乳腺癌Ki-67及PCNA表达的比较研究

目的 研究Ki 6 7与PCNA两种增殖抗原在乳腺癌组织中的原位表达特点以及二者的差异性问题。方法 采用间接免疫荧光双标法对 30例乳腺癌组织切片进行Ki 6 7及PCNA染色 ,运用激光扫描共聚焦显微镜观察 ,分析细胞核的荧光阳性面积 ,并对二者进行相关性分析。结果 PCNA的核阳性面积明显大于Ki 6 7,二者的阳性面积呈正相关。结论 在乳腺癌组织中 ,PCNA抗原表达较强 ,几乎涵盖了所有Ki 6 7的增殖信息。

电生理学特性得到确定的大鼠脊髓背根神经节细胞内谷氨酸和P物质的共存

在离体灌流带脊髓和坐骨神经的标本上，对脊髓背根神经节（DRG）细胞的电生理学特性、对P物质（SP）受体激动剂的反应及谷氨酸（Glu）／SP共存的特点进行了研究。（1）对135个细胞进行了细胞内记录，并依纤维传导速度将其分为Aα／β（＞12m／s）和C（＜1．3m／s）两大类；它们的动作电位的快速后超极化（fAHP）有明显区别，C类的fAHP幅度小、时程长，Aα／β类的fAHP幅度大、时程短；（2）SP受体激动剂Sar－SP（10－6mol／L）诱导42％（5／12）的Aα／β细胞和80％（8／10）的C细胞发生去极化反应；（3）最后向给予SP受体激动剂的22个细胞内电泳biocytin，固定、切片后进行磷酸激活的谷氨酰胺酶（PAG）和SP免疫荧光组织化学染色并同时显示biocytin，观察到biocytin标记并呈PAG样和SP样阳性的三标细胞在Aα／β类为25％（3／12），C类为80％（8／10），两者差异显著（P＜0.05）。结果提示DRG中Aα／β细胞与C细胞的化学解剖和电生理特性不同，SP可能通过作用于节细胞上的自身受体易化冲动的发放。

参龙健脑胶囊对脑缺血大鼠模型海马CGRP表达的影响

目的探讨参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠脑组织海马区降钙素基因相关肽(CGRP)表达的影响。方法用结扎双侧颈总动脉制备缺血性脑损伤大鼠模型,造模成功后随机分为假手术组、模型组、脑复康组及参龙脑胶囊高、低剂量组。灌胃28d后,应用免疫组织化学染色法观察CGRP在缺血脑损伤大鼠海马区的表达。结果与模型组相比,参龙健脑胶囊组大鼠海马区CGRP表达增加。结论参龙健脑胶囊对缺血性脑损伤的保护作用与其促进脑组织CGRP表达密切相关。

3种不同染色方法对肺组织弹力纤维染色效果的影响

目的评价Verhoeff铁苏木精染色法、Weigert间苯二酚复红染色法和改良Gomori醛复红染色法等3种不同染色方法对肺组织弹力纤维的染色效果。方法收集送检的住院手术患者的肺石蜡包埋组织30例,分别采用Verhoeff铁苏木精法、Weigert间苯二酚复红法和改良Gomori醛复红法进行染色,并比较3种染色方法对肺组织弹力纤维的染色效果。结果Verhoeff铁苏木精法中的弹力纤维呈黑色,Weigert间苯二酚复红法中的弹力纤维呈棕色,改良Gomori醛复红法中的弹力纤维呈深紫色。改良Gomori醛复红法的染色积分与其他两种方法比较差别均有统计学意义(P<0.05)。结论改良Gomori醛复红染色法对肺组织中弹力纤维染色,具有操作简单、定位准确、背景清晰、对比更明显等特点。

应用改进的免疫荧光组织化学染色法对水稻根尖细胞微管结构的观察

植物细胞微管在细胞形态建成中具有重要作用。它体积小,且结构始终处于动态变化之中,因此观察到清晰的微管形态有一定的困难。本实验以水稻根尖为材料,介绍了一种改进的植物细胞微管免疫荧光组织化学染色方法,用此方法可以观察到清晰、完整的植物微管形态,此法对观察其它植物细胞微管结构也具有指导作用。

微波快速免疫荧光组化染色方法的研究

本文应用微波辐射方法加速免疫荧光组化染色(间接和直接法),分别定位15种不同组织抗原,并应用连续切片同时用两种不同的孵育方法即微波辐射和常规孵育方法进行比较。结果证明,经微波辐射后免疫荧光组化染色时间大大缩短,背景染色明显好于常规法,阳性率和阳性强度与常规法基本一致。

Ki-67和PCNA在乳腺癌中的表达

目的:研究Ki-67与PCNA两种增殖抗原在乳腺癌组织中的原位表达特点及二者的差异性问题。方法:采用间接免疫荧光双标法对60例乳腺癌组织切片进行Ki-67及PCNA染色。运用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM),分析细胞核的荧光阳性面积,并对二者进行相关性分析。结果:PCNA的核阳性面积明显大于Ki-67。二者的阳性面积呈正相关。结论:在乳腺癌组织中,PCNA抗原表达较强,几乎涵盖了所有Ki-67的增殖信息,二者对增殖情况的反映各具特点。

酶标葡萄球菌A蛋白组化法在流行性出血热诊断上的应用

使用辣根过氧化酶标记葡萄球菌A蛋白(HRP—SPA)间接免疫酶组化法检测100例流行性出血热病人、54例非出血热病人及31名正常人血清中出血热异特性抗体。结果表明(HRP—SPA)在灵敏度和特异度上与间接免疫荧光法IFA基本相同,由于HRP—SPA简便易行,可作为EHF诊断的一种新方法。

下丘脑-脑垂体胃动素对消化间期胃运动的调控

目的探讨下丘脑-脑垂体胃动素(MTL)对消化间期胃运动的调控作用。方法 32只大鼠按数字表法随机分为4组(每组8只):下丘脑室旁核(PVN)+MTL组,PVN+生理盐水(NS)组,垂体摘除+PVN+MTL组,垂体摘除+PVN+NS组。采用荧光免疫组织化学染色方法,观察大鼠脑垂体MTL免疫物质的表达;采用在体胃运动记录的方法,观察大鼠垂体摘除后血浆MTL和消化间期移行性复合运动(MMC)的改变。结果 (1)PVN+MTL组注射MTL后,MMC收缩频率显著加快,为[(11.2±1.3)次/h,PVN+NS组为[(4.9±0.6)次/h],与对照值[(5.3±0.5)次/h]比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)垂体摘除后2 d,MMC收缩频率显著减慢[(4.5±0.8)次/h](对照值),垂体摘除+PVN+MTL组MMC收缩频率增快[(8.2±0.7)次/h],与对照值比较差异有统计学意义(P<0.05);垂体摘除+PVN+NS组[(4.3±0.9)次/h]与对照值比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)免疫组织化学荧光研究结果显示,脑垂体组织有MTL免疫阳性反应物表达。结论下丘脑-脑垂体对消化间期胃运动有调控作用。

ATP酶组织化学染色孵育方法比较

目的比较经典的ATP酶组织化学染色法中几种孵育方法优缺点,以用于临床诊断中肌纤维分型研究和肌肉疾病病理诊断。方法新鲜的肌肉组织用异戊烷-液氮冷冻,冰冻切片厚度7μm,组织化学染色采用ATP酶滴染法和浸染法两种,采用的两种孵育条件分别为37℃恒温箱(120~180)min和4℃冰箱过夜。结果 4℃过夜滴染的染色效果比37℃滴染的效果好;37℃浸染比4℃过夜浸染效果好。浸染过夜虽然容易有沉淀,但是使用前过滤ATP酶孵育液,染色效果仍然好。结论各种方法和实验条件的改变导致染色结果的不同,临床工作者可根据实际情况,在减少人力和试剂成本前提下,选择使用不同的ATP酶组织化学染色技术,使其得到更广泛的应用。

全自动免疫组织化学染色技术的应用

目的：探讨全自动免疫组织化学染色技术在基层医院的应用。方法：随机选取常见肿瘤50例，经包埋、切片后分为2组，分别采用全自动免疫组化机与手工操作2种免疫组化染色方法，显微镜下观察染色结果。结果：免疫组化机染色的组织定位准确，染色强度强，背景清晰，未见切片边缘着色现象。而手工染色虽然组织定位准确，但染色强度强弱不一，背景不清晰，存在非特异性染色，切片边缘着色现象较多，两者比较有显著性差异，均P〈0．05。结论：全自动免疫组织化学染色技术比手工操作染色效果好，易于做到染色标准化。

免疫荧光检测平台联合快速HE染色在阴道炎中的诊断价值

目的分析免疫荧光检测平台联合快速HE染色在阴道炎中的诊断价值。方法选取2021年1月至2022年12月在首都医科大学附属北京妇产医院怀柔妇幼保健院妇科就诊的250例疑似阴道炎患者为研究对象。以实验室检验作为金标准,分析不同检验方式检测阴道炎的诊断效能及阴道清洁度检出情况。结果免疫荧光联合快速HE染色法的诊断效能高于湿片镜检法,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光联合快速HE染色与湿片镜检法的阴道清洁度检出情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论免疫荧光检测平台联合快速HE染色在阴道炎中的诊断价值较高,能够提高诊断效能。

Lewis y抗原与CD 147在卵巢上皮性浆液性肿瘤中的表达及其相关性研究

目的探讨Lewis y抗原及CD 147在卵巢上皮性浆液性肿瘤中的表达及相关性。方法选择2000～2010年中国医科大学附属盛京医院的30例卵巢上皮性浆液性囊腺癌(高分化9例,中分化10例,低分化11例)、20例上皮性交界性浆液性囊腺瘤、20例上皮性浆液性囊腺瘤及20例正常卵巢组织。采用免疫组织化学法检测各组样本中Lewis y抗原、CD 147的表达;分析二者表达与卵巢癌患者病理参数之间的关系;同时采用免疫荧光双标法检测上述两种蛋白与卵巢上皮性浆液性肿瘤的关系。结果 Lewis y抗原的阳性表达方面,卵巢上皮性浆液性囊腺癌(90.00%)明显高于交界性浆液性囊腺瘤(60.00%)、浆液性囊腺瘤(35.00%)、及正常卵巢组(0)(P<0.05);Lewis y抗原的阳性表达率与卵巢癌临床病理参数间未发现明显的相关性(P>0.05)。CD 147在卵巢上皮性浆液性囊腺癌组织的阳性表达率(86.67%)高于交界性浆液性囊腺瘤(55.00%)、浆液性囊腺瘤(35.00%)以及正常卵巢组(5.00%)(P<0.05),但其阳性表达率与卵巢癌临床病理参数无关(P>0.05)。Lewis y抗原和CD 147在卵巢上皮性浆液性囊腺癌组织中同时高表达,且其表达具有正相关性(P<0.05)。结论 Lewis y抗原与CD 147在卵巢上皮性浆液性囊腺癌中呈现明显阳性表达,且两者表达呈正相关,可能与卵巢上皮性浆液性肿瘤的发生、发展相关。

蠕虫来源的LNFPⅢ对周围性神经病理性疼痛的病理发生和脊髓胶质细胞活化的影响

目的 探讨蠕虫来源的免疫调控性糖分子乳-N-岩藻五糖Ⅲ（lacto-N-fucopentaoseⅢ,LNFPⅢ）对成年大鼠胫神经永久性横断伤（即改良型备用性神经损伤,modified spared nerve injury,mSNI）后神经病理性疼痛的病理发生的影响,以及它对此时脊髓胶质细胞活化的影响。方法 成年雄性SD大鼠随机分为4组,即假手术组（n=6）、mSNI手术组（n=6）、mSNI手术＋牛血清白蛋白（BSA）组（n=12）和mSNI手术＋LNFPⅢ组（n=12）。各组动物行右侧mSNI手术或者相应的假手术,根据实验分组腹腔注射BSA或LNFPⅢ与BSA的结合物。每组取6只大鼠进行足底试验、von Frey纤维试验、针刺试验和丙酮试验,测试手术前、后手术同侧和对侧大鼠后爪足底面腓肠神经和隐神经皮肤区域特异性的疼痛反应。制备mSNI手术＋BSA组和mSNI手术＋LNFPⅢ组手术后7d和14d（各组每个时间点3只动物）的第3~第4腰椎（L3~4）脊髓节段冰冻切片,进行小胶质/巨噬细胞标志物分化抗原簇分子11b（cluster of differentiation molecule 11b,CD11b）和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的免疫荧光染色。结果 成年大鼠mSNI后,早期系统性给予LNFPⅢ可显著缓解手术后急性诱导期（4/5d）和慢性转化期（7/8d和14/15d）中手术侧后爪足底面腓肠神经和隐神经皮肤区域特异性的机械和温度刺激诱发的病理性疼痛。同时,早期系统性给予LNFPⅢ抑制mSNI大鼠手术侧脊髓背角中术后7d小胶质/巨噬细胞以及术后7d和14d星形胶质细胞的活化。结论 早期系统性给予LNFPⅢ能抑制成年大鼠mSNI后神经病理性疼痛的病理发生（包括急性诱发和慢性转化）以及该过程中脊髓胶质细胞的活化。