几种食用乳酸菌内源性质粒DNA的普查、消除及其稳定性试验

以内蒙古和青海等地区牛乳中分离的11种野生乳酸菌为材料,分别应用核酸电泳技术、药物敏感试验和SDS-变温质粒DNA消除等方法,进行了内源性质粒DNA的普查、消除及其稳定性试验。结果表明:11种野生乳酸菌均被检测出不同大小的质粒DNA的可疑条带,可分为大于23 kb和小于23 kb两个型;经SDS-变温方法消除质粒DNA后,除3种乳酸菌不宜生长而被淘汰以外,在剩余8种乳酸菌中,小于23 kb型的条带全部被消除,个别大于23 kb型的可疑条带也能被消除,与药物敏感补充试验所得到的结果基本相符;已被消除质粒DNA的8种乳酸菌经过转接培养20代,显示出良好的遗传稳定性。本研究为筛选和建立新型基因工程受体菌奠定了基础。

发酵肉制品中乳酸菌分离鉴定技术的研究

对发酵肉制品中乳酸菌的分离、纯化以及鉴定技术进行了研究,结果从发酵香肠、腊肠、火腿中分离筛选得到2株德氏乳杆菌,并建立了一套发酵肉制品中乳酸菌的分离鉴定方法。

乳酸菌天然质粒提取方法的优化

将前人报道的乳酸菌质粒提取方法与大肠杆菌质粒提取方法相结合,对常用试剂盒质粒提取方法进行改进,建立了一种快速、安全、高效的乳酸菌质粒提取方法。提取过程中,溶菌酶最佳浓度为20mg/ml,最佳处理时间为30min,同时避免了毒性物质溴化乙锭的使用。多次实验结果表明,采用改进后的方法可明显提高乳酸菌天然质粒的提取效果。且重复性好,为下一步乳酸菌的分子改良奠定了基础。