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The Application of Quantum Dots Double-Labeling Immunofluorescence Technology in Detection of PR and CD146 in Paraffin-Embedded Tissue Sections of Endometrioid Adenocarcinoma
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作者 Jianping Zheng Qing Huang +3 位作者 Lei Zhang Yong Chen Jinpeng Jiang Cunjian Yi 《Yangtze Medicine》 2017年第1期1-7,共7页
Objective: The aim was to detect the expression of PR and CD146 in paraf-fin-embedded tissue sections of endometrioid adenocarcinoma by using QDs double-labeling immunofluorescence, and evaluate the applied value of Q... Objective: The aim was to detect the expression of PR and CD146 in paraf-fin-embedded tissue sections of endometrioid adenocarcinoma by using QDs double-labeling immunofluorescence, and evaluate the applied value of QDs double-labeling immunofluorescence in endometrioid adenocarcinoma. Methods: To detect the expression of PR and CD146 on 140 cases of paraffin-embedded tissue sections of endometrioid adenocarcinoma by using QDS double-labeling immunofluorescence. Results: The co-expression of PR and CD146 in the endometrioid adenocarcinoma can be detected by QDs double-labeling immunofluorescence, and there was no correlation between them (P > 0.05). Conclusion: QDs double-labeling immunofluorescence can detect the localization and co-expression of PR and CD146 in the endometrioid adenocarcinoma. 展开更多
关键词 ENDOMETRIOID Adenocarcinoma PR CD146 QDs double-labeling immunofluorescence
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Seropositivity rates of water channel protein 4 antibodies compared between a cell-based immunofluorescence assay and an enzyme-linked immunosorbent assay in neuromyelitis optica patients 被引量:2
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作者 Xiaoli Wu Zhangyuan Liao +3 位作者 Jing Ye Huiqing Dong ChaodongWang Piu Chan 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第32期2490-2494,共5页
A total of 66 samples (from 27 cases with neuromyelitis optica, 26 cases with multiple sclerosis, aa 13 cases with optic neuritis) were tested for aquaporin-4 antibody by a cell-based immunofluorescence assay and an... A total of 66 samples (from 27 cases with neuromyelitis optica, 26 cases with multiple sclerosis, aa 13 cases with optic neuritis) were tested for aquaporin-4 antibody by a cell-based immunofluorescence assay and an enzyme-linked immunosorbent assay. The sensitivities and specificities of the two assays were similar. We further analyzed an additional 68 patients and 93 healthy controls using the enzyme-linked immunosorbent assay. A Kappa test showed good consistency between the two methods in terms of detection of anti-aquaporin-4 antibody in the se of neuromyelitis optica patients. No significant correlations were identified with onset age or disea duration, suggesting that aquaporin-4 antibody is a good marker for neuromyelitis optica. The enzyme-linked immunosorbent assay can be used for quantifying aquaporin-4 antibody concentrations and may be useful to dynamically monitor changes in the levels of aquaporin-4 antibody during disease duration. 展开更多
关键词 neuromyelitis optica cell-based immunofluorescence assay anti-aquaporin 4 antibody enzyme-linked immunosorbent assay long and extended spinal cord lesions neural regeneration
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Determination of anti-endomysium IgA antibodies in the diagnosis of celiac disease:Comparison of a novel ELISA-based assay with conventional immunofluorescence 被引量:1
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作者 Dennis CW Poland Huib Ceelie +1 位作者 Rob B Dinkelaar Cornelis Beijer 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第17期2779-2780,共2页
瞄准:评估新奇 anti-endomysium (anti-EMA ) 察觉基于 ELISA。方法:Anti-EMA IgA 被新奇 ELISA 与胃肠的症状在 196 个病人测量并且怀疑了吸收不良。数据与获得由的那些相比常规如果测试。结果:98% 的一个好词语索引在这二试金之间... 瞄准:评估新奇 anti-endomysium (anti-EMA ) 察觉基于 ELISA。方法:Anti-EMA IgA 被新奇 ELISA 与胃肠的症状在 196 个病人测量并且怀疑了吸收不良。数据与获得由的那些相比常规如果测试。结果:98% 的一个好词语索引在这二试金之间被发现。在重量的单位一 of 161 病人(82%) 两个而,试金测试了 negative 在重量的单位一 of 31 病人(16%) 两个为 anti-EMA 抗体的存在积极的测试的试金。在 EMA-ELISA 和 EMA-immunofluorescence 之间的差异(如果) 在仅仅 4 个病人(2%) 被发现。结论:如果,这 ELISA 能代替为 anti-EMA 抗体的察觉并且向临床医生提供一个优秀工具与胃肠的抱怨在病人为乳糜泻屏蔽。 展开更多
关键词 肌内膜 IGA抗体 腹腔疾病 免疫荧光
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Immunofluorescence on paraffin embedded renal biopsies:Experience of a tertiary care center with review of literature 被引量:3
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作者 Geetika Singh Lavleen Singh +2 位作者 Ranajoy Ghosh Devajit Nath Amit Kumar Dinda 《World Journal of Nephrology》 2016年第5期461-470,共10页
AIM To describe the technique of immunofluorescence on paraffin embedded tissue sections and discuss the potential pitfalls with an in depth review of literature.METHODS Immunofluorescence is integral to diagnostic re... AIM To describe the technique of immunofluorescence on paraffin embedded tissue sections and discuss the potential pitfalls with an in depth review of literature.METHODS Immunofluorescence is integral to diagnostic renal pathology. Immunofluorescence on paraffin embedded renal biopsies(IF-P) after enzyme treatment has been described in literature, however has not found widespread use in renal pathology laboratories. In our laboratory proteinase K digestion of paraffin embedded renal biopsy material was standardized and applied prospectively in cases where immunofluorescence on fresh frozen tissue was non contributory or not possible. Diagnostic utility was assessed and in a cohort of cases comparison of intensity of staining with routine immunofluorescence was performed. RESULTS Over the 5-year study period, of the 3141 renal biopsies received IF-P was performed on 246 cases(7.7%) and was interpretable with optimal digestion in 214 cases(6.8%). It was of diagnostic utility in the majority of cases, which predominantly included glomerular disease. Nondiagnostic IF-P was found in membranous nephropathy(2 of 11 cases), membranoproliferative glomerulonephritis(2 of 32 cases), lupus nephritis(1 of 25 cases), post infectious glomerulonephritis(1 of 11 cases) and chronic glomerulonephritis(3 of 8 cases). Comparing cases with both routine IF and IF-P, 35 of 37 showed either equal intensity or a minor difference in intensity of staining(1+) for the diagnostic immunoglobulin/complement. Technically assessment of immunofluorescence on the paraffin embedded tissue was found to be easier with clearly observed morphology, however a false positive staining pattern was observed in under-digested tissue. CONCLUSION As a "salvage" technique, immunofluorescence on paraffin embedded renal biopsies is of great diagnostic utility, however not without pitfalls. 展开更多
关键词 肾脏 病理学 肾病 治疗方法
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Comparison of indirect immunofluorescence and western blot method in the diagnosis of hantavirus infections
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作者 Tatjana Vilibic-Cavlek Ljubo Barbic +4 位作者 Vladimir Stevanovic Vladimir Savic Anna Mrzljak Maja Bogdanic Irena Tabain 《World Journal of Methodology》 2021年第6期294-301,共8页
BACKGROUND Serologic cross-reactivity between hantaviruses often complicates the interpretation of the results.AIM To analyze the diagnostic value of indirect immunofluorescence assay(IFA)and western blot(WB)in the di... BACKGROUND Serologic cross-reactivity between hantaviruses often complicates the interpretation of the results.AIM To analyze the diagnostic value of indirect immunofluorescence assay(IFA)and western blot(WB)in the diagnosis of hantavirus infections.METHODS One hundred eighty-eight serum samples from Puumala(PUUV)and Dobrava(DOBV)orthohantavirus infected patients were analyzed.Serology was performed using commercial tests(Euroimmun,Lübeck,Germany).RESULTS Using IFA,49.5%of acute-phase samples showed a monotypic response to PUUV,while 50.5% cross-reacted with other hantaviruses.The overall cross-reactivity was higher for immunoglobulin G(IgG)(50.0%)than for immunoglobulin M(IgM)(25.5%).PUUV IgM/IgG antibodies showed low/moderate reactivity with orthohantaviruses Hantaan(12.3%/31.5%),Seoul(7.5%/17.8%),DOBV(5.4%/28.1%),and Saaremaa(4.8%/15.7%).Both DOBV IgM and IgG antibodies were broadly reactive with Hantaan(76.2%/95.2%),Saaremaa(80.9%/83.3%),and Seoul(78.6%/85.7%)and moderate with PUUV(28.5%/38.1%).Using a WB,serotyping was successful in most cross-reactive samples(89.5%).CONCLUSION The presented results indicate that WB is more specific than IFA in the diagnosis of hantavirus infections,confirming serotype in most IFA cross-reactive samples. 展开更多
关键词 HANTAVIRUSES SEROLOGY CROSS-REACTIVITY Indirect immunofluorescence Western blot
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COMPARISON BETWEEN IMMUNOFLUORESCENCE AND PCR IN DETECTING HUMAN PAPILLOMA VIRUS IN CONDYLOMA ACUMINATA
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作者 Fang Liu Jia-bi Wang +2 位作者 Yue-hua Liu Ya-gang Zuo Xiao-hong Man 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2006年第2期125-127,共3页
Objective To compare the effectiveness of immunofluorescence and polymerase chain reaction (PCR) in detecting human papilloma virus (HPV) in condyloma acuminata (CA). Methods HPVs in CA tissues from 60 patients were d... Objective To compare the effectiveness of immunofluorescence and polymerase chain reaction (PCR) in detecting human papilloma virus (HPV) in condyloma acuminata (CA). Methods HPVs in CA tissues from 60 patients were detected by immunofluorescence and PCR, respectively. Different subtypes of HPVs were also identified with restriction fragment length polymorphism (RFLP). Results The positive detective rates of immunofluorescence and PCR were 56.67% (34/60) and 96.67% (58/60), respectively (P<0.01). RFLP results showed HPV6 and HPV11 were the main subtypes in the detected virus, which accounted for 98.28%. Conclusion The sensibility of PCR is superior to that of immunofluorescence. 展开更多
关键词 荧光免疫PCR 乳头状瘤病毒 湿疣 病毒感染
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真菌病毒Beauveria bassiana chrysovirus 2(BbCV2)外壳蛋白多克隆抗体制备及应用
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作者 路杨 郭文博 +4 位作者 隋丽 张庆贺 赵宇 张正坤 李启云 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期583-591,共9页
球孢白僵菌Beauveriabassiana是一种在害虫生物防治中应用广泛的虫生真菌,真菌病毒能够影响球孢白僵菌的致病力和生物学性状,但真菌病毒相关蛋白的抗体制备和利用其进行病毒检测和定位鲜有报道。本研究原核表达了一株普遍流行并且造成... 球孢白僵菌Beauveriabassiana是一种在害虫生物防治中应用广泛的虫生真菌,真菌病毒能够影响球孢白僵菌的致病力和生物学性状,但真菌病毒相关蛋白的抗体制备和利用其进行病毒检测和定位鲜有报道。本研究原核表达了一株普遍流行并且造成寄主球孢白僵菌毒力下降的双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)病毒Beauveria bassiana chrysovirus 2(Bb CV2)的外壳蛋白(Coat protein,CP),并制备了多克隆抗体,进行了病毒在寄主球孢白僵菌胞内和胞外的检测,以及利用间接免疫荧光进行病毒在寄主内的定位。结果表明,表达的BbCV2-CP蛋白主要以包涵体的形式存在,相对分子质量约为85.7kD;经间接ELISA方法测定,制备的BbCV2-CP兔源多抗效价达到1:8192000;Westernblot结果显示,制备的BbCV2兔源多抗能与抗原蛋白进行特异性结合,且能检测出感染寄主球孢白僵菌的BbCV2;ELISA测定结果表明病毒BbCV2可在寄主真菌体内复制,并能够游离到寄主体外;经间接免疫荧光观察,发现BbCV2病毒定位于真菌细胞核中。本研究建立了球孢白僵菌真菌病毒的血清学检测体系,为球孢白僵菌-真菌病毒互作机制研究提供材料。 展开更多
关键词 球孢白僵菌 真菌病毒BbCV2 多克隆抗体 免疫荧光 亚细胞定位
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果胶酶对灵武长枣果实发育中阿拉伯半乳糖蛋白分布的影响
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作者 王静 章英才 +1 位作者 陶珊珊 杨雪 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期62-74,共13页
以3种不同浓度的果胶酶处理灵武长枣(Ziziphus jujuba‘Lingwu Changzao’)4个不同发育时期的果实,采用免疫细胞化学技术,在细胞水平上对果实阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)表位进行原位分析,探讨果胶酶对其不同发育时期的果实中AGPs分布的影响... 以3种不同浓度的果胶酶处理灵武长枣(Ziziphus jujuba‘Lingwu Changzao’)4个不同发育时期的果实,采用免疫细胞化学技术,在细胞水平上对果实阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)表位进行原位分析,探讨果胶酶对其不同发育时期的果实中AGPs分布的影响,为明确果胶酶对果实成熟软化的影响提供解剖学依据。结果表明:JIM13、JIM8和MAC204抗体所标记的抗原荧光强弱在各时期果实的不同组织存在一定的差异。当果肉组织用较低浓度的果胶酶0.028 U·mL^(-1)(E1)处理,果皮组织结构没有明显的变化,果皮及内部薄壁细胞细胞壁表面和细胞间隙中的AGPs抗原表位减少;0.056 U·mL^(-1)(E2)和0.084 U·mL^(-1)(E3)浓度果胶酶处理的果实,果实组织细胞壁解体程度增加,果皮及内部薄壁细胞细胞壁中AGPs抗原表位检测量逐渐降低,果胶酶浓度的增加导致AGPs在果实所有表位排列的更大影响和较低的荧光信号。经果胶酶最高浓度0.084 U·mL^(-1)(E3)处理后,Calcofluor White染色显示细胞壁区域荧光也不同程度减弱或降低,AGPs分布的紊乱和抗原表位的缺失与细胞中纤维素组装的变化有关。比较分析表明,不同发育时期的果实AGPs碳水化合物的分布不同,这与组织结构的变化有关;果胶酶作用下AGPs聚糖链的缺失导致细胞壁组分之间的相关性建立和细胞壁结构的重塑受阻,诱导了整个细胞壁结构的改变,影响了果实的成熟。 展开更多
关键词 果胶酶 灵武长枣 果实 阿拉伯半乳糖蛋白 免疫荧光定位
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New highly specific anti-BnASY polyclonal antibody prepara-tion and application in immunofluorescence assay
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作者 Keqi Li Rong Yuan +3 位作者 Xiaohong Yan Xinhua Zeng Ruixing Guo Gang Wu 《Oil Crop Science》 2016年第4期58-64,共7页
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不同途径感染禽网状内皮组织增殖病病毒的动态监测
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作者 徐凤霞 孙万里 +3 位作者 张亚文 常爽 王一新 赵鹏 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期11-17,共7页
为明确鸡群经不同途径感染禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)的排毒动态,本试验通过设立无特定病原体(SPF)鸡胚6胚龄卵黄囊感染组、1日龄SPF鸡腹腔感染组以及对上述两组SPF鸡分别加入感染鸡的卵黄囊感染同居组和腹腔感染同居组,建立SPF鸡感... 为明确鸡群经不同途径感染禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)的排毒动态,本试验通过设立无特定病原体(SPF)鸡胚6胚龄卵黄囊感染组、1日龄SPF鸡腹腔感染组以及对上述两组SPF鸡分别加入感染鸡的卵黄囊感染同居组和腹腔感染同居组,建立SPF鸡感染REV模型,同时设置空白对照组,在不同日龄记录各组鸡的体重和死亡情况,并综合运用反转录PCR(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和间接免疫荧光试验(IFA)3种检测方法对各感染组进行REV的动态监测。结果显示:(1)与空白对照组相比,腹腔感染组和卵黄囊感染组SPF鸡体重增长在感染后第21~70天均受到显著抑制(P<0.05),卵黄囊感染组SPF鸡的死亡率在感染后第49和63天显著升高(P<0.05),腹腔感染组SPF鸡的死亡率在感染后第42天显著升高(P<0.05),卵黄囊感染组SPF鸡血浆中REV病毒载量在感染后第21天显著高于腹腔感染组(P<0.05);(2)卵黄囊感染组SPF鸡自出壳即可检测到病毒血症阳性,并在感染后第21天时达到排毒高峰,腹腔感染组SPF鸡在感染后第14天时达到排毒高峰;(3)卵黄囊感染同居组的10只SPF鸡在感染后第7天时即检测到2只鸡呈病毒血症阳性,腹腔感染同居组SPF鸡在感染后第21天时检测到1只鸡呈阳性;(4)3种检测方法中,RT-qPCR和IFA检出REV效果更好。本试验通过分析不同途径感染REV后鸡群血浆中的带毒状态,为REV感染的科学防控和净化提供参考数据。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增殖病病毒(REV) 排毒规律 反转录PCR(RT-PCR) 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) 间接免疫荧光试验(IFA)
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免疫荧光技术在近视相关生物标志物检测中的应用进展
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作者 赵宇辉 毕宏生 +3 位作者 孙华跃 李文慧 田庆梅 卢秀珍 《中国医药导报》 CAS 2024年第8期36-39,共4页
免疫荧光(IF)技术亦称荧光抗体技术,是通过结合荧光团标记的特定抗原或抗体在紫外线发出荧光来实现的一种示踪技术。IF具有极高的灵敏度和信号放大能力,被广泛应用于细菌病毒和寄生虫的鉴别诊断、部分疾病免疫学机制的研究、器官移植的... 免疫荧光(IF)技术亦称荧光抗体技术,是通过结合荧光团标记的特定抗原或抗体在紫外线发出荧光来实现的一种示踪技术。IF具有极高的灵敏度和信号放大能力,被广泛应用于细菌病毒和寄生虫的鉴别诊断、部分疾病免疫学机制的研究、器官移植的鉴定、抗原组织定位等方面。近视作为一种屈光不正性疾病,严重影响着人们的视力健康,IF在近视机制及治疗措施的研究中发挥了重要作用。本文就近年来IF在近视相关生物标志物检测中的应用进展进行综述。 展开更多
关键词 免疫荧光 免疫荧光染色 荧光抗体 近视 眼科学 免疫学
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毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX的原核表达与分析
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作者 彭月梅 叶状 +7 位作者 汪飞燕 王礼跃 冯永翠 王乐乐 候照峰 许金俊 陶建平 刘丹丹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期846-853,共8页
旨在研究毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX的反应原性及其在虫体内的亚细胞定位。提取毒害艾美耳球虫(扬州株)配子体总RNA,RT-PCR扩增En GPX的ORF编码序列,构建原核表达质粒pET-28a(+)-En GPX,转化至BL21(DE3)进行体外诱导表达,... 旨在研究毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX的反应原性及其在虫体内的亚细胞定位。提取毒害艾美耳球虫(扬州株)配子体总RNA,RT-PCR扩增En GPX的ORF编码序列,构建原核表达质粒pET-28a(+)-En GPX,转化至BL21(DE3)进行体外诱导表达,同时制备鼠抗rEnGPX多克隆抗体,对重组蛋白进行Western blot反应原性分析和激光共聚焦免疫荧光定位分析。结果表明,En GPX ORF序列全长753 bp,编码250个氨基酸,体外重组表达蛋白大小约30 ku,主要以包涵体形式存在。该重组蛋白能被6×HIS标签单克隆抗体,鼠抗rEnGPX多克隆抗体,毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫病鸡康复血清所识别,表明其具有较好的反应原性和交叉反应原性。在天然配子体蛋白中检测出EnGPX,其编码蛋白主要分布于配子体内的Ⅱ型成壁体(WFBII)及卵囊壁上。本研究成功克隆表达了毒害艾美耳球虫谷胱甘肽过氧化物酶EnGPX,验证其具有良好的反应原性,并定位于配子体及卵囊壁上。以期为研究En GPX参与卵囊壁形成的分子机制提供新的线索,也为研制新型球虫亚单位疫苗提供新的靶标。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 EnGPX 克隆表达 反应原性 免疫荧光定位
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用于多重免疫荧光染色的小鼠肺组织冰冻切片制备方法优化研究
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作者 叶倩宸 徐丹 +2 位作者 文富强 陈俊 汪涛 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期96-102,共7页
目的优化小鼠肺组织冰冻切片制作方法,提高肺组织冰冻切片质量,有利于提高免疫荧光染色的特异性,获得更准确可靠的实验结果。方法使用C57BL/6小鼠,分别采用传统冷冻后固定法、冷冻前固定法、改良灌注冷冻前固定法3种方法制作冰冻切片,... 目的优化小鼠肺组织冰冻切片制作方法,提高肺组织冰冻切片质量,有利于提高免疫荧光染色的特异性,获得更准确可靠的实验结果。方法使用C57BL/6小鼠,分别采用传统冷冻后固定法、冷冻前固定法、改良灌注冷冻前固定法3种方法制作冰冻切片,经免疫荧光染色后使用激光扫描共聚焦荧光显微镜观察肺组织染色情况。使用荧光显微镜对肺组织切片进行全片扫描,计算单位面积内完整气道数量。结果传统冷冻后固定法制作的小鼠肺组织冰冻切片,肺泡结构破坏,气道壁断裂严重,存在非特异性染色;冷冻前固定法制作的小鼠肺组织切片,肺泡和气道结构相对完整,但肺泡塌陷,部分气道结构破坏;改良灌注冷冻前固定法制作的小鼠肺组织切片,肺泡和气道结构形态均完整、清晰,多重免疫荧光染色定位准确。改良灌注冷冻前固定法制作的小鼠肺组织冰冻切片单位面积内完整气道(直径≥100μm)数量高于冷冻前固定法((0.66±0.15)/mm^(2) vs(0.33±0.14)/mm^(2),P<0.05),也显著高于传统冷冻后固定法((0.66±0.15)/mm^(2) vs(0.02±0.04)/mm^(2),P<0.01)。结论使用改良灌注冷冻前固定法制作冰冻切片,利于保持小鼠肺组织形态完整,利于获得高质量的多重免疫荧光染色结果。 展开更多
关键词 小鼠 肺组织 冰冻切片 免疫荧光
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南京地区健康人群血清可溶性程序性死亡蛋白-1参考区间的建立
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作者 潘婕 徐琴 +4 位作者 张俊 欧明蓉 陈琳 沈瀚 陈雨欣 《临床检验杂志》 CAS 2024年第3期186-192,共7页
目的探讨健康人群血清可溶性程序性死亡蛋白-1(soluble programmed cell death protein-1,sPD-1)水平及其影响因素,初步建立南京地区健康人群血清sPD-1水平的参考区间。方法本研究纳入2023年5月至9月在南京鼓楼医院及句容人民医院进行... 目的探讨健康人群血清可溶性程序性死亡蛋白-1(soluble programmed cell death protein-1,sPD-1)水平及其影响因素,初步建立南京地区健康人群血清sPD-1水平的参考区间。方法本研究纳入2023年5月至9月在南京鼓楼医院及句容人民医院进行体检的健康人群375例,其中男性194例,女性181例。留取健康人群的血清标本,采用基于新型探针生物传感器的全自动荧光免疫分析法(tests-on-probes,TOP法)检测血清sPD-1水平,并分析性别、年龄及其他实验室指标对sPD-1的影响;采用非参数法计算总体及不同年龄段健康人群血清sPD-1水平的参考区间。结果健康人群血清sPD-1水平为108.82(92.80,134.95)pg/mL,男性和女性健康人群血清sPD-1水平差异无统计学意义(P>0.05)。进一步将健康人群按照年龄分为<65岁和≥65岁2组,其血清sPD-1水平分别为106.65(90.35,130.60)pg/mL,113.20(95.60,144.83)pg/mL,组间差异有统计学意义(P=0.014);而将健康人群根据年龄分成3组(<40岁,40~64岁,≥65岁)时,其血清sPD-1水平分别为112.00(98.68,137.23)pg/mL,99.07(82.38,119.60)pg/mL,113.20(95.60,144.83)pg/mL,3组间差异亦有统计学意义(P<0.001)。多因素线性回归分析显示,γ-谷氨酰基转移酶(γ-glutamyl transpeptidase,GGT)是健康人群血清sPD-1水平的影响因素。根据临床与实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institutes,CLSI)C28-A3文件推荐的非参数法计算sPD-1参考区间,健康人群总体血清sPD-1水平的参考区间(第2.5%~97.5%百分位的浓度范围)为66.7~214.7 pg/mL;将健康人群分为<40岁、40~64岁、≥65岁3个年龄段,其对应的血清sPD-1在第2.5%~97.5%百分位的浓度范围分别为71.9~202.7 pg/mL、59.4~220.0 pg/mL、69.6~229.0 pg/mL。结论本研究初步建立了南京地区血清sPD-1健康人群以及分为3个年龄段的参考区间。 展开更多
关键词 可溶性程序性死亡蛋白-1 参考区间 荧光免疫分析法
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犬冠状病毒Ⅱ毒株的分离鉴定及其基因的遗传进化分析
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作者 刘可欣 谭斌 +3 位作者 张傲 王倩颖 杨森 张淑琴 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期104-110,共7页
自长春市某宠物医院临床症状为肠胃炎的幼犬腹泻粪便中分离到1株病毒,该分离毒株在CRFK细胞上出现明显的细胞病变,经RT-PCR、序列测定和直接免疫荧光鉴定可知该分离毒株为犬冠状病毒株(Canine coronavirus,CCV),命名为CCV-CC01。利用PC... 自长春市某宠物医院临床症状为肠胃炎的幼犬腹泻粪便中分离到1株病毒,该分离毒株在CRFK细胞上出现明显的细胞病变,经RT-PCR、序列测定和直接免疫荧光鉴定可知该分离毒株为犬冠状病毒株(Canine coronavirus,CCV),命名为CCV-CC01。利用PCR技术扩增CCV-CC01 S基因序列全长4273 bp,ORF-3序列1071 bp,N基因序列全长1202 bp。对分离毒株与其他冠状病毒毒株进行同源性比对并绘制系统进化树,结果显示该毒株与美国分离的CCV S378株亲缘关系最近,处于同一分支,与SARS-CoV-2亲缘关系较远,该毒株的出现可能与国际贸易相关。该毒株的分离鉴定为犬冠状病毒病的诊断、防治及后续疫苗研发奠定了基础。 展开更多
关键词 CCV 分离鉴定 直接免疫荧光法 遗传进化分析
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流式荧光免疫法检测抗核抗体谱在自身免疫性疾病中的诊断价值
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作者 凌青 文振华 +1 位作者 王敏 唐小燕 《检验医学与临床》 CAS 2024年第13期1895-1898,共4页
目的探讨流式荧光免疫法检测抗核抗体谱在自身免疫性疾病(AID)中的诊断价值。方法选取2021年12月至2022年9月在该院就诊的269例AID患者作为AID组,另选取同期在该院体检的40例健康体检者作为正常对照组,以及51例非AID(消化系统疾病、呼... 目的探讨流式荧光免疫法检测抗核抗体谱在自身免疫性疾病(AID)中的诊断价值。方法选取2021年12月至2022年9月在该院就诊的269例AID患者作为AID组,另选取同期在该院体检的40例健康体检者作为正常对照组,以及51例非AID(消化系统疾病、呼吸系统疾病等)患者作为疾病对照组。采用流式荧光免疫法和免疫印迹法检测所有研究对象血清的抗核抗体谱,进行一致性评价,分析两种方法的灵敏度和特异度。结果以免疫印迹法作为金标准,流式荧光免疫法检测各组360例样本的灵敏度为92.64%,特异度为83.33%,准确度为90.00%,Kappa值为0.755;AID组中不同抗体的准确度为72.12%~98.51%,Kappa值为0.281~0.874。结论以免疫印迹法为金标准,流式荧光免疫法检测抗核抗体谱诊断AID的准确度较高,可同时检测不同抗体并精准定量,大大减少了实验室工作量,将会成为新一代的抗核抗体谱检测方法。 展开更多
关键词 流式荧光免疫法 免疫印迹法 自身免疫性疾病 自身抗体 抗核抗体谱
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碘乙酸钠诱导大鼠颞下颌关节骨关节炎动物模型的建立
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作者 冯㛃 常攀辉 +2 位作者 张智玲 黎凯歌 高一珂 《中华老年口腔医学杂志》 2024年第2期101-106,113,共7页
目的通过对碘乙酸钠(monosodium iodoacetate,MIA)刺激的大鼠颞下颌关节骨关节炎的病理表现及结构变化的研究,寻找可诱发大鼠颞下颌关节骨关节炎的适宜药物浓度及作用时间。方法选取6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠24只,随机分为4组。1组... 目的通过对碘乙酸钠(monosodium iodoacetate,MIA)刺激的大鼠颞下颌关节骨关节炎的病理表现及结构变化的研究,寻找可诱发大鼠颞下颌关节骨关节炎的适宜药物浓度及作用时间。方法选取6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠24只,随机分为4组。1组关节内注射0.9%的生理盐水,为空白组。其余3组按照0.5 mg,1.0 mg,2.0 mg三种不同浓度MIA进行颞下颌关节上腔注射,单个关节腔注射体积为50μL。观察4周后,处死大鼠,取颞下颌关节髁突进行分析。采用苏木精-伊红(HE)染色,番红O-固绿染色,TRAP染色,CD31免疫荧光染色及显微CT(micro computed tomography,MicroCT)扫描髁突。染色标本用改良Mankin评分法评估颞下颌关节骨组织的病理改变。结果HE和番红O-固绿染色结果显示,注射MIA1.0 mg/50 uL,2.0 mg/50 uL组髁突软骨厚度减少,软骨细胞层数减少,排列紊乱,骨髓腔变大。0.5 mg/50 uL组,未见明显变化;CD31免疫荧光染色显示1.0 mg/50 uL,2.0 mg/50 uL组可见软骨和软骨下骨连接处有新生血管,TRAP染色三组均未见破骨细胞活化。MicroCT髁突扫描显示仅2.0 mg/50 uL组可见髁突骨皮质及骨松质的破坏影像。结论1.0 mg/50 uL是MIA诱导大鼠TMJ典型OA样病变开始出现病理学改变的最小有效剂量,可以作为早期颞下颌关节器质性病变的预防性治疗的动物模型。2.0 mg/50 uL或更高浓度的药物注射可能会得到影像学中典型的OA样改变,可以用于长期观察以及OA治疗的动物模型。 展开更多
关键词 颞下颌关节骨关节炎 碘乙酸钠 免疫荧光染色 模型建立 显微CT
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7803例患儿血清ANA检测结果及其与疾病的关系
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作者 高莉梅 郜秀盼 +2 位作者 曾俊祥 余悠悠 潘秀军 《检验医学》 CAS 2024年第6期517-523,共7页
目的探讨血清抗核抗体(ANA)在不同疾病患儿中的分布特征,及其与疾病的关系。方法选取2016年1月—2021年11月上海交通大学医学院附属新华医院住院患儿7803例,采用间接免疫荧光法(IIF)和线性免疫印迹法(LIA)检测ANA。根据出院诊断将所有... 目的探讨血清抗核抗体(ANA)在不同疾病患儿中的分布特征,及其与疾病的关系。方法选取2016年1月—2021年11月上海交通大学医学院附属新华医院住院患儿7803例,采用间接免疫荧光法(IIF)和线性免疫印迹法(LIA)检测ANA。根据出院诊断将所有患儿分为抗核抗体相关风湿免疫性疾病(AARD)组(296例)、其他风湿病(ORD)组(2314例)、非风湿病(NRD)组(5128例)、高度怀疑AARD但未明确诊断(UD)组(65例)。根据ANA检测结果分为IIF-LIA-、IIF+LIA-、IIF-LIA+和IIF+LIA+共4种模式,其中IIF-LIA-模式为ANA阴性,其他3种模式为ANA阳性。结果7803例患儿中ANA阳性1550例(19.9%),AARD组ANA阳性率最高(81.8%),显著高于ORD组、NRD组和UD组(P<0.05)。AARD组ANA双阳性(IIF+LIA+)检出率最高(48.3%),且ANA双阳性对AARD的诊断似然比为27.03。在LIA阳性样本中,检出率居前3位的抗体分别为抗SS-A抗体[33.2%(168/506)]、抗双链DNA(dsDNA)抗体[24.1%(122/506)]、抗组蛋白抗体[18.0%(91/506)]。AARD组常见的2种ANA荧光核型为颗粒型(41.9%)和均质型(30.7%),且以高滴度为主。ANA滴度诊断AARD的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.8702,最佳临界值为1∶80,敏感性为71.3%,特异性为93.5%;随着滴度的增加,对应的似然比呈对数性增加。结论在儿童群体中,IIF和LIA检测ANA各有优势,互相不可替代。ANA双阳性、高滴度对AARD具有重要的诊断价值,建议将似然比纳入ANA的检测报告。 展开更多
关键词 抗核抗体 间接免疫荧光法 线性免疫印迹法 抗核抗体相关风湿免疫性疾病
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皮肤石蜡组织Ⅳ型胶原免疫荧光抗原修复方法的评估
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作者 张彬 李治 +1 位作者 金晶 吴滢 《实用皮肤病学杂志》 2024年第2期89-92,共4页
目的 寻找皮肤石蜡包埋组织Ⅳ型胶原免疫荧光(IF-PE)最佳抗原修复方法。方法以2021年1月至2022年12月在上海交通大学医学院附属儿童医院确诊的X-连锁Alport综合征患儿和父(母)亲共14例皮肤组织,冰冻组织免疫荧光(IF-FT)为自身对照,比较... 目的 寻找皮肤石蜡包埋组织Ⅳ型胶原免疫荧光(IF-PE)最佳抗原修复方法。方法以2021年1月至2022年12月在上海交通大学医学院附属儿童医院确诊的X-连锁Alport综合征患儿和父(母)亲共14例皮肤组织,冰冻组织免疫荧光(IF-FT)为自身对照,比较不同抗原修复法IF-PE染色部位和强度。结果 与Ⅳ型胶原IF-FT自身对照比较,采用蛋白酶K修复,仅部分患儿基膜正常分布(6/14),而角质层均异常表达;微波、高温水浴和高压蒸汽3种修复方法,基膜均无正常分布,角质层异常分布(分别为2/14,11/14,12/14);微波联合酶修复法仅2例基膜正常分布,未见角质层异常表达;高压蒸汽联合酶和高温水浴联合酶2种修复法基膜全部正常分布,角质层异常表达(分别为14/14和2/14),表达强度两者接近。结论高温水浴联合蛋白酶K可作为皮肤石蜡包埋组织Ⅳ型胶原免疫荧光理想的抗原修复法。 展开更多
关键词 皮肤组织 石蜡包埋免疫荧光 抗原修复 Ⅳ型胶原
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远端脊髓节段星形胶质细胞活化介导神经损伤诱发的播散性疼痛
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作者 金思璇 于宁 +1 位作者 孙丰润 马超 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第2期167-173,共7页
目的探讨中枢神经系统中远端脊髓节段胶质细胞活化与播散性疼痛的关系。方法50只雌性大鼠随机分为假手术(sham)组、眶下神经慢性压迫性损伤(CCI-ION)组、CCI-ION+米诺环素(Mino)组、CCI-ION+L-2-氨基己二酸(LAA)组和CCI-ION+生理盐水(NS... 目的探讨中枢神经系统中远端脊髓节段胶质细胞活化与播散性疼痛的关系。方法50只雌性大鼠随机分为假手术(sham)组、眶下神经慢性压迫性损伤(CCI-ION)组、CCI-ION+米诺环素(Mino)组、CCI-ION+L-2-氨基己二酸(LAA)组和CCI-ION+生理盐水(NS)组,每组n=10。建立CCI-ION模型,鞘内注射Mino、LAA和生理盐水,利用免疫荧光染色分别检测延髓、颈段、胸段、腰段脊髓节段中活化的星形胶质细胞标记物自身免疫性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和小胶质细胞标记物离子钙结合衔接分子1(IBA1);在第7、14、21、28天,使用von Frey纤维丝评估大鼠触须垫机械痛阈值,并采用电子von Frey仪测量大鼠前足、胸部及后足机械痛阈值,用辐射热痛刺激仪测量大鼠后足热痛阈值。结果结果显示,鞘内注射Mino抑制小胶质细胞后,各脊髓节段活化的小胶质细胞减少,鞘内注射LAA抑制星形胶质细胞后,各脊髓节段活化的星形胶质细胞减少,且注射Mino和LAA后,模型组大鼠触须垫机械痛阈升高,损伤部位的神经病理性疼痛缓解。鞘内注射Mino后,模型组大鼠后足热痛阈和机械痛阈未发现明显变化;鞘内注射LAA后,后足热痛阈和机械痛阈显著升高,播散性疼痛缓解。结论远端脊髓节段星形胶质细胞活化介导外周神经损伤诱发的播散性疼痛。 展开更多
关键词 慢性痛 播散性疼痛 小胶质细胞 星形胶质细胞 免疫荧光 大鼠
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