姜黄素阻断NF-κB信号通路促进食管鳞癌细胞凋亡的体外研究

背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。但在食管鳞癌中的作用尚不清楚。姜黄素具有抗感染、抗氧化等多种药理作用。本研究将探讨姜黄素是否能够通过阻断NF-κB信号通路对食管鳞癌细胞增殖、抗凋亡产生影响。方法:Western blot法检测EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素(50μmol/L)培养不同时间后,pIκBα和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。在EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素培养72h,流式细胞仪检测凋亡细胞情况。MTT法检测姜黄素单独或与5-FU联合对细胞增殖的影响。结果:Western blot的结果显示,在姜黄素作用下EC9706和Eca109细胞中pIκBα和Bcl-2蛋白的表达水平随着时间的延长逐渐下降。在单独使用姜黄素后,就可促进EC9706和Eca109细胞的凋亡(P<0.05);当与5-FU联合使用时,可明显提高EC9706和Eca109细胞对化疗药物的敏感性,凋亡细胞显著增加(P<0.05)。姜黄素与5-FU联合应用48h和72h,可明显抑制EC9706和Eca109细胞的增殖,与单独使用姜黄素或5-FU组相比,细胞存活率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素可以通过抑制IκBα的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加细胞对5-FU的敏感性。

姜黄素通过下调IκBα磷酸化抑制食管鳞癌细胞的体外增殖

目的探讨姜黄素是否能够通过下调IκBα的磷酸化而抑制食管鳞癌细胞的增殖并对其细胞周期产生影响。方法 MTT法检测姜黄素作用下食管鳞癌细胞的增殖;Western blot法检测EC9706和Eca109细胞在姜黄素作用下pIκBα和细胞周期蛋白cyclin D1的表达情况。两种细胞中加入姜黄素培养72 h,或联合5-FU培养72 h,流式细胞仪检测细胞周期。结果 EC9706和Eca109细胞的存活率均随着姜黄素浓度的增加逐渐下降;姜黄素作用下EC9706和Eca109细胞中pIκBα和cyclin D1蛋白的表达水平随着时间的延长逐渐下降,且G0/G1期的细胞开始增加,S期的细胞逐渐减少;当姜黄素联合使用5-FU时,G0/G1期的细胞明显增加,S期的细胞明显减少。结论 姜黄素通过下调IκBα及cyclin D1的表达而抑制食管鳞癌细胞的增殖,或许有望成为食管癌治疗中的一个辅助用药。

姜黄素与p65siRNA促进食管鳞癌细胞凋亡的比较研究

背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路在多种肿瘤的发生、发展中起着重要的作用,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关基因的表达。目前其在食管鳞癌中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨p65siRNA和姜黄素能否通过阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞的凋亡及增强对化疗药的敏感性,并将两种方法加以比较。方法:Western blot检测p65siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中p65蛋白的表达;EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素(50μmol/L)后检测pIκBα蛋白的表达。转染p65siRNA的食管鳞癌细胞,单独或联合使用氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)治疗72 h;EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素培养72 h,或联合使用姜黄素和5-FU培养72 h,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。显微镜下观察各组食管鳞癌细胞形态学特性的改变。结果:Western blot结果显示,转染p65siRNA的EC9706和Eca109细胞中,p65蛋白的表达水平下调,而非靶向蛋白MAPK的表达无影响;姜黄素组中,EC9706和Eca109细胞中pIκBα蛋白的表达水平随着姜黄素作用时间的延长逐渐下降。将siRNA转染组与姜黄素组所引起的食管鳞癌细胞的凋亡及联合应用化疗药所引起的细胞凋亡加以比较,结果发现,与siRNA转染组相比,单独使用姜黄素可引起细胞凋亡数增加(P<0.05);但姜黄素与5-FU联合应用时,可明显提高肿瘤细胞对化疗药的敏感性,凋亡和坏死的细胞均显著增加(P<0.05)。结论:p65siRNA和姜黄素都可以通过阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞的凋亡及增强对5-FU的敏感性;RNA干扰虽特异,但用于临床还需要一段时间。姜黄素不良反应小,有望成为治疗食管癌的辅助用药。