCRA3细胞的增殖抑制率及IU1对顺铂细胞毒性的影响;采用去泛素化酶活性实验对IU1作用于HO9810、OVCRA3细胞后USP14活性的变化进行研究;采用Western blot检测IU1作用于HO9810、OVCRA3细胞后cleaved-caspase 3和连接蛋白32(Cx32)表达水平的变化;采用细胞接种荧光示踪法测定IU1对人卵巢癌细胞HO9810、OVCRA3细胞缝隙连接(GJ)的影响。结果 IU1能降低USP14的活性;IU1能降低顺铂的细胞毒性,抑制细胞凋亡;IU1对Cx32的蛋白表达水平无影响,但能抑制细胞间GJ通信功能。结论 IU1可以降低顺铂的细胞毒性,该作用可能与IU1抑制卵巢癌细胞HO9810、OVCRA3的GJ通讯功能有关,与Cx32蛋白表达水平变化无关。

去泛素化酶USP14调控H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤

目的:观察抑制泛素特异性蛋白酶14(ubiquitin-specific protease 14,USP14)的活性对H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的影响。方法:体外培养H9c2心肌细胞,用H_2O_2(25μmol/L)处理2 h,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。将细胞分为对照(control,CON)组、模型组(H_2O_2组)、USP14抑制剂IU1处理组(IU1组)和IU1处理后建模组(IU1+H_2O_2组)。MTS法检测H9c2心肌细胞活力;流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)的产生和细胞存活率;Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶家族相关蛋白的表达变化。结果:与CON组相比,H_2O_2组细胞活力、细胞存活率显著降低,细胞内ROS含量、Bax/Bcl-2、P53、p-ERK1/2、p-JNK和p-P38的蛋白水平显著增加(P<0.05);与H_2O_2组比较,IU1+H_2O_2组细胞活力、细胞存活率显著增加,细胞内ROS含量、Bax/Bcl-2、P53、p-ERK1/2、p-JNK和p-P38蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:抑制USP14活性可以减轻氧化应激条件下H9c2心肌细胞的损伤,其机制可能与抑制丝裂原活化蛋白激酶信号活化和下调凋亡相关蛋白有关。

17600IU·mg^(-1)Bt悬浮剂防治小菜蛾田间药效试验

应用17 600 IU·mg-1 Bt悬浮剂防治小菜蛾幼虫,结果显示,17 600 IU.mg-1 Bt悬浮剂1 125 g·hm-2的防效为94.36%,高于16 000 IU·mg-1 Bt可湿性粉剂1 125 g·hm-2的防效(85.53%),是防治小菜蛾的有效生物药剂,推荐使用浓度为750～1 125 g·hm-2。