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体内诱生抗原鉴定技术 被引量:1
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作者 胡勇 丛延广 胡福泉 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期261-264,共4页
体外不表达而只在体内才表达的基因称为体内诱导基因。研究表明,体内诱导基因涉及病原菌在体内的生存和致病过程,因此有重要意义。最近提出的体内诱生抗原鉴定技术(invivo-inducedantigentechnology,IVIAT)就是用于筛选病原菌体内诱导... 体外不表达而只在体内才表达的基因称为体内诱导基因。研究表明,体内诱导基因涉及病原菌在体内的生存和致病过程,因此有重要意义。最近提出的体内诱生抗原鉴定技术(invivo-inducedantigentechnology,IVIAT)就是用于筛选病原菌体内诱导基因的一种方法。该方法不使用动物模型,而是采用经病原菌体外表达抗原吸收处理的病人血清来检测病原菌的表达文库,从而筛选体内诱导基因;方法简便、快速。这些筛选得到的体内诱导基因有助于病原菌致病机制的研究,同时也能够为抗菌药物、诊断试剂及疫苗设计等研究提供潜在靶标。 展开更多
关键词 iviat 体内诱导基因 致病机制 毒力
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应用体内诱导抗原技术筛选病原菌体内表达基因的研究进展
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作者 李书光 张娜 +4 位作者 王金良 赵蕾 陈金龙 苗立中 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第7期87-89,共3页
病原菌体内诱导基因与其在体内的生存和致病过程密切相关,体内诱导抗原技术(IVIAT)已广泛应用于筛选体内诱导基因的研究。IVIAT不使用动物模型,采用经病原菌体外培养抗原吸附处理的感染动物血清来检测病原菌的原核表达文库,对体内诱导... 病原菌体内诱导基因与其在体内的生存和致病过程密切相关,体内诱导抗原技术(IVIAT)已广泛应用于筛选体内诱导基因的研究。IVIAT不使用动物模型,采用经病原菌体外培养抗原吸附处理的感染动物血清来检测病原菌的原核表达文库,对体内诱导基因进行筛选。利用该方法可以快速、简单的筛选到体内诱导基因,有助于病原菌致病机制的研究,同时也能够为目标病原菌抗菌药物、诊断试剂及疫苗设计的开发研究提供理论依据。文章就IVIAT的原理、兽医致病病原菌中的应用及应用前景作一简略的概述。 展开更多
关键词 体内诱导基因 iviat 原理 应用 展望
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应用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌体内表达基因 被引量:10
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作者 李霆 高志勇 +5 位作者 王恒 冯尔玲 陈宗德 李新月 黄留玉 黄翠芬 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期111-117,共7页
为寻找新型抗结核药物靶标 ,采用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌的体内诱导基因。首先构建了结核分枝杆菌基因组质粒表达文库 ,库容量为 1 0 2× 1 0 5CFU。再用经过结核分枝杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清 ,... 为寻找新型抗结核药物靶标 ,采用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌的体内诱导基因。首先构建了结核分枝杆菌基因组质粒表达文库 ,库容量为 1 0 2× 1 0 5CFU。再用经过结核分枝杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清 ,通过原位免疫印迹来筛选基因组表达文库 ,共获得 1 6个阳性克隆。对阳性克隆进行测序和生物信息学分析 ,发现该 1 6个阳性克隆可能包含 2 2个开放阅读框 (ORF)。按照功能将其分为 7类基因 :脂类代谢 2个、信号途径 5个、PE/PPE蛋白家族 2个、中间产物与能量代谢 6个、细胞壁与细胞处理 1个、假想蛋白 4个和与牛型分枝杆菌定向进化同源的 2个 ,其中部分基因可能与毒力相关 。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 体内诱导抗原技术 药物靶标 毒力
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羊布鲁菌体内诱导基因的筛选与初步鉴定
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作者 杨艳玲 程悦宁 +3 位作者 张萍 周玉成 张海威 程世鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1979-1986,共8页
本研究利用体内诱导表达抗原技术(IVIAT)来筛选和鉴定羊布鲁菌特异的体内诱导抗原,为筛选新的毒力分子,诊断靶标、疫苗候选抗原和药物靶点提供科学依据。通过收集临床上羊布鲁菌阳性血清,吸附后作为探针,构建羊布鲁菌16M基因组表达文库... 本研究利用体内诱导表达抗原技术(IVIAT)来筛选和鉴定羊布鲁菌特异的体内诱导抗原,为筛选新的毒力分子,诊断靶标、疫苗候选抗原和药物靶点提供科学依据。通过收集临床上羊布鲁菌阳性血清,吸附后作为探针,构建羊布鲁菌16M基因组表达文库,进行体内诱导抗原的筛选,同时利用RT-PCR验证筛选得到的基因,对筛选得到的基因进行测序比对及生物信息学分析。结果显示:利用临床上感染布鲁菌的羊阳性血清作为探针,通过体内诱导抗原技术成功地从羊布鲁菌的基因组中筛选得到了14个体内诱导表达的基因。这些基因主要参与布鲁菌的糖代谢、tRNA修饰、离子转运和跨膜运输等生物过程,这些分子有的已经被证实是布鲁菌的药物靶点和毒力分子,有的可能与布鲁菌的毒力和免疫相关,可以作为疫苗候选抗原和诊断标识。体内诱导抗原技术(IVIAT)成功地应用到布鲁菌候选抗原和诊断标识的筛选和鉴定研究中,利用该技术成功获得14个体内诱导基因,这些基因将为布鲁菌疫苗的研制和诊断产品的研发提供候选抗原和诊断标识。 展开更多
关键词 布鲁菌 体内诱导抗原技术 RT-PCR
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体内诱导抗原技术鉴定细菌毒力基因的研究进展 被引量:1
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作者 袁建丰 覃宗华 +5 位作者 吕敏娜 余劲术 吴彩燕 孙铭飞 谢明权 蔡建平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1533-1536,共4页
病原细菌的致病作用是其与宿主复杂的相互作用的结果。一方面细菌表达产生、分泌释放多种毒力因子,另一方面宿主通过其防御系统抵抗这些毒力因子的作用[1-2]。一般来说,由于环境条件的显著差差异,病原菌在体内外所表达的产物是明显不同... 病原细菌的致病作用是其与宿主复杂的相互作用的结果。一方面细菌表达产生、分泌释放多种毒力因子,另一方面宿主通过其防御系统抵抗这些毒力因子的作用[1-2]。一般来说,由于环境条件的显著差差异,病原菌在体内外所表达的产物是明显不同的,其感染宿主时被诱导表达的基因。 展开更多
关键词 体内诱导基因 细菌毒力基因 基因组表达文库 体内诱导抗原技术(iviat)
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伤寒沙门菌感染过程中体内诱导表达蛋白抗原的筛选 被引量:1
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作者 胡勇 丛延广 +3 位作者 黎庶 饶贤才 王刚 胡福泉 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2009年第9期879-884,共6页
在感染过程中,病原体会表达一系列基因产物以适应体内环境.因此,病原体只在宿主体内表达或高表达的基因可能与致病机制密切相关.本研究用体内诱导抗原技术(in vivo induced antigen technology,IVIAT)来筛选伤寒沙门菌感染过程中体内诱... 在感染过程中,病原体会表达一系列基因产物以适应体内环境.因此,病原体只在宿主体内表达或高表达的基因可能与致病机制密切相关.本研究用体内诱导抗原技术(in vivo induced antigen technology,IVIAT)来筛选伤寒沙门菌感染过程中体内诱导表达的抗原,共筛选到7个体内诱导(in vivo induced,IVI)抗原,分别是BcfD(菌毛结构亚单位)、GrxC(谷氧还蛋白3)、SapB(ABC转运系统)、T3663(ABC未知转运系统)、T3816(可能的有关硫氰酸酶的硫转移酶)、T1497(可能的TonB依赖受体)和T3689(功能未知),其中BcfD,GrxC,SapB,T3663和T3689这5个抗原与吸附处理后的健康志愿者的血清无交叉免疫反应.这些筛选到的体内诱导抗原是新药和疫苗开发的潜在靶标,同时也有利于新诊断方法的研究. 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 体内诱导抗原技术(iviat) 毒力
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Identification of in vivo induced protein antigens of Salmonella enterica serovar Typhi during human infection 被引量:9
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作者 HU Yong1,2, CONG YanGuang1, LI Shu1, RAO XianCai1, WANG Gang3 & HU FuQuan1 1 Department of Microbiology, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China 2 Department of Biotechnology, Chongqing University of Technology, Chongqing 400050, China 3 Department of Clinical Laboratory, The 3rd Hospital of People’s Liberation Army, Baoji 721004, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2009年第10期942-948,共7页
During infectious disease episodes, pathogens express distinct subsets of virulence factors which allow them to adapt to different environments. Hence, genes that are expressed or upregulated in vivo are implicated in... During infectious disease episodes, pathogens express distinct subsets of virulence factors which allow them to adapt to different environments. Hence, genes that are expressed or upregulated in vivo are implicated in pathogenesis. We used in vivo induced antigen technology (IVIAT) to identify antigens which are expressed during infection with Salmonella enterica serovar Typhi. We identified 7 in vivo induced (IVI) antigens, which included BcfD (a fimbrial structural subunit), GrxC (a glutaredoxin 3), SapB (an ABC-type transport system), T3663 (an ABC-type uncharacterized transport system), T3816 (a putative rhodanese-related sulfurtransferase), T1497 (a probable TonB-dependent receptor) and T3689 (unknown function). Of the 7 identified antigens, 5 antigens had no cross-immunoreactivity in adsorbed control sera from healthy subjects. These 5 included BcfD, GrxC, SapB, T3663 and T3689. Antigens identified in this study are potential targets for drug and vaccine development and may be utilized as diagnostic agents. 展开更多
关键词 SALMONELLA ENTERICA SEROVAR Typhi in vivo INDUCED ANTIGEN technology (iviat) VIRULENCE
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狐源维氏气单胞菌体内诱导基因的筛选 被引量:1
8
作者 张海月 康元环 +5 位作者 吴同垒 孙武文 陈龙 张冬星 单晓枫 钱爱东 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期54-59,共6页
为了筛选狐源维氏气单胞菌体内诱导基因,本研究将狐源维氏气单胞菌人工感染家兔,并取不同感染时期的血清混合,分别用体外培养的维氏气单胞菌和大肠杆菌BL21全菌、二者菌体裂解物以及热变性裂解物进行吸附,用ELISA进行检测;同时构建狐源... 为了筛选狐源维氏气单胞菌体内诱导基因,本研究将狐源维氏气单胞菌人工感染家兔,并取不同感染时期的血清混合,分别用体外培养的维氏气单胞菌和大肠杆菌BL21全菌、二者菌体裂解物以及热变性裂解物进行吸附,用ELISA进行检测;同时构建狐源维氏气单胞菌基因组的p ET系统重组质粒表达文库。再用经吸附处理的血清对狐源维氏气单胞菌基因组文库进行菌落原位免疫杂交筛选,将筛选的阳性克隆进行测序,并用RT-PCR进一步验证。结果显示,最终获得8个狐源维氏气单胞菌的体内诱导基因,分别为GTP焦磷酸激酶基因、转录调控基因Mar R基因、氢化酶细胞膜亚基基因、外膜受体转运蛋白Ton B基因、Ⅲ型分泌系统asc V基因以及3个保守假想蛋白基因。研究结果为维氏气单胞菌保护性抗原的筛选、分子致病机制及跨物种间传播机制奠定了基础。 展开更多
关键词 维氏气单胞菌 狐狸 体内诱导抗原技术 基因组表达文库 菌落原位免疫杂交
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