血清IGFBP-3、Gd-IgA1在儿童紫癜性肾炎早期诊断中的应用价值

目的 探索血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)及半乳糖缺乏免疫球蛋白A1(Gd-IgA1)联合检测在儿童紫癜性肾炎(HSPN)早期诊断中的应用价值。方法 选取2021年6月至2023年4月在该院确诊的105例首发过敏性紫癜(HSP)患儿作为研究对象,在入院后按照HSP是否累及肾脏将患儿分为HSPN组及无肾炎组(HSP组),同期选择在该院体检的52例健康儿童作为对照组(NC组)。收集3组临床资料,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对血清及尿液中IGFBP-3、Gd-IgA1表达水平进行检测,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IGFBP-3、Gd-IgA1对HSPN的早期诊断价值,多因素Logistic回归分析HSPN早期发生的影响因素。结果 与NC组相比,HSPN组及HSP组的IgA、IgG、补体C3、IgA/C3、白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)及血清光抑素C(CysC)、血肌酐(sCr)水平显著升高(P<0.05),但HSPN组与HSP组的临床资料差异无统计学意义(P>0.05);HSPN组及HSP组血清IGFBP-3、Gd-IgA1及尿液IGFBP-3/尿肌酐(uCr)、Gd-IgA1/uCr表达水平较NC组显著升高(P<0.05),并且,与HSP组相比,HSPN组血清IGFBP-3、Gd-IgA1及尿液Gd-IgA1/uCr表达水平进一步升高(P<0.05);ROC曲线分析显示,联合IGFBP-3、Gd-IgA1诊断HSPN的曲线下面积(AUC)显著大于IGFBP-3单独诊断的AUC(Z=3.629,P<0.001)和Gd-IgA1单独诊断的AUC(Z=2.274,P=0.023);多因素Logistic回归分析显示,血清CysC、IGFBP-3、Gd-IgA1、尿液Gd-IgA1/uCr是HSPN早期发生的影响因素(P<0.05)。结论 HSPN患儿血清IGFBP-3、Gd-IgA1的表达水平均显著上升,二者是HSPN早期发生的影响因素,血清IGFBP-3、Gd-IgA1水平联合检测对HSPN的早期诊断具有较高的应用价值。

肾小球半乳糖缺乏型IgA1在IgA异常沉积肾小球疾病中的表达及意义

目的探讨肾小球半乳糖缺乏型IgA1(Gd-IgA1)在IgA异常沉积肾小球疾病中的表达及意义。方法纳入2020年1月至2024年6月天津医科大学总医院收治的IgA异常沉积肾小球疾病患者35例(IgA异常沉积组),包括IgA沉积型感染相关性肾小球肾炎(IgA-IRGN)5例,伴IgA沉积的糖尿病肾病(IgA-DN)8例,伴IgA沉积的ANCA相关性血管炎肾损害(IgA-ANCA-GN)9例,伴IgA沉积的微小病变肾病(IgA-MCD)13例。另选择同期住院的35例性别、年龄匹配的原发性IgA肾病(IgAN)患者作为对照(IgAN组)。分析两组患者临床和病理特征,评估肾活检中肾小球Gd-IgA1染色的强度和分布特点。结果两组患者主要临床表现均为蛋白尿和(或)血尿、血肌酐水平升高。肾病理检查显示,IgAN组患者毛细血管内增生更常见,而IgA异常沉积组患者纤维素样坏死、新月体形成及基底膜增厚较多见。Gd-IgA1抗体KM55免疫组化染色显示,IgAN组患者肾小球KM55主要表达于系膜区,染色强度范围为轻度阳性(+)至强阳性(+++),染色强度显著高于IgA异常沉积组(P<0.05)。电镜检查显示,IgAN组肾小球电子致密物沉积(EDD)位置与IgA免疫荧光及KM55染色一致;IgA异常沉积组肾小球EDD位置与IgA免疫荧光染色一致,但与KM55染色一致性较差。结论在IgA异常沉积肾小球疾病中,肾小球Gd-IgA1沉积明显少于IgA沉积,提示Gd-IgA1在其发病机制中可能不占重要地位。

探讨固本通络方基于细菌脂多糖介导的肠B细胞激活对Gd-IgA1的影响

目的探讨固本通络方对IgA肾病小鼠肠道细菌脂多糖(LPS)和糖基化缺陷IgA1(Gd-IgA1)的干预及肾保护作用。方法将36只雄性小鼠分为正常对照组、模型组、固本通络方低剂量组、固本通络方中剂量组、固本通络方高剂量组、依立托仑组。实验采用ddY小鼠构建IgA肾病动物模型,将模型组和各药物组进行造模,中药干预各组分别予以固本通络方免煎颗粒低(13.2 g/kg)、中(26.4 g/kg)、高(52.8 g/kg)3种不同剂量药液灌胃给药,正常对照组和模型组小鼠给予0.9%氯化钠溶液灌胃(10 mL/kg),依立托仑组予以腹腔注射依立托仑药液,各药物组每天给予药物1次,连续8周。干预4周、8周后,测定各组24 h尿蛋白定量;8周测定血清及肠道黏膜LPS、IgA、GdIgA1水平,观察肾脏病理染色及右肾IgA沉积情况,实时荧光定量PCR检测Cosmc基因表达,Western blot法测定Cosmc蛋白表达及IgA肠道菌群特异性,流式细胞术检测肠道B淋巴细胞活化率及分泌IgA前体B淋巴细胞比率,对肠道黏膜组织LPS水平与B细胞活化率及IgA前体B细胞比率行相关性分析。结果固本通络方可降低24 h尿蛋白定量水平及血清肌酐水平(P<0.05)。HE染色发现,与模型组相比,固本通络方用药组肾小球系膜细胞、内皮细胞及基质增生显著减少,肾小球系膜区IgA沉积显著改善;血清及肠道黏膜LPS水平检测发现,与模型组比较,各中药干预组均能降低小鼠血清和肠道黏膜组织LPS、Gd-IgA1和IgA水平(P<0.05);降低B细胞活化率及IgA前体B细胞比率(P<0.05),qRT-PCR和Western blot结果显示固本通络方能够显著降低小鼠粪便培养中菌落蛋白表达水平,上调Cosmc蛋白和Cosmc基因表达水平(P<0.05)。LPS水平与B细胞活化率及IgA前体B细胞比率均呈正相关(P<0.05)。结论固本通络方能有效降低IgA肾病小鼠蛋白尿及血清肌酐水平,减轻肾脏病理损伤及肾小球系膜区IgA沉积,其作用可能和固本通络方降低IgA肾病小鼠血清及肠道LPS水平,降低B淋巴细胞活化率,Cosmc表达上调相关。

IgA肾病患者血清Gd-IgA1与Th淋巴细胞亚群变化及临床病理特点的相关性分析

目的:探讨IgA肾病患者低糖基化IgA1分子与Th淋巴细胞亚群及其细胞因子、临床指标、病理特点的相关性。方法:选取2021年06月—2022年10月北京市昌平区中西医结合医院肾病科门诊及住院的IgA肾病患者30例(IgA肾病组)与健康受试者30例(健康对照组),应用ELISA测定血清中低糖基化IgA1分子、IL-4、IL-6、IL-10水平,应用流式细胞学检测Th淋巴细胞亚群比例,分析比较两组低糖基化IgA1与Th淋巴细胞亚群及其细胞因子、临床指标、病理特点之间相关性。结果:IgA肾病组外周血Gd-IgA1、Th2细胞、Th17细胞、Th17/Treg、IL-4、IL-6、IL-17水平高于对照组(P<0.05),Treg细胞水平低于对照组(P<0.05)。Gd-IgA1与Th2细胞、Th17细胞、Th17/Treg、IL-17呈显著正相关(R=0.463、0.554、0.652、0.531,P<0.05),与Treg细胞、Th1细胞显著负相关(R=-0.690、-0.402,P<0.05)。Gd-IgA1、Th2、Th17/Treg、IL-4、IL-6、IL-17与24 h尿蛋白定量均呈显著正相关,Th17、Th17/Treg与Alb呈显著负相关,Gd-IgA1、Th2、Th17、Th17/Treg与Scr呈显著正相关,Treg与BUN呈显著负相关(P<0.05)。结论:Gd-IgA1、Th淋巴细胞亚群及其细胞因子共同参与IgA肾病多重致病过程,为寻找敏感的血清学指标应用于临床具有参考意义。

异常糖基化IgA1在过敏性紫癜患儿肾损害中的作用

目的:分析异常糖基化IgA1在过敏性紫癜(HSP)患儿肾脏损害中的作用。方法:选取我院2010年7月～2013年3月儿科住院确诊为HSP患儿42例,过敏性紫癜肾炎组(HSPN)58例,以及门诊体检的健康儿童(对照组)50例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测对照组、HSP组和HSPN组血清IgA、IgA1以及蚕豆凝集素(VVL)与血清IgA1的结合力。结果:HSP组和HSPN组血清IgA、IgA1较对照组明显升高(P<0.05),HSP、HSPN组比较差异无统计学意义(P>0.05);HSPN组VVL与血清IgA1的结合力明显高于对照组及HSP组(P<0.05)。结论:过敏性紫癜肾炎患儿存在IgA1的异常糖基化。

过敏性紫癜性肾炎患儿血清IgA1对肾小球系膜细胞增殖及TNF-α分泌的影响

目的观察过敏性紫癜性肾炎（HSPN）患儿及健康儿童血清IgA1对小鼠肾小球系膜细胞（MES）增殖及TNF-α分泌的影响。方法采集2013年5～12月于河南中医学院第一附属医院儿科住院的40例HSPN患儿及20名健康儿童血清：通过Jacalin亲和层析联合Superdex-200分子筛层析的方法将血清中单聚体IgA1（mIgA1）纯化、分离，将mIgA1热聚合为聚合IgA1（aIgA1）；采用不同浓度的患儿及健康儿童的aIgA1分别刺激MES细胞株,用MTT法检测24h及48h的细胞增殖情况；收集培养48h的细胞培养基上清，用ELISA法测定TNF-α的水平。结果在HSPN患儿aIgA1刺激结果中，不同浓度aIgA1刺激组间MTT实验吸光度的比较，差异有统计学意义（P〈0．05），24hMTT实验结果显示：与阴性对照比较，aIgA1刺激浓度在250、1000μg／mL时，细胞增殖差异均有统计学意义（P〈0．05），在aIgA1浓度为500和750μg／mL时，细胞增殖差异有高度统计学意义（P〈0．01）；48hMTT实验结果显示：与阴性对照比较．在aIgA1刺激浓度50μg／mL时，细胞增殖差异有统计学意义（P〈0．05），在100～1000μg／mL时，细胞增殖差异均有高度统计学意义（P〈0．01）。健康儿童在aIgA1刺激浓度在750和1000μg／mL可刺激MES增殖，与阴性对照比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。HSPN患儿aIgA1可刺激MES分泌TNF-α水平升高，与阴性对照比较，差异有高度统计学意义（P〈0．01），且随aIgA1浓度增加呈上升趋势。结论HSPN患儿aIgA1可刺激MES增殖及分泌TNF-α水平增加，且这一结果具有浓度依赖性及饱和性。

IgA肾病患者血清IgA1对足细胞凋亡的影响

【目的】探讨IgA肾病患者血清IgA1对足细胞凋亡的影响。【方法】Jacalin亲和层析和Sephacryl S-200分子筛用来纯化蛋白,单体IgA1(mIgA1)热聚合为聚合体IgA1(aIgA1),同步化的足细胞与患者和健康对照来源的aIgA1共培养,流式细胞仪评价细胞凋亡情况,Real time PCR检测Bcl-2,Bax,Fas and Fas-L mRNA表达情况。【结果】IgAN患者的aIgA1可诱导足细胞的凋亡,其凋亡率显著高于对照组[(30.5±5.4)%vs(20.6±4.5)%,P<0.05];而健康对照的aIgA1可诱导足细胞的凋亡,凋亡率也显著高于对照[(31.4±5.3)%vs(20.6±4.5)%,P<0.05];IgAN患者的aIgA1诱导足细胞的凋亡呈现时间和浓度依赖。与对照相比,IgAN患者和健康对照来源的aIgA1诱导足细胞Fas mRNA升高2.4倍(P<0.05),而Bcl-2 mRNA和Bax mRNA无显著性变化(P>0.05)。【结论】IgA肾病患者血清IgA1可诱导足细胞的凋亡,其可能参与IgAN的进展。

川芎嗪对过敏性紫癜小鼠血清IgA1异常糖基化与晚期氧化蛋白产物的影响

目的:探讨川芎嗪对过敏性紫癜小鼠血清IgA1异常糖基化与晚期氧化蛋白产物(AOPPs)水平的影响,阐明其治疗机理。方法:将50只KM小鼠分为正常组、模型组及川芎嗪低、中、高浓度组,每组10只。造模后,川芎嗪低、中、高浓度组腹腔注射盐酸川芎嗪剂量分别为10、20、40mg/(kg·d)。采用蚕豆凝集素亲和ELISA检测IgA1异常糖基化程度,紫外分光光度法检测血清丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)及髓过氧化物酶(MPO)活力。采用分光光度法测定AOPPs含量。结果:与正常组比较,模型组小鼠IgA1异常糖基化程度、血清MDA、MPO与AOPPs含量水平显著升高,T-AOC与SOD表达水平显著下降;与模型组比较,川芎嗪低、中、高浓度组小鼠IgA1异常糖基化程度、血清MDA、MPO与AOPPs含量水平显著降低,T-AOC与SOD表达水平显著升高。IgA1异常糖基化程度与AOPPs含量水平呈正相关。结论:川芎嗪可通过降低AOPPs含量,缓解IgA1异常糖基化,抑制其氧化损伤,对过敏性紫癜起治疗作用。

清热止血方联合雷公藤多苷治疗儿童紫癜性肾炎临床疗效及对Gd-IgA1影响的研究

目的观察清热止血方联合雷公藤多苷治疗儿童紫癜性肾炎临床疗效及对血清中IgA1异常糖基化的影响。方法选取河南中医药大学第一附属医院儿科肾脏病区2018年03月至2018年12月收治的HSPN患儿45例作为研究对象,采用随机分组,按照2∶1分为中医组30例,西医组15例。中医组给予清热止血方联合雷公藤多苷,西医组给予贝那普利联合双嘧达莫,疗程12周,随访观察临床疗效及检测血清中的IgA1异常糖基化水平。结果经治疗患儿尿蛋白及尿红细胞均下降,在治疗4周时中医组对尿蛋白及尿红细胞的治疗总有效率优于西医组,有统计学差异(P<0.05),对IgA1异常糖基化的下调优于西医组,有统计学差异(P<0.05),在治疗8周及12周,两组疗效无统计学差异(P>0.05),对IgA1异常糖基化调控无统计学差异(P>0.05)。结论清热止血方联合雷公藤多苷能降低儿童紫癜性肾炎血尿及蛋白尿的水平,起效时间早于西医组,其作用机制可能与降低IgA1异常糖基化水平相关。

紫癜性肾炎患儿血清IgA1通过系膜细胞-足细胞轴对足细胞增殖及TNF-α分泌的影响

目的观察过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患儿刺激系膜细胞-足细胞轴及直接刺激足细胞对细胞增殖及肿瘤坏死因子(TNF)-α分泌的影响,从而探讨在HSPN发病机制中IgA1引起足细胞损伤的作用机制。方法采用层析法获得HSPN患儿及健康儿童血清单聚体IgA1(mIgA1),并热聚合为聚合IgA1(aIgA1),分别采用HSPN患儿aIgA1与系膜细胞共培养上清(aIgA1-MES上清组)、HSPN患儿的aIgA1(HSPN组)及健康儿童的aIgA1(健康儿童组)刺激足细胞,三组均采用50、100、250μg/mL三种浓度的aIgA1;并设不含aIgA1的阴性对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测刺激24 h及48 h足细胞的增殖情况;收集培养48 h的细胞培养基上清,用酶聚免疫吸附测定(ELISA)法测定TNF-α的水平。对比分析不同浓度的aIgA1对细胞增殖和TNF-α分泌水平的影响。结果 24 h MTT结果显示,aIgA1-MES上清组刺激足细胞在aIgA1浓度为100、250μg/mL的aIgA1中OD值明显低于阴性对照组(P<0.05),HSPN组及健康儿童组aIgA1直接刺激足细胞不能对细胞增殖产生影响(P>0.05);48 h MTT结果显示,IgA1-MES上清组在三种aIgA1浓度下足细胞OD值明显低于阴性对照组(P<0.05),HSPN组及健康儿童组直接刺激足细胞不能对细胞增殖产生影响(P>0.05);三种aIgA1浓度的aIgA1-MES上清组刺激足细胞分泌TNF-α含量较阴性对照组明显升高(P<0.01),三种aIgA1浓度的HSPN组及健康儿童组TNF-α含量与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSPN患儿aIgA1不能直接刺激足细胞造成细胞损伤,而是通过系膜细胞-足细胞轴抑制足细胞的增殖,并诱导足细胞分泌TNF-α水平增加。

黏膜方对IgA肾病大鼠异常糖基化IgA1及肾间质纤维化的干预及机制研究

目的:研究血清和肾组织中的异常糖基化IgA1水平与IgA肾病的间质纤维化程度的相关性;阐明黏膜方治疗IgA肾病的作用机制。方法:采用口服牛血清白蛋白、四氯化碳皮下注射和尾静脉注射脂多糖免疫复合法建立IgA肾病大鼠模型,随机分为正常组、模型组、中药组(黏膜方)及西药组(福辛普利钠)、中西医结合组(黏膜方+福辛普利),观察治疗后各组血清和肾组织异常糖基化的IgA1水平、血清IgA-纤维连接蛋白(IgA-FN)、肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及其mRNA的表达量。结果:血清IgA-FN,中药组及中西医结合组低于模型组(P<0.001);血清异常糖基化IgA1量,中药组及西药组均低于模型组(P<0.05);肾组织中的异常糖基化IgA1水平,模型组高于正常组(P<0.05),各治疗组低于模型组(P<0.05);肾组织中TGF-β1mRNA及蛋白表达量模型组均显著高于正常组(P<0.01),各治疗组TGF-β1mRNA及蛋白表达均低于模型组(P<0.05);模型组α-SMAmRNA高于正常组(P<0.05),各治疗组低于模型组(P<0.001),模型组α-SMA蛋白表达阳性面积高于正常组(P<0.001),中西医结合组和西药组阳性面积低于模型组(P<0.05);肾组织α-SMAmRNA及蛋白表达与血清及肾组织中异常糖基化IgA1呈正相关(P<0.005);肾组织TGF-β1mRNA与血清及肾组织异常糖基化IgA1呈正相关(P<0.005)。结论:血清中异常糖基化IgA1与肾间质纤维化程度密切相关,黏膜方能减轻实验性IgAN大鼠血清及肾脏异常糖基化的IgA1水平,改善肾间质纤维化。

IgA肾病患者血清低糖基化IgA1水平的变化及其临床意义

目的 探讨IgA肾病患者血清低糖基化IgA1的程度与临床表现、肾脏病理及近期疗效间的关系。方法 用ELISA法对 68例IgA肾病及 2 0例肾病综合征肾小球微小病变 (MCD )患者血清IgA1糖基化程度进行检测 ,并经治疗后随访。 结果 IgA肾病患者蚕豆凝集素与血清IgA1的结合力明显高于对照组 (P <0 .0 2 5 )。IgA肾病患者中 2 0例低糖基化组和 48例正常糖基化组比较 ,前者发病年龄轻、血IgA浓度及肌酐清除率低于后者 (P值均 <0 .0 5 ) ,而病程、尿蛋白排泄量、总胆固醇水平、血压、肾小球病理分级和近期疗效比较差异无显著性 (P值均 >0 .0 5 )。结论 IgA肾病患者血清IgA1呈低糖基化 ,血清低糖基化程度重者发病年龄较轻 ,但肾功能损伤较重 。

从干预IgA1异常糖基化角度探讨中医“三焦”论治IgA肾病

IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是全球最常见的原发性肾小球疾病,高居我国原发性肾小球疾病的首位(43.5%)[1]。该病临床及病理表现多样,预后相差甚远,较轻者仅表现为无症状性的镜下血尿、蛋白尿,重者可表现为肾病综合征、急进性肾炎,其中约有36%患者在20年内发展为终末期肾脏病(end-stage renal disease,ESRD)[2]。IgAN特征性表现为IgA或IgA为主的免疫复合物呈团块状或颗粒状弥漫性沉积在肾小球系膜区,进而引起肾损伤,IgA1分子糖基化的异常及后续免疫反应是IgAN病理机制的关键[3]。自1980年肾脏病理学传入中国后,中医学家也开始了针对IgAN深入研究并逐渐形成体系[4],在百家争鸣中从“三焦”论治IgA肾病为中医名家所推崇[5]。对比研究发现中西医在IgA肾病机制和治疗认识上有异曲同工、相辅相成之妙。现从IgA1异常糖基化机制和其干预角度,探讨中医药“三焦”论治IgA肾病的研究进展。

IgA肾病异常糖基化IgA1分子的研究现状

IgA肾病是最常见的原发性肾小球疾病。研究表明沉积于肾小球系膜区的IgA主要为IgA1,IgA1分子的异常糖基化是导致IgA肾病发病的关键因素。糖基化酶缺乏、基因突变、免疫紊乱都可能导致IgA1异常糖基化的发生。异常糖基化IgA1分子可通过自我聚集或形成免疫复合物沉积于系膜区,进而刺激系膜细胞增殖、分泌系膜基质、细胞因子、趋化因子、生长因子等,导致肾小球炎性反应。对IgA1异常糖基化的深入研究有助于了解IgA肾病的发病机制并提供新的诊断与治疗方法。

血清sST、IgA1与T细胞亚群联合检测在HSP患儿诊断中的价值

目的探讨血清可溶性ST2(sST)、免疫球蛋白1(IgA1)与T细胞亚群联合检测在过敏性紫癜(HSP)患儿诊断中的价值。方法随机选择2015年1月-2018年1月在本院就诊的HSP患儿110例,同时选择同期在本院体检的健康儿童80例,空腹抽取所有儿童的肘部静脉血5ml,检测血清sST、IgA1水平与T细胞亚群。结果观察组患儿的CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+低于健康儿童,CD8^+高于健康儿童,差异有统计学意义(P<0.05);观察组儿童的IgA1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-33(IL-33)水平显著高于健康儿童,白介素-21(IL-21)水平显著低于健康儿童,差异有统计学意义(P<0.05),免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、补体C3、补体C4水平与健康儿童无差异(P>0.05),观察组儿童的sST2水平显著高于健康儿童,差异有统计学意义(P<0.05),相关性分析表明:CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+、IgA1、sST2/IL-33与HSP的发生有关。以CD4^+/CD8^+、IgA1、sST2/IL-33为自变量,以是否为HSP为因变量,进行非条件Logistic回归分析,结果表明T细胞亚群、IgA1、sST2/IL-33是HSP的独立危险因素(P<0.05),ROC曲线显示:CD4^+/CD8^+、IgA1、sST2/IL-33单独检测的曲线下面积为0.789、0.763、0.775,联合检测的曲线下面积为0.907,联合检测的敏感度为89.49%,显著高于单独检测。结论sST2/IL-33、IgA1与T细胞亚群在诊断HSP患儿中有重要价值,联合检测可提高敏感性,诊断率,在临床上可广泛使用。

IgA肾病患者血清aIgA1对系膜细胞增殖的影响

目的观察IgA肾病(IgAN)患者与正常人的血清热聚合IgA1(aIgA1)对系膜细胞(MC)增殖的影响。方法收集原发性IgAN患者及健康人的血清标本,利用Jacalin-agarose亲和层析联合SephacrylS-200HR分子筛层析法分离获得血清单体IgA1(mIgA1),将mIgA1热聚合为aIgA1。利用患者及正常人的aIgA1分别刺激小鼠MSC-1097系膜细胞株,利用MTT法检测aIgA1对系膜细胞增殖的影响。结果aIgA1刺激48h组的吸光度是24h组的1.59倍(P=0.000)。不同浓度aIgA1刺激组间MTT吸光度的差异有统计学意义(P=0.000),相比于阴性对照组(SFM),0.25mg/mL组、0.5mg/mL组、1mg/mL组的吸光度分别为SFM的1.67、1.74、1.77倍(P=0.000);2mg/mL组的吸光度是SFM的1.15倍(P=0.086)。在刺激24h时患者0.25mg/mL组的aIgA1就可促进系膜细胞增殖了,其吸光度是SFM的1.34倍(P<0.05),而正常对照组则要在浓度达到1mg/mL时才引起系膜细胞增殖,其吸光度为SFM的1.33倍(P<0.05)。结论研究结果提示患者及正常人的aIgA1均可促进系膜细胞增殖,这种增殖表现为时间依赖性及一定的剂量依赖性,在高浓度时aIgA1促系膜细胞增殖的作用消失了;患者的aIgA1可能更易与系膜细胞结合,刺激相同时间时患者低浓度aIgA1既可引起MC增殖。

过敏性紫癜肾炎患儿IgA1异常糖基化的研究

目的探讨过敏性紫癜肾炎患儿血清中是否存在IgA1的异常糖基化。方法对20例健康患儿(对照组)和20例过敏性紫癜肾炎患儿(过敏性紫癜肾炎组),分别进行蚕豆凝集素(VVL)亲和ELIsA检测,观察VVL与血清IgA1的结合力,间接反映血清IgA1糖基化程度,结合力增高说明IgA1存在异常糖基化。结果过敏性紫癜性肾炎组异常糖基化的IgA1为(0.35±0.06)U,对照组异常糖基化的IgA1为(0.12±0.07)U,过敏性紫癜性肾炎组异常糖基化的I-gA1明显高于正常组(t=3.658,P<0.05)。结论过敏性紫癜性肾炎患儿存在异常IgA1糖基化。

过敏性紫癜患儿IgA1异常糖基化水平变化的意义

目的探讨IgA1异常糖基化在不同临床表现的过敏性紫癜患儿的表达水平及临床意义。方法根据临床症状将66例过敏性紫癜患儿分为单纯紫癜组(n=18)、紫癜+有关节症状组(n=16)、紫癜+有消化道症状组(n=12)、紫癜性肾炎组(n=20),以同期健康儿童为健康对照组(n=20)。以蚕豆凝集素(VVL)亲和ELISA检测血清IgA1糖基化程度,采用免疫比浊法检测血清IgA水平。结果单纯紫癜组、紫癜+有关节症状组、紫癜+有消化道症状组、紫癜性肾炎组和健康对照组异常糖基化的IgA1水平分别为(0.21±0.07)、(0.23±0.04)、(0.27±0.03)、(0.35±0.06)和(0.12±0.07)U,紫癜性肾炎组与单纯紫癜组比较差异有统计学意义(P<0.05),而与其他组别比较差异无统计学意义(P>0.05)。过敏性紫癜患儿IgA明显升高,且以IgA1升高为主,各组IgA、IgA1比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论过敏性紫癜患儿IgA明显升高,且以IgA1升高为主,过敏性紫癜患儿发生肾脏损害可能与IgA1的异常糖基化有关。

紫癜性肾炎患儿血清IgA1水平的测定与分析

目的通过测定并比较紫癜性肾炎（HSPN）患儿及健康儿童血清IgA1水平，探讨IgA1对HSPN发病的影响。方法收集2013年5-12月河南中医学院第一附属医院儿科住院的HSPN患儿40例（HSPN组）及20名健康儿童（对照组）献血者血清，采用免疫比浊法测定HSPN患儿及健康儿童血清IgA的浓度：通过Jacalin亲和层析法分离、纯化血清，得到Jacalin结合蛋白，测定两组血清总IgA1浓度；Jacalin结合蛋白通过分子筛层析法分离，测定两组单聚体IgA1（mIgA1）及多聚体IgA1（pIgA1）的浓度。结果HSPN组及对照组血清IgA水平比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；HSPN组血清总IgA1、mIgA1及pIgA1水平均高于对照组，差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论HSPN患儿血清IgA水平升高不明显，血清中mlgA1及pIgA1水平明显升高．提示IgA1在HSPN的发病中起一定作用。

生地黄提取物对过敏性紫癜模型小鼠血清IgA1诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察和评价分析生地黄提取物对过敏性紫癜模型小鼠血清免疫球蛋白A1(IgA1)诱导血管内皮细胞损伤的保护作用。方法将SPF级小鼠40只随机分为对照组、模型组、西咪替丁组和生地黄提取物组,各10只。建模后西咪替丁组每日固定时间灌胃西咪替丁配制为浓度0.1 g/mL的溶液,生地黄提取物组每日固定时间灌胃浓度0.1 g/mL生地黄提取物的溶液,模型组及对照组则灌胃等量生理盐水。采用蚕豆凝集素亲和ELISA检测Ig A1异常糖基化程度,紫外分光光度法检测血清丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)及髓过氧化物酶(MPO)活力。用ELISA法检测血清中IL-8和TNF-α水平;用RT-PCR和Western blot法检测NF-κB和Fractalkine mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠IgA1异常糖基化程度、血清MDA、MPO含量水平显著升高,T-AOC与SOD表达水平显著下降,差异均具有统计学意义(P均<0.05);与模型组比较,西咪替丁组和生地黄提取物组小鼠Ig A1异常糖基化程度、血清MDA与MPO含量水平显著降低,T-AOC与SOD表达水平显著升高,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。与西咪替丁组相比,生地黄提取物组小鼠Ig A1异常糖基化程度、血清MDA与MPO含量水平降低更显著,T-AOC与SOD表达水平升高更显著,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。与对照组比较,模型组IL-8和TNF-α表达水平均明显升高(P<0.05);生地黄提取物组的IL-8和TNF-α表达水平较模型组明显降低(P<0.05)。RT-PCR和Western blot法检测结果显示,模型组NF-κB、Fractalkine mRNA和蛋白表达水平明显升高;生地黄提取物组NF-κB、Fractalkine mRNA和蛋白水平较模型组明显下降差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论生地黄提取物缓解Ig A1异常糖基化,抑制其氧化损伤,能抑制NF-κB的高表达,降低IL-8和TNF-α,进而缓解血管损伤发生,对过敏性紫癜起治疗作用。