加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症气虚证临床研究

目的:观察加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症(ITP)的疗效,探讨中药复方制剂对ITP患者Treg/Th17免疫紊乱调控的有效干预机制。方法:将符合标准的60例慢性ITP患者随机分为中药组和激素组各30例,中药组予加味归脾合剂治疗,激素组予泼尼松治疗,记录治疗前后ITP患者血清中细胞因子Treg细胞、Th17细胞以及Treg/Th17比值,Foxp3mRNA、RORγt mRNA、Foxp3/RORγt比值检测结果及外周血血小板计数。结果 :(1)血小板计数:中药组和激素组治疗后均有所上升,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Treg/Th17:中药组与激素组治疗前与正常对照组比较,Treg细胞、Th17细胞、Treg/Th17比值、Foxp3mRNA、RORγt mRNA表达、Foxp3/Ro Rγt比值差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后中药组Treg细胞表达与Treg/Th17比值、Foxp3mRNA表达、Foxp3/Ro Rγt比值检测均高于激素组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);Th17和RORγtmRNA表达,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:加味归脾合剂可有效提升血小板计数及Treg细胞、Treg/Th17比值、Foxp3mRNA、Foxp3/Ro RγT比值,其上调Treg细胞及Foxp3mRNA表达,从而改善Treg/Th17免疫功能紊乱,健脾益气统血是治疗ITP气虚证的主要机制之一。

B淋巴细胞特异单克隆鼠白血病病毒整合位点基因-1及辅助性T淋巴细胞相关细胞因子在儿童免疫性血小板减少症中的变化

目的通过检测新诊断免疫性血小板减少症（ITP）患儿B淋巴细胞特异单克隆鼠白血病病毒整合位点基因-1（Bmi-1）及辅助性T淋巴细胞相关因子1干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）mRNA的表达变化，分析探讨Bmi-1及Th1／Th2细胞比例在新诊断ITP患儿中的变化及意义。方法试验组36例ITP患儿均来源于新乡医学院第一附属医院儿科2013年4至12月住院和门诊患儿，同期小儿外科择期手术患儿26例作为对照组，采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测外周血淋巴细胞中Bmi-1、TFN-γ、IL-4mRNA的表达；并采用t检验和直线相关分析进行分析比较。结果1．试验组外周血淋巴细胞中Bmi-1 mRNA为2．63±0．54，对照组Bmi-1 mRNA为3．91±0．92，试验组明显低于对照组（P〈0．001）；试验组IFN-γmRNA为3．84±0．43，对照组IFN-γmRNA为2．88±0．57，试验组明显高于对照组（P〈0．001）；试验组IL-4mRNA为1．444-0．39，对照组IL4mRNA为1．874-0．34，试验组明显低于对照组（P〈0．001）。2．试验组外周血淋巴细胞中IFN-γmRNA表达与IL-4mRNA表达呈负相关（r=一0．667，P〈0．001），IL-4mRNA表达与Bmi-1mRNA表达呈正相关（r=0．776，P〈0．001），IFN-γmRNA表达与Bmi-1mRNA表达无相关性（r=一0．206，P〉0．05）。结论Bmi-1可能通过调节Th细胞参与ITP发病；ITP患儿存在Th细胞功能紊乱、Th1／Th2比例失调，可能是Th1优势。

药物(奎宁)依赖性血小板抗体检测技术的建立及国际合作评估

目的建立药物(奎宁)依赖性血小板抗体检测的技术并组织国际实验室进行评估。方法建立药物依赖性抗体流式细胞术及药物依赖性抗体血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术,向各参与的实验室提供检测方案,奎宁依赖性血小板抗体血清、血小板糖蛋白单克隆抗体、阴性对照及药物奎宁,各实验室按照给定的方案对样本进行检测,对结果做统计比较。结果参加评估实验室对3个评估样本检测的准确率:药物依赖性抗体流式细胞术分别为91.67%,100%,91.67%;药物依赖性抗体血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术均为100%。所建立的2种检测技术,经国际23家实验室评估,获得良好的灵敏度和特异性。结论该技术可应用于药物诱导免疫性血小板减少症的实验室诊断。